反向流动注射化学发光法测定二邻苯二甲酰亚胺甲基二磺酸基酞菁锌

第２Ｉ卷第５，ｔＯＪ　２（Ｘ）２年９　Ｊ　Ｊ　分ｆＪ　试验　Ｃｈｉｎｅ￣＂Ｊｏｕｍａｌ（Ｊｆ＇Ａｎａｈｓｉｓ　Ｉ　ｄＩ×）ｒｄｌ（）ｌ、　～０Ｉ．２ｌ　Ｉ　Ｊ＿５　２（ｘ】２—９　反向流动注射化学发光法测定二邻苯二甲酰亚胺　甲基二磺酸基酞菁锌　』　惠生　，ＩＩｌ’桦珍！，Ｉｉ缱：　（１．东华大学环境科学与Ｊ二稚　院，ｊ：海２０００５ｌ；２．　州人　、　化　化　院，　州３５（Ｘ）０２）　摘　要：在碱性介质中，二邻苯二甲酰亚胺甲基二磺酸基酞菁锌（简写为　ｚｎｎ：　）可增强Ｌｕｍｉｎｏｌ—ｔｔ，０２一Ｃ　ＦＡＢ体系的化学发光，据此建立了测定Ｚｎ！　ｃ・　含量的反向流动注射化学发光分析新方法　用该法测定ＺｎＰ（・　Ｐ２，其范围为２．５　×ｌ０一　～１．０×ｌ０—　ｍｏｌ／１　，捡坝１Ｊ限为９×ｌ０一　ｍｏｌ／１　，对１．０×１０一　Ｉｌｌ（，Ｉ／Ｉ　的　Ｉｌ—　ｆ）’溶液进行９次乎行测定，其相对标准偏差为１．２％　本法有一定的选择　性，与分光光度法相比，灵敏度提高了ｌ～２个数量级　关键词：二邻苯二甲酰亚胺甲基二磺酸基酞菁锌；流动注射；化学发光；鲁米诺　中图分类号：０６５７．３２　文献标识码：＾　文章编号：Ｉ（　）一０７２（）（２（Ｘ）２）ｏ５一（ｘ）Ｉ　３　０３　光动力治疗法的实验和临床研究足　今　’　：　研究领域中的一个重要的热点研究课题，¨前至少　有近２０个国家开展光动力疗法的实验和临床研　究＿】～９　住光动力治疗法的实验和临床研究中，最　基础和最关键的技术，是抗癌光敏剂的研制及其作　机制的研究，而且对抗癌光敏齐ｌＪ的用　及其代埘　研究离不歼灵敏和准确的分析方法。■邻苯二ｌ｛１　酰亚胺甲基二磺酸基酞菁锌（以下简称为　ＺｎＰｃ￣Ｐ２）是一类用于光动力治疗的新型抗癌光敏　剂，建　一种准确、灵敏、快速的分析方法，用于该　抗癌光敏剂的测定，在开展光动力疗法的实验和临　床研究中具有十分重要的意义。流动沣射化学发　光法具有仪器简单、灵敏度高、速度快，已住分析化　学、环境科学、生物、医学、药学等诸多邻域中受钊　人们的广泛关注。本文建立的Ｌｕｍｉｎｏｌ—ＺｎＰｒ￣Ｐ，一　Ｈ２Ｏ２一ＣＴＡＢ反向流动注射化学发光分析新力‘法，川　于测定两亲性酞菁衍生物（ｚｎ　Ｐ１）抗癌光敏剂，　有一定的选择性，Ｈ灵敏度高，速度快，对该抗癌光　敏剂的实验和临床研究提供ｒ有利的监控分析技　术：　ｌ　实验部分　１．１仪器与试剂　ＩＦ＇Ｆ、Ｉ　一１）　流动注射化　、　发光仪（　安瑞科电　Ｊ　没箭仃　公『　）；ＦＡ２００４　Ｉ乜ｆ人　（ｆ　海人平　仪器厂）ＺｎＰ（・　１　，储备液（１．０×１０一・ｎｏｌ／１　）：精　街称取ｌ占】体二邻笨　【ｆｊ酰、　胺ＩＩＩ　磺酸基酞菁　锌（ｔｔｔ稍州大学功能材料研究所提供）０．０５６９　ｇ，ｆ＿｝ｊ　水溶解　于５０　ＩｌｌＪ　棕色窬量瓶，定容；使川时用　水稀释全所需浓度Ｌｕｍｉｎｏｌ储备液（１．０×１０。　ｍｏｌ／１　）：精衔称取０．