经方治疗动脉粥样硬化研究进展_王佑华

进钙化形成 。也有一些 因子可 以抑 制 Ｖ Ｓ Ｍ Ｃ转变 为成骨 细
胞 样 表 型 的过 程 。
钙化 的形成 受多种 因素的共 同调节 ， 该文 从分 子机 制 、 化学
机制 、 代谢因素及炎症 因素探 讨影 响血管 钙化形 成 的因 素 ， 并对 中药 防治血 管钙化方面 的国内外研究进 展进 行综述 。 关键词 ： 血管钙化 ； 动脉粥 样硬化 ； 血 管平 滑肌 细胞 ； 钙磷 过 量； 调节机制 ； 中药 血管钙化 （ ｖ ａ ｓ ｃ ｕ ｌ ａ ｒ ｃ ａ ｌ ｃ ｉ ｆ ｉ ｃ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ） 是动 脉粥样硬 化 （ ａ ｔ ｈ ｅ ｒ — ｏ ｓ ｃ ｌ ｅ ｒ ｏ ｓ ｉ ｓ ， Ａ Ｓ ） 、 高血压 、 糖尿病 血管病变 、 血管损 伤和慢性 肾 病患者 中普遍存在 的 临床病理 表现 … 。它 是一个 由细胞 控 制而且主动可调 的过 程 ， 类似骨发育 和骨 质疏 松的过程 。钙
等转变为成骨细胞样 表型 ， 是与 骨发 育相似 的主 动 的、 高度
可 调控 过程 。这个过程 中细胞 分泌多 种骨形 成 蛋 白如 骨保 护素、 骨形态发 生蛋 白、 骨唾液 酸蛋 白 、 骨钙蛋 白等 ， 在 细胞
Ｇ Ｌ Ａ） ， 具有维生素 Ｋ依赖性 。是 由成 骨细胞 和成牙本 质细 胞特异合成 和分 泌的一种非胶原蛋 白， 是构成骨基质 的成分 之一 。绝大部分骨钙素是 由成骨 细胞 、 类似成骨细胞 的钙 化血管细胞分泌 的 ， 而 正常 Ｖ Ｓ ＭＣ分泌量 极少 ， 骨 钙素是 成
化是血管壁钙磷过量 的异常沉积 ， 可 以造 成斑块破裂和血 栓 形成 ， 形成 Ａ Ｓ ， 其主要 特征是 动 脉壁 弹性 降低和 血流 阻滞 ， 从 而降低 Ａ Ｓ的血管顺应性 Ｊ 。

Traditional Chinese Medicine 中医学, 2023, 12(8), 1985-1990 Published Online August 2023 in Hans. https:///journal/tcm https:///10.12677/tcm.2023.128292近15年动脉粥样硬化的中西医理论机制研究进展朱西阳湖北中医药大学，针灸骨伤学院，湖北 武汉收稿日期：2023年6月16日；录用日期：2023年7月28日；发布日期：2023年8月9日摘要 动脉粥样硬化(arteriosclerosis, AS)是一种发生在大、中血管的慢性特异性炎症，可引发冠心病和脑梗死，其发病率和病死率均居各种疾病前列，是严重危害人类生命健康的疾病之一。

目前关于动脉粥样硬化的机制尚不十分明确，各中西医学者各有其见解。

搜索国内外近十五年关于动脉粥样硬化的中医、西医理论机制以及实验研究进展的期刊论文，为动脉粥样硬化机制的研究提供参考，有利于以后的治疗研究。

关键词动脉粥样硬化，理论机制，中医，西医，研究进展Research Progress of Theoretical Mechanism of Traditional Chinese Medicine and Western Medicine on Atherosclerosis in Recent 15 YearsXiyang ZhuCollege of Acupuncture and Orthopaedics, Hubei University of Chinese Medicine, Wuhan Hubei Received: Jun. 16th , 2023; accepted: Jul. 28th , 2023; published: Aug. 9th , 2023AbstractAtherosclerosis (AS) is a kind of chronic specific inflammation that occurs in large and middle blood vessels, which can cause coronary heart disease and cerebral infarction. Its incidence rate朱西阳and mortality rate are in the forefront of various diseases, and it is one of the diseases that se-riously endanger human life and health. At present, the mechanism of Atherosclerosis is not very clear, and Chinese and Western medicine practitioners have their own views. Search the domestic and foreign journal papers on the theoretical mechanism of Atherosclerosis in traditional Chinese medicine and western medicine and the progress of experimental research in the past 15 years to provide reference for the research on the mechanism of Atherosclerosis, which is conducive to the future treatment research.KeywordsAtherosclerosis, Theoretical Mechanism, Traditional Chinese Medicine, Western Medicine,Research Progress Array Copyright © 2023 by author(s) and Hans Publishers Inc.This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License (CC BY 4.0)./licenses/by/4.0/1. 引言动脉粥样硬化(arteriosclerosis, AS)是一种发生在大、中血管的慢性特异性炎症，是心绞痛、心肌梗死、动脉瘤和外周动脉疾病共同的病理生理基础。

观察桃红四物汤联合常规药物治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病心绞痛的临床疗效近年来，冠状动脉粥样硬化性心脏病已成为心血管疾病的主要死因之一。

针对冠心病引起的心绞痛，临床上普遍采用药物治疗为主，以减轻疼痛和提高患者的生活质量。

然而，传统的西医药物治疗效果有限，副作用明显，因此寻求一种安全有效的辅助治疗方式变得尤为重要。

桃红四物汤，作为一种传统中药，具有活血化瘀、调经养颜的功效，历史悠久，常用于妇科疾病的治疗。

近年来，桃红四物汤在临床上的应用范围扩展到心脏病，特别是冠心病的治疗。

据医学界的报道，桃红四物汤能够改善心肌缺血，减轻心绞痛症状，对冠心病患者的疗效有显著改善。

经过一段时间的观察和治疗，我们发现桃红四物汤联合常规药物治疗心绞痛能够取得较好的临床疗效。

下面将从多个方面具体介绍这种疗效。

首先，桃红四物汤的药理作用有助于改善心血管系统的功能。

桃红四物汤由桃仁、红花、当归和川芎组成，桃仁和红花有活血化瘀的作用，可以促进血液循环，改善心脏供血；当归和川芎具有调节血液流动的功效，有助于舒张冠状动脉，增加心肌供血量。

而常规药物主要通过抗凝血、扩血管等方式改善心脏血液供应，两者结合使用能够相互补充，达到更好的疗效。

其次，桃红四物汤的疗效主要体现在缓解心绞痛症状方面。

心绞痛是冠心病的主要表现之一，患者常常感到胸闷、胸痛等不适。

桃红四物汤具有活血化瘀、镇痛的作用，能够减轻心脏缺血引起的疼痛感，改善心绞痛症状，提高患者的舒适感。

与传统的西医药物相比，桃红四物汤不仅能够缓解疼痛，而且没有明显的副作用，对患者的生活质量和心理健康有着积极的影响。

此外，桃红四物汤联合常规药物治疗心绞痛还能够改善患者的心功能。

心脏是供应全身血液的中枢器官，心脏功能的恢复对于患者的康复至关重要。

桃红四物汤的活血化瘀作用有助于改善心肌缺血、增强心肌的供血能力，进而提高心功能。

在实际的临床观察中，我们发现联合治疗后的患者心功能明显改善，例如心率的下降、心肌收缩力的增加等指标，这些结果说明联合治疗具有一定的效果。

谢诗情等:动脉粥样硬化机制的研究进展85 *综述*动脉粥样硬化机制的研究进展谢诗情，程文静，祝旗,卢德赵浙江中医药大学生命科学学院，浙江杭州310051摘要动脉粥样硬化(atherosclerosis, AS)是心脑血管疾病的主要原因和病理基础，表现为大动脉及中动脉的血管内壁出现脂质沉积，形成分散或成片的粥样斑块，造成动脉管腔狭窄，随后斑块破裂出血，可在狭窄的动脉内形成血栓，导致缺血性脑卒中、心肌梗死发生。

每年约有一千多万人死于A S所引起的心血管病和脑中风，其严重危害人体健康，并且具有年轻化的趋势。

动脉粥样硬化形成与发展与内皮细胞、血管平滑肌细胞、巨噬细胞、血小板和一系列细胞因子和炎性因子有关，其机制非常复杂，涉及脂质代谢紊乱、内皮细胞功能障碍、血栓形成、血管壁慢性炎症、平滑肌细胞增殖和免疫功能障碍等，该文总结了近年来国内外有关动脉粥样硬化机制的研究，并进行综述。

关键词动脉粥样硬化;心脑血管病;内皮细胞;炎症中图分类号R587.1;R541.4 文献标志码 A doi10.11966/j.issn.2095-994X. 2016.02.03.24Research Progressonon the Mechanism of AtherosclerosisXIE Shi-qing,CHENG Wen-jing,ZHU Ji, LU De-zhaoCollege ofLife Science, Zhejiang Chinese Medicine University，Hangzhou,Zhejiang Province,310051 ChinaAbstract Atherosclerosis (AS) is the main cause and pathological basis of cardiovascular and cerebrovascular diseases. Its pathological process is as follow: lipid deposition in the aorta and middle artery wallform into scattered or complete atherosclerotic plaques, result­ing in arterial stenosis, then plaques rupture and bleeding, causing arterial thrombosis in the stenosis, finally leading to ischemic Stroke, myocardial infarction.Every year, more than 10 million people die from AS-induced cardiovascular disease and stroke, which seriously endanger human health. Additionally,age of atherosclerotic onset has been dropping.The formation and development of atherosclerosis is related to endothelial cells, vascular smooth muscle cells, macrophages, platelets and a series of cytokines and in - flammatory factors. Its mechanism is very complex, involving lipid metabolism disorders, endothelial dysfunction, thrombosis, vascular wall chronic inflammation, smooth muscle cell proliferation and immune dysfunction,etc.This paper summarizes recent studies at home and abroad, and then review on atherosclerosis mechanisms.Key words Atherosclerosis; Cardia-cerebrovascular Disease 曰 Endotheliocyte 曰 Inflammation收稿日期：2016-07-20;修回日期：2016-08-20基金项目：国家自然科学基金(81102841);浙江省自然科学基金(LY15H280005);浙江省中医药科技计划（2012ZA066);浙江省大学生科技创新活动计划（2015R410016)作者简介:谢诗情（1996.11-),女，浙江温州人，本科，助教，研究方向：中医药抗动脉粥样硬化。

