3株乳杆菌在模拟消化环境中存活性能的研究

I FOOD INDUSTRY I 77FOOD INDUSTRY I INTERPRETA TION益生菌在食品中的应用研究减少炎症反应和肠道疾病的发生。

1.2增强免疫系统能力肠道是免疫系统的重要组成部分，约占人体免疫细胞的70%-80%。

益生菌通过调节肠道免疫系统的平衡发挥作用，可以刺激和调节免疫细胞的活性，促进免疫细胞的发育和功能，增强肠道免疫的应答能力。

益生菌的抗菌作用可以抑制有害菌的生长，通过产生抗菌物质，如有机酸、抗菌肽和过氧化物酶等，抑制有害菌的繁殖，维护肠道的微生态平衡，有助于预防感染性疾病，并减轻免疫系统的负担。

并且，益生菌可以促进免益生菌可以对人体健康产生多种益处，包括改善消化系统功能、增强免疫系统、降低胆固醇等。

因此，益生菌在食品中的应用也受到了较高的关注。

益生菌的功效因菌株的不同而有所差异，需要根据食品种类来确认适合的益生菌类型，加强对益生菌作用机理的研究，明确其在食品中的应用要点，才能做到在食品领域中推动益生菌食品工业化生产的需求。

本文通过对益生菌的功效进行研究，探讨其所具备的益处，在此基础上提出在食品中其具体的应用方向。

人体内存在大量的微生物，其中包括有益菌和有害菌。

当有害菌过多或菌群失衡时，可能会导致消化问题、免疫系统失调等健康问题。

益生菌通过增加有益菌的数量和种类，有助于抑制有害菌的生长，并维持健康的肠道环境。

益生菌作为有益于人体健康的活菌，在食品中通常被用作一种补充剂或食品添加剂，目前主要在乳制品、发酵食品、功能性食品等中，因此，需要了解益生菌的效用，探索其在食品中的应用发展。

1.益生菌在食品中应用的作用研究1.1促进消化系统健康益生菌可以帮助维持肠道菌群的平衡，抑制有害菌的生长，增加有益菌的数量，并帮助构建健康的肠道微生物群落，这种菌群平衡对于消化、免疫功能和营养吸收都非常重要。

并且，益生菌参与食物的消化和营养吸收过程，可以产生酶。

例如，淀粉酶和脂肪酶，帮助分解食物中的淀粉和脂肪，使其更易被消化和吸收。

益生菌发酵六神曲的制备及其对功能性消化不良小鼠的改善作用目录1. 内容描述 (2)1.1 研究背景 (3)1.2 研究目的 (4)1.3 研究意义 (4)1.4 研究方法与材料 (6)2. 益生菌发酵六神曲的制备 (7)2.1 原料准备 (7)2.2 益生菌的筛选与扩增 (9)2.3 六神曲的配方与制备 (9)2.4 益生菌发酵六神曲的制作方法 (10)3. 功能性消化不良小鼠模型的建立与评价 (11)3.1 实验动物的选择与饲养 (12)3.2 功能性消化不良小鼠模型的建立 (13)3.3 小鼠体质量变化的观察与评价指标 (14)3.4 小鼠血清生化指标的变化分析 (15)4. 益生菌发酵六神曲对功能性消化不良小鼠的影响 (15)4.1 不同剂量益生菌发酵六神曲对小鼠体质量的影响 (17)4.2 不同剂量益生菌发酵六神曲对小鼠血清生化指标的影响 (17)4.3 益生菌发酵六神曲对小鼠胃肠功能的影响 (18)5. 结果与讨论 (20)5.1 益生菌发酵六神曲对小鼠体质量的影响结果分析 (21)5.2 益生菌发酵六神曲对小鼠血清生化指标的影响结果分析 (22)5.3 益生菌发酵六神曲对小鼠胃肠功能的影响结果分析 (22)6. 结论与展望 (24)6.1 主要研究结论总结 (24)6.2 研究的不足之处与展望 (25)6.3 对实际应用的建议与启示 (27)1. 内容描述功能性消化不良是一种指病理形态上没有明显器质性病变，但以功能性紊乱为主的慢性上消化道临床症候群，是消化系统常见病和消化系统疾病的研究热点之一。