０８８６　ｇ　体鲁水诺（Ａ．Ｒ级，　ｓｉｇｍａ），川０．１０　ｍｏｌ／ｌ　的ＮａＯＨ溶解许稀释至５０　川Ｉ　Ｈ，Ｏ，溶液（３０％溶液，Ｊ　尔　陇化　厂　产），　使　，『川水稀释垒所需浓度，ＪｆＪ高锰酸钾法标定　ｆ一六烷　叫Ｉ琏澳化铵（ＣＴＡＢ，』匕　海淀　新晕试　制厂　产）；Ｔｒｉｔｏｎ　Ｘ一１００（￣ａｒｅｌｌＺ￣－ｉｃｈｅｎ　ｄｅｒ　ｒｏｈｍ＆ｈａａｓ　ｒｏｍｐａｎｙ）；ｆ　二烷琏苯磺酸纳（ＳＩ）ＢＳ，ｌ　海化学试剂　牛　），　其它试齐】Ｊ均为分析纯，按一般的分析实验方法　配制　实验【ｆ１所用的水均为二二次蒸馏水　１．２实验方法　按　¨｜斤示流路进行ｉ＿ｒｌ＝验，洲节峰高定　数　据的采集和处胛采刚ＩＦ’ＦＩ　一Ｉ）　流动沣射化学发光　收稿日期：２００２—０５—３０　基金项目：乃　华人　’　科技发展Ｊ　项ｌｌｆ１Ｉ．｝ｆ　１　竹ｆ　Ｉ然科，、　：Ｊ上　资ＪＩＪＪＪ州Ｉ（（　）ｌ】（ＸＸ）５）　作者简介：　惠，Ｉｉ（１９５５一）．　Ｊ，Ｍ　教授，　Ｉ‘＇１－　Ｉｌｌｌｉ

　维普资讯 http://www.cqvip.com ２Ｉ巷　５　２００２年９　Ｊ　Ｊ　分析试验事　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ａｎａｌｙｓｉｓ　１　ＭＪｏｒａｔｏ￣　、（，Ｉ．２Ｉ．Ｎｏ．５　２【ｘ】２—９　仪配备的分析软件。　图Ｉ　反相流动注射化学发光分析流路图　Ｆｉｇ．Ｉ　Ｄｉａｇｒａｍ　ｏｆ　ａ　ｒｅｖｅｒｓｅ　ｆｌｏｗ　ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ　ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ　ｓｙｓｔｅｍ　Ｉ—Ｉ　ｕＩｎｉｎｏｌ／Ｎａ０ｌ１溶液；２一　ｎｌ＇ｃＳ２Ｐ２／ＣＩ、Ａｌ；溶液；３一ｔｔ２Ｏ　溶液；ｌ，＿一蠕　；、一进样　；卜一流迎池；、、一　液；Ｈ、一饥ｌ　；　Ｐ川一光ｆｕ俯增僻；Ｒ—　求仪　２结果与讨论　２．１仪器参数的选择　２．１．１　管道连接方式与注射组分的选择　试验ｒ　各种　同的管道连接方式，并分别以ＺｎＰｃ￣　／　（；ＴＡＢ、Ｈ，Ｏ，、Ｌｕｎ・ｉｎ（｝Ｉ／ＮａＯＨ为注射溶液结果丧　明，采用如图ｌ所示的连接方式、以碱性Ｉ：ｕｍｉｎｏｌ为　注射溶液（用主泵运行）时，无背景ｆ扰，基线平稳，　便于渎取峰高　故本义选择如图ｌ所示的腹柏流　动注射系统　２．１．２光电倍增管负高压的选择　光电倍增管负　高Ｊｉ　增大，灵敏度随之增强，但噪音也随之增大　，　义兼顾仪器灵敏度与稳定性，选择一８００　Ｖ电压，　２．１．３泵速及运行时间的影响　主泵和副泵的运　行速度对峰高基本无影响，但对峰形略有影响　综　合考虑试剂用蕈、峰形、操作时间等各种因素．本文　选择主泵转速３０　ｒ／ｍｉｎ（相　于流速１．５　Ｍ／ｍｉｎ），　０泵转速４０　ｒ／ｍｉｎ（相当于流速２．