肠道微生物PPT
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微生物的分离与纯化:从自然界或混有杂菌的培养体中将所需要的微生物提纯出来的获得纯培养的方法。
分离:从存在于自然界的混合菌群中分离出一种微生物,并加以培养。
选择培养分离:通过抑制大多数微生物的生长或者造成有利于该菌生长的环境,再通过稀释平板方法进行微生物纯培养的分离技术。
生长曲线:将少量单细胞的纯培养,接种到一恒定容积的液体培养基中,在适宜条件下培养,定时取样,测菌量。以培养时间为横坐标,以细菌增长数目的对数为纵坐标,绘制所得的曲线。
代时:单个细胞完成一次分裂所需要的时间。
产量常数:表示微生物对基质利用效率的高低,Y=菌体干重/消耗营养物质的浓度。
恒浊培养:在恒浊器内,调节培养基流速,使细菌培养液浊度保持恒定的连续培养方法。
恒化培养:以恒定流速使营养物质浓度恒定而保持细菌生长速率恒定的方法。
细胞固定化:是通过包埋法、微胶囊法、吸附法等将细胞固定在载体的内部或表面 ,加入营养液及合适的培养条件,得到代谢产物。
优点:可提供高密度的细胞;减少细胞的流失,反复利用;简化细胞与代谢产物的分离工艺。 缺点:成本高;易污染;物质传递阻力大;只能用于细胞分泌型产物的发酵。
同步培养法:能获得处于同一生长阶段的群体细胞的培养方法。
同步生长:运用同步培养技术,控制微生物生长,使之处于同一生长阶段并同时分裂。
高密度培养:指微生物在液体培养基中细胞群体密度超过常规培养10倍以上时的生长状态或培养技术。选取最佳培养基成分和各成分含量; 补料; 提高溶解氧的浓度; 防止有害代谢产物的生成。
灭菌:采用任何强烈理化因素使物体内外部的一切微生物永远丧失生长繁殖能力的措施。
杀菌:菌体虽死,形体尚存。
溶菌:菌体被杀死以后,细胞自溶、裂解而消失。
消毒:采用较温和的理化因素,仅杀死物体表面或内部一部分的病原菌,而对被消毒的对象基本无害。
防腐:采用某种理化因素完全抑制微生物的生长繁殖(制菌作用)
化学治疗:指具有高度选择力(对病原菌具高度选择力而对其宿主基本无毒)的化学物质来抑制宿主体内的病原微生物的生长繁殖,达到治疗宿主疾病的目的的一种措施。
以肠道致病菌检测为基础的微生物学综合性实验探索
[摘 要] 目的:开展微生物学实验教学改革,探讨微生物学实验教学中开设综合性实验的必要性、实施过程及效果评价。方法:选择生物技术专业2010级本科生作为研究对象,设计肠道致病菌检测的综合性实验,参考中国疾病预防控制中心(cdc)应对突发公共卫生事件微生物检验程序,实施教学改革,由学生自主设计、动手操作、分组讨论并提交实验报告。结果:通过开设综合性实验,学生巩固了课堂理论知识,掌握了实验操作的基本技能,增强了生物安全意识,并熟悉了肠道致病菌检测的方法和流程。结论:综合性实验的开设有助于提高学生分析问题、解决问题的能力,对于学生素质的全面提高起到了促进作用。
[关键词] 微生物学 实验教学 肠道致病菌 综合性实验
前言
实验教学在医学教育中占有重要地位,对培养医学生理论联系实际、动手能力、分析解决问题能力、科学思维方法以及严谨的科学精神均具有重要意义,对实现素质教育和创新人才培养目标也有着不可替代的作用[1]。综合性实验是实验教学创新的一个重要改革, 它是一种需要学生自拟实验方案、查阅参考资料以及提出设计思路和实验步骤, 并在获得的现象或数据的基础上自己概括出实验结论的类科研实验[2]。微生物学是生物技术专业的一门重要基础课程,实验教学是微生物学教学中的重要组成部分。改革实验教
学、增加综合性实验、培养学生的科研思维和创新能力是微生物学教学改革的重要课题。本文以“肠道致病菌检测”这一综合性实验为例,探讨了在生物技术专业微生物学实验教学中开设综合性实验的尝试及效果。
1.微生物学综合性实验开设的必要性
医学是实践性很强的学科,人们对于生命现象和疾病发生机制的研究都是通过实验研究来证明,直至今日,实验仍然是医学研究的基本方法。因此,在医学教育中,实验教学占有重要的比重,部分学科实验教学比重达到了一半以上。实验教学效果的高低直接影响到学生对课堂理论知识的理解程度。在通常经典的教学模式中,实验教学大多数是验证性试验,各个实验项目之间相互独立,缺乏必要的逻辑联系,虽然在一定程度上可以增强学生对课本理论知识的理解,但是实验过程自主性差,不利于学生创新思维的培养和对学科的整体把握。综合性实验是用3个或者更多的知识点来完成实验过程的教学方式,是比较新颖的教学类型,通过对系统设计的几个实验结果进行综合分析,在较广泛知识理论体系的指导下,得出较全面的结论。与经典的实验教学方法比较,更能提高学生自主学习的能力,锻炼学生的创新思维,也符合以人为本的教育理念。
