灵芝新品种“仙芝2号”的选育及特征特性研究

２０１７年３月　第ｌ９卷第３期　中国现代中药Ｍｏｄ　Ｃｈｉｎ　Ｍｅｄ　Ｍａｒ．２０１７　Ｖ０１．１９　Ｎｏ．３　

・专题・　

灵芝新品种“仙芝２号＂的选育及特征特性研究△　

李建淼　，徐靖　，王秀娟　，张国亮　，李明焱　，邵清松　，潘钦霞　（１．浙江寿仙谷医药股份有限公司，浙江　武义３２１２００；　２．浙江省珍稀植物药工程技术研究中心，浙江　武义３２１２００；　３．金华寿仙谷药业有限公司，浙江武义３２１２００；４．浙江农林大学中药学科，浙江杭州３１１３００）　

［摘要］　目的：选育灵芝新品种，促进灵芝产业链发展。方法：品种（系）问遗传差异分析采用ＥＲＩＣ—ＰＣＲ扩增　技术，经组织分离、航天诱变、品比及稳定性试验，结合系统育种方法，从“仙芝ｌ号”中筛选出高产、优质的灵　芝新品种“仙芝２号”。结果：获得高产量、抗高温能力等方面均优于其他品种的灵芝新品种。结论：“仙芝２号”　菌株具有抗逆性强、孢子产量高、饱满度高等优良特性，具有良好的推广价值与市场前景。　【关键词］仙芝２号；新品种选育；优良特性　

Ｂｒｅｅｄｉｎｇ　ｏｆ　Ｇａｎｏｄｅｒｉｎｄ　ｌｕｃｉｄｕｍ　ｖａｒ．“Ｘｉａｎｚｈｉ　２’’ａｎｄ　Ｉｔｓ　Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ　ＬＩ　Ｊｉａｎｍｉａｏ　，ＸＵ　Ｊｉｎｇ　＇　，ＷＡＮＧ　Ｘｉｕｊｕａｎ　，ＺＨＡＮＧ　Ｇｕｏｌｉａｎｇ　，ＬＩ　Ｍｉｎｇｙａｎ　，ＳＨＡＯ　Ｑｉｎｇｓｏｎｇ　，ＰＡＮ　Ｑｉｎｘｉａ　（１．Ｚｈｅｊｉａｎｇ　Ｓｈｏｕｘｉａｎｇｕ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｃｏ．Ｌｔｄ，Ｗｕｙｉ　３２１２００，Ｃｈｉｎａ；　２．Ｚｈｅｊｉａｎｇ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｃｅｎｔｅｒ　ｏｆ　Ｒａｒｅ　Ｐｌａｎｔ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｗｕｙｉ　３２１２００，Ｃｈｉｎａ；　３．ＪｉｎｈｕａＳｈｏｕｘｉａｎｇｕ　ＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａＺ　Ｃｏ．Ｌｔ　，Ｗｕｙｉ　３２１２００，Ｃｈｉｎａ；　４．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，ＺｈｅｊｉａｎｇＡ＆Ｆ　西ｅ　，Ｈａｎｇｚｈｏｕ　３１１３００，Ｃｈｉｎａ）　

［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ　ｓｅｌｅｃｔ　ｎｅｗ　ｖａｒｉｅｔｉｅｓ　ｏｆ　Ｇａｎｏｄｅｒｍａ　ｌｕｃｉｄｕｍ　ａｎｄ　ｐｒｏｍｏｔｅ　ｔｈｅ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｇ　ｌｕｃｉｄｕｍ　ｉｎｄｕｓｔｒｙ　ｃｈａｉｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｖａｒｉｅｔｉｅｓ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ａｍｐｌｉｆｉｅｄ　ｂｙ　ＥＲＩＣ—ＰＣＲ　ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ｔｈｒｏｕｇｈ　ｔｉｓｓｕｅ　ｉｓｏｌａｔｉｏｎ，ｓｐａｃｅ　ｍｕｔａｔｉｏｎ，ｒａｔｉｏ　ｏｆ　ｐｒｏｄｕｃｔｓ　ａｎｄ　ｓｔａｂｉｌｉｔｙ　ｔｅｓｔ，ｃｏｍｂｉｎｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｓｙｓｔｅｍ　ｏｆ　ｂｒｅｅｄｉｎｇ　ｍｅｔｈｏｄｓ，ｆｒｏｍ“Ｘｉａｎｚｈｉ　１”ｓｃｒｅｅｎｅｄ“ｎｅｗ　Ｇａｎｏｄｅｒｍａ　ｓｐｅｃｉｅｓ　ｗｉｔｈ　ｈｉｇｈ　ｙｉｅｌｄ　ａｎｄ　ｇｏｏｄ　ｑｕａｌｉｔｙ　ａｒｅ　２”．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｔｈｅ　ａｓｐｅｃｔ　ｏｆ　ｏｂｔａｉｎ　ｈｉｇｈ　ｙｉｅｌｄ，ｈｉｇｈ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｉｓ　ｂｅｔｔｅｒ　ｔｈａｎ　ｏｔｈｅｒ　ｖａｒｉｅｔｉｅｓ　ｏｆ　Ｇ．１ｕｃｉｄｕｍ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：“Ｘｉａｎｚｈｉ　２　ｗｉｔｈ　ｓｕｐｅｒｉｏｒ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ　ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ　ｓｔｒｏｎｇ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ，ｈｉｇｈ　ｓｐｏｒｅ　ｙｉｅｌｄ，ｈｉｇｈ　ｐｌｕｍｐｎｅｓｓ，ｈａｓ　ｐｒｏｍｏｔｉｏｎ　ｖａｌｕｅ　ａｎｄ　ｇｏｏｄ　ｍａｒｋｅｔ　ｐｒｏｓｐｅｃｔｓ．　［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］Ｘｉａｎｚｈｉ　２；ｂｒｅｅｄｉｎｇ　ｏｆ　ｎｅｗ　ｖａｒｉｅｔｙ；ｓｕｐｅｒｉｏｒ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ　ｄｏｉ：１０．１３３１３／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３－４８９０．２０１７．３．００８　