本研究以益生菌发酵传统中药六神曲为切入点，探究六神曲经益生菌发酵后的成分变化及其对功能性消化不良小鼠模型的作用效果。

作为中草药剂型之一，广泛应用于中医复合方剂中，根据药代学理论，六神曲含有多种有益活性成分，如挥发油、维生素B等，具有宣导游气、健胃口、化食除胀的功效。

首先将六神曲粗粉与乳酸菌、嗜酸性乳杆菌等益生菌按照一定的比例混合，在适宜的温度与湿度条件下进行发酵。

植物乳杆菌如何培养及应用植物乳杆菌是一种常见的有益菌种，在食品工业、畜牧业和医药领域有着广泛的应用。

本文将从培养方法和应用领域两个方面，详细介绍植物乳杆菌的培养及应用。

一、植物乳杆菌的培养植物乳杆菌是一种需氧、兼性厌氧的杆菌，对培养条件要求较宽松。

下面将分别从培养基、培养条件和培养方法三个方面进行介绍。

1. 培养基选择植物乳杆菌的培养基可以选择一般的细菌培养基，如液体培养基、固体培养基等。

常用的培养基有Lactobacilli MRS、De Man Rogosa Sharpe (MRS) 等。

2. 培养条件植物乳杆菌的适宜生长温度一般在30-40摄氏度之间，最适生长pH大约为6-7.5。

在培养过程中，可以添加一些辅助生长因子，如葡萄糖、酵母浸膏等。

3. 培养方法a. 液体培养法：将所选的培养基配制好后，加入适量的植物乳杆菌菌种，培养于摇床或培养箱中。

培养温度和时间根据菌株的需要进行调整。

b. 固体培养法：将所选的培养基配制好后，装入培养皿中，待凝固后点接植物乳杆菌菌种，然后在恰当的温度下孵育。

孵育结束后，观察菌落的形态和生长情况。

二、植物乳杆菌的应用植物乳杆菌具有广泛的应用价值，涉及食品工业、畜牧业和医药领域。

下面将介绍几种常见的应用领域。

1. 食品工业植物乳杆菌主要应用于酸奶、发酵牛奶、发酵肉制品等食品工业中。

其能够发酵乳糖产生乳酸，降低食品pH值，抑制有害菌的生长，提高食品的质量和保鲜效果。

此外，植物乳杆菌还可以产生具有特殊风味和香气的化合物，赋予食品独特的风味。

2. 畜牧业植物乳杆菌在畜牧业中有着重要作用。

它可通过发酵制备酸菌预混饲料，能够促进动物的消化吸收，增强免疫力，预防和治疗消化系统疾病。

此外，植物乳杆菌还可以抑制肠道有害菌的生长，改善动物的肠道菌群结构，提高饲料的利用率和动物的生长性能。

3. 医药领域植物乳杆菌在医药领域中具有重要的应用前景。

它可以通过多种途径进入人体，并在肠道中定殖和繁殖。

ph值降低可缩短肠内容物在肠道的滞留时间使变异原如一葡萄糖苷酶一葡萄糖苷酸酶硝基还原酶偶氮还原酶和7一脱羟基酶等及早排出体43破坏致癌物抑制产生致癌物质的细菌增殖抑制硝胺产生或抑制涉及硝胺合成的硝基还原酶如干酪乳杆菌能抑制乳酪中硝酸盐转化为硝酸胺嗜酸乳杆菌可显著降低高肉食大鼠粪便硝酸基和述
乳酸菌的研究进展
广东省佛山市三水区乐平镇动物防疫检疫站 叶 红 曾 敏
［摘 要］ 乳酸菌是应用最早、 最广泛的饲用微生态制剂， 具有多种益生作用。本文从乳酸菌的粘附、 活性物质、 免疫赋活作用、 抗肿 降低胆固醇和降血压作用进行综述， 为开发新型绿色的饲用乳酸菌奠定扎实的基础。 瘤作用、 ［关键词］ 乳酸菌 活性物质 可溶性肽 1. 竞争性排斥病原菌的粘附 乳酸菌能与肠粘膜上皮细胞结合，占据有害菌肠粘膜上皮细胞结 从人体分离的嗜酸乳杆 合位点， 对有害菌起屏障作用。