经方治疗动脉粥样硬化研究进展_王佑华

Traditional Chinese Medicine 中医学, 2023, 12(8), 1985-1990 Published Online August 2023 in Hans. https:///journal/tcm https:///10.12677/tcm.2023.128292近15年动脉粥样硬化的中西医理论机制研究进展朱西阳湖北中医药大学，针灸骨伤学院，湖北 武汉收稿日期：2023年6月16日；录用日期：2023年7月28日；发布日期：2023年8月9日摘要 动脉粥样硬化(arteriosclerosis, AS)是一种发生在大、中血管的慢性特异性炎症，可引发冠心病和脑梗死，其发病率和病死率均居各种疾病前列，是严重危害人类生命健康的疾病之一。

目前关于动脉粥样硬化的机制尚不十分明确，各中西医学者各有其见解。

搜索国内外近十五年关于动脉粥样硬化的中医、西医理论机制以及实验研究进展的期刊论文，为动脉粥样硬化机制的研究提供参考，有利于以后的治疗研究。

关键词动脉粥样硬化，理论机制，中医，西医，研究进展Research Progress of Theoretical Mechanism of Traditional Chinese Medicine and Western Medicine on Atherosclerosis in Recent 15 YearsXiyang ZhuCollege of Acupuncture and Orthopaedics, Hubei University of Chinese Medicine, Wuhan Hubei Received: Jun. 16th , 2023; accepted: Jul. 28th , 2023; published: Aug. 9th , 2023AbstractAtherosclerosis (AS) is a kind of chronic specific inflammation that occurs in large and middle blood vessels, which can cause coronary heart disease and cerebral infarction. Its incidence rate朱西阳and mortality rate are in the forefront of various diseases, and it is one of the diseases that se-riously endanger human life and health. At present, the mechanism of Atherosclerosis is not very clear, and Chinese and Western medicine practitioners have their own views. Search the domestic and foreign journal papers on the theoretical mechanism of Atherosclerosis in traditional Chinese medicine and western medicine and the progress of experimental research in the past 15 years to provide reference for the research on the mechanism of Atherosclerosis, which is conducive to the future treatment research.KeywordsAtherosclerosis, Theoretical Mechanism, Traditional Chinese Medicine, Western Medicine,Research Progress Array Copyright © 2023 by author(s) and Hans Publishers Inc.This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License (CC BY 4.0)./licenses/by/4.0/1. 引言动脉粥样硬化(arteriosclerosis, AS)是一种发生在大、中血管的慢性特异性炎症，是心绞痛、心肌梗死、动脉瘤和外周动脉疾病共同的病理生理基础。

观察桃红四物汤联合常规药物治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病心绞痛的临床疗效近年来，冠状动脉粥样硬化性心脏病已成为心血管疾病的主要死因之一。

针对冠心病引起的心绞痛，临床上普遍采用药物治疗为主，以减轻疼痛和提高患者的生活质量。

然而，传统的西医药物治疗效果有限，副作用明显，因此寻求一种安全有效的辅助治疗方式变得尤为重要。

桃红四物汤，作为一种传统中药，具有活血化瘀、调经养颜的功效，历史悠久，常用于妇科疾病的治疗。

近年来，桃红四物汤在临床上的应用范围扩展到心脏病，特别是冠心病的治疗。

据医学界的报道，桃红四物汤能够改善心肌缺血，减轻心绞痛症状，对冠心病患者的疗效有显著改善。

经过一段时间的观察和治疗，我们发现桃红四物汤联合常规药物治疗心绞痛能够取得较好的临床疗效。

下面将从多个方面具体介绍这种疗效。

首先，桃红四物汤的药理作用有助于改善心血管系统的功能。

桃红四物汤由桃仁、红花、当归和川芎组成，桃仁和红花有活血化瘀的作用，可以促进血液循环，改善心脏供血；当归和川芎具有调节血液流动的功效，有助于舒张冠状动脉，增加心肌供血量。

而常规药物主要通过抗凝血、扩血管等方式改善心脏血液供应，两者结合使用能够相互补充，达到更好的疗效。

其次，桃红四物汤的疗效主要体现在缓解心绞痛症状方面。

心绞痛是冠心病的主要表现之一，患者常常感到胸闷、胸痛等不适。

桃红四物汤具有活血化瘀、镇痛的作用，能够减轻心脏缺血引起的疼痛感，改善心绞痛症状，提高患者的舒适感。

与传统的西医药物相比，桃红四物汤不仅能够缓解疼痛，而且没有明显的副作用，对患者的生活质量和心理健康有着积极的影响。

此外，桃红四物汤联合常规药物治疗心绞痛还能够改善患者的心功能。

心脏是供应全身血液的中枢器官，心脏功能的恢复对于患者的康复至关重要。

桃红四物汤的活血化瘀作用有助于改善心肌缺血、增强心肌的供血能力，进而提高心功能。

在实际的临床观察中，我们发现联合治疗后的患者心功能明显改善，例如心率的下降、心肌收缩力的增加等指标，这些结果说明联合治疗具有一定的效果。

谢诗情等:动脉粥样硬化机制的研究进展85 *综述*动脉粥样硬化机制的研究进展谢诗情，程文静，祝旗,卢德赵浙江中医药大学生命科学学院，浙江杭州310051摘要动脉粥样硬化(atherosclerosis, AS)是心脑血管疾病的主要原因和病理基础，表现为大动脉及中动脉的血管内壁出现脂质沉积，形成分散或成片的粥样斑块，造成动脉管腔狭窄，随后斑块破裂出血，可在狭窄的动脉内形成血栓，导致缺血性脑卒中、心肌梗死发生。

每年约有一千多万人死于A S所引起的心血管病和脑中风，其严重危害人体健康，并且具有年轻化的趋势。

动脉粥样硬化形成与发展与内皮细胞、血管平滑肌细胞、巨噬细胞、血小板和一系列细胞因子和炎性因子有关，其机制非常复杂，涉及脂质代谢紊乱、内皮细胞功能障碍、血栓形成、血管壁慢性炎症、平滑肌细胞增殖和免疫功能障碍等，该文总结了近年来国内外有关动脉粥样硬化机制的研究，并进行综述。