1 / 6 《农产品/食品微生物检验》课程-微教材
微课名称 沙门氏菌——操作程序及要点——传统鉴定
关键词 沙门氏菌;致病菌;检验;操作程序及要点;传统鉴定
微课类型 讲授型 微课形式 PPT动画式 教学设计模式 讲授法
教学目标 掌握沙门氏菌的检验的程序及要点
掌握沙门氏菌的检验中前增菌、增菌、平板分离、生化鉴定和血清学试验的过程和要点
教学内容 知识点 技能点
沙门氏菌的检验前增菌的过程和要点
沙门氏菌的检验增菌的过程和要点
沙门氏菌的检验平板分离的过程和要点
沙门氏菌的检验生化鉴定的过程和要点
沙门氏菌的检验血清学试验的过程和要点 沙门氏菌的检验每一步骤过程和要点
知识讲解
沙门氏菌操作程序及要点——传统鉴定
沙门氏菌操作程序及要点分为检验程序和操作步骤
一、 检验程序
根据国标,沙门氏菌的检验程序为: 检样经无菌处理后,称取25 g(mL)样品加入到225 mL
BPW中36±1℃培养8~18h;取培养物1mL 接种到10mL的TTB中同时取1mL 接种到10mL的SC中,分别于42±1℃和36±1℃培养18~24h;取培养后的增菌液分别划线接种于BS琼脂平板和XLD琼脂平板(或HE琼脂平板、显色培养基平板)中,于36±1℃培养18~24h,BS需延长至40~48h;培养后挑取可疑菌落做生化试验。
挑取2 个以上典型或可疑菌落——接种三糖铁琼脂,赖氨酸脱羧酶试验管和对照管、供做靛基质试验的色氨酸肉汤、尿素(pH7.2),KCN试验管和对照管,同时划线营养琼脂平板——
2 / 6 如5项生化都符合——则直接判定为沙门氏菌——如五项中靛基质阳性——则补做甘露醇和山梨醇试验,如果两项均为阳性——为可疑沙门氏菌,但需结合血清学鉴定结果进行判定——如五项中H2S阴性——则需补做ONPG试验,ONPG阴性,同时赖氨酸脱羧酶阳性——为沙门氏菌——也可在三糖铁和赖氨酸脱羧酶试验初步判断结果后,使用商品化的生化鉴定系统进行生化鉴定——判定是否为沙门氏菌——如果5项反应中有2项以上不符合——则沙门氏菌阴性——最后报告结果
hCG 检查、阴道分泌物检查及粪便检查
首都医科大学附属北京安贞医院 左大鹏
一、尿 hCG 检查
尿液人绒毛膜促性腺激素的检查,这个激素是胎盘合体滋养细胞分泌的糖蛋白激素,具有促进性腺发育的作用,对于促性腺激素受体有高度的亲和性。这个 hCG 存在于孕妇的血液,尿液,初乳,羊水和胎儿体内。
在受精后的第六天,受精滋养层形成时就分泌微量的 hCG ,受精体着床以后,我们就可以用免疫学方法制备抗 hCG 的抗体,然后我们就可以去检查抗原。在妊娠早期,大约 1.7~2
天, hCG 的分泌量可倍增高,就是怀孕的一两天,就能增高一倍,到了妊娠的 8~10 周血液的浓度达到高峰,以后就会有一些降低,到了妊娠晚期,浓度只为当初峰值的 10% ,一直到分娩,它主要用于妊娠的诊断。
检测的方法,我们目前主要用的是免疫学法,早早孕试条是用胶体金标记的。参考范围是健康的没有怀孕的妇女是阴性的。
临床意义是一个怀孕的诊断指标,所以可以作为早期妊娠的诊断,妊娠后尿液中 hCG 增高,一般在妊娠后 35 天 ~40 天就可以达到 200 个 ng/L ,受精卵着床后 5~7 天在尿中就可以检测到 hCG ,所以叫做早早孕,人工受精或药物促进排卵者需要早点作出妊娠诊断,以便加强监护,因此可能需要选用灵敏度更高,特异性更强的试验方法。
除了对于早早孕的诊断有重要的意义之外,另外尿的 hCG 检查对于流产的诊断和检测也是非常重要的,如果是先兆流产,尿的 hCG 可以维持在一个高的水平。如果临床上怀疑有先兆流产,但是 hCG 始终在一个高的水平,那我们说一般能保住,不会发生难免流产,如果
hCG 在 200ng/L 以下,并且逐渐减低,这个可能要保不住了,可能就会出现流产,甚至会出现死胎,如果 hCG 降到 48ng/L 以下,就可能发生难免流产。
流产有先兆的话,医生一定会采取保胎的措施, hCG 也可以作为保胎效果的一个检测,如果 hCG 不断增高,我们说保胎有效,如果 hCG 逐渐下降,说明保胎无效,那就要早处理了,不要成为死胎,如果胎儿死在宫腔内的话,也会造成孕妇的损伤。那不全流产的时候,