０　ｍＬ／ｌｎｉｎ）剐泵　运行时间对峰高基本无影响，但时间太短会使峰形　重叠，在副泵运行时问大于１５　Ｓ时，峰形完整，本文　选择运行时问为２０　随着主泵运行时　Ｊ（进样时　阳】）增大，发光强度增大，　运行时间达４ｓ时，Ｌｕｍｉ—　ＨｏＶＮａＯＨ溶液基本充满定　环，发光强度趋于最　：　，Ｈ‘在ｌＯ　ｓ之内保持不变，本文选择运行时问为　５　Ｓ　２．２反应条件的选择　２．２．１　表面活性剂及其浓度的影响　试验ｒ　３千叶１　表面活性剂（ＣＴＡＢ、　Ｆｒｉｔｏｎ　Ｘ—ｌ（ｘ）和ＳＢＩ）Ｓ）对发光强　度的影响，结果丧明：ＣＴＡＢ　ＪＪＩ】入ｌ川）ｌｉｉＩ（，ｌ—Ｈ，（）１体　１４一　系后埘发光有增强，Ｈ　ＺｎＰｃ￣　加入Ｌｕｍｉｎｏｌ—Ｈ２Ｏ２一　Ｃ　ＦＡＢ体系　发光强度又进一步的明　增强，故选　择ＣＴＡＢ为陔实验所用表面活性剂　ＣＴＡＢ的浓度　侄１．０　Ｘ　１０一【ｌｊ【１１／１　（１．５　Ｘ　ｌ０　ｍｏｌ／ｌ　范围，；ｌ己随　着浓度的增大发光强度增强，　Ｃ　ＦＡＢ的浓度为５．　０　Ｘ　１０一ｍｏｌ／Ｉ　，发光最强；ＣＴＡＢ的浓度大于６．５　Ｘ　ｌ０　ｍ・／１／１　时，发光强度开始缓慢的降低一本文选　择ＣｒｒＡＢ的浓度为５．０　Ｘ　ｌ０　ｍｏｌ／１　，进行实验　２．２．２　Ｈ２Ｏ，的影响Ｈ２Ｏ２　较低时，发光强度随　着Ｈ　Ｏ，世的增大而增大，　其量达ｙｉｊ体积分数　ｌ０％Ｉ｛、『，发光强度基本达到最大值并趋于稳定，从　灵敏度及　约试剂的角度考虑，本义选择Ｈ２Ｏ２的　体积分数为１０％　２．２．３　ｌ，ｕｍｉｎｏｌ及其介质浓度的影响ｌ，ｕｍｉｎｏｌ浓　度越高，体系的发光强度越大，Ｒ发光强度　Ｌｕｌｎｉ—　ｎｏｌ浓度线性相关（如图２所示）　从发光强度与试　剂消耗的角度考虑，本文选择Ｌｕｍｉｎｏｌ的浓度为１．　００　Ｘ　ｌ０～　，１／Ｌ　Ｉ儿ｍｉｎｏｌ溶于碱性介质中口『得到　强的发光，本文选择０．５０　ｍｏｌ／Ｉ　的ＮａＯＨ作为介　质　２．３线性范围、检测限及精密度　２．３．１　线性范围　在所选定的最佳条件下，ｚｎｌ　溶液的浓度在２．５　Ｘ　１０　～１．０　Ｘ　１０　ｍｏｌ／Ｌ　之『廿Ｊ时，体系的化学发＿光强度与其浓度呈良好的线　性关系线性同归力　为，＝１０２．１２　ｒ＋５４９．４８，　相关系数ｒ＝０．９９７６　２．３．２检测限与精密度　若定义　ｒ１信号的标准　

偏差的３倍所对应的分析物的浓度为化　发光分　维普资讯 http://www.cqvip.com ２Ｉ巷第５　２００２年９』Ｊ　分析试验卒　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｊｏｕｍａｌ　ｏｆ　Ａｎａ１．＇￣ｓｉｓ　，Ｉ．２Ｉ．Ｎｏ．５　２（ｘ】２—９　析的检测限，则本法的检测限为９×１０　ｍｏｌ／ｌ　（，ｚ　＝ｌ１），　＿ｊ分光光度法相比，灵敏度提高Ｊ，ｌ～２个　数｛ｉｆ级　对１．０×１０　ｍｏｌ／ｌ　的ｇｎＰｃ￣Ｐ２溶液进行　平行测定并计算相对标准偏筹，测定结果ＲＳＤ＝１．　