关键词动脉粥样硬化;心脑血管病;内皮细胞;炎症中图分类号R587.1;R541.4 文献标志码 A doi10.11966/j.issn.2095-994X. 2016.02.03.24Research Progressonon the Mechanism of AtherosclerosisXIE Shi-qing,CHENG Wen-jing,ZHU Ji, LU De-zhaoCollege ofLife Science, Zhejiang Chinese Medicine University，Hangzhou,Zhejiang Province,310051 ChinaAbstract Atherosclerosis (AS) is the main cause and pathological basis of cardiovascular and cerebrovascular diseases. Its pathological process is as follow: lipid deposition in the aorta and middle artery wallform into scattered or complete atherosclerotic plaques, result­ing in arterial stenosis, then plaques rupture and bleeding, causing arterial thrombosis in the stenosis, finally leading to ischemic Stroke, myocardial infarction.Every year, more than 10 million people die from AS-induced cardiovascular disease and stroke, which seriously endanger human health. Additionally,age of atherosclerotic onset has been dropping.The formation and development of atherosclerosis is related to endothelial cells, vascular smooth muscle cells, macrophages, platelets and a series of cytokines and in - flammatory factors. Its mechanism is very complex, involving lipid metabolism disorders, endothelial dysfunction, thrombosis, vascular wall chronic inflammation, smooth muscle cell proliferation and immune dysfunction,etc.This paper summarizes recent studies at home and abroad, and then review on atherosclerosis mechanisms.Key words Atherosclerosis; Cardia-cerebrovascular Disease 曰 Endotheliocyte 曰 Inflammation收稿日期：2016-07-20;修回日期：2016-08-20基金项目：国家自然科学基金(81102841);浙江省自然科学基金(LY15H280005);浙江省中医药科技计划（2012ZA066);浙江省大学生科技创新活动计划（2015R410016)作者简介:谢诗情（1996.11-),女，浙江温州人，本科，助教，研究方向：中医药抗动脉粥样硬化。

基金项目：国家自然科学基金青年基金（８１５０２０２４）通信作者：王阿曼，Ｅ ｍａｉｌ：ｗａｎｇａｍａｎｄｌ＠１２６．ｃｏｍ肿瘤免疫治疗相关动脉粥样硬化的研究进展孙睿　王阿曼（大连医科大学附属第一医院肿瘤内科，辽宁大连１１６０００）【摘要】免疫检查点抑制剂（ＩＣＩ）的应用改善了多种肿瘤的疗效和预后，然而其特有的免疫相关不良事件，尤其是心脏毒性受到关注。

最近的研究发现ＩＣＩ治疗可能通过促进动脉慢性炎症导致或加重动脉粥样硬化，机制尚不十分明确。

现重点对ＩＣＩ相关动脉粥样硬化的流行病学、病理生理机制、影像学特征和药物治疗方面的进展进行综述，旨在提高临床医生对该心血管免疫相关不良事件的认识和诊疗水平。

【关键词】动脉粥样硬化，免疫检查点抑制剂，免疫相关不良事件，心血管毒性【ＤＯＩ】１０ １６８０６／ｊ．ｃｎｋｉ．ｉｓｓｎ．１００４ ３９３４ ２０２３ ０７ ００３ＡｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓＡｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈＣａｎｃｅｒＩｍｍｕｎｅＴｈｅｒａｐｙＳＵＮＲｕｉ，ＷＡＮＧＡｍａｎ（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＯｎｃｏｌｏｇｙ，ＴｈｅＦｉｒｓｔＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＤａｌｉａｎＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｄａｌｉａｎ１１６０００，Ｌｉａｏｎｉｎｇ，Ｃｈｉｎａ）【Ａｂｓｔｒａｃｔ】Ｔｈｅａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆｉｍｍｕｎｅｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ（ＩＣＩ）ｈａｓｉｍｐｒｏｖｅｄｔｈｅｅｆｆｉｃａｃｙａｎｄｐｒｏｇｎｏｓｉｓｏｆａｖａｒｉｅｔｙｏｆｔｕｍｏｒｓ．Ｈｏｗｅｖｅｒ，ｉｔｓｕｎｉｑｕｅｉｍｍｕｎｅ ｒｅｌａｔｅｄａｄｖｅｒｓｅｅｖｅｎｔｓ，ｅｓｐｅｃｉａｌｌｙｃａｒｄｉｏｔｏｘｉｃｉｔｙ，ｈａｖｅａｔｔｒａｃｔｅｄｍｕｃｈａｔｔｅｎｔｉｏｎ．ＲｅｃｅｎｔｓｔｕｄｉｅｓｈａｖｅｆｏｕｎｄｔｈａｔＩＣＩｔｈｅｒａｐｙｍａｙｃａｕｓｅｏｒａｇｇｒａｖａｔｅａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓｂｙｐｒｏｍｏｔｉｎｇｃｈｒｏｎｉｃｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎｏｆｔｈｅａｒｔｅｒｉｅｓ，ｂｕｔｔｈｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｉｓｎｏｔｆｕｌｌｙｕｎｄｅｒｓｔｏｏｄ．Ｔｈｉｓｒｅｖｉｅｗｆｏｃｕｓｅｓｏｎｔｈｅｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙ，ｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ，ｉｍａｇｉｎｇｆｅａｔｕｒｅｓａｎｄｄｒｕｇｔｈｅｒａｐｙｏｆＩＣＩ ｒｅｌａｔｅｄａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ，ｗｉｔｈｔｈｅａｉｍｏｆｉｍｐｒｏｖｉｎｇｔｈｅｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｉｎｇａｎｄｄｉａｇｎｏｓｉｓｌｅｖｅｌｏｆｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒｉｍｍｕｎｅ ｒｅｌａｔｅｄａｄｖｅｒｓｅｅｖｅｎｔｓａｍｏｎｇｃｌｉｎｉｃｉａｎｓ．【Ｋｅｙｗｏｒｄｓ】Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ；Ｉｍｍｕｎｅｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ；Ｉｍｍｕｎｅ ｒｅｌａｔｅｄａｄｖｅｒｓｅｅｖｅｎｔｓ；Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒｔｏｘｉｃｉｔｙ 近年来免疫检查点抑制剂（ｉｍｍｕｎｅｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ，ＩＣＩ）的临床应用改善了多种肿瘤的疗效和预后，至今在全球范围内已获批５０多种适应证，有望取代传统抗肿瘤治疗模式，成为最有前景的抗肿瘤治疗手段［１ ４］。