Conway [1]报道， 菌 (L. acidophilus ADH)对人的回肠上皮细胞和猪的回肠上皮细胞都具 有较好的粘附性，且粘附率显著高于从乳制品中分离的保加利亚乳杆 菌(L. bulgaricus)和嗜热链球菌(S. thermophilus)， 对猪的结肠和盲肠上皮 细胞的粘附率也以嗜酸乳杆菌最高， 嗜热链球菌显著低于两株乳杆菌。 Conway 同时还指出实验中的乳酸菌的粘附都是非特异性的 。Gopal 报 道三株饲用微生态制剂菌株， 鼠李糖乳杆菌 (L. rhamnosus DR20)， 嗜酸 乳杆菌(L. acidophilus HN017)和乳酸双歧杆菌(B. lactisDR10)对人肠道上 皮细胞系 HT- 29， Caco- 2 和 HT29- MTX 有极强的粘附力，而且三株乳 H7 对肠细胞的侵袭能力和细胞结合能力 。 酸菌都能降低 E.coli O157： Pascual 发现用浓度为 l05CFU. g- 1 的唾液乳杆菌(L. salivanus)饲喂新生 雏鸡可有效预防肠道中沙门氏菌的定植。 Coconnier [2]报道人源嗜酸乳杆 从而抑制幽门螺杆菌对肠 菌 LB 菌株能吸附于结肠细胞系 HT29- MTX， 细胞的吸附。 2. 产生多种活性物质 2.1 酸性物质 乳酸菌发酵糖类产生大量的酸， 如乳酸 、 乙酸 、 丙酸等， 降低肠道 pH 值， 抑制致病菌的生长。 乳酸菌产生的有机酸使肠内 pH 及 Eh 下降， 对肠道致病菌如痢疾杆菌、 沙门氏菌、 金黄色葡萄球菌、 大肠埃希氏菌、 艰难梭菌等有拮抗作用。低 pH 及 Eh 能促进肠道蠕动， 调整肠道的菌 短链脂肪酸和乳酸能抑制腐败细菌的生长， 从而减少了这些物 群失调。 质产生的毒胺 、 靛基质 、 吲哚 、 氨、 粪臭素 、 硫化氢 、 致癌物质和其它毒 短链脂 物， 还能减少氨的吸收及尿素的生成而对肾功能不全者有疗效。 铁、 镁的吸收和代谢， 短链脂肪酸被吸 肪酸能改善一些金属离子如钙、 收后， 它的代谢产物在各种器官中被利用。 例如丁酸盐可被结肠表皮细 丙酸盐和部分醋酸盐可被肝脏所利用， 部分醋酸盐 胞所利用， 乳酸盐、 可被肌肉和周围组织所利用，所以短链脂肪酸可能在调节内源性代谢 方面起重要作用。 醋酸盐、 丙酸盐和乳酸盐也可能对降低血中极低密度 脂蛋白和胆固醇起一定的作用。 据 Sorrels 报道， 明串珠菌 (Leuconostoc citrovorum)代谢产生的乙酸 和乳酸对沙门氏菌有抑菌效果，其中乙酸起了主要作用。Michinaga O gawa 实验证明乳杆菌对 STEC(Shiga toxin- producing Escherichia coli)起 从仔猪 抑制作用的主要是乳杆菌产生的乳酸和 pH 值的降低。经报道， 小肠分离的 6 株乳杆菌对 ETEC （K88、 K99、 987P ） 有抑制作用， 且发挥 作用的抑菌物质是有机酸， 而不是细菌素或过氧化氢。 乳酸菌产生的过氧化氢， 对致病菌有抑菌作用。嗜酸乳杆菌、 乳酸乳 杆菌(L- lactis)和保加利亚乳杆菌、 戊糖片球菌(Pediococcuspentosaceus)、 乳酸片球菌(P- acidilactici)和植物乳杆菌(L- plantarum)产生过氧化氢， 对 金黄色葡萄球菌、 假单胞杆菌等致病菌起抑制作用。 2.2 可溶性肽 乳酸菌素是具有生物活性的蛋白质，它对其它相近种类的细菌具 有抑制作用， 乳酸菌素一般是带正电荷的小分子蛋白(30～60 个氨基酸 具有高等电点和亲水特性。