阳离子交换柱后衍生法测定草甘膦

柱前衍生-固相萃取-高效液相色谱法测定饮用水中草甘膦和氨甲基膦酸杨华梅;杭莉【期刊名称】《理化检验-化学分册》【年(卷),期】2015(051)004【摘要】提出了柱前衍生-固相萃取-高效液相色谱法测定饮用水中草甘膦和氨甲基膦酸.水样经9-芴基甲基三氯甲烷衍生和C18固相萃取小柱净化后,洗脱液采用Waters Atlantis T3色谱柱分离,流动相为甲醇-0.02 mol·L-1乙酸铵溶液(60+40),荧光检测器激发波长为266 nm,发射波长为315 nm.苹甘膦和氨甲基膦酸的质量浓度在5.00～500 μg·L-1范围内与其峰面积呈线性关系,检出限均为0.002 μg·L-1.对水样进行加标回收试验,草甘膦和氨甲基膦酸的回收率分别在84.4％～92.0％和87.8％～96.8％之间,相对标准偏差(n=6)分别在1.2％～4.3％和1.1％～4.0％之间.该方法适用于水厂出水水样中草甘膦和氨甲基膦酸的同时测定.【总页数】4页(P474-477)【作者】杨华梅;杭莉【作者单位】泰州疾病预防控制中心,泰州225300;泰州疾病预防控制中心,泰州225300【正文语种】中文【中图分类】O652.63【相关文献】1.水中草甘膦和氨甲基膦酸的柱前衍生－液相色谱方法研究 [J], 张蓓蓓;张立志;章勇2.柱前衍生-液相色谱法测定土壤中草甘膦和氨甲基膦酸 [J], 高俊海;宋桂雪;宋薇3.柱前衍生-超高效液相色谱-串联质谱测定茶叶中草甘膦、草铵膦及主要代谢物氨甲基膦酸残留 [J], 叶美君;陆小磊;刘相真;张海华;杜颖颖;潘胜东4.固相萃取净化-超高效液相色谱-三重四极杆质谱法测定土壤中草铵膦、草甘膦及其代谢物氨甲基膦酸 [J], 孙文闪;诸骏杰;钟寒辉;董叶箐;俞婕;刘静5.柱前衍生高效液相色谱-串联质谱法测定土壤中草甘膦及其主要代谢物氨甲基膦酸 [J], 刘拉平;武瑜;王玉堂;张晓荣;刘朝霞;李爱华因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

实验一根系阳离子交换量的测定（淋洗法）根系是作物吸收养分的重要器官，作物根系阳离子代换量（Cation Exchange Content, CEC）的大小，大体上可反映根系吸收养分的强弱和多少，因此，测定根系阳离子代换量（CEC）对于了解作物吸收养分的能力与指导合理施肥具有一定的意义。

一、方法原理根系中的阳离子，在稀HCl中，能被H+代换出来，而根系所吸收的H+量与代换出来的阳离子量相等。

在洗去多余的HCl溶液后，用中性KCl溶液将H+代换出来，以KOH溶液滴定至pH 7.0，根据消耗KOH的浓度和用量，计算出阳离子代换量（以每1kg干根的厘摩尔数表示）。

二、操作步骤从田间选取具有代表性的植株若干（尽可能不要损坏根系），先用水冲洗根系，再放在筛子上置于水中轻轻振荡，至洗净为止，后再用蒸馏水冲洗数次，然后切去地上部分，置于30℃烘箱中烘干（一般烘8 h以上），将烘干根样取出磨细，过18~25号筛（0.7~1.0 mm），混合均匀，贮于广口瓶中备用。

称取烘干磨细的根样0.1000 g，放入180~250 mL烧杯中，先加几滴蒸馏水使根系湿润，避免以后操作时根浮在液面上，再加0.01 mol·L -1HCl 100 mL，搅拌5 min，待根样下沉后，将大部分盐酸连同根样倒入漏斗中过滤，然后用蒸馏水漂洗至无Cl-为止（用AgNO3检验）（一般用110~200 mL蒸馏水，少量多次即可洗至无Cl-）。