综述针灸防治动脉粥样硬化性心血管疾病研究进展郭斌，岳增辉，易丽贞，刘欣，王彭汉，黄麟荇湖南中医药大学，湖南长沙 410208摘要：动脉粥样硬化性心血管疾病（ASCVD）包括急性冠状动脉综合征、稳定性冠心病、血运重建术后、缺血性心肌病、缺血性脑卒中、短暂性脑缺血发作、外周动脉粥样硬化病等。

目前，针灸在防治ASCVD尤其冠心病方面已受到高度关注，但由于ASCVD的复杂和高风险特点，针灸防治ASCVD亟需建立风险评估体系。

本文从ASCVD西医评价指南、中医辨证分型、针灸防治方面进行梳理，为不同类型或风险层次人群诊疗方案的制定提供参考。

关键词：动脉粥样硬化性心血管疾病；冠心病；针灸；评估体系；诊疗方案；综述中图分类号：R245；R259.414 文献标识码：A 文章编号：1005-5304(2019)05-0137-04DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2019.05.032 开放科学（资源服务）标识码（OSID）：Research Progress in Acupuncture and Moxibustion for Prevention andTreatment of Atherosclerotic Cardiovascular DiseasesGUO Bin, YUE Zenghui, YI Lizhen, LIU Xin, WANG Penghan, HUANG LinxingHunan University of Chinese Medicine, Changsha 410208, ChinaAbstract: Atherosclerotic cardiovascular diseases (ASCVD) include acute coronary syndrome, stable coronary heart disease, revascularization, ischemic cardiomyopathy, ischemic stroke, transient cerebral ischemic attack and peripheral atherosclerosis. Acupuncture and moxibustion has received great attention from scholars in the prevention and treatment of ASCVD, especially coronary heart disease. However, due to the complex and high-risk characteristics of ASCVD, acupuncture and moxibustion for prevention and treatment of ASCVD requires a risk assessment system. This article sorted out the ASCVD Western medicine evaluation guide, TCM syndrome differentiation, and progress in acupuncture and moxibustion for prevention and treatment, and provided references for the development of different types or risk groups.Keywords: atherosclerotic cardiovascular diseases; coronary heart disease; acupuncture and moxibustion; evaluation system; treatment plan; review随着社会节奏加快及生活水平提高，包括饮食结构在内的生活习惯逐渐改变，心血管疾病的发生率逐年增加并有向中青年人群发展的趋势。