根据化学结构， 可将乳酸菌素大致分 残基)， 为四类。 第一类是 Lantibiotics， 分子量小于 5kDa， 具有羊毛硫氨酸(Lanthionine)或 β- 甲基羊毛硫氨酸(β- methyllanthionine)基团。如 Nisin。 第二类是肽类细菌素， 分子量小于 10kDa， 具有膜活性的肽， 如 pediocin P A- 1。这类细菌素又可分为三个亚类： ①N- 末端氨基酸序列为 - Thr- Gly- Asn- Gly- Val- Xaa- Cys， 具有抗 Listeria 的活性； ②孔道复合物 由两个不同的肽的寡聚体形成； ③能被硫醇激活， 活性基团要求有还原 性半胱氨酸残基。 第三类是蛋白质细菌素，分子量大于 10kDa，热不稳定性的蛋白 质。 第四类是复合型细菌素， 除蛋白质外， 还含有碳水化合物或类脂基 团。 第二、 三、 四类细菌素不含 lanthionine 基团， 因此被称为非 lanthionine 细菌素(non- lanthionine- containing- bacteriocin)。 乳酸菌素(Lactobacillin)一般对近缘的革兰氏阳性细菌的生长具有 抑制作用， 可以防止某些腐败菌和病原菌的生长 。由于乳酸菌素能在 人体消化道内被消化液中的酶所分解 。 因此， 被认为是一种高效、 安全 的天然代谢产物。 根据研究报道乳酸菌素包括乳酸链球菌素 （Nisin ） ， 双 球菌素 （Diploccins ） ， 乳链菌素 （Lactostrepcins ） ， 乳球菌素 （Lactococcins ） ， 足球菌素 （Pediocins ）及 乳 菌 素 （Lacticin 3147 ） ， 此外， 还 有 Lactocins、 Lactacins、 Entercin ll46、 Helveticin J、 Sakacin A、 Mesentericin Y105 及 Plantaricin 423 等。这些细菌素有抑制沙门氏菌、 大肠埃希氏菌、 志贺氏 菌的作用[3]。 大多数已知的细菌素只对相同革兰氏染色的细菌有抑菌作用， 比 对多种革兰氏阳性菌如葡萄球 如某些乳球菌产生的多肽细菌素(Nisin)， 菌、 芽抱杆菌和乳杆菌有很强的抑制作用， 但对革兰氏阴性菌无效。但 随着研究的深入， 发现许多细菌素作用范围很广。 那淑敏[4]报道， 嗜酸乳 杆菌产生一种广谱抗菌肽 AP311，对致病性的革兰氏阳性菌和革兰氏 阴性菌均有抑制作用。Bernet- Camard 报道， 粘附于人类肠道的嗜酸乳 杆菌 LA1 分泌的一种抑菌物质 LA I- SCS 对革兰氏阳性菌和革兰氏阴 性菌也都有抑制作用，但这种活性物质是否应归入抗生素类物质还在 争议之中。 3. 免疫赋活作用 多种乳酸菌如嗜酸乳杆菌、双歧杆菌和酸奶中常用的保加利亚乳 杆菌 、 嗜热链球菌均在体外实验中被证明有显著的免疫调节作用 。 Donnet 等[5]实验证明含 107 个 /mL 保加利亚乳杆菌的酸奶引起人体血 液中单核细胞的吞噬活性和白细胞呼吸爆发作用的显著增加 。 Tejada- simon 等发现用 109 个 /mL 嗜酸乳杆菌给小鼠灌胃 8h，取其腹膜巨 噬细胞培养， 所产生的 INF- α 明显上升。 Pollman 给无菌仔猪口服嗜酸 乳杆菌后， 可引起白细胞数量和血清总蛋白 (主要是球蛋白 )浓度的提 高。