再用尖头玻棒将过滤纸中心穿孔，以100 mL KCl（事先调至pH 7.0）逐渐将过滤纸上的根样全部洗入原烧杯中，用pH计测定根-KCl 悬浮液pH值，然后加7~8 d酸碱混合指示剂，用0.01 mol·L -1 KOH滴定至兰绿色（保持30 s 不变），记下所消耗的0.01 mol·L -1 KOH 毫升数，并以此计算出根系的阳离子代换量（以每1kg干根的厘摩尔数表示）。

三、结果计算CEC（cmol·kg-1）=N KOH×V KOH×100 根样干重（g）四、注意事项1、过滤及漂洗时，溶液不超过漏斗的2/3处，并遵守“少量多次”的洗涤原则。

方法验证报告项目名称：土壤和沉积物草甘膦的测定方法名称：《HJ 1055-2019土壤和沉积物草甘膦的测定高效液相色谱法》报告编写人：参加人员：审核人员：报告日期：1 实验室基本情况1.1 人员情况实验室检测人员已通过《HJ 1055-2019土壤和沉积物草甘膦的测定高效液相色谱法》的培训，熟知标准内容、检测方法及样品数据采集和处理等，考核合格，得到公司技术负责人授权上岗。

1-1参加验证的人员情况登记表1.2 检测仪器/设备情况1.3 检测用试剂情况1.4 环境设施和条件情况实验室具有检定合格的温湿度计，环境可以控制在标准要求范围内，满足检测环境条件。

另外实验室配备了洗眼器、喷淋设施、护目镜、灭火器等的安全防护措施，符合实验室安全内务的要求。

2 方法简介2.1方法原理及适用范围土壤和沉积物中的草甘膦用磷酸钠和柠檬酸钠混合水溶液提取，提取液在弱碱性条件下经正己烷萃取净化，水样用9-芴甲基氯甲酸酯衍生化后，用具有荧光检测器的高效液相色谱分离检测草甘膦的衍生物，根据保留时间定性，外标法定量。

2.2样品采集与保存按照HJ/T166的相关规定进行土壤样品的采集和保存；按照GB17378.3、GB17378.5、HJ494、HJ495及HJ/T的要求采集和保存沉积物样品。

样品于4℃以下密封、避光、冷藏运输和保存。

土壤样品应在7d内完成前处理，沉积物样品应在3d内完成前处理。

2.3 样品的制备土壤样品：称取两份新鲜样品，一份样品用于测定干物质含量，另一份样品（干物质含量应大于10g）用于目标物草甘膦的测定。

沉积物样品：用高速离心机离心10min去除间隙水后，再称取两份新鲜样品，一份样品用于测定含水率，另一份样品（干物质含量应大于10g）用于用于目标物草甘膦的测定。

2.4 水分的测定按照HJ613测定土壤样品干物质含量，按照GB17378.5测定沉积物样品含水率。

2.5试样的制备2.5.1 提取将样品全部转移到50ml离心管中，加入50.0ml磷酸钠和柠檬酸钠混合提取液，超声提取30min,用高速离心机离心5min，取上清液用滤纸过滤，待净化。

土壤中阳离子交换量的测定土壤是农业生产的基础，而土壤中阳离子交换量（Cation Exchange Capacity，简称 CEC）是评价土壤肥力和土壤质量的重要指标之一。