2194　环球中医药2023年11月第16卷第11期　Global Traditional Chinese Medicine,October 2023,Vol.16,No.11㊃基础研究㊃基金项目:国家中医心血管病临床医学研究中心专项科研基金(CMC2022010);国家自然科学基金联合基金(U22A20372)作者单位:100029　北京中医药大学研究生院[路爱梅(硕士研究生)㊁李洪峥(博士研究生)㊁彭煜暄(硕士研究生)];中国中医科学院西苑医院心血管科[杨文文(博士研究生)㊁魏玥(硕士研究生)㊁曲华㊁付长庚],老年病科(龙霖梓);北京了未元中医药研究有限公司(吴汉涛)作者简介:路爱梅(1996-),2021级在读硕士研究生㊂研究方向:中西医结合心血管疾病研究㊂E⁃mail:570633591@ 通信作者:付长庚(1981-),博士,主任医师,博士生导师㊂研究方向:中西医结合心血管疾病研究㊂E⁃mail:fucgbs@化栓通脉方调节自噬抗动脉粥样硬化的实验研究路爱梅　李洪峥　杨文文　彭煜暄　魏玥　龙霖梓　曲华　吴汉涛　付长庚【摘要】　目的　观察化栓通脉方对ApoE 基因敲除(ApoE knockdown,ApoE -/-)小鼠动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的影响,并初步研究其抗AS 的作用机制㊂方法　10只8周龄C57BL /6J 小鼠设为对照组,全程普通饲料喂养;43只同品系ApoE -/-小鼠高脂饲料喂养8周制备体内AS 模型㊂造模成功后随机分为4组:模型组㊁辛伐他汀组(3mg /kg)㊁化栓通脉方低剂量组(6g /kg)㊁化栓通脉方高剂量组(12g /kg)㊂第9周各组开始相应药物灌胃,对照组和模型组采用等体积生理盐水,连续灌胃6周后分离血清和主动脉㊂使用全自动生化分析仪测定各组血清总胆固醇(total cholesterol,TC)㊁甘油三酯(triglyceride,TG)㊁低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL⁃C)㊁高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL⁃C)水平;采用ELISA 法检测各组血清白细胞介素(interleukin,IL)⁃1β㊁γ干扰素(interferon gamma,IFN⁃γ)㊁IL⁃10㊁IL⁃4水平;采用油红O 染色评价整体主动脉内膜斑块分布情况并测定相对斑块面积;采用苏木素 伊红染色评价主动脉窦斑块病理形态并量化斑块区域;采用Russell⁃Movat 染色分析小鼠主动脉窦斑块成分;采用免疫荧光染色检测小鼠主动脉窦组织溶酶体关联膜蛋白2(lysosomal associated membrane protein 2,LAMP2)㊁轻链蛋白3A /B(light chain 3A /B,LC3A /B)㊁P62蛋白的表达㊂结果　化栓通脉方调节血脂效果较为突出,可明显降低AS 小鼠血清TC㊁TG㊁LDL⁃C 水平,提升HDL⁃C 水平,高㊁低剂量组都显示出显著的优势(P <0.01);相比于模型组,化栓通脉方高剂量组血清中IL⁃1β㊁IFN⁃γ含量显著降低,斑块面积㊁泡沫细胞和胶原纤维相对占比明显减小,P62蛋白表达显著减少,IL⁃10㊁IL⁃4含量显著升高,LAMP2㊁LC3A /B 表达明显增加,差异具有统计学意义(均P <0.05)㊂结论　化栓通脉方可显著调节AS 小鼠血脂和炎症因子水平,减少主动脉组织中泡沫细胞㊁胶原纤维和斑块的生成,通过促进LC3A /B㊁LAMP2的表达和P62的降解,调控细胞自噬,从而延缓AS 的发生发展㊂【关键词】　化栓通脉方;　动脉粥样硬化;　自噬;　降脂;　抗炎【中图分类号】　R285.5　【文献标识码】　A　doi:10.3969/j.issn.1674⁃1749.2023.11.006Experimental study of Huashuan Tongmai decoction regulating autophagy against atherosclerosis LU Aimei ,LI Hongzheng ,YANG Wenwen ,PENG Yuxuan ,WEI Yue ,LONG Linzi ,QU Hua ,WU Hantao ,FU ChanggengThe Graduate School of Beijing University of Chinese Medicine ,Beijing 100029,China Corresponding author :FU Changgeng ,E⁃mail :fucgbs@【Abstract 】　Objective To observe the effect of Huashuan Tongmai decoction on atherosclerosis环球中医药2023年11月第16卷第11期　Global Traditional Chinese Medicine,October2023,Vol.16,No.112195　(AS)in ApoE knockout(ApoE knockdown,ApoE-/-)mice,and to study the mechanism of action againstAS.Methods　108-week⁃old C57BL/6J mice were treated as the control group and fed general diet,and43ApoE-/-mice were fed high⁃fat diet for8weeks to prepare in vivo AS model.After successful modelmaking,they were randomly divided into4groups:model group,Simvastatin group(3mg/kg),low dosegroup(6g/kg),and high dose group(12g/kg)of Huashuan Tongmai decoction.On week9,the controlgroup and the model group were received volume saline intragastric administration,the other groups weretreated with the drug intragastric administration,and serum and aorta were obtained after continuous gavagefor6weeks.The serum levels of TC,TG,LDL⁃C,and HDL⁃C in each group were determined by an automatic biochemical analyzer;the serum levels of IL⁃1β,IFN⁃γ,IL⁃10,and IL⁃4in each group were measured by ELISA;oil red O staining was used to evaluate the overall aortic endometrial plaque distribution and determine the relative plaque area;the method of Hematoxylin⁃eosin(HE)staining wasused to evaluate the aortic sinus plaque pathological morphology and quantify the plaque areas;the plaque components of the mouse aortic sinus were analyzed by Russell⁃Movat staining;the expression of LAMP2,LC3A/B,and P62in mice aortic sinus tissues were detected