基金项目：国家自然科学基金青年基金（８１５０２０２４）通信作者：王阿曼，Ｅ ｍａｉｌ：ｗａｎｇａｍａｎｄｌ＠１２６．ｃｏｍ肿瘤免疫治疗相关动脉粥样硬化的研究进展孙睿　王阿曼（大连医科大学附属第一医院肿瘤内科，辽宁大连１１６０００）【摘要】免疫检查点抑制剂（ＩＣＩ）的应用改善了多种肿瘤的疗效和预后，然而其特有的免疫相关不良事件，尤其是心脏毒性受到关注。

最近的研究发现ＩＣＩ治疗可能通过促进动脉慢性炎症导致或加重动脉粥样硬化，机制尚不十分明确。

现重点对ＩＣＩ相关动脉粥样硬化的流行病学、病理生理机制、影像学特征和药物治疗方面的进展进行综述，旨在提高临床医生对该心血管免疫相关不良事件的认识和诊疗水平。

【关键词】动脉粥样硬化，免疫检查点抑制剂，免疫相关不良事件，心血管毒性【ＤＯＩ】１０ １６８０６／ｊ．ｃｎｋｉ．ｉｓｓｎ．１００４ ３９３４ ２０２３ ０７ ００３ＡｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓＡｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈＣａｎｃｅｒＩｍｍｕｎｅＴｈｅｒａｐｙＳＵＮＲｕｉ，ＷＡＮＧＡｍａｎ（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＯｎｃｏｌｏｇｙ，ＴｈｅＦｉｒｓｔＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＤａｌｉａｎＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｄａｌｉａｎ１１６０００，Ｌｉａｏｎｉｎｇ，Ｃｈｉｎａ）【Ａｂｓｔｒａｃｔ】Ｔｈｅａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆｉｍｍｕｎｅｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ（ＩＣＩ）ｈａｓｉｍｐｒｏｖｅｄｔｈｅｅｆｆｉｃａｃｙａｎｄｐｒｏｇｎｏｓｉｓｏｆａｖａｒｉｅｔｙｏｆｔｕｍｏｒｓ．Ｈｏｗｅｖｅｒ，ｉｔｓｕｎｉｑｕｅｉｍｍｕｎｅ ｒｅｌａｔｅｄａｄｖｅｒｓｅｅｖｅｎｔｓ，ｅｓｐｅｃｉａｌｌｙｃａｒｄｉｏｔｏｘｉｃｉｔｙ，ｈａｖｅａｔｔｒａｃｔｅｄｍｕｃｈａｔｔｅｎｔｉｏｎ．ＲｅｃｅｎｔｓｔｕｄｉｅｓｈａｖｅｆｏｕｎｄｔｈａｔＩＣＩｔｈｅｒａｐｙｍａｙｃａｕｓｅｏｒａｇｇｒａｖａｔｅａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓｂｙｐｒｏｍｏｔｉｎｇｃｈｒｏｎｉｃｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎｏｆｔｈｅａｒｔｅｒｉｅｓ，ｂｕｔｔｈｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｉｓｎｏｔｆｕｌｌｙｕｎｄｅｒｓｔｏｏｄ．Ｔｈｉｓｒｅｖｉｅｗｆｏｃｕｓｅｓｏｎｔｈｅｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙ，ｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ，ｉｍａｇｉｎｇｆｅａｔｕｒｅｓａｎｄｄｒｕｇｔｈｅｒａｐｙｏｆＩＣＩ ｒｅｌａｔｅｄａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ，ｗｉｔｈｔｈｅａｉｍｏｆｉｍｐｒｏｖｉｎｇｔｈｅｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｉｎｇａｎｄｄｉａｇｎｏｓｉｓｌｅｖｅｌｏｆｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒｉｍｍｕｎｅ ｒｅｌａｔｅｄａｄｖｅｒｓｅｅｖｅｎｔｓａｍｏｎｇｃｌｉｎｉｃｉａｎｓ．【Ｋｅｙｗｏｒｄｓ】Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ；Ｉｍｍｕｎｅｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ；Ｉｍｍｕｎｅ ｒｅｌａｔｅｄａｄｖｅｒｓｅｅｖｅｎｔｓ；Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒｔｏｘｉｃｉｔｙ 近年来免疫检查点抑制剂（ｉｍｍｕｎｅｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ，ＩＣＩ）的临床应用改善了多种肿瘤的疗效和预后，至今在全球范围内已获批５０多种适应证，有望取代传统抗肿瘤治疗模式，成为最有前景的抗肿瘤治疗手段［１ ４］。

用。
陈文 垲 等 用 软脉 冲剂 （ 制首 乌 、 郁金 、 菖蒲 、 石 决 明子 ） 疗 Ｃ Ｓ０例 ， ６个 月 治 疗后 ， 疗 组头 治 Ａ２ 经 治 痛、 目涩 、 鸣 、 闷痛 、 酸 、 秘 、 腻 的疗 效 优 于 耳 胸 腰 便 苔
改变 。张 映琦 等 将 Ｃ Ｓ ８例 随机 分 为 服 用通 心 络 Ａ９ 胶囊 （ 参 、 蛭 、 蝎 、 人 水 全 土鳖 虫 、 蚣 、 芍 、 片等 ） 蜈 赤 冰 ６ ８例和服用 维生素 Ｅ胶 丸 ３ 两 组 ， ０例 治疗 ８周 后 ， 通 心络组颈内动脉血流速度显著增快， 血流阻力显著降 低 （ ＜０ ０ ， Ｃ、 Ｇ、 Ｄ 升 高 （ Ｐ ． ５） Ｔ Ｔ Ｈ Ｌ Ｐ＜０ ０ Ｐ ＜ ． ５， ００ ）全 血黏 度及 全血 血浆 黏 度降 低 （ ０ ０ ）缺 ．１ ， Ｐ＜ ．５ ，
明显降低 ， 颈动脉斑块体积缩小或消失 ， 总有效率为
８ ％ ，Ｃ Ｄ增 加 、ＭＴ变 薄 、Ｖ增 加 、 Ｖ增 加 、Ｊ减 ８ ＣＡ Ｉ ｓ Ｄ Ｒ 少 、Ｉ Ｐ 增加 ， 床症状及体征消失或改善， Ｉ ｌ 缶 与对照组相
血性卒 中发生 率明显低 于对 照 组。谢梅林 等 将 Ｃ ＳＯ Ａ ２ 例分为服消瘀片组 １ ０例、 山楂精降脂片组 １ Ｏ
口综
述 口
中药治疗 颈动脉 粥样硬 化临床研究进 展
王敏 毓 ， 张 琪（ 导） 指
（ 南京 中 医药大 学 ， 苏 南京 ２０ ２ ） 江 １０ ％
［ 中图分类号］ ２ ９４ ５ ［ Ｒ ５ ．３ 文献标识码 ］ ［ Ｂ 文章编号 ］０４— ８４ ２０ ）５ ３４一 ２ １０ ２ １ （０７ Ｏ — ３ Ｏ 中医药在预防和治疗颈动脉粥样硬化方面有其 独到的作用。单味药物 的究主要运用于动物实验 ， 证实 中药在 调血 脂 ， 氧 化 ， 血 小 板粘 附 聚集及 抗 抗 抗 血栓等方面 阻止 动 脉 粥样 硬 化 进 展 的环 节 发 挥 了作 用 。到 目前 为止 国 内进 行 的多 组 复 方 治疗 颈 动 脉粥 样 硬化 的疗效 观 察 均显 示 复 方 治 疗 颈 动脉 粥 样 硬化 具 有疗效 ， 同时 相对 西 药 治 疗 能 减 少 副反 应 的发 生 ，

年迈体 虚 等 。《素问 ·调 经论 》日 ：“寒 气 积于胸 中而不 调 ，气 、血 、津液 运 行代 谢 发 生 障碍 ，产 生痰 瘀 、热毒
泻 ，不 泻则 温气 去 ，寒 独 留 ，则血凝 泣 ，凝则 脉不 通 。” 等 内生之 邪 ，痹 阻血 脉 ，胶 结凝 在血 脉 ，根 在脏 腑 ，属 于本 虚标
１．１ 中医对 ＡＳ病 因的认 识 历 代 医家认 为 本病 病 实 之候 。ＡＳ是在 寒 邪 内侵 、饮 食失 调 、情 志 失节 、劳
因 主要 为寒 邪 内侵 、饮食 失 调 、情 志 失节 、劳倦 内伤 、 倦 内伤 、年迈 体虚 等 多种病 因作 用下 ．脏 腑功 能失
变 和 钙 化 ，从 而 使 动 脉 壁 增 厚 变 硬 、失 去 弹性 进 而 认 为冠 心病 的中医病 机 主要 为血脉 瘀滞 ，血 瘀贯 穿
管 腔狭 窄 。ＡＳ的发生 发展 与 内皮损 伤 、脂质 积 聚 、纤 冠心病 疾病 的始 终圆。吴伟 教授 提 出动脉粥样 硬 化斑
维 粥 样 斑块 的形成 密切 相关 ，是 心脑 血 管 疾 病 重要 块炎 症浸 润 、温 度升 高 是一 种 阳热 表现 ，热壅 血瘀 是
本病 的病 理基 础 。陈 言在 《三 因极 一病 证方 论》中说 ： 分 为 ３种 证 型 治疗 ：① 肝 肾阴虚 、髓 海 不 足证 ．治 以
“真心 痛 皆脏 气 不 平 ，喜 怒忧 思 所 致 ，属 内所 因 ”，从 益髓通络、滋肾养肝 ，选用杞菊地黄丸加减 ；②脾虚
情 志发病 的角度进 一步 深化 了对本 病病 因的认识 。 痰 聚 、阻 遏 脉 络 证 ，治 以健 脾 化 痰 、除 湿 降 脂 ，选 用
指 出寒 凝气 滞 ，痹 阻胸 阳而成胸 痹 。《金 匮要 略 ·胸 痹 ２ 中医药治 疗