它反映了土壤保持和供应植物所需养分离子的能力，对于合理施肥、土壤改良以及环境保护都具有重要意义。

那么，如何准确测定土壤中的阳离子交换量呢？阳离子交换量指的是在一定 pH 值条件下，每千克土壤所能吸附的全部交换性阳离子的厘摩尔数（cmol/kg）。

这些阳离子包括钾（K⁺）、钠（Na⁺）、钙（Ca²⁺）、镁（Mg²⁺）、铵（NH₄⁺）等。

土壤中的胶体物质，如黏土矿物、腐殖质等，带有负电荷，能够吸附这些阳离子，并在一定条件下与溶液中的其他阳离子进行交换。

测定土壤阳离子交换量的方法有多种，常见的有乙酸铵法、氯化铵乙酸铵法等。

下面以乙酸铵法为例，介绍一下测定的具体步骤。

首先，需要准备实验所需的仪器和试剂。

仪器包括离心机、电动振荡器、火焰光度计等；试剂有乙酸铵溶液（pH 70）、乙醇、氧化镁等。

接着，进行土壤样品的采集和处理。

采集的土壤样品要具有代表性，去除其中的杂质，如石块、植物残体等，然后将其风干、磨细，并通过一定孔径的筛子。

然后，进行样品的预处理。

称取一定量的土壤样品放入离心管中，加入乙酸铵溶液，在电动振荡器上振荡一定时间，使土壤中的阳离子充分与乙酸铵溶液中的铵离子进行交换。

振荡结束后，离心分离，倒掉上清液。

用乙醇洗涤样品，以去除多余的乙酸铵，然后再次离心，倒掉上清液。

接下来，将处理后的样品放入烘箱中烘干，然后加入氧化镁进行蒸馏。

蒸馏出的氨用硼酸溶液吸收。

最后，用标准酸溶液滴定吸收液，根据滴定所消耗的酸量，计算出土壤中阳离子交换量。

在测定过程中，需要注意以下几点：1、实验操作要规范、准确，严格按照实验步骤进行，以减少误差。

2、试剂的配制要精确，浓度要符合要求。

3、仪器要校准，确保测量结果的准确性。

此外，不同类型的土壤，其阳离子交换量的范围有所不同。

柱前衍生-固相萃取-高效液相色谱法测定饮用水中草甘膦和氨甲基膦酸杨华梅;杭莉【摘要】提出了柱前衍生-固相萃取-高效液相色谱法测定饮用水中草甘膦和氨甲基膦酸.水样经9-芴基甲基三氯甲烷衍生和C18固相萃取小柱净化后,洗脱液采用Waters Atlantis T3色谱柱分离,流动相为甲醇-0.02 mol·L-1乙酸铵溶液(60+40),荧光检测器激发波长为266 nm,发射波长为315 nm.苹甘膦和氨甲基膦酸的质量浓度在5.00～500 μg·L-1范围内与其峰面积呈线性关系,检出限均为0.002 μg·L-1.对水样进行加标回收试验,草甘膦和氨甲基膦酸的回收率分别在84.4％～92.0％和87.8％～96.8％之间,相对标准偏差(n=6)分别在1.2％～4.3％和1.1％～4.0％之间.该方法适用于水厂出水水样中草甘膦和氨甲基膦酸的同时测定.【期刊名称】《理化检验-化学分册》【年(卷),期】2015(051)004【总页数】4页(P474-477)【关键词】高效液相色谱法;柱前衍生;固相萃取;草甘膦;氨甲基膦酸【作者】杨华梅;杭莉【作者单位】泰州疾病预防控制中心,泰州225300;泰州疾病预防控制中心,泰州225300【正文语种】中文【中图分类】O652.63草甘膦（GLY）属内吸传导型广谱灭生性除草剂，能有效防除本科、阔叶杂草，因其具有高效、低成本等特点，目前已被广泛用于农业生产［1］。