２％（／ｌ＝９）　２．４结论　ＺｎＰｃ￣Ｐ２作为过氧化物模拟酶，　Ｉ￣ｍｎｉｎｏｌ—　Ｈ　０，一ＣＴＡＢ体系的化学发光反应中起催化剂的作　川　本文建立的ＺｎＰｅ￣Ｐ２一Ｌｕｍｉｎｏｌ—Ｈ２Ｏ！一ＣＴＡＩ｛体系　川于低浓度ＺｎＰｅ￣Ｐ２的测定，具有简便、　敏的特　点　参考文献　ｌ　Ｉ—　Ｉｄｎ　Ｈ，Ｍｏｔｔｏｌａｎ　Ａ　Ａｎａｌ　Ｃｈｉｍ　Ａ（・ｔａ，Ｉ９９６，３２９（３）：３０５　［２　Ｒｕｅｇｅｍｅｒ　Ａ，Ｒｅｉｓｓ　Ｓ，　ｙ¨Ａ　ｅｌ　ｆ　．　ＩｌＩｓ　（・ｔｕａｔｏｒ￣ｌ｛．　Ｉ９９９．Ｂ５６（Ｉ一２）：４５　ｌ３　Ｈａｒａ　。’Ｉ，　Ｉ＇ｓｕｋａｇｎｓｈ；Ｋ．Ａｎａｌ　・；ｉｎ，１９９０，６（６）：７９７　ｌ４　Ｊ　ｔｌａｒａ—Ｉ，　Ｉ　’ｒｉ　ａｒｌ，ｌａ　Ｍ，　ｌ＇ｓｕｋａｇｎｓｈｉ　Ｋ．Ｂｕｌｌ　Ｃｈｅｍ　Ｊｆｌｌ１　Ｉ９８３，５６（８）：２２６７　５　ｔｔａｒａ。。。Ｉ，　Ｉ＇ｏｒｉ＇，ａｍａ　Ｍ，　Ｉ＇ｓｕｋａｇｏｓｈｉ　Ｋ．Ｂｕｌｌ（：　ｔｎ　Ｊｐｎ，　Ｉ９８３，５６（１０）：２９６５　ｌ（）］Ｈａｒａ　Ｉ’，ｔｓｕｋａｇｏｓｈｉ　Ｋ，Ａｍｉ　Ａ　ｅｌ　ａ１．Ｂｕｌｌ　Ｃｈｅｍ　ｘ・Ｊ）ｍ　Ｉ９８９，６２（９）：２８４４　ｌ　７　０　ｌｚ　Ｍ，Ｅｒｄｅｍ　Ａ，Ｋｉｌｉｎｃ　Ｅ，ｇｏｋｇｕｎｎｅ（・Ｉ　．¨　・ｔｒｏａｎａｈ—　ｓ　（ＮＹ）．Ｉ９９６，８（２）：Ｉ４７　８　Ｋｉｌｉｎ￣　Ｅ，Ｅｒｄｅｍ　、，（ａ）ｋｇｕｎ（　（‘Ｉ　Ｈ“　［ｒｏａｎａ［＇，ｓｉｓ（　、）　Ｉ９９８，Ｉ（）（４）：２７３　’　９　－Ｋ　ｆ’ｆ、　ｆｆ．感光科　、　：　比化　：，Ｉ９９４．８：２Ｉ４　Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｚｎｐｃ　Ｐ，ｂｙ　ｒｅ．　ｖｅｒｓｅ　ｆｌｏｗ　ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ　ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ　ａｎａｌｙｓｉｓ　Ｚｈｕａｎｇ　Ｈｕｉｓｈｅｎｇ’一，　Ｈｚ　（ｔＺ］ｌｅｔｌ！ａｎｄ　Ｗａ　ｒｊｇ　，！！（１．　Ｃｏｌｈ、　ｏｆ　Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ　ｉｅｎｃｅ　ｍｌｄ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，　１）ｏｎｇｈｕａ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ　２５０００１；２，１）ｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　（：ｈ　【ｌｌｉｓｌ　ｎ＿，ｈＩｚｈｏ［Ｉ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，ＦｉＩｚｈｏｕ　