by immunofluorescence staining.Results　The effect of Huashuan Tongmai decoction was prominent,which could significantly decreased the levels ofTC,TG,and LDL⁃C,and increased the level of HDL⁃C in AS mice serum,both the high and the low dosegroups showed significant advantages(P<0.01);compared with the model group,the high dose groupwas decreased significantly in the levels of IL⁃1βand IFN⁃γ,plaque area,the relative proportion of foamcells and collagen fibers,and the expression of P62,meanwhile,increased significantly in the levels ofIL⁃10and IL⁃4,and the expression of LAMP2and LC3A/B(P<0.05).Conclusion　Huashuan Tongmai decoction can significantly regulate serum lipids and inflammatory factors in AS mice,reduce the generationof foam cells,collagen fibers and plaques in aortic tissue,and regulate cell autophagy by promoting the expression of LC3A/B and LAMP2and depressing the expression of P62,thus delaying the occurrence and development of AS.【Key words】　Huashuan Tongma decoction;　atherosclerosis;　autophagy;　lipid⁃lowering;　anti⁃inflammation 2019年全球疾病负担研究结果表明,以缺血性心脏病和卒中为主的动脉粥样硬化性心血管疾病(atherosclerotic cardiovascular disease,ASCVD)是引起全球人口死亡的首要原因,占全球总死亡人数的三分之一[1],给人类健康带来严重的危害㊂动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是ASCVD的病理基础,其成因复杂,其中脂质代谢紊乱㊁免疫和炎症贯穿AS病变始终[2⁃3]㊂自噬是在自噬相关基因的调控下,利用溶酶体自我降解后再利用,维持细胞能量稳态的过程[4],对AS的调控更具有双向作用 在AS早期内皮通过自噬调节脂质代谢㊁减轻炎症反应,从而抑制斑块的形成,晚期随着斑块的进展而变得功能失调[5]㊂因此,维持自噬的动态平衡对抑制AS的恶性发展极为重要㊂化栓通脉方是本课题组根据临床治疗AS患者总结而来的经验方,用于改善冠状动脉㊁颈动脉粥样硬化斑块,临床疗效确切㊂但其在动物体内研究中,是否具有抗AS效应及其作用机制有待进一步研究㊂有鉴于此,本实验从血清脂蛋白㊁炎症因子㊁斑块面积等方面,综合评价化栓通脉方调节ApoE 基因敲除(ApoE knockdown,ApoE-/-)小鼠主动脉粥样硬化斑块的效应,并初步探索其是否通过调控自噬而发挥抗AS作用㊂1　材料与方法1.1　实验动物及实验环境8周龄SPF级雄性C57BL/6J小鼠10只,同品系ApoE-/-小鼠43只,体质量(22±2)g,购于斯贝福(北京)生物技术有限公司[许可证号:SCXK(京) 2019⁃0010]㊂小鼠饲养于北京了未元医药科技公司动物实验中心[许可证号:SYXK(京)2022⁃0007],温度(22±2)℃,湿度(50±10)%,明/暗周期(12/12)小时㊂动物自由进食㊁饮水㊂动物伦理审查批号:SYXK2022⁃0007㊂高脂饲料(83.5%基础饲料+15%猪油+1.5%胆固醇)和普通饲料均由北京华阜康生物科技有限公司[许可证号:SCXK(京)2019⁃0008]提供㊂实验过程中,动物灌胃致死3只,剔除各组离群2196　环球中医药2023年11月第16卷第11期　Global Traditional Chinese Medicine,October2023,Vol.16,No.11值,各组统计数量均为7只㊂1.2　实验药物辛伐他汀片(杭州默沙东制药有限公司,规格:20mg/片,批号:U04517)㊂化栓通脉方药物组成及剂量:金银花15g㊁山楂15g㊁鸡血藤15g㊁制何首乌15g㊁生白芍7.5g㊁生甘草4g㊂中药饮片皆购于九州通医药集团股份有限公司,经北京中医药大学吴嘉瑞教授鉴定,均符合2020版‘中国药典“要求㊂辛伐他汀片用生理盐水配置成混悬液,浓度为0.3mg/mL㊂化栓通脉方各药物按组方比例,称取715g,用2000mL蒸馏水煎煮2次,然后浓缩至715mL的中药混悬液,每毫升含生药量1g,浓度为1g/mL,4℃保存,备用㊂用药剂量参考公式:高剂量给药剂量=成人(70kg)临床常用量×12(按人 小鼠体表面积折算等效剂量系数)㊂以成人(70kg)每日金银花15g㊁山楂15g㊁鸡血藤15g㊁制何首乌15g㊁生白芍7.5g㊁生甘草4g,共71.5g,生药计算高剂量组小鼠每日等效剂量为12g/kg,高㊁低剂量组给药剂量按2∶1设置,低剂量组小鼠每日给药剂量为6g/kg㊂辛伐他汀片成人给药剂量为每日20mg,换算获得辛伐他汀组小鼠每日灌胃剂量为3mg/kg㊂1.3　主要试剂与仪器白细胞介素(interleukin,IL)⁃1β㊁γ干扰素(interferon gamma,IFN⁃γ)㊁IL⁃10㊁IL⁃4ELISA试剂盒(武汉赛维尔生物科技有限公司,批号分别为EK201BHS⁃96㊁EK280/3⁃96㊁EK210/4⁃96㊁EK204HS⁃96);油红O染色试剂盒(北京索莱宝科技有限公司,批号G1016);苏木素 伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色试剂盒(北京索莱宝科技有限公司,批号G1120);Russell改良Movat五色染色试剂盒(北京索莱宝科技有限公司,批号G3701);抗⁃SQSTM1/ P62兔pAb㊁抗⁃LAMP2兔pAb㊁抗LC⁃3A/B兔pAb (武汉赛维尔生物科技有限公司,批号分别为GB11239⁃1㊁GB11330㊁GB11124)㊂台式高速冷冻离心机(大龙,型号D3024R),酶标检测仪(美国BioTeK公司,型号Epoch),全自动生化分析仪(深圳雷杜生命科技,型号分别为Chemray240㊁420㊁800),荧光显微镜(宁波舜宇仪器有限公司,型号2204926),光学显微镜(DMi1,型号Leica),组织切片机(浙江省金华市科迪仪器公司,型号KD⁃ST5500)㊂1.4　动物分组㊁给药及取材适应性喂养1周,10只C57BL/6J小鼠作为对照组,全程采用普通维持饲料喂养㊂43只ApoE⁃/⁃小鼠采用高脂饲料喂养8周后,随机抽取3只取材,主动脉窦病理切片HE染色显示:主动脉管腔狭窄,内膜明显增厚,有明显斑块形成,提示早期AS体内模型建立成功㊂造模后的ApoE-/-小鼠随机分为4组:模型组㊁辛伐他汀组(3mg/kg)㊁化栓通脉方低剂量组(6g/kg)㊁化栓通脉方高剂量组(12g/kg),每组10只,继续高脂饲料喂养,用药组同时予以相应药物灌胃,对照组和模型组予等体积生理盐水灌胃以保证组间一致性,每日灌胃1次,连续6周㊂最后一次灌胃后,禁食㊁不禁水12小时㊂用3%戊巴比妥钠腹腔麻醉,球后静脉(眼眶静脉丛)取血,室温静置2小时,4℃4000r/min离心10分钟,分离上层血清,-80℃下冻存㊂取血后打开小鼠胸腔及腹腔,经PBS充分灌流,整体分离自主动脉根部至髂总动脉分叉处主动脉,并剥离周围多余结缔组织和脂肪组织,投入液氮或组织固定液中保存,用于后续相关实验㊂1.5　