近年来，随着转基因抗草甘膦农作物的增多，草甘膦用量逐年增加，已成为世界上应用最广、产量最大的农药品种［2］。

研究表明:草甘膦及其主要降解产物氨甲基膦酸（AMPA）具有与有机磷化合物类似的毒理［3］。

长期广泛地使用草甘膦必然带来环境水体的污染，进而威胁到人类的健康。

目前GB 5749－2006《生活饮用水卫生标准》规定，饮用水中草甘膦的含量不得超过0.700 mg·L－1［4］。

离子色谱法检测饮用水中的草甘膦刘玉欣;李锦;常凤启;卢振敏;王维榕【摘要】A method for determination of glyphosate in water by ion chromatography was established in this paper. After removed residual chlorine by adding ascorbic acid and filtrated by micropore filtrer membrance, the water samples were directly injected into IC. The separation was carried out on IonPac ASI1-HC anion-exchange column and the eluent was 20 mmol/L KOH at flow rate of 1. 00 mL/min. The injection volume was 100 μL. The linearity of the method is from 0 to 1.5 mg/L. The detection limit was 0. 1 mg/L. The recoveries were from 95％ to 106％ , and RSD was from 5.08％ to 7.09％. The experiments verified that the method was simple, sensitive, and accurate.%建立了离子色谱法直接测定饮用水中草甘膦的分析方法.水样加入抗坏血酸除去余氯,微孔滤膜过滤后直接进样测定.用IonPac AS11-HC阴离子交换柱为分析柱,淋洗液为20 mmol/L KOH溶液,流速为1.00mL/min,进样量100μL进行检测.方法的线性范围0～1.5 mg/L,检出限为0.1 mg/L,加标回收率为95%～106%,相对标准偏差为5.08%～7,09%.方法操作简便快捷,灵敏度高,结果准确可靠.【期刊名称】《岩矿测试》【年(卷),期】2011(030)003【总页数】3页(P361-363)【关键词】离子色谱法;草甘膦;饮用水【作者】刘玉欣;李锦;常凤启;卢振敏;王维榕【作者单位】河北省疾病预防控制中心,河北石家庄,050021;河北省疾病预防控制中心,河北石家庄,050021;河北省疾病预防控制中心,河北石家庄,050021;河北省疾病预防控制中心,河北石家庄,050021;河北省疾病预防控制中心,河北石家庄,050021【正文语种】中文草甘膦(分子式C3H8NO5P)，是美国Monsanto公司于1971年开发出的一种广谱除草剂[1]，纯品为非挥发性白色固体，溶于水,不溶于一般的有机溶剂，高效低毒，是农业生产中应用最广泛的除草剂之一[2]。

离子色谱法同时测定生活饮用水中四种阴离子和草甘膦发布时间：2021-08-30T17:12:57.013Z 来源：《城镇建设》2021年第4月第11期作者：曹利剑[导读] 由于草甘膦的除草性能优异，极易被植物叶片吸收并传导至植物全身，曹利剑浙江中检海德标准技术有限公司，浙江省杭州市310011摘要：由于草甘膦的除草性能优异，极易被植物叶片吸收并传导至植物全身，对一年生及多年生杂草都有很高的活性。

目前《生活饮用水卫生标准》（GB/T5750.5－2006）中多种阴离子常用的检测方法有比色法、电极法、滴定法、离子色谱法、柱前衍生-高效液相色谱测试方法等。

其中，分光光度法检测线性范围窄，操作繁琐，检测速度慢，效率低；滴定法终点不易观察；色谱法草甘膦操作麻烦，回收率不理想；离子色谱法在灵敏度、检出限方面更具有优势，且离子色谱法方法简单、操作方便。

因此，本文根据《生活饮用水标准检验方法》（GB/T5750－2006），采用离子色谱法同时测定生活饮用水中的氟、氯、硝酸盐氮、硫酸盐和草甘膦。

关键词：生活饮用水；离子色谱方法；淋洗液；多种成分；同时测定引言在当前水质检测项目中，主要包括氯化物、氟化物、硝酸盐以及硫酸盐4类，主要检测Cl-、F-、SO2-4以及NO-3的4种阴离子。

常规检测方法是应用化学法，均需对各个类型的阴离子进行单独测定，操作过程较为繁琐，检测的工作量较大、周期长，同时检测结果易受到实验室条件以及人工操作等相关因素的影响。