Herich 报道， 饲喂干酪乳杆菌后仔猪白细胞总数和嗜中性细胞数显 著增加。Shiffrin 等报道了来源于母乳喂养的婴儿粪便中的双歧杆菌热 致死菌体对 IgA 产生有增强作用。嗜酸乳杆菌、 干酪乳杆菌、 植物乳杆 经 菌等菌体食用后可活化单核巨噬细胞的活性， 增强全身性免疫应答。 IgE， T 细胞和巨噬细胞的产生， 从 常食用酸奶可促使免疫球蛋白 IgG， 而有免疫增强效果， 主要是酸奶中的乳酸菌起作用。 4. 抗肿瘤作用 乳酸菌抗肿瘤作用是由于肠道菌群的改善，抑制了致癌物质的产 生， 一般认为， 乳酸菌及其代谢产物增强了机体免疫功能， 抑制了癌细 胞的增殖。乳酸菌的抗癌特性可归纳为四类。 4.1 对肿瘤细胞抑制 通过吸附、 抑制、 去除等途径来减少致癌物质和致癌物前体。 4.2 降低肠道内 pH pH 值降低，可使与致癌作用有关的酶活性及胆汁酸水解活性降 低， 因为这些酶能催化致癌前体物质转化为致癌物质。 pH 值降低， 可缩 短肠内容物在肠道的滞留时间，使变异原如 β 一葡萄糖苷酶、 β 一葡 硝基还原酶、 偶氮还原酶和 7α 一脱羟基酶等及早排出体 萄糖苷酸酶、 外。 4.3 破坏致癌物 抑制产生致癌物质的细菌增殖，抑制硝胺产生或抑制涉及硝胺合 成的硝基还原酶， 如干酪乳杆菌能抑制乳酪中硝酸盐转化为硝酸胺， 嗜 酸乳杆菌可显著降低高肉食大鼠粪便硝酸基和氮基还原酶的活性。 4.4 抗突变活性 致癌作用是通过致癌物诱导动物细胞开始的，一些乳酸菌能抑制 通过乳酸菌可以使变异原诱导染色体异常减少 80%。 动物细胞的突变。 如 Hosono 报道， 保加利亚乳杆菌 、 乳酸乳杆菌和嗜热链球菌的发酵乳 对各种变异原性物质诱导的细胞突变有抑制作用。 5. 降低胆固醇 吸收方式， 降解胆固 乳酸菌有抑制胆固醇合成的作用。通过消化、 嗜酸乳杆菌在体外试验中有降 醇和胆酸， 减少动物体内胆固醇的含量。 低胆固醇的作用，动物试验同样证明了嗜酸乳杆菌具有降低猪血清胆 固醇的功能。Taranto 等给实验鼠吃乳杆菌， 其总胆固醇下降 20%， 三甘 油脂下降 33 %， LDH/HDL 降低 17%。 乳酸菌能降低胆固醇机制目前还不清楚。大量研究认为乳酸菌可 产生 3－羟基戊－3－甲基二酸 (HMG)， 从而抑制了胆固醇合成时所必 需的羟基戊二酰辅酶 A 还原酶活性；发酵乳中的乳清酸衍生的代谢产 物可降低胆固醇浓度；乳酸菌可将胆固醇有效的同化或将其捕住使之 不能进入血液； 由于乳酸菌可使胆汁酸盐脱抱合而变得难于吸收。 6. 降血压作用 乳酸菌具有降血压作用， 这在几种乳酸菌中已有报道， 并且起作用 的物质也各不相同。高血压患者口服干酪乳杆菌的菌体自溶物的热水 每天两次， 每次 400mg， 连续 3 个月后血压明显下降： 粪肠 抽提液(LEx)， 球菌 FK- 23 热水抽提液也具有降低血压的效果，且对正常的血压完全 没有影响，进一步分析结果证实起作用的物质是分子量在 10000 ～ 70000Da 的 RNA。 瑞士乳杆菌发酵的酸奶也具有降低血压的功能， 有效 物质是两个小肽 Val- Pro- Pro(VPP)和 Ile- Pro- Pro(IPP)。 研究认为这两个 小肽形成的空间结构和降血压药物络活喜主成份结构很相似。 此外， 乳酸菌还可以通过束缚抗原、 破坏抗原而减轻过敏反应症状 ） （下转第 402 页 和提高机体抗氧化能力而有助于延缓衰老。