指标检测1.5.1　酶标法测定小鼠血脂水平　每组取7只小鼠,使用全自动生化分析仪测定各组小鼠血清中总胆固醇(total cholesterol,TC)㊁甘油三酯(triglyceride,TG)㊁低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL⁃C)㊁高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL⁃C)的水平㊂1.5.2　ELISA法检测血清炎症因子水平　每组取7只小鼠,根据ELISA试剂盒说明书操作,检测小鼠血清中IL⁃1β㊁IFN⁃γ㊁IL⁃10㊁IL⁃4的水平㊂1.5.3　大体油红O染色测定整体主动脉相对斑块面积　每组取3只小鼠,在光学显微镜下将小鼠主动脉纵剖面固定,水洗,油红O染色后将血管平铺于黑色橡胶板,迅速拍照,利用Image J软件分析以主动脉相对斑块面积来评价主动脉斑块严重程度㊂相对斑块面积(%)=主动脉斑块面积/血管内膜总面积×100%㊂1.5.4　HE染色评价主动脉窦病理形态　每组取3只小鼠,4%多聚甲醛固定主动脉于4℃冰箱24小时,梯度脱水后石蜡包埋,并连续切片(5μm),HE 常规染色后封片拍照,于光学显微镜下检测AS小鼠主动脉窦病理形态的变化,测量并计算斑块面积占血管内膜面积百分比㊂相对斑块面积(%)=斑块环球中医药2023年11月第16卷第11期　Global Traditional Chinese Medicine,October2023,Vol.16,No.112197面积/内膜总面积×100%㊂1.5.5　Russell⁃Movat染色评价主动脉窦斑块成分　每组取3只小鼠,主动脉石蜡切片处理,切片厚度5μm,连续切片至观察到3个主动脉瓣完全融合开始留取10张切片,切片脱蜡至水,经五色法染液进行染色,脱水封片,在光学显微镜下观察主动脉窦斑块各成分变化,染色后的细胞核和弹性纤维呈黑色,胶原纤维呈红色,泡沫细胞呈淡紫色,蛋白聚糖呈蓝色㊂测量并计算斑块内泡沫细胞及胶原纤维的占比㊂1.5.6　免疫荧光法评价主动脉窦溶酶体关联膜蛋白2(lysosomal associated membrane protein2, LAMP2)㊁轻链蛋白3A/B(light chain3A/B,LC3A/ B)㊁P62蛋白的表达　每组取3只小鼠,主动脉窦石蜡切片,常规脱蜡㊁水化㊁抗原修复后,血清室温封闭30分钟,滴加一抗4℃孵育过夜,PBS浸洗3次,次日滴加荧光二抗25℃避光孵育1小时,PBS浸洗3次,滴加DAPI避光孵育5分钟复染细胞核,PBS 浸洗4次,最后用含抗荧光的淬灭剂封片㊂使用荧光显微镜观察主动脉窦的LAMP2㊁LC3A/B㊁P62蛋白荧光表达,并采集图像,利用Image J分析处理数据㊂1.6　统计学方法实验所得数据为计量资料,使用SPSS24.0统计软件进行处理㊂数据经检验均符合正态分布且方差齐,以均数±标准差(x±s)表示㊂多组间比较采用单因素方差分析,两两比较用LSD法,P<0.05表示差异具有统计学意义㊂2　结果2.1　化栓通脉方对小鼠血脂水平的影响相比于对照组,模型组小鼠血清中TC㊁TG㊁LDL⁃C水平明显升高,HDL⁃C水平明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05);相比于模型组,辛伐他汀组和化栓通脉方低㊁高剂量组血清中TC㊁TG㊁LDL⁃C水平均显著降低,HDL⁃C水平均显著升高,差异具有统计学意义(P<0.01)㊂见表1㊂2.2　化栓通脉方对小鼠血清炎症因子水平的影响与对照组相比,模型组血清中IL⁃1β㊁IFN⁃γ含量显著上升,差异具有统计学意义(P<0.01), IL⁃10㊁IL⁃4含量也有所升高,但无统计学意义(P>0.05);与模型组相比,化栓通脉方高剂量组血清中IL⁃1β㊁IFN⁃γ含量显著降低,IL⁃10㊁IL⁃4含量显著升高,差异具有统计学意义(P<0.01);化栓通脉方低剂量组较模型组IFN⁃γ含量降低,IL⁃4含量升高,差异有统计学意义(P<0.01),IL⁃1β含量降低, IL⁃10含量升高,差异无统计学意义(P>0.05)㊂见表2㊂表1　各组AS模型小鼠血脂水平比较(x±s,mmol/L)组别鼠只TC TG LDL⁃C HDL⁃C对照组7 2.75±0.160.66±0.030.36±0.03 1.99±0.10模型组724.74±0.96b 4.17±0.34b15.28±1.50b 1.43±0.30a 辛伐他汀组717.88±2.90bc 2.21±1.07bc11.13±1.66bc 2.96±0.82bc 化栓通脉方低剂量组718.74±2.23bc 2.06±0.45bc11.82±2.23bc 2.83±0.31bc 化栓通脉方高剂量组718.21±1.37bc 1.44±0.35ac10.17±2.16bc 3.39±0.52bc 注:与对照组相比,a P<0.05,b P<0.01;与模型组相比,c P<0.01㊂表2　各组AS模型小鼠血清炎症因子比较(x±s,pg/mL)组别鼠只IL⁃1βIFN⁃γIL⁃10IL⁃4对照组70.61±0.3153.44±21.3435.66±18.26 1.30±0.31模型组7 5.97±1.65a214.70±87.64a72.92±28.44 2.89±0.85辛伐他汀组7 3.93±2.06ab129.80±95.78b90.36±28.06a7.64±5.92化栓通脉方低剂量组7 4.79±2.05a61.71±21.39b93.33±33.28a11.81±4.02ab 化栓通脉方高剂量组7 2.03±0.74b61.89±23.34b140.80±59.54ab22.24±7.69ab 注:与对照组相比,a P<0.05;与模型组相比,b P<0.01㊂2198　环球中医药2023年11月第16卷第11期　Global Traditional Chinese Medicine,October2023,Vol.16,No.112.3　化栓通脉方对小鼠整体主动脉斑块面积的影响主动脉大体油红O染色显示,对照组小鼠主动脉血管壁大体光滑㊁平整,呈半透明状,见有少量点状斑块散在分布;高脂饲料喂养14周,模型组小鼠主动脉管腔病理性扩增,管壁存在大量的红染的点片状脂质斑块,且多分布在主动脉弓及血管分叉处㊂相比对照组,模型组主动脉窦部斑块面积明显增加(P<0.01);相比模型组,化栓通脉方低㊁高剂量组小鼠主动脉窦部斑块面积均明显减少(P<0.01)㊂见图1及表3㊂2.4　化栓通脉方对小鼠主动脉窦病理形态的影响主动脉窦HE染色显示,对照组小鼠主动脉内膜光滑完整,内膜下无明显泡沫细胞和脂质沉积形成,中层平滑肌细胞排列整齐;模型组小鼠主动脉内膜增厚明显,内膜下可见大量泡沫细胞和脂质沉积,中层平滑肌细胞增殖且排列紊乱;与模型组相比,化栓通脉方高剂量干预后,小鼠主动脉窦内膜厚度㊁泡沫细胞数量及脂质沉积明显减轻(P<0.01)㊂见图2,表4㊂表3　各组小鼠AS模型小鼠斑块面积占比(大体油红O染色)(x±s)组别鼠只主动脉相对斑块面积占比(%)对照组3 1.98±0.98模型组312.55±4.05a辛伐他汀组3 2.65±0.99b化栓通脉方低剂量组3 6.46±3.31b化栓通脉方高剂量组3 2.75±0.29b注:与对照组相比,a P<0.05;与模型组相比,b P<0.01㊂注:A对照组;B模型组;C辛伐他汀组;D化栓通脉方低剂量组;E化栓通脉方高剂量组㊂图1　各组AS模型小鼠主动脉大体油红O染色结果注:A对照组;B模型组;C辛伐他汀组;D化栓通脉方低剂量组;E化栓通脉方高剂量组㊂图2　各组AS模型小鼠主动脉窦HE染色结果(×100)环球中医药2023年11月第16卷第11期　Global Traditional Chinese Medicine,October2023,Vol.16,No.112199表4　各组小鼠AS模型小鼠斑块面积及成分占比(x±s)组别鼠只主动脉窦相对斑块占比(HE染色,%)泡沫细胞占比(Movat染色,%)胶原纤维占比(Movat染色,%)对照组3000模型组351.00±4.00a17.00±2.00a18.33±2.08a 