综述针灸防治动脉粥样硬化性心血管疾病研究进展郭斌，岳增辉，易丽贞，刘欣，王彭汉，黄麟荇湖南中医药大学，湖南长沙 410208摘要：动脉粥样硬化性心血管疾病（ASCVD）包括急性冠状动脉综合征、稳定性冠心病、血运重建术后、缺血性心肌病、缺血性脑卒中、短暂性脑缺血发作、外周动脉粥样硬化病等。

目前，针灸在防治ASCVD尤其冠心病方面已受到高度关注，但由于ASCVD的复杂和高风险特点，针灸防治ASCVD亟需建立风险评估体系。

本文从ASCVD西医评价指南、中医辨证分型、针灸防治方面进行梳理，为不同类型或风险层次人群诊疗方案的制定提供参考。

关键词：动脉粥样硬化性心血管疾病；冠心病；针灸；评估体系；诊疗方案；综述中图分类号：R245；R259.414 文献标识码：A 文章编号：1005-5304(2019)05-0137-04DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2019.05.032 开放科学（资源服务）标识码（OSID）：Research Progress in Acupuncture and Moxibustion for Prevention andTreatment of Atherosclerotic Cardiovascular DiseasesGUO Bin, YUE Zenghui, YI Lizhen, LIU Xin, WANG Penghan, HUANG LinxingHunan University of Chinese Medicine, Changsha 410208, ChinaAbstract: Atherosclerotic cardiovascular diseases (ASCVD) include acute coronary syndrome, stable coronary heart disease, revascularization, ischemic cardiomyopathy, ischemic stroke, transient cerebral ischemic attack and peripheral atherosclerosis. Acupuncture and moxibustion has received great attention from scholars in the prevention and treatment of ASCVD, especially coronary heart disease. However, due to the complex and high-risk characteristics of ASCVD, acupuncture and moxibustion for prevention and treatment of ASCVD requires a risk assessment system. This article sorted out the ASCVD Western medicine evaluation guide, TCM syndrome differentiation, and progress in acupuncture and moxibustion for prevention and treatment, and provided references for the development of different types or risk groups.Keywords: atherosclerotic cardiovascular diseases; coronary heart disease; acupuncture and moxibustion; evaluation system; treatment plan; review随着社会节奏加快及生活水平提高，包括饮食结构在内的生活习惯逐渐改变，心血管疾病的发生率逐年增加并有向中青年人群发展的趋势。

