1.2 基因工程的基
本操作程序
第1课时目的基因的获取基因表达载体的构建
一、选择题
题型一基因工程的基本操作步骤
1．基因工程主要操作步骤的顺序是()
①基因表达载体的构建②将目的基因导入受体细胞
③目的基因的检测与鉴定④目的基因的获取
A．③②④①B．②④①③
C．④①②③D．③④①②
[答案] C
[解析]基因工程的主要操作步骤顺序：目的基因的获取→基因表达载体的构建→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测和鉴定。
题型二目的基因的获取
2．获取目的基因的方法有多种，下列不属于目的基因获取方法的是() A．从基因组文库中获取B．从cDNA文库中获取
C．直接从受体细胞中提取D．利用PCR技术获取
[答案] C
[解析]获取目的基因的方法有多种，例如可以从基因组文库中获取目的基因，可以从cDNA文库中获取目的基因，也可以利用PCR技术获取目的基因，故A、B、D不符合题意；受体细胞是接受目的基因的细胞，受体细胞自身不含目的基因，C符合题意。
3．下列关于基因文库的说法，错误的是()
A．可分为基因组文库和部分基因文库
B．cDNA文库属于部分基因文库
C．基因组文库的基因在不同物种之间均可进行基因交流
D．同种生物的cDNA文库中基因数量较基因组文库少
[答案] C
[解析]基因组文库中只有部分基因能够在不同物种之间进行基因交流。
4．下列有关PCR技术的说法，不正确的是()
A．PCR是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术
B．PCR技术的原理是DNA双链复制
C．利用PCR技术获取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列
D．PCR扩增中需要解旋酶解开双链DNA
[答案] D
[解析]利用PCR技术获取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物，C正确；PCR扩增中目的基因受热变性后解链为单链，不需要解旋酶解开双链DNA，D错误。
5．某基因比较小，且核苷酸序列已知，获得该基因的最佳方法是()
A．以mRNA为模板反转录合成DNA
B．以4种脱氧核苷酸为原料人工合成
C．将供体DNA片段转入受体细胞中，再进一步筛选
D．先建立基因文库，再从中筛选
[答案] B
[解析]目的基因的获取方法主要有三种：从基因文库中获取、利用PCR技术扩增、人工合成。对于比较小且核苷酸序列已知的目的基因，可以通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成。
6．下列有关获取目的基因的叙述，不正确的是()
A．获取目的基因是实施基因工程的第一步
B．目的基因可以是一些具有调控作用的因子
C．PCR技术的原理是DNA复制，需要DNA连接酶催化DNA合成
D．目的基因可以从自然界中分离，也可以人工合成
[答案] C
[解析]目的基因可以是一些控制蛋白质合成的基因，也可以是一些具有调控作用的因子，B正确；PCR技术的原理是DNA复制，需要DNA聚合酶催化DNA 的合成，C错误；目的基因可以用限制酶从自然界中分离，也可以通过人工合成的方法获得，D正确。
题型三基因表达载体的构建
7．基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤，其中基因工程的核心是() A．目的基因的获取
B．基因表达载体的构建
C．将目的基因导入受体细胞
D．目的基因的检测与鉴定
[答案] B
[解析]基因工程的基本操作程序主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定。其中，基因表达载体的构建是基因工程的核心。
8．下列选项中不是表达载体必要的组成成分的是()
A．目的基因B．启动子
C．终止子D．抗青霉素基因
[答案] D
[解析]一个基因表达载体的组成，除目的基因外，还必须有启动子、终止子以及标记基因等，标记基因的作用是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来，而抗青霉素基因是标记基因的一种，但也可以是其他标记基因，所以抗青霉素基因不是基因表达载体的必要的组成部分，D 错误。
9.如图为基因表达载体的模式图，若结构X是表达载体所必需的，则X最可能是()
A．氨苄青霉素抗性基因
B．启动子
C．限制酶
D．DNA连接酶
[答案] B
[解析]由X的位置可以判断其为启动子。启动子是基因表达载体所必需的，功能是启动插入基因的转录过程。
10．如图为基因表达载体的模式图，下列有关说法错误的是()
A．构建基因表达载体需要用到限制酶和DNA连接酶
B．任何基因表达载体的构建都是一样的，没有差别
C．图中启动子位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位
D．抗生素抗性基因的作用是作为标记基因，用于鉴别受体细胞中是否导入了
目的基因
[答案] B
[解析]构建基因表达载体需要用到限制酶和DNA连接酶，A正确；载体上的酶切位点和标记基因都有可能不同，因此基因表达载体的构建也不完全相同，B 错误；启动子位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，C正确；抗生素抗性基因的作用就是作为标记基因，用于检测受体细胞中是否导入了目的基因，D正确。
11．如图为某质粒限制酶酶切图谱。某基因不含图中限制酶识别序列。为使PCR扩增的该基因重组进该质粒，则扩增的该基因两端需分别引入哪两种限制酶的识别序列()
注：图中限制酶的识别序列及切割形成的黏性末端均不相同。
A．NdeⅠ和Bam HⅠB．NdeⅠ和XbaⅠ
C．XbaⅠ和Bam HⅠD．Eco RⅠ和KpnⅠ
[答案] A
[解析]构建重组质粒时，要将目的基因插入到启动子和终止子之间，而且不能破坏启动子、终止子、复制原点、抗生素抗性基因等部位，故只能选用NdeⅠ和Bam HⅠ切割质粒和含目的基因的DNA片段，因此在PCR扩增的该基因的两端需分别引入NdeⅠ和Bam HⅠ两种限制酶的识别序列。
12．下列关于载体的叙述中，错误的是()
A．与目的基因结合后，实质上就是一个重组DNA分子