辛伐他汀组336.80±1.76ab12.00±2.94ab9.75±3.50ab 化栓通脉方低剂量组332.40±7.96ab13.80±3.56a11.33±0.58ab 化栓通脉方高剂量组325.67±10.40ab11.00±4.00ab8.33±1.53ab 注:与对照组相比,a P<0.05;与模型组相比,b P<0.01㊂ 主动脉窦Russell⁃Movat染色结果显示,对照组内膜未见明显斑块,内皮细胞结构完整,弹力纤维弯曲连续,富有弹性,中膜血管平滑肌排列整齐,周围分布少量胶原纤维和网状纤维结构;模型组可见内膜斑块显著突向管腔,斑块内部有大量泡沫细胞和脂质堆积,斑块表面有大量炎症细胞浸润黏附,平滑肌细胞大量增生,排列紊乱,血管中膜失去连续性,弹力纤维绷直㊁失去弹性,胶原纤维㊁网状纤维排布错乱㊂化栓通脉方干预后主动脉窦Movat染色显示:斑块炎症细胞浸润黏附有所减轻,脂质堆积有所减少,胶原纤维结构稳定,覆盖包裹在脂质表面,血管中膜连续性较模型组有所改善(P<0.05),表明化栓通脉方促进斑块稳定,减少AS的发展㊂见图3,表4㊂2.5　化栓通脉方对小鼠主动脉窦自噬相关蛋白表达的影响免疫荧光结果显示,与对照组相比,模型组小鼠主动脉中LAMP2㊁LC3A/B㊁P62的表达升高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,化栓通脉方高剂量干预后,AS模型小鼠主动脉窦中LAMP2㊁LC3A/B表达升高(P<0.01),P62的表达降低(P>0.05)㊂见图4,表5㊂3　讨论在AS的中医药防治中,瘀与毒是导致易损斑块形成及破裂的主要病理因素㊂稳定斑块和血栓属于 内阻瘀血”,各种炎症因子属于 内生毒邪”,瘀为常,毒为变,由常生变,因瘀致毒,毒瘀互结,AS 易损斑块在瘀血基础上 毒邪”致病,治当以解毒化瘀[6⁃9]㊂化栓通脉方以金银花为君,解毒清热,直击病本;山楂行气散瘀化浊,鸡血藤祛瘀养血通络,制何首乌㊁白芍养血益精,敛阴止痛,共为臣药;甘草清热解毒,调和诸药㊂上述药物合用,共奏解毒化瘀㊁养血通络之效㊂注:A对照组;B模型组;C辛伐他汀组;D化栓通脉方低剂量组;E化栓通脉方高剂量组㊂图3　各组AS模型小鼠主动脉窦Movat染色结果(×100)表5　各组AS模型小鼠主动脉窦自噬蛋白表达情况比较(x±s)组别鼠只P62LC3A/B LAMP2对照组3 1.98±0.987.04±0.2938.23±8.04模型组312.55±4.05b10.60±2.7866.13±16.30a 辛伐他汀组3 2.65±0.99ac14.27±3.93b108.60±15.36bc 化栓通脉方低剂量组3 6.46±3.31b8.66±0.6573.54±8.85b 化栓通脉方高剂量组3 2.75±0.29b17.05±2.34bc109.80±8.34bc 注:与对照组相比,a P<0.05,b P<0.01;与模型组相比,c P<0.01㊂2200　环球中医药2023年11月第16卷第11期　Global Traditional Chinese Medicine,October 2023,Vol.16,No.11注:A 对照组;B 模型组;C 辛伐他汀组;D 化栓通脉方低剂量组;E 化栓通脉方高剂量组㊂图4　各组AS 模型小鼠主动脉窦免疫荧光染色结果(×100) 现代药理学研究指出,化栓通脉方通过多成分㊁多靶点㊁多途径,发挥抗AS 作用 金银花㊁山楂㊁鸡血藤㊁白芍都具有抗炎㊁抗氧化㊁抗血小板聚集的作用[10⁃12],山楂还可调节血脂代谢及改善血管内皮功能,鸡血藤可调节造血系统[13⁃14],制何首乌可补血㊁抗衰老㊁降血脂[15],白芍可通过调节免疫㊁抑制细胞凋亡㊁促进胆固醇流出等途径抗AS [16⁃17]㊂由此可知,化栓通脉方中药物成分可能通过抑制斑块内炎症反应㊁改善脂质代谢和血流动力学,从而降低斑块恶化破裂风险㊂故本研究旨在通过探讨化栓通脉方对ApoE -/-小鼠抗AS 的作用及其机制,为其临床应用提供理论依据和数据支撑㊂3.1　化栓通脉方通过降脂㊁抗炎实现抗AS 作用AS 是一种慢性炎症性血管疾病,脂质代谢紊乱与炎症因子升高会导致血管内皮功能受损,引起血管内壁脂质堆积及斑块和血栓的形成,与AS 的生成与发展密切相关[3,18],促炎和抗炎机制的平衡决定着AS 的结局,是病情转化和恶化的关键[19]㊂有鉴于此,调节血脂代谢㊁抑制炎症反应在AS 的治疗中占有重要地位㊂本研究表明,化栓通脉方可调节血清脂蛋白㊁炎症因子水平㊂研究结果指出,相比于模型组,高㊁低剂量化栓通脉方组血清中TC㊁TG㊁LDL⁃C 水平均显著下降,HDL⁃C 水平显著上升,促炎因子IL⁃1β㊁IFN⁃γ含量降低,抑炎因子IL⁃10㊁IL⁃4含量升高,斑块面积㊁泡沫细胞和胶原纤维相对占比明显减小,且随化栓通脉方浓度升高而存在一定差异㊂由此表明,化栓通脉方可能通过调节血脂代谢㊁降低血清炎症因子水平,减少主动脉斑块面积,实现抗AS 作用㊂3.2　化栓通脉方抗AS 作用可能与诱导细胞自噬有关自噬是细胞自身的分解代谢机制,对AS 具有重要影响,其水平主要通过自噬标志物(自噬体和自噬溶酶体)和自噬蛋白标志物的水平进行评价[20⁃21]㊂自噬体作为自噬过程的标志性结构,是检测自噬的唯一金标准,而LC3是最可靠的自噬体标志物,其表达水平与自噬体数量呈正相关;LAMP2是溶酶体标志物,其表达水平与自噬溶酶体亦呈正相关;P62是自噬的特异性底物,其表达水平与自噬潮呈负相关㊂本研究免疫荧光结果显示,模型组较对照组具有高水平的LC3A /B㊁LAMP2共定位,表明自噬的募集是对新兴斑块的应激反应㊂化栓通脉方组较模型组LC3A /B㊁LAMP2的表达上调㊁P62的表达下调,且高剂量组比低剂量组自噬蛋白表达更为显著,表明化栓通脉方可增加自噬通量,升高自噬水平,起到抗AS 作用,并与剂量呈相关关系㊂综上所述,化栓通脉方可能通过诱导细胞自环球中医药2023年11月第16卷第11期　Global Traditional Chinese Medicine,October2023,Vol.16,No.112201噬,调节脂质代谢㊁减弱炎症反应,从而抑制斑块形成与进展,达到防治AS的作用,具体机制通路有待进一步实验验证㊂参考文献[1]　Roth G A,Mensah G A,Johnson C O,et al.Global burden ofcardiovascular diseases and risk factors,1990⁃2019:update fromthe GBD2019study[J].J Am Coll Cardiol,2020,76(25):2982⁃3021.[2]　Wolf D,Ley K.Immunity and Inflammation inAtherosclerosis[J].Circ Res,2019,124(2):315⁃327.[3]　LU Y,CUI X,ZHANG L,et al.The Functional Role ofLipoproteins in Atherosclerosis:Novel Directions for Diagnosisand TargetingTherapy[J].Aging Dis,2022,13(2):491⁃520.[4]　Kim K H,Lee M S.Autophagy⁃a key player in cellular 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1中西医结合心血管病电子杂志Cardiovascular Disease Electronic Journal of integratedtraditional Chinese and Western Medicine2019 年 4月 B 第 7 卷第 11 期Apr. B 2019 V ol. 7 No. 11·论 著·动脉粥样硬化中药治疗机制的研究进展张 强，罗 毅（苏州市中西医结合医院脑病科，江苏 苏州 215101）【摘要】动脉粥样硬化的发生发展过程复杂，受到很多因素的影响，严重威胁着人类生命健康。