2194　环球中医药2023年11月第16卷第11期　Global Traditional Chinese Medicine,October 2023,Vol.16,No.11㊃基础研究㊃基金项目:国家中医心血管病临床医学研究中心专项科研基金(CMC2022010);国家自然科学基金联合基金(U22A20372)作者单位:100029　北京中医药大学研究生院[路爱梅(硕士研究生)㊁李洪峥(博士研究生)㊁彭煜暄(硕士研究生)];中国中医科学院西苑医院心血管科[杨文文(博士研究生)㊁魏玥(硕士研究生)㊁曲华㊁付长庚],老年病科(龙霖梓);北京了未元中医药研究有限公司(吴汉涛)作者简介:路爱梅(1996-),2021级在读硕士研究生㊂研究方向:中西医结合心血管疾病研究㊂E⁃mail:570633591@ 通信作者:付长庚(1981-),博士,主任医师,博士生导师㊂研究方向:中西医结合心血管疾病研究㊂E⁃mail:fucgbs@化栓通脉方调节自噬抗动脉粥样硬化的实验研究路爱梅　李洪峥　杨文文　彭煜暄　魏玥　龙霖梓　曲华　吴汉涛　付长庚【摘要】　目的　观察化栓通脉方对ApoE 基因敲除(ApoE knockdown,ApoE -/-)小鼠动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的影响,并初步研究其抗AS 的作用机制㊂方法　10只8周龄C57BL /6J 小鼠设为对照组,全程普通饲料喂养;43只同品系ApoE -/-小鼠高脂饲料喂养8周制备体内AS 模型㊂造模成功后随机分为4组:模型组㊁辛伐他汀组(3mg /kg)㊁化栓通脉方低剂量组(6g /kg)㊁化栓通脉方高剂量组(12g /kg)㊂第9周各组开始相应药物灌胃,对照组和模型组采用等体积生理盐水,连续灌胃6周后分离血清和主动脉㊂使用全自动生化分析仪测定各组血清总胆固醇(total cholesterol,TC)㊁甘油三酯(triglyceride,TG)㊁低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL⁃C)㊁高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL⁃C)水平;采用ELISA 法检测各组血清白细胞介素(interleukin,IL)⁃1β㊁γ干扰素(interferon gamma,IFN⁃γ)㊁IL⁃10㊁IL⁃4水平;采用油红O 染色评价整体主动脉内膜斑块分布情况并测定相对斑块面积;采用苏木素 伊红染色评价主动脉窦斑块病理形态并量化斑块区域;采用Russell⁃Movat 染色分析小鼠主动脉窦斑块成分;采用免疫荧光染色检测小鼠主动脉窦组织溶酶体关联膜蛋白2(lysosomal associated membrane protein 2,LAMP2)㊁轻链蛋白3A /B(light chain 3A /B,LC3A /B)㊁P62蛋白的表达㊂结果　化栓通脉方调节血脂效果较为突出,可明显降低AS 小鼠血清TC㊁TG㊁LDL⁃C 水平,提升HDL⁃C 水平,高㊁低剂量组都显示出显著的优势(P <0.01);相比于模型组,化栓通脉方高剂量组血清中IL⁃1β㊁IFN⁃γ含量显著降低,斑块面积㊁泡沫细胞和胶原纤维相对占比明显减小,P62蛋白表达显著减少,IL⁃10㊁IL⁃4含量显著升高,LAMP2㊁LC3A /B 表达明显增加,差异具有统计学意义(均P <0.05)㊂结论　化栓通脉方可显著调节AS 小鼠血脂和炎症因子水平,减少主动脉组织中泡沫细胞㊁胶原纤维和斑块的生成,通过促进LC3A /B㊁LAMP2的表达和P62的降解,调控细胞自噬,从而延缓AS 的发生发展㊂【关键词】　化栓通脉方;　动脉粥样硬化;　自噬;　降脂;　抗炎【中图分类号】　R285.5　【文献标识码】　A　doi:10.3969/j.issn.1674⁃1749.2023.11.006Experimental study of Huashuan Tongmai decoction regulating autophagy against atherosclerosis LU Aimei ,LI Hongzheng ,YANG Wenwen ,PENG Yuxuan ,WEI Yue ,LONG Linzi ,QU Hua ,WU Hantao ,FU ChanggengThe Graduate School of Beijing University of Chinese Medicine ,Beijing 100029,China Corresponding author :FU Changgeng ,E⁃mail :fucgbs@【Abstract 】　Objective To observe the effect of Huashuan Tongmai decoction on atherosclerosis环球中医药2023年11月第16卷第11期　Global Traditional Chinese Medicine,October2023,Vol.16,No.112195　(AS)in ApoE knockout(ApoE knockdown,ApoE-/-)mice,and to study the mechanism of action againstAS.Methods　108-week⁃old C57BL/6J mice were treated as the control group and fed general diet,and43ApoE-/-mice were fed high⁃fat diet for8weeks to prepare in vivo AS model.After successful modelmaking,they were randomly divided into4groups:model group,Simvastatin group(3mg/kg),low dosegroup(6g/kg),and high dose group(12g/kg)of Huashuan Tongmai decoction.On week9,the controlgroup and the model group were received volume saline intragastric administration,the other groups weretreated with the drug intragastric administration,and serum and aorta were obtained after continuous gavagefor6weeks.The serum levels of TC,TG,LDL⁃C,and HDL⁃C in each group were determined by an automatic biochemical analyzer;the serum levels of IL⁃1β,IFN⁃γ,IL⁃10,and IL⁃4in each group were measured by ELISA;oil red O staining was used to evaluate the overall aortic endometrial plaque distribution and determine the relative plaque area;the method of Hematoxylin⁃eosin(HE)staining wasused to evaluate the aortic sinus plaque pathological morphology and quantify the plaque areas;the plaque components of the mouse aortic sinus were analyzed by Russell⁃Movat staining;the expression of LAMP2,LC3A/B,and P62in mice aortic sinus tissues were detected by immunofluorescence staining.Results　The effect of Huashuan Tongmai decoction was prominent,which could significantly decreased the levels ofTC,TG,and LDL⁃C,and increased the level of HDL⁃C in AS mice serum,both the high and the low dosegroups showed significant advantages(P<0.01);compared with the model group,the high dose groupwas decreased significantly in the levels of IL⁃1βand IFN⁃γ,plaque area,the relative proportion of foamcells and collagen fibers,and the expression of P62,meanwhile,increased significantly in the levels ofIL⁃10and IL⁃4,and the expression of LAMP2and LC3A/B(P<0.05).Conclusion　Huashuan Tongmai decoction can significantly regulate serum lipids and inflammatory factors in AS mice,reduce the generationof foam cells,collagen fibers and plaques in aortic tissue,and regulate cell autophagy by promoting the expression of LC3A/B and LAMP2and depressing the expression of P62,thus delaying the occurrence and development of AS.