有研究提示，离子色谱法在对水中阴离子的检测操作较为简单，且多组分均可进行测定，操作成本也相对较低。

本研究主要探讨离子色谱法同时测定水中的Cl-、F-、SO2-4以及NO-3的4种阴离子的效果，汇报如下。

1材料与方法1.1仪器DIONEXAQUION离子色谱仪（美国赛默飞公司）；Milli-Q超纯水系统（美国密理博公司）。

1.2试剂及配制1.2.1试剂KOH淋洗液；超纯水（电阻率大于18.0MΩ·cm）；氟化物标准溶液（编号：GBW(E)082706，浓度为1000mg/L）；氯化物标准溶液（编号：GBW(E)080268，浓度为1000mg/L）；硝酸盐氮标准溶液（编号：BW3058，浓度为1000mg/L）；硫酸盐标准溶液（编号：GBW(E)080372，浓度为1000mg/L）；草甘膦标准溶液（编号：GBW(E)081571，浓度为100.0mg/L）。

UPLC-MS/MS测定茶叶中草甘膦、草铵膦及氨甲基膦酸残留量文洋洋（六安市产品质量监督检验所，安徽六安 237000）摘 要：目的：建立一种采用超高效液相色谱-串联质谱法（Ultra Performance Liquid Chromatography tandem Mass Spectrometry，UPLC-MS/MS）测定茶叶中草甘膦、草铵膦及氨甲基膦酸残留量的方法。

方法：通过对提取净化方式、衍生条件、UPLC-MS/MS色谱系统等进行分析和优化，使用CNWBOND HC-C18 SPE小柱进行前处理，采用芴甲氧羰酰氯丙酮溶液作为衍生化试剂，色谱系统选用ACQUITY UPLC® BEH C18色谱柱，并使用Waters I-Class/Xevo-TQD质谱联用仪进行分析。

结果：在10～500 ng·mL-1，草甘膦、草铵膦及氨甲基膦酸线性关系良好（R2＞0.995）；方法测定低限为50 μg·kg-1；不同加标浓度下，不同茶叶中草甘膦的回收率为80.8%～94.3%，草铵膦的回收率为82.0%～95.1%，氨甲基膦酸的回收率为83.1%～95.5%。

结论：该方法准确可靠，满足国标规定的最大残留量，为茶叶中草甘膦、草铵膦、氨甲基膦酸的检测提供了有效手段。

关键词：超高效液相色谱-串联质谱法；茶叶；草甘膦；草铵膦Determination of Glyphosate, Glufosinate and AMPA Residuesin Tea by UPLC-MS/MSWEN Yangyang(Lu’an Institute of Product Quality Supervision and Inspection, Lu’an 237000, China) Abstract: Objective: A method for the determination of glyphosate, glufosinate and aminonenenebc methylphosphonic acid residues in tea by ultra performance liquid chromatography tandem mass spectrometry(UPLC-MS/ MS) was established. Method: Through the analysis and optimization of extraction and purification methods, derivatization conditions, UPLC-MS/MS chromatographic system, CNWBOND HC-C18 SPE cartridge was used for pretreatment, Fmoc-Cl acetone solution was used as derivatization reagent, ACQUITY UPLC®BEH C18 column was used for chromatographic separation, and Waters I-Class/Xevo-TQD ultra-high performance liquid chromatography tandem mass spectrometer was used for analysis. Result: In the range of 10～500 ng·mL-1, the linear relationship among glyphosate, glufosinate and aminomethyl phosphonic acid was good (R2＞0.995); the detection limit of the method was 50 μg·kg-1; the recoveries of glyphosate, glufosinate and ammonia methylphosphonic acid in different teas at different spiking concentrations were 80.8%～94.3%, 82.0%～95.1% and 83.1%～95.5% respectively. Conclusion: The quality of this method is reliable and accurate, which meets the maximum residue amount stipulated by the national standard, and provides an effective means for the detection of glyphosate, glufosinate-ammonium and aminomethyl phosphonic acid in tea.Keywords: ultra performance liquid chromatography tandem mass spectrometry; tea leaves; glyphosate; glufosinate草甘膦（Glyphosate，PMG）是近些年应用最广、产量最大的非选择性广谱除草剂，因其高效、廉价、低毒的特性被广泛应用于花木、茶叶、果树等领域[1]。