它是心脑血管不良事件发生的重要原因。

近些年来，随着人们生活水平的不断提高以及不良生活方式的出现，其发病率逐年升高。

越来越多的研究表明，传统中药单体或复方对动脉粥样硬化的治疗有着确切的临床效果。

本文将从调节脂质代谢、抗炎抗氧化等几个方面，阐述其抗动脉粥样硬化的作用机制。

【关键词】中药；血脂；动脉粥样硬化【中图分类号】R541.4 【文献标识码】A 【文章编号】ISSN.2095-6681.2019.11.1.03Advances in Research on Therapeutic Mechanisms of TraditionalChinese Medicine for AtherosclerosisZHANG Qiang,LUO Yi(Department of Encephalopathy,Suzhou Integrated Traditional Chinese and Western MedicineHospital,Jiangsu Suzhou 215101,China)【Abstract 】The occurrence of atherosclerosis is complicated, and it is affected by many factors, which seriously threatens human health. It is an important cause of adverse cardiovascular and cerebrovascular events. In recent few years, with the continuous improvement of people's living standard and the appearance of unhealthy lifestyles, the incidence rate is increasing year by year. More and more studies show that the traditional Chinese medicine included monomer and compound has a definite clinical effect on the treatment of atherosclerosis. In this article, we will expound the mechanism of anti atherosclerosis from the aspects of regulating lipid metabolism, anti-inflammatory and anti-oxidation.【Key words 】Traditional Chinese medicine;Blood lipid;Atherosclerosis动脉粥样硬化（atherosclerosis ，AS ）是一种进展缓慢的心血管系统的常见疾病。