【Key words】　Huashuan Tongma decoction;　atherosclerosis;　autophagy;　lipid⁃lowering;　anti⁃inflammation 2019年全球疾病负担研究结果表明,以缺血性心脏病和卒中为主的动脉粥样硬化性心血管疾病(atherosclerotic cardiovascular disease,ASCVD)是引起全球人口死亡的首要原因,占全球总死亡人数的三分之一[1],给人类健康带来严重的危害㊂动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是ASCVD的病理基础,其成因复杂,其中脂质代谢紊乱㊁免疫和炎症贯穿AS病变始终[2⁃3]㊂自噬是在自噬相关基因的调控下,利用溶酶体自我降解后再利用,维持细胞能量稳态的过程[4],对AS的调控更具有双向作用 在AS早期内皮通过自噬调节脂质代谢㊁减轻炎症反应,从而抑制斑块的形成,晚期随着斑块的进展而变得功能失调[5]㊂因此,维持自噬的动态平衡对抑制AS的恶性发展极为重要㊂化栓通脉方是本课题组根据临床治疗AS患者总结而来的经验方,用于改善冠状动脉㊁颈动脉粥样硬化斑块,临床疗效确切㊂但其在动物体内研究中,是否具有抗AS效应及其作用机制有待进一步研究㊂有鉴于此,本实验从血清脂蛋白㊁炎症因子㊁斑块面积等方面,综合评价化栓通脉方调节ApoE 基因敲除(ApoE knockdown,ApoE-/-)小鼠主动脉粥样硬化斑块的效应,并初步探索其是否通过调控自噬而发挥抗AS作用㊂1　材料与方法1.1　实验动物及实验环境8周龄SPF级雄性C57BL/6J小鼠10只,同品系ApoE-/-小鼠43只,体质量(22±2)g,购于斯贝福(北京)生物技术有限公司[许可证号:SCXK(京) 2019⁃0010]㊂小鼠饲养于北京了未元医药科技公司动物实验中心[许可证号:SYXK(京)2022⁃0007],温度(22±2)℃,湿度(50±10)%,明/暗周期(12/12)小时㊂动物自由进食㊁饮水㊂动物伦理审查批号:SYXK2022⁃0007㊂高脂饲料(83.5%基础饲料+15%猪油+1.5%胆固醇)和普通饲料均由北京华阜康生物科技有限公司[许可证号:SCXK(京)2019⁃0008]提供㊂实验过程中,动物灌胃致死3只,剔除各组离群2196　环球中医药2023年11月第16卷第11期　Global Traditional Chinese Medicine,October2023,Vol.16,No.11值,各组统计数量均为7只㊂1.2　实验药物辛伐他汀片(杭州默沙东制药有限公司,规格:20mg/片,批号:U04517)㊂化栓通脉方药物组成及剂量:金银花15g㊁山楂15g㊁鸡血藤15g㊁制何首乌15g㊁生白芍7.5g㊁生甘草4g㊂中药饮片皆购于九州通医药集团股份有限公司,经北京中医药大学吴嘉瑞教授鉴定,均符合2020版‘中国药典“要求㊂辛伐他汀片用生理盐水配置成混悬液,浓度为0.3mg/mL㊂化栓通脉方各药物按组方比例,称取715g,用2000mL蒸馏水煎煮2次,然后浓缩至715mL的中药混悬液,每毫升含生药量1g,浓度为1g/mL,4℃保存,备用㊂用药剂量参考公式:高剂量给药剂量=成人(70kg)临床常用量×12(按人 小鼠体表面积折算等效剂量系数)㊂以成人(70kg)每日金银花15g㊁山楂15g㊁鸡血藤15g㊁制何首乌15g㊁生白芍7.5g㊁生甘草4g,共71.5g,生药计算高剂量组小鼠每日等效剂量为12g/kg,高㊁低剂量组给药剂量按2∶1设置,低剂量组小鼠每日给药剂量为6g/kg㊂辛伐他汀片成人给药剂量为每日20mg,换算获得辛伐他汀组小鼠每日灌胃剂量为3mg/kg㊂1.3　主要试剂与仪器白细胞介素(interleukin,IL)⁃1β㊁γ干扰素(interferon gamma,IFN⁃γ)㊁IL⁃10㊁IL⁃4ELISA试剂盒(武汉赛维尔生物科技有限公司,批号分别为EK201BHS⁃96㊁EK280/3⁃96㊁EK210/4⁃96㊁EK204HS⁃96);油红O染色试剂盒(北京索莱宝科技有限公司,批号G1016);苏木素 伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色试剂盒(北京索莱宝科技有限公司,批号G1120);Russell改良Movat五色染色试剂盒(北京索莱宝科技有限公司,批号G3701);抗⁃SQSTM1/ P62兔pAb㊁抗⁃LAMP2兔pAb㊁抗LC⁃3A/B兔pAb (武汉赛维尔生物科技有限公司,批号分别为GB11239⁃1㊁GB11330㊁GB11124)㊂台式高速冷冻离心机(大龙,型号D3024R),酶标检测仪(美国BioTeK公司,型号Epoch),全自动生化分析仪(深圳雷杜生命科技,型号分别为Chemray240㊁420㊁800),荧光显微镜(宁波舜宇仪器有限公司,型号2204926),光学显微镜(DMi1,型号Leica),组织切片机(浙江省金华市科迪仪器公司,型号KD⁃ST5500)㊂1.4　动物分组㊁给药及取材适应性喂养1周,10只C57BL/6J小鼠作为对照组,全程采用普通维持饲料喂养㊂43只ApoE⁃/⁃小鼠采用高脂饲料喂养8周后,随机抽取3只取材,主动脉窦病理切片HE染色显示:主动脉管腔狭窄,内膜明显增厚,有明显斑块形成,提示早期AS体内模型建立成功㊂造模后的ApoE-/-小鼠随机分为4组:模型组㊁辛伐他汀组(3mg/kg)㊁化栓通脉方低剂量组(6g/kg)㊁化栓通脉方高剂量组(12g/kg),每组10只,继续高脂饲料喂养,用药组同时予以相应药物灌胃,对照组和模型组予等体积生理盐水灌胃以保证组间一致性,每日灌胃1次,连续6周㊂最后一次灌胃后,禁食㊁不禁水12小时㊂用3%戊巴比妥钠腹腔麻醉,球后静脉(眼眶静脉丛)取血,室温静置2小时,4℃4000r/min离心10分钟,分离上层血清,-80℃下冻存㊂取血后打开小鼠胸腔及腹腔,经PBS充分灌流,整体分离自主动脉根部至髂总动脉分叉处主动脉,并剥离周围多余结缔组织和脂肪组织,投入液氮或组织固定液中保存,用于后续相关实验㊂1.5　指标检测1.5.1　酶标法测定小鼠血脂水平　每组取7只小鼠,使用全自动生化分析仪测定各组小鼠血清中总胆固醇(total cholesterol,TC)㊁甘油三酯(triglyceride,TG)㊁低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL⁃C)㊁高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL⁃C)的水平㊂1.5.2　ELISA法检测血清炎症因子水平　每组取7只小鼠,根据ELISA试剂盒说明书操作,检测小鼠血清中IL⁃1β㊁IFN⁃γ㊁IL⁃10㊁IL⁃4的水平㊂1.5.3　大体油红O染色测定整体主动脉相对斑块面积　每组取3只小鼠,在光学显微镜下将小鼠主动脉纵剖面固定,水洗,油红O染色后将血管平铺于黑色橡胶板,迅速拍照,利用Image J软件分析以主动脉相对斑块面积来评价主动脉斑块严重程度㊂相对斑块面积(%)=主动脉斑块面积/血管内膜总面积×100%㊂1.5.4　HE染色评价主动脉窦病理形态　每组取3只小鼠,4%多聚甲醛固定主动脉于4℃冰箱24小时,梯度脱水后石蜡包埋,并连续切片(5μm),HE 常规染色后封片拍照,于光学显微镜下检测AS小鼠主动脉窦病理形态的变化,测量并计算斑块面积占血管内膜面积百分比㊂相对斑块面积(%)=斑块环球中医药2023年11月第16卷第11期　Global Traditional Chinese Medicine,October2023,Vol.16,No.112197面积/内膜总面积×100%㊂1.5.5　Russell⁃Movat染色评价主动脉窦斑块成分　每组取3只小鼠,主动脉石蜡切片处理,切片厚度5μm,连续切片至观察到3个主动脉瓣完全融合开始留取10张切片,切片脱蜡至水,经五色法染液进行染色,脱水封片,在光学显微镜下观察主动脉窦斑块各成分变化,染色后的细胞核和弹性纤维呈黑色,胶原纤维呈红色,泡沫细胞呈淡紫色,蛋白聚糖呈蓝色㊂测量并计算斑块内泡沫细胞及胶原纤维的占比㊂1.5.6　免疫荧光法评价主动脉窦溶酶体关联膜蛋白2(lysosomal associated membrane protein2, LAMP2)㊁轻链蛋白3A/B(light chain3A/B,LC3A/ B)㊁P62蛋白的表达　每组取3只小鼠,主动脉窦石蜡切片,常规脱蜡㊁水化㊁抗原修复后,血清室温封闭30分钟,滴加一抗4℃孵育过夜,PBS浸洗3次,次日滴加荧光二抗25℃避光孵育1小时,PBS浸洗3次,滴加DAPI避光孵育5分钟复染细胞核,PBS 浸洗4次,最后用含抗荧光的淬灭剂封片㊂使用荧光显微镜观察主动脉窦的LAMP2㊁LC3A/B㊁P62蛋白荧光表达,并采集图像,利用Image J分析处理数据㊂1.6　统计学方法实验所得数据为计量资料,使用SPSS24.0统计软件进行处理㊂数据经检验均符合正态分布且方差齐,以均数±标准差(x±s)表示㊂多组间比较采用单因素方差分析,两两比较用LSD法,P<0.05表示差异具有统计学意义㊂2　结果2.1　化栓通脉方对小鼠血脂水平的影响相比于对照组,模型组小鼠血清中TC㊁TG㊁LDL⁃C水平明显升高,HDL⁃C水平明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05);相比于模型组,辛伐他汀组和化栓通脉方低㊁高剂量组血清中TC㊁TG㊁LDL⁃C水平均显著降低,HDL⁃C水平均显著升高,差异具有统计学意义(P<0.01)㊂见表1㊂2.2　化栓通脉方对小鼠血清炎症因子水平的影响与对照组相比,模型组血清中IL⁃1β㊁IFN⁃γ含量显著上升,差异具有统计学意义(P<0.01), IL⁃10㊁IL⁃4含量也有所升高,但无统计学意义(P>0.05);与模型组相比,化栓通脉方高剂量组血清中IL⁃1β㊁IFN⁃γ含量显著降低,IL⁃10㊁IL⁃4含量显著升高,差异具有统计学意义(P<0.01);化栓通脉方低剂量组较模型组IFN⁃γ含量降低,IL⁃4含量升高,差异有统计学意义(P<0.01),IL⁃1β含量降低, IL⁃10含量升高,差异无统计学意义(P>0.05)㊂见表2㊂表1　各组AS模型小鼠血脂水平比较(x±s,mmol/L)组别鼠只TC TG LDL⁃C HDL⁃C对照组7 2.75±0.160.66±0.030.36±0.03 1.99±0.10模型组724.74±0.96b 4.17±0.34b15.28±1.50b 1.43±0.30a 辛伐他汀组717.88±2.90bc 2.21±1.07bc11.13±1.66bc 2.96±0.82bc 化栓通脉方低剂量组718.74±2.23bc 2.06±0.45bc11.82±2.23bc 2.83±0.31bc 化栓通脉方高剂量组718.21±1.37bc 1.44±0.35ac10.17±2.16bc 3.39±0.52bc 注:与对照组相比,a P<0.05,b P<0.01;与模型组相比,c P<0.01㊂表2　各组AS模型小鼠血清炎症因子比较(x±s,pg/mL)组别鼠只IL⁃1βIFN⁃γIL⁃10IL⁃4对照组70.61±0.3153.44±21.3435.66±18.26 1.30±0.31模型组7 5.97±1.65a214.70±87.64a72.92±28.44 2.89±0.85辛伐他汀组7 