３５０００２），Ｆ　眦ｊ　Ｓｈｉｙａｎｓｌｌｉ，２Ｏ０２，２ｌ（５）：ｌ３～ｌ５　Ａｂｓｔｒａｃｔ：　Ｆｈｅ　ａｂｉｌｉｔｖ　ｏｆ　Ｚｎ｝）（　Ｐ，ｔｏ　ｅｌｌｈａｌｌ（・ｅ　ｔｈｅ　ｃｈｅｍｉ—　ｌＩｌｌ１ｆｉｎｅｓ￣　ｅｌｌ（・Ｐ（ＣＩ　）ｏｔ’Ｉｉｌｎｌｉｎｌ’ｌ—Ｈ，（），一ＣＴＡＢⅥ　ｓｔｔｕｌｉｅ（Ｉ　ｉｎ　ａ　ａｌｋａｌｉｎ￣　ｍｅｄｉｕｍ．ｔｉｌｌ｛Ｉ　ａ　ｖｅｌ＊Ｓｅ　ｌ１（’ｗ　ｉｎｉｅ（　ｌ　ｌ１　（・ｈｅｍｉｌＵｌｌｌｉｌｌｅｂｃｅｌｌ［ｍｅｔｈ（ｕＩ　ｆｉ）ｒ（Ｉｅｔｅｎｎｉｎａｔｉｏｎ　ｏｔ　Ｚｎ｝）（　ｗａｓ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅ（Ｉ．Ｕｎｄｅｒ　ｏｐｔｉｎｌｔｍｌ　ｆ　（）ｎ（１ｉｔｈ．ＩＳ．Ｉｌ　ｌ　ｉｉｌｅａｒ　ｒｅ—　ｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ　Ｉ）ｅｔＷｅｅｌｌ　１Ｉ　（　Ｐ，ａｌｌ（｛（：｝　ｉｎｔｅｎｓｉｈ￣、　ｏｌ，一　ｓｅＰ，，ＰｆＩ　ｉ１１　ｔｈｅ　ｒａｎｇｅ　ｏｆ　２．５×ｌ０　～１　０×ｌ０一　Ｉｎｏｌ／Ｉ　、、ｉｔｈ（１ｅｔｅ（・ｔｉｏｎ　ｌｉｍｉｔ（，ｆ．９×ｌ０　ｍｏｌ／１　．ＴＩｌｅ　ｒｅｌａｔｉｖｅ　ｓｔａｎｄａｒ￣Ｉ（１ｅｖｉａｔｉｏｎ　ｗａｓ　１　２３％　ｒ　Ｉ．０×ｌ０　ｍｏｌ／ｌ　ＺｎＰｃ　Ｐ，（ｎ＝９）．　Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ＺｎＰ（　Ｐ２；　（・ｅｎ　Ｐ：Ｉ　ｕｍｈｌｏｌ　２００３年《中文科技资料目录・中草药》征订启事　《中文科技资料目录・中草药》为国家科技信息检索体系的川物，以　、系统、准确、迅速报道　ｆＪ　药　文献题录，为读者提供准确、便捷的检索途　为办刊　旨，是ｌ１前报道【｛Ｊ　药义献最令的印刷夺偷索工具　由中草药信　皂、中心站和天津药物研究院主办　本刊２００３年报道国内１０００种医约学、化学、　物　：、农林科　、　、综合自然科学期刊，以』爻各种资料ｆ　ｒ＝　编、会议论文集　每期报道中草药文献题录２４００条，伞＝年共报道ｌ２０００条（第６期为年度主题索引），报道　时差４～６个月　是从事中草药科研、　产、检验、敦学、Ｉ　场营销、信息服务等部门必备的检索　具　本刊为双月刊，每期定价３０元，伞年汀价ｌ８０，　旧内统一ｆ｛Ｊ弓・：ＣＮ１２一ｌ　１０７／Ｒ　编辑部自办发行，欢　迎汀阅，银行信汇、邮局汇款均可　编辑部地址：天津市南开区鞍山曲道３０８　；邮政编码：３００１９３；联系电话：（０２２）２３００６８２２；传真：（０２２）　２７３８ｌ３２８；Ｅ—ｍａｉｌ：ｌｖｇｉ２００１８８＠ｈｏｔｍａｉｌ．（＇ｏｌｌｌ；ｚｗｋｊｍｌ＠ｍａｉｌ．ｒｈｉｎａ．（・ＯＩｌｌ；Ｊ　银行：天滓市ｌ　商银行南ｌ、ｊ外分卵