气质联用法测定生物样品中草甘膦作者：罗俊潘豪杰童兴钧来源：《中国化工贸易·下旬刊》2017年第10期摘要：样品中草甘膦用水提取，提取液经二氯甲烷溶液和离子交换柱（CAX）净化后用三氟乙酸酐和七氟丁醇的混合液衍生，衍生物用气相色谱-质谱联用仪定性，单点校正法定量，在实际案例中得到应用。

关键词：气质联用；草甘膦衍生物；检测草甘膦是一种非选择性、无残留灭生性除草剂，对多年生根杂草非常有效，纯品为非挥发性白色固体，大约在230℃左右熔化，并伴随分解。

25℃时在水中的溶解度为1.2%，不溶于一般有机溶剂。

草甘膦作为目前世界上用量最大，应用最广的农药品种之一，近年来其对生物和环境的影响已经受到越来越多的关注，当草甘膦浓度在10μg/mL时，中毒特征并不明显，当达到20μg/mL以上时，则出现明显的中毒症状，如恶心、呕吐、胸闷、呼吸困难等《食品中农药最大残留限量》（GM2763-2005）和《生活饮用水卫生标准》（GB5749-2006）都明确规定了草甘膦在稻谷、小麦、水果、甘蔗和棉籽油等农作物以及饮用水中的最大残留限量，但尚无生物样品中草甘膦检测的相应标准。

本实验参考《植物性产品中草甘膦残留量的测定气相色谱-质谱法》（GB/T 23750-2009）建立了羊肝和羊肚中草甘膦的检测方法色谱。

1 实验部分1.1样品前处理1.1.1 提取将脏器（羊肝和羊肚）按四分法进行取样，匀浆后称取12.5g置于50mL离心管中，加纯净水35mL，涡旋混合提取约3min，离心10min，取上清液20mL到另一个50mL离心管中，加入15mL二氯甲烷，涡旋混合提取约3min，离心10min，取上清液4.5mL于15mL离心管中，加入0.5mL酸调节液，轻轻振摇，离心10min，上清液供净化用。

1.1.2 净化移取1.0mL样品提取液过LC-WCX阳离子固相萃取柱，自然垂滴，待上清液完全流出后，用1.0mL CAX洗脱液淋洗，淋洗液收集于15mL离心管中，在50℃水浴中旋转蒸发至近干，用2.0mL CAX洗脱液成分溶解残渣，待衍生。

附
异丙胺盐鉴别试验
1方法提要
试样用水溶解，以甲基磺酸为流动相，使用阳离子分析柱和电导检测器的离子色谱仪，对试样中的异丙胺盐离子进行分离和测定。

2 试剂和溶液
甲基磺酸；
水：去离子水；
异丙胺盐标样：已知异丙胺盐质量分数99.0%。

3 仪器
离子色谱仪；
色谱工作站；
色谱柱：250mm×4.0mm(i.d.)DionexIonPac CS12A阳离子分析柱；
过滤器：滤膜孔径约0.22μm；
超声波清洗器。

4 离子色谱操作条件
清洗液：甲基磺酸溶液，c（甲基磺酸）=12mol/L；
流速：1.0mL/min；
柱温：20℃；
电导温度：30℃；
进样体积：5μL；
保留时间：异丙胺盐8.3min。

上述操作参数系典型的，可根据不同仪器特点，对给定的操作参数作适当的调整，以期获得最佳效果，典型的异丙胺盐阳离子色谱图下图。

5 试样溶液的制备
称取0.1g试样（精确至0.0001g），置于100mL容量瓶中，用水稀释至刻度、摇匀。

用移液管吸取上述溶液5mL于100mL容量瓶中，用水稀释至刻度、摇匀。