3.93±2.06ab129.80±95.78b90.36±28.06a7.64±5.92化栓通脉方低剂量组7 4.79±2.05a61.71±21.39b93.33±33.28a11.81±4.02ab 化栓通脉方高剂量组7 2.03±0.74b61.89±23.34b140.80±59.54ab22.24±7.69ab 注:与对照组相比,a P<0.05;与模型组相比,b P<0.01㊂2198　环球中医药2023年11月第16卷第11期　Global Traditional Chinese Medicine,October2023,Vol.16,No.112.3　化栓通脉方对小鼠整体主动脉斑块面积的影响主动脉大体油红O染色显示,对照组小鼠主动脉血管壁大体光滑㊁平整,呈半透明状,见有少量点状斑块散在分布;高脂饲料喂养14周,模型组小鼠主动脉管腔病理性扩增,管壁存在大量的红染的点片状脂质斑块,且多分布在主动脉弓及血管分叉处㊂相比对照组,模型组主动脉窦部斑块面积明显增加(P<0.01);相比模型组,化栓通脉方低㊁高剂量组小鼠主动脉窦部斑块面积均明显减少(P<0.01)㊂见图1及表3㊂2.4　化栓通脉方对小鼠主动脉窦病理形态的影响主动脉窦HE染色显示,对照组小鼠主动脉内膜光滑完整,内膜下无明显泡沫细胞和脂质沉积形成,中层平滑肌细胞排列整齐;模型组小鼠主动脉内膜增厚明显,内膜下可见大量泡沫细胞和脂质沉积,中层平滑肌细胞增殖且排列紊乱;与模型组相比,化栓通脉方高剂量干预后,小鼠主动脉窦内膜厚度㊁泡沫细胞数量及脂质沉积明显减轻(P<0.01)㊂见图2,表4㊂表3　各组小鼠AS模型小鼠斑块面积占比(大体油红O染色)(x±s)组别鼠只主动脉相对斑块面积占比(%)对照组3 1.98±0.98模型组312.55±4.05a辛伐他汀组3 2.65±0.99b化栓通脉方低剂量组3 6.46±3.31b化栓通脉方高剂量组3 2.75±0.29b注:与对照组相比,a P<0.05;与模型组相比,b P<0.01㊂注:A对照组;B模型组;C辛伐他汀组;D化栓通脉方低剂量组;E化栓通脉方高剂量组㊂图1　各组AS模型小鼠主动脉大体油红O染色结果注:A对照组;B模型组;C辛伐他汀组;D化栓通脉方低剂量组;E化栓通脉方高剂量组㊂图2　各组AS模型小鼠主动脉窦HE染色结果(×100)环球中医药2023年11月第16卷第11期　Global Traditional Chinese Medicine,October2023,Vol.16,No.112199表4　各组小鼠AS模型小鼠斑块面积及成分占比(x±s)组别鼠只主动脉窦相对斑块占比(HE染色,%)泡沫细胞占比(Movat染色,%)胶原纤维占比(Movat染色,%)对照组3000模型组351.00±4.00a17.00±2.00a18.33±2.08a 辛伐他汀组336.80±1.76ab12.00±2.94ab9.75±3.50ab 化栓通脉方低剂量组332.40±7.96ab13.80±3.56a11.33±0.58ab 化栓通脉方高剂量组325.67±10.40ab11.00±4.00ab8.33±1.53ab 注:与对照组相比,a P<0.05;与模型组相比,b P<0.01㊂ 主动脉窦Russell⁃Movat染色结果显示,对照组内膜未见明显斑块,内皮细胞结构完整,弹力纤维弯曲连续,富有弹性,中膜血管平滑肌排列整齐,周围分布少量胶原纤维和网状纤维结构;模型组可见内膜斑块显著突向管腔,斑块内部有大量泡沫细胞和脂质堆积,斑块表面有大量炎症细胞浸润黏附,平滑肌细胞大量增生,排列紊乱,血管中膜失去连续性,弹力纤维绷直㊁失去弹性,胶原纤维㊁网状纤维排布错乱㊂化栓通脉方干预后主动脉窦Movat染色显示:斑块炎症细胞浸润黏附有所减轻,脂质堆积有所减少,胶原纤维结构稳定,覆盖包裹在脂质表面,血管中膜连续性较模型组有所改善(P<0.05),表明化栓通脉方促进斑块稳定,减少AS的发展㊂见图3,表4㊂2.5　化栓通脉方对小鼠主动脉窦自噬相关蛋白表达的影响免疫荧光结果显示,与对照组相比,模型组小鼠主动脉中LAMP2㊁LC3A/B㊁P62的表达升高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,化栓通脉方高剂量干预后,AS模型小鼠主动脉窦中LAMP2㊁LC3A/B表达升高(P<0.01),P62的表达降低(P>0.05)㊂见图4,表5㊂3　讨论在AS的中医药防治中,瘀与毒是导致易损斑块形成及破裂的主要病理因素㊂稳定斑块和血栓属于 内阻瘀血”,各种炎症因子属于 内生毒邪”,瘀为常,毒为变,由常生变,因瘀致毒,毒瘀互结,AS 易损斑块在瘀血基础上 毒邪”致病,治当以解毒化瘀[6⁃9]㊂化栓通脉方以金银花为君,解毒清热,直击病本;山楂行气散瘀化浊,鸡血藤祛瘀养血通络,制何首乌㊁白芍养血益精,敛阴止痛,共为臣药;甘草清热解毒,调和诸药㊂上述药物合用,共奏解毒化瘀㊁养血通络之效㊂注:A对照组;B模型组;C辛伐他汀组;D化栓通脉方低剂量组;E化栓通脉方高剂量组㊂图3　各组AS模型小鼠主动脉窦Movat染色结果(×100)表5　各组AS模型小鼠主动脉窦自噬蛋白表达情况比较(x±s)组别鼠只P62LC3A/B LAMP2对照组3 1.98±0.987.04±0.2938.23±8.04模型组312.55±4.05b10.60±2.7866.13±16.30a 辛伐他汀组3 2.65±0.99ac14.27±3.93b108.60±15.36bc 化栓通脉方低剂量组3 6.46±3.31b8.66±0.6573.54±8.85b 化栓通脉方高剂量组3 2.75±0.29b17.05±2.34bc109.80±8.34bc 注:与对照组相比,a P<0.05,b P<0.01;与模型组相比,c P<0.01㊂2200　环球中医药2023年11月第16卷第11期　Global Traditional Chinese Medicine,October 2023,Vol.16,No.11注:A 对照组;B 模型组;C 辛伐他汀组;D 化栓通脉方低剂量组;E 化栓通脉方高剂量组㊂图4　各组AS 模型小鼠主动脉窦免疫荧光染色结果(×100) 现代药理学研究指出,化栓通脉方通过多成分㊁多靶点㊁多途径,发挥抗AS 作用 金银花㊁山楂㊁鸡血藤㊁白芍都具有抗炎㊁抗氧化㊁抗血小板聚集的作用[10⁃12],山楂还可调节血脂代谢及改善血管内皮功能,鸡血藤可调节造血系统[13⁃14],制何首乌可补血㊁抗衰老㊁降血脂[15],白芍可通过调节免疫㊁抑制细胞凋亡㊁促进胆固醇流出等途径抗AS [16⁃17]㊂由此可知,化栓通脉方中药物成分可能通过抑制斑块内炎症反应㊁改善脂质代谢和血流动力学,从而降低斑块恶化破裂风险㊂故本研究旨在通过探讨化栓通脉方对ApoE -/-小鼠抗AS 的作用及其机制,为其临床应用提供理论依据和数据支撑㊂3.1　化栓通脉方通过降脂㊁抗炎实现抗AS 作用AS 是一种慢性炎症性血管疾病,脂质代谢紊乱与炎症因子升高会导致血管内皮功能受损,引起血管内壁脂质堆积及斑块和血栓的形成,与AS 的生成与发展密切相关[3,18],促炎和抗炎机制的平衡决定着AS 的结局,是病情转化和恶化的关键[19]㊂有鉴于此,调节血脂代谢㊁抑制炎症反应在AS 的治疗中占有重要地位㊂本研究表明,化栓通脉方可调节血清脂蛋白㊁炎症因子水平㊂研究结果指出,相比于模型组,高㊁低剂量化栓通脉方组血清中TC㊁TG㊁LDL⁃C 水平均显著下降,HDL⁃C 水平显著上升,促炎因子IL⁃1β㊁IFN⁃γ含量降低,抑炎因子IL⁃10㊁IL⁃4含量升高,斑块面积㊁泡沫细胞和胶原纤维相对占比明显减小,且随化栓通脉方浓度升高而存在一定差异㊂由此表明,化栓通脉方可能通过调节血脂代谢㊁降低血清炎症因子水平,减少主动脉斑块面积,实现抗AS 作用㊂3.2　化栓通脉方抗AS 作用可能与诱导细胞自噬有关自噬是细胞自身的分解代谢机制,对AS 具有重要影响,其水平主要通过自噬标志物(自噬体和自噬溶酶体)和自噬蛋白标志物的水平进行评价[20⁃21]㊂自噬体作为自噬过程的标志性结构,是检测自噬的唯一金标准,而LC3是最可靠的自噬体标志物,其表达水平与自噬体数量呈正相关;LAMP2是溶酶体标志物,其表达水平与自噬溶酶体亦呈正相关;P62是自噬的特异性底物,其表达水平与自噬潮呈负相关㊂本研究免疫荧光结果显示,模型组较对照组具有高水平的LC3A /B㊁LAMP2共定位,表明自噬的募集是对新兴斑块的应激反应㊂化栓通脉方组较模型组LC3A /B㊁LAMP2的表达上调㊁P62的表达下调,且高剂量组比低剂量组自噬蛋白表达更为显著,表明化栓通脉方可增加自噬通量,升高自噬水平,起到抗AS 作用,并与剂量呈相关关系㊂综上所述,化栓通脉方可能通过诱导细胞自环球中医药2023年11月第16卷第11期　Global Traditional Chinese Medicine,October2023,Vol.16,No.112201噬,调节脂质代谢㊁减弱炎症反应,从而抑制斑块形成与进展,达到防治AS的作用,具体机制通路有待进一步实验验证㊂参考文献[1]　Roth G A,Mensah G A,Johnson C O,et al.Global burden ofcardiovascular diseases and risk factors,1990⁃2019:update fromthe GBD2019study[J].J Am Coll Cardiol,2020,76(25):2982⁃3021.[2]　Wolf D,Ley K.Immunity and Inflammation inAtherosclerosis[J].Circ Res,2019,124(2):315⁃327.[3]　LU Y,CUI X,ZHANG L,et al.The Functional Role ofLipoproteins in Atherosclerosis:Novel Directions for Diagnosisand TargetingTherapy[J].Aging Dis,2022,13(2):491⁃520.[4]　Kim K H,Lee M S.Autophagy⁃a key player in cellular 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1中西医结合心血管病电子杂志Cardiovascular Disease Electronic Journal of integratedtraditional Chinese and Western Medicine2019 年 4月 B 第 7 卷第 11 期Apr. B 2019 V ol. 7 No. 11·论 著·动脉粥样硬化中药治疗机制的研究进展张 强，罗 毅（苏州市中西医结合医院脑病科，江苏 苏州 215101）【摘要】动脉粥样硬化的发生发展过程复杂，受到很多因素的影响，严重威胁着人类生命健康。

它是心脑血管不良事件发生的重要原因。

近些年来，随着人们生活水平的不断提高以及不良生活方式的出现，其发病率逐年升高。

越来越多的研究表明，传统中药单体或复方对动脉粥样硬化的治疗有着确切的临床效果。

本文将从调节脂质代谢、抗炎抗氧化等几个方面，阐述其抗动脉粥样硬化的作用机制。

【关键词】中药；血脂；动脉粥样硬化【中图分类号】R541.4 【文献标识码】A 【文章编号】ISSN.2095-6681.2019.11.1.03Advances in Research on Therapeutic Mechanisms of TraditionalChinese Medicine for AtherosclerosisZHANG Qiang,LUO Yi(Department of Encephalopathy,Suzhou Integrated Traditional Chinese and Western MedicineHospital,Jiangsu Suzhou 215101,China)【Abstract 】The occurrence of atherosclerosis is complicated, and it is affected by many factors, which seriously threatens human health. It is an important cause of adverse cardiovascular and cerebrovascular events. In recent few years, with the continuous improvement of people's living standard and the appearance of unhealthy lifestyles, the incidence rate is increasing year by year. More and more studies show that the traditional Chinese medicine included monomer and compound has a definite clinical effect on the treatment of atherosclerosis. In this article, we will expound the mechanism of anti atherosclerosis from the aspects of regulating lipid metabolism, anti-inflammatory and anti-oxidation.【Key words 】Traditional Chinese medicine;Blood lipid;Atherosclerosis动脉粥样硬化（atherosclerosis ，AS ）是一种进展缓慢的心血管系统的常见疾病。

《身痛逐瘀汤治疗下肢动脉硬化闭塞症（ASO Fontaine Ⅰ-Ⅲ期）血脉瘀阻证的临床疗效观察》一、引言下肢动脉硬化闭塞症（ASO）是一种常见的周围血管疾病，常因动脉内膜下脂质沉积和血管壁增厚导致血管狭窄或闭塞，影响下肢血液循环。

根据Fontaine分期，该病可分为Ⅰ-Ⅲ期，其中血脉瘀阻证是较为常见的证候之一。

身痛逐瘀汤作为一种传统的中药方剂，具有活血化瘀、通络止痛的功效，对血脉瘀阻证的治疗具有显著效果。

本文旨在观察身痛逐瘀汤治疗下肢动脉硬化闭塞症（ASO Fontaine Ⅰ-Ⅲ期）血脉瘀阻证的临床疗效。

二、研究方法本研究采用随机、对照、双盲的设计方法，选取符合ASO Fontaine Ⅰ-Ⅲ期且诊断为血脉瘀阻证的患者作为研究对象。

患者被随机分为治疗组和对照组，治疗组采用身痛逐瘀汤治疗，对照组采用常规西药治疗。

观察指标包括患者疼痛程度、下肢血液循环改善情况、生活质量等。

三、身痛逐瘀汤的药理作用身痛逐瘀汤主要由川芎、桃仁、红花等中药组成，具有活血化瘀、通络止痛的功效。

该方剂能够改善微循环，降低血液粘稠度，促进血液循环，从而缓解下肢动脉硬化闭塞症患者的症状。

此外，该方剂还能调节免疫功能，提高机体的抗病能力。

四、临床疗效观察1. 疼痛程度：治疗组患者在服用身痛逐瘀汤后，疼痛程度明显减轻，且疼痛缓解速度较对照组快。

2. 下肢血液循环改善情况：治疗组患者下肢血液循环改善情况较对照组明显，表现为皮肤温度升高、肤色改善、足背动脉搏动增强等。

3. 生活质量：治疗组患者的生活质量较对照组有明显提高，表现为活动能力增强、睡眠质量改善、精神状态好转等。

五、结论本研究结果表明，身痛逐瘀汤治疗下肢动脉硬化闭塞症（ASO Fontaine Ⅰ-Ⅲ期）血脉瘀阻证具有显著的临床疗效。

该方剂能够明显减轻患者疼痛程度，改善下肢血液循环，提高患者生活质量。

因此，身痛逐瘀汤可作为治疗下肢动脉硬化闭塞症血脉瘀阻证的有效方法之一。

六、讨论与展望尽管身痛逐瘀汤在治疗下肢动脉硬化闭塞症血脉瘀阻证方面取得了显著效果，但仍需进一步探讨其作用机制及优化治疗方案。

SHI Le，WANG Cong-na（Department of Cardiology, Tianjin Beichen Traditional Chinese Medicine Hospital, Tianjin 300400 China）
Abstract：Currently, drugs are commonly used in the clinical treatment of atherosclerosis (AS). Despite that western medi⁃ cine works quickly, it can cause side effects such as liver and kidney function damage, leading to the elevation of transami⁃ nase and rhabdomyolysis. Basing on the principle of syndrome differentiation, Traditional Chinese Medicine (TCM)therapy⁃ considers the overall structure from a macroscopic perspective. Also, the multiple mechanisms of TCM can provide more possible waysin the treatment of AS, which is a complex disease caused by various reasons. This study mainly reviews the TCM treatment of AS from the aspects of syndrome differentiation, TCM decoction and injection, aiming to provide more theoretical basis for clinical treatment. Keywords：Atherosclerosis; TCM treatment; Research progress

针灸治疗动脉粥样硬化的临床研究进展【摘要】目前我国动脉粥样硬化患病率不断上升，严重影响着人民的健康生活。

长期以来，针灸对该病具有着良好的治疗效果，然其治疗方法各异，在一定程度上影响其临床应用。

针灸疗法，以其简便操作、毒副作用少、疗效确切而独具优势。

因此，针灸治疗动脉粥样硬化，对临床防治心脑血管疾病的发生和发展都有着重要的意义。

【关键词】动脉粥样硬化性；针灸；治疗；展望【中图分类号】R246.1 【文献标识码】B 【文章编号】1003-5028（2015）6-0462-02动脉粥样硬化(atherosclerosis, AS)是以血管平滑肌细胞增生和脂质、坏死组织的聚集为特征的一种退行性病变。

动脉粥样硬化是多因素共同作用的结果，严重危害着人类的健康，是心脑血管病的主要病理基础[1]。

动脉粥样硬化中医中归属“痰凝”、“血瘀”的范畴，是本虚标实之病。

针灸对AS的治疗，可以发挥其调节机能和多途径、多靶点干预的优势，调节血脂、抗氧化、抗血小板黏附聚集及抑制血管平滑肌细胞(SMC)增殖等作用。

因而针灸治疗动脉粥样硬化，疗效确切且临床应用广泛，前景良好[2]。

现综述如下：1 针灸治疗1.1 单纯针刺治疗针刺治疗具有调和脏腑、通畅气血，协调阴阳和抗御病邪的作用，因而可通过腧穴的协同作用调节脂质及脂蛋白的代谢，使其阴阳归于平衡、脏腑功能趋于调和、脂质代谢恢复平衡[3]。

王占奎等[4]通过观察针灸对动脉粥样硬化患者颈动脉形态学和血流参数的变化，发现针灸可消退颈动脉粥样硬化斑块，减小颈动脉粥样硬化斑块的厚度和面积。

张静等[5]观察调神通络针刺法对降低血脂的作用，结果发现此法对降血脂、改善AS有着极大的作用。

刘全让等[6]实验证实，针刺对脑动脉粥样硬化患者具有双向调节作用，可增加脑血管血流速度和缓解血管痉挛。

侯亚菊[7]观察针灸治疗78例颈动脉粥样硬化患者的临床疗效，结果发现治疗后的临床症状观察组优于对照组(P<0.01)；而两组患者的血流变及血脂也均有改善。

[收稿日期]㊀2021-01-20[修回日期]㊀2021-06-21[基金项目]㊀国家自然科学基金项目(81670396);234学科攀峰计划项目(2019YPT001)[作者简介]㊀史张,博士研究生,研究方向为心脑血管动脉粥样硬化疾病的影像诊断,E-mail 为shizhang2080007@㊂通信作者刘崎,教授,博士研究生导师,研究方向为全身无创血管成像,E-mail 为liuqimd@㊂㊃文献综述㊃[文章编号]㊀1007-3949(2021)29-10-0908-05多功能纳米粒在动脉粥样硬化性疾病诊治中的研究进展史张,刘崎,陆建平(海军军医大学第一附属医院,上海市200433)[关键词]㊀纳米粒;㊀动脉粥样硬化;㊀诊断;㊀治疗[摘㊀要]㊀心脑血管疾病在全球范围内具有很高的死亡率,其发病多数由于动脉粥样硬化斑块形成㊂纳米材料可以用于治疗动脉粥样硬化性疾病㊂通过纳米颗粒的合理设计,基于纳米的输送系统可以克服生物障碍,并提高药物的治疗指数,将药物更有效地输送到病变部位㊂此外,影像技术的进步使纳米粒的使用得到了拓展,实现可同时进行成像和治疗㊂本文对多功能纳米粒在动脉粥样硬化性疾病中的诊断及治疗研究进行综述㊂[中图分类号]㊀R5[文献标识码]㊀AStudy advances in multi-functional nanoparticles targeting diagnosis and treatment of atherosclerotic diseaseSHI Zhang,LIU Qi,LU Jianping(The First Affiliated Hospital of Naval Medical University ,Shanghai 200433,China )[KEY WORDS ]㊀nanoparticles;㊀atherosclerosis;㊀diagnosis;㊀treatment[ABSTRACT ]㊀Atherosclerosis,leading to formation of plaque on the artery vessel wall,underpins many cerebral and cardiovascular diseases with high mortality rates globally.㊀Nanoparticles promise to advance strategies to treat atheroscle-rotic disease.㊀Through the rational design of nanoparticles,nano-based delivery systems enable more efficient delivery of a drug to its therapeutic target or even directly to the diseased site,overcoming biological barriers and enhancing a drug s therapeutic index.㊀In addition,advances in imaging techniques have led to the development of theranostic nanoparticles that may simultaneously act as carriers of both imaging and therapeutic payloads.㊀The following is a summary of nanoparticle di-agnosis for atherosclerosis and an overview of recent major advances in the targeted treatment of atherosclerotic disease.㊀㊀动脉粥样硬化(atherosclerosis,As)是由于脂蛋白㊁免疫细胞㊁促炎因子以及细胞外基质成分降解坏死后,其产物在动脉壁下沉积而导致的一种动脉壁慢性炎症反应,是导致心脑血管疾病发生的主要原因,其标志性特征是As 斑块的形成[1]㊂As 斑块破裂可造成动脉阻塞或局部血栓形成,从而导致缺血性心脏病㊁脑卒中㊁外周动脉闭塞和As 性肾脏疾病等㊂由于As 发生和发展的过程较长,且早期患者多无临床症状,因此能够无创且准确地分类和预测高危斑块尤为重要㊂As 疾病的诊断方法主要分为有创和无创检查,其中以无创的超声㊁计算机断层扫描(computed tomography,CT)㊁磁共振成像(magnetic resonance ima-ging,MRI)和正电子发射断层扫描(positron emissioncomputed tomography,PET)为临床最常用的诊断技术㊂尽管生物纳米材料诊断和治疗As 还未进入临床应用阶段[2],但纳米粒能够对As 斑块同时兼具成像和治疗作用,并通过载药及靶向技术可避免传统抗炎药的不良反应并提高药物利用率㊂多功能纳米材料有望成为治疗As 的新策略㊂1㊀纳米材料的特征生物纳米材料可以通过特异性递送方式来促进As 斑块的分子成像或分子治疗㊂它是指部分或全部由生物分子组成的材料,如脂质㊁糖㊁核酸和蛋白质,尺寸在1~100nm 之间㊂近年来,制造生物纳米材料的技术日趋成熟,研究人员可精确控制生物分子的类型㊁数量及其在3D空间中的位置,从而为生物纳米材料成为临床诊断和疾病治疗的载体奠定基础㊂生物纳米材料可用于诊治As的原因有三:首先,生物纳米材料因具有独特的物理化学特性可以进行体内成像㊂Wei等[3]构建了一种组织因子靶向磁纳米探针,通过体内磁共振成像对斑块进行特异性检测,提高了As斑块的诊断技术,为As的治疗提供分子水平的指导;其次,生物纳米材料可以在紧凑的纳米结构中包被高剂量的治疗药物,并促进其向斑块内递送,达到靶向治疗㊂Meneghini等[4]将多烯紫杉醇装入脂质纳米粒中,通过静脉注射入患有As的家兔体内,药物包裹的纳米粒可靶向到As斑块,从而减少斑块体积㊂最后,生物纳米材料可以链接各种类型的生物分子,以特异性地靶向到斑块中的不同类型组织或细胞㊂Wang等[5]将抗体与氧化铁纳米粒相连接,并注射到ApoE-/-小鼠中,以靶向平滑肌细胞表达的受体蛋白,从而对斑块进行精准成像㊂2㊀纳米材料的类型和作用2.1㊀类型㊀㊀目前,纳米材料在As的诊断和治疗的双模态应用上都表现出较好的前景,其中较常见的材料有磁性纳米粒㊁碳基纳米材料㊁二氧化硅纳米材料㊁金属纳米粒和聚合物纳米粒㊂近来发光性和光反应的纳米材料,以其低成本和高效率的诊治一体化特点而得到广泛关注(表1),如具有高等离子体共振(high plasmon resonance,HPR)的金属纳米材料㊁有机和聚合类纳米材料等[6]㊂碳基纳米材料具有独特的结构尺寸和物理化学特性,易于功能化,生物相容性较高,并且具有较广阈值的单光子特性㊂碳纳米管(carbon nanotubes, CNT)以及氧化石墨(graphene oxide,GO)等碳纳米材料,作为诊断和治疗的双栖材料被广泛应用[7]㊂除了碳基纳米材料外,聚合纳米材料及其与不同纳米材料相结合的新型多功能纳米材料对As诊断和治疗提供了一个新的维度㊂聚合纳米材料化学性质稳定,空间分辨率高,可用于近红外成像㊁双光子成像和光声成像中㊂此外,这些聚合纳米材料还可用于光热疗法(photothermal therapy,PTT)和光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)等治疗模式,这些方法有助于心血管疾病诊断和治疗[8]㊂表1.常用于As诊断和治疗的纳米材料类型Table1.The type of nano materials used in atherosclerotic diagnosis and treatment纳米材料目标成像模式治疗方式交联右旋糖酐涂层的铁氧化物磁荧光纳米粒As中的巨噬细胞消融荧光成像/磁共振成像中四(间羟基苯基)氯蛋白酶介导的诊治一体化纳米材料选择性消除巨噬细胞的鱼蛋白酶B活性近红外荧光成像草蛋白酶B激活型诊治金纳米材料炎症巨噬细胞的消融计算机断层扫描成像光热活性近红外辐照硅涂层等离子体的金纳米材料As斑块治疗血管内超声和血管内光声联合成像连续激光波单壁碳纳米管吞噬细胞凋亡近红外荧光成像光热活性近红外辐照18F-氟脱氧葡萄糖标记脂质体糖皮质激素As病变正电子发射断层扫描/磁共振成像糖皮质激素高密度脂蛋白样磁性纳米结构逆向胆固醇转运磁共振成像高密度脂蛋白混合脂乳胶纳米颗粒As中靶向巨噬细胞磁共振成像罗格利酮固体脂质纳米颗粒血小板聚集磁共振成像α-生育酚或前列腺素2.2㊀诊治作用纳米材料可被作为一种有效的分子成像对比剂用于疾病的早期检测和诊断,如光学成像㊁超声成像㊁CT㊁MRI和PET等㊂同时,纳米材料也可用于As疾病的治疗,如全氟碳纳米材料㊁金纳米粒㊁顺磁性纳米粒和脂质体等[6]㊂首先,全氟碳是一种磷脂双分子层的抗血管生成纳米材料,可靶向αvβ3整合素,从而作为诊断和治疗的多模态纳米复合材料[9]㊂其次,金纳米颗粒(gold nanoparticle,AuNP)因其高表面粒子共振㊁强吸收能力和生物相容性等特征成为诊断和治疗双模态的纳米材料,在As病变中通过将光能转化为热能,促进巨噬细胞消耗[10]㊂同时,空间设计的多功能AuNP可作为新型对比剂,在CT下显示深层组织结构,进行As的生物成像,有助于早期诊断[10]㊂再者,顺磁性纳米粒在As的诊断和治疗方面非常有效㊂抗血管生成因子可被连接在磁性活性纳米材料上,进而有效抑制与血管生成相关的As斑块,同时,其光学特性有利于进行生物成像㊂其中典型代表为氧化铁纳米颗粒,由于其具有超顺磁性且易于合成和修饰,可作为常规MRI的对比剂及诊治一体化纳米材料[11]㊂最后,脂质体亦可用于As的诊断和治疗,由于其同时包含亲水和疏水药物分子,将不同特异性的药物部分和抗生素封装到脂质体载体中,便可用于As的诊断和治疗[12]㊂3㊀纳米材料的常见生物学靶点3.1㊀内皮细胞动脉血管的某些区域(如弯曲处和分支点),因为血流对血管内膜的冲击力,容易造成该部位的损伤,进而形成As斑块㊂这些部位的内皮细胞受到刺激后可表达出更多促炎性趋化因子和黏附分子[13]㊂血管细胞黏附分子1(vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1)是生物纳米材料最常见的生物靶标[14-15]㊂当前报道的靶向VCAM-1的配体是通过噬菌体展示文库筛选,可在流动条件下被表达VCAM-1的内皮细胞内化的肽㊂3.2㊀炎性细胞由于斑块中富含巨噬细胞,并且易于吸收纳米颗粒,因此成为生物纳米材料最常见的生物学靶点㊂巨噬细胞最常见的生物标记是清道夫受体,主要有A型清道夫受体和B型清道夫受体[16]㊂硫酸葡聚糖是A型清道夫受体的配体,被广泛用作纳米粒的斑块靶向涂层材料㊂由于巨噬细胞主动摄取被修饰的LDL,因此LDL的模拟肽如载脂蛋白A1也是靶向标记巨噬细胞的常见配体㊂3.3㊀非细胞成分生物纳米材料也可以靶向标记As斑块的非细胞成分,其中最常见的是胶原蛋白㊂作为细胞外基质的关键部分,胶原蛋白调节细胞反应,并有助于纤维帽的强度和完整性㊂有研究报道,在血管基底膜上可发现大量通过噬菌体展示技术筛选出的Ⅳ型胶原有效肽,这可能与血管损伤时通透性增加有关[17]㊂构建出含肽聚合物㊁金和脂蛋白的纳米粒,亦可靶向As斑块内的胶原[18]㊂有学者利用氧化铁纳米粒连接抗整合素αIIbβ3抗体的scFv片段,注入ApoE-/-小鼠后,通过近红外荧光和离体MRI发现了该纳米粒高度选择性结合As斑块[19]㊂4㊀治疗类别4.1㊀抗炎治疗炎症反应是As的重要病理特征㊂靶向载药纳米颗粒具有局部递送抗炎药物至As斑块的能力,可解决全身抗炎带来的不良反应㊂目前利用纳米递送抗炎药物的方式可分为被动靶向给药和主动靶向给药㊂4.1.1㊀被动靶向抗炎治疗㊀㊀被动靶向给药主要是利用疾病部位的高通透性和滞留效应来实现载药纳米粒在病变处的聚集㊂在As发展过程中,病变部位的内皮细胞被激活成炎性内皮细胞,导致病变处内皮通透性增强,从而允许纳米粒渗透到斑块中,并聚集于斑块中㊂有研究表明,利用脂质体纳米粒包裹泼尼松龙,并被递送至As斑块处,改善了泼尼松龙的药代动力学,延长了药物循环半衰期,并且因为靶向释放而减少了全身毒性[20]㊂单剂量给药后,通过MRI观察到斑块中的炎症特征快速且持续减少[21]㊂斑块炎症的减少可归因于载药纳米粒使糖皮质激素类抗炎药在局部发挥了更强的作用,从而降低了单核细胞趋化因子和巨噬细胞含量㊂4.1.2㊀主动靶向抗炎治疗㊀㊀主动靶向指通过表面修饰纳米药物递送系统,使其能与病变部位组织或细胞特异性结合,以实现纳米药物可靶向结合病变部位的功能㊂巨噬细胞在As中起关键作用,形成泡沫细胞,并可在血管内膜下聚集,加强炎症反应㊁促进斑块形成,因此是主动靶向给药的重要目标㊂另外,单核细胞和巨噬细胞可优先吞噬纳米粒,超过75%的氧化铁纳米颗粒会被巨噬细胞摄取,而被嗜中性粒细胞和其他炎性细胞吸收的程度较小[22]㊂靶向巨噬细胞的纳米治疗主要有减少斑块内单核细胞聚集㊁抑制巨噬细胞增殖㊁调控胆固醇代谢和使M1型巨噬细胞极化到更稳定的M2型㊂一种能直接抑制和下调清道夫受体(scavenger receptor, SR)的纳米粒,可阻止巨噬细胞对LDL吸收,研究结果表明这种纳米粒使ApoE-/-小鼠主动脉中的脂质负荷和斑块总面积明显减少[23]㊂而另一项研究开展了靶向纳米免疫疗法,以阻断单核细胞和巨噬细胞中CD40诱导的肿瘤坏死受体相关因子6(tumornecrosis receptor-associated factor6,TRAF6),从而抑制单核细胞在动脉壁内膜下的聚集[24]㊂4.2㊀预防斑块新生血管形成当As进入晚期时,动脉内膜和外膜均可见新生血管形成㊂相较于无症状患者,急性冠状动脉综合征和有症状的颈动脉狭窄患者的动脉斑块中可观察到明显增多的新生血管,且更易发生斑块内出血㊂这表明斑块内新生血管可能与斑块内出血密切相关[25]㊂血管生成由多种细胞因子协调,包括血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)和血小板源性生长因子㊂有研究表明高剂量抗血管生成药物可抑制ApoE-/-小鼠斑块的形成㊂基于这个结论,研究人员开发了一种可用于连续监测新生血管形成的靶向治疗性纳米粒,利用血管生成过程中αvβ3-整合素配体的上调,通过MRI扫描发现高血脂兔模型的主动脉管壁上与αvβ3相关T1加权信号减弱,而这与主动脉壁的As新生血管形成程度有关[26]㊂另外,靶向αvβ3并包裹阿托伐他汀纳米粒治疗高血脂兔,兔主动脉斑块的MRI信号及斑块中的新生血管计数均持续减少,这表明他汀类药物抑制内皮细胞增殖和VEGF的生成,对预防斑块新生血管形成起到了作用[27]㊂4.3㊀调节脂质代谢血脂代谢异常是导致As的重要危险因素之一,而纳米粒递送系统可通过RNA干扰来靶向胆固醇代谢㊂研究表明,载脂蛋白B(apolipoprotein B, ApoB)的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)脂质体制剂可导致肝细胞中ApoB特异性沉默,并减少啮齿动物和猴子体内的ApoB㊁LDL和总胆固醇的水平[28]㊂由此可见,通过靶向干扰ApoB基因可以降低LDL,对临床降脂治疗是有益处的㊂另外,从病理生理学研究角度来看,ox-LDL可在As斑块中大量沉积,胆固醇前体角鲨烯可用作仿生载体,可用于与LDL进行特定相互作用㊂当其与特定的荧光纳米材料共轭相连时,便可用于As的成像和靶向治疗[29]㊂4.4㊀阻止血栓形成血栓形成是As后期导致血管腔狭窄或斑块破裂后局部血液滞留所致㊂血栓形成的过程包括血小板激活㊁凝血级联反应和新鲜血栓形成,而靶向治疗药物均可靶向递送这三个独立因素㊂血栓靶向纳米粒可用于递送血栓溶解剂和抗凝血剂,其中包括组织型纤溶酶原激活物(tissue-type plasminogen activator,tPA)㊁尿激酶和直接凝血酶抑制剂㊂有研究发现,通过将von Willebrand因子结合蛋白包裹在纳米粒中可有效地将tPA靶向猪冠状动脉内的血栓,达到高效的溶栓作用[30]㊂在另一项研究中,研究人员发现抗凝血酶的治疗性纳米粒可直接减弱ApoE-/-小鼠受损动脉斑块的凝血活性[31]㊂此外,局部抑制斑块周围的凝血酶可降低斑块内炎性分子的表达,并恢复被破坏的血管内皮,表明抗凝血酶纳米粒促进了斑块的稳定性㊂综上所述,这些研究提示纳米粒在抗凝治疗方面具有巨大的潜力㊂5㊀局限与不足靶向治疗性纳米粒为As的诊治提供了一种新的方案㊂但是心血管纳米医学仍存在一定的局限性㊂首先,纳米粒的成分具有异质性,即使在保证良好的药物生产规范(如无菌性㊁稳定性和纯度),想进行大规模生产仍具有挑战性㊂其次,纳米粒在体内循环和体外储存期间的稳定性欠佳,是纳米技术普遍的劣势㊂尽管有质控手段尝试解决这个问题,但是每个纳米粒都需要对理化性质和药物释放速率进行专门测量㊂在生理和储存条件下建立药物释放曲线,避免药物在循环中或储存期间缓慢释放㊂再次,一些纳米颗粒对某些细胞类型如斑块内的巨噬细胞具有高亲和力,人们对这种纳米粒被细胞吸收的独特机制仍不甚了解,这是未来研究的可探索领域㊂最后,在评估纳米粒体内代谢的长期安全方面存在争议㊂尽管目前已经开发出可负载药物的纳米制剂不良反应较小,但一些正在进行临床前研发的纳米粒,仍然具有细胞毒性或免疫原性,这些问题也限制了纳米材料在临床的应用㊂[参考文献][1]MAHMOUDI M,YU M,SERPOOSHAN V,et al.Multiscale tech-nologies for treatment of ischemic cardiomyopathy[J].Nat Nano-technol,2017,12(9):845-855.[2]MULDER W bination nanotherapy penetrates atherosclerosis [J].Cardiovasc Res,2016,109(2):191-192.[3]WEI Q,WANG J,SHI W,et al.Improved in vivo detection of ath-erosclerotic plaques with a tissue factor-targeting magnetic nanoprobe [J].Acta 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