灵芝Ｇａｎｏｄｅｒｍａ　ｌｕｃｉｄｕｍ属于担子菌纲多孔菌科　大型真菌，主产于亚洲、澳洲、非洲及美洲的热带　

及亚热带，分布于中国大部分省份。自古作为“扶　正固本，久食长生”的传统保健药物，乃吉祥瑞　草Ｈ　Ｊ。《本草纲目》中的详细记载也肯定了它的作　用。现代研究表明，灵芝的主要有效成分灵芝多糖　和灵芝三萜类化合物具有扶正固本，调节血脂、血　

糖，提高免疫力，抗病毒，抗肿瘤等广泛的医学价　值＿２　Ｊ。灵芝孢子（灵芝菌褶中弹射出来的极其微小的　

卵形生殖细胞），凝聚了灵芝的精华，具有灵芝的全　部遗传物质和保健作用　。随着人们对灵芝的深入　研究，以灵芝及灵芝孢子为原料开发的保健食品深　

受消费者认可，灵芝、灵芝孢子粉的市场需求量日　

益增长，其产业发展前景变得非常广阔　Ｊ。本研究　

主要以结合市场需求为主，开展灵芝的新品种选育，　

最终获得孢子产量高、具有耐温等高抗特征，同时　

又适合设施化栽培的灵芝新品种“仙芝２号”。　

１材料与方法　

１．１选育过程　

２００４年７月在“仙芝１号”种植区内，发现有　

［基金项目］　浙江省中药材新品种选育重大科技专项（２０１６Ｃ０２０５８）；浙江省重点研发计划项目（２０１７Ｃ０２０１１）　ｒ　［通信作者］　徐靖，工程师，研究方向：药用植物栽培与育种；Ｔｅｌ：（０５７９）８７９８０００３，Ｅ－ｍａｉｌ：３７１１７８９４＠ｑｑ・ｃｏｒｎ　

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　２０１７　３　Ｊ　Ｊ　第１９巷琊３划　

朵　３３　：离温下生Ｋ良好，柄Ｋ、子实体芝盖　大的特殊“　１芝ｌ　”　取其　实体进行组织分离，　

得２０艾试僻种进行培养片编　（“ｆＩｌｌ芝１号一１”全　“仙芝１　一２０”）　经过菌丝培养观察，发现２０支试　

管巾仃１　１支试管种菌丝牛长　盛、　丝致密程度　岛，表脱卡ｆＩ埘优秀。进而将这些试竹种进行　｛Ｉ芝试　

验观察，　之后的研究中发现，　株２号、５　、　

７　、Ｉ　５　、Ｉ６号以及ｌ７　试竹　侏长势良好，具　有抗逆一　姒的特点，而其他　ｆｆｔ　Ｉｆ余下菌株ｌ尢明　

謦　、　２００５　ｑ－：，通过我陶第■１　一　返回式科　卜了技　

术试验ｌｂ￣－．ｇｊ－５号菌株（“仙芝ｌ　一５”）和７弓　菌株　（“ｆｌｌＪ芝ｌ‘　一７”）进行航灭诱变，　・ｆＩ“仙芝１　一５”　

转接成功至ｌ０支试管　中培养（“ｓ　１号”　“ｓｚ　１０弓・”）　Ｉ｜ｌ号、４　１、６号、７　、８号和１０号　

豫ｆ丝ｑｉ长较好，于㈣年１　ｌ』ｊ将该６支蔺种扩接为生　

Ｊ　种。　次　，对上述扩接的ｑ－Ｊ　：种进ｉ　｝』Ｊ筛试验　根　

据蜱地争…　犬数、孢子套袋收集【Ｉ、Ｊ　问、采收ｌ１、『问、　菌　半均“－　ｚ＆　：、菌盖平均厚度、闲　长度、了实仆　

产城、　芝孢子总产　、平均，Ｉｉ物　：转化牢等指标　综合　价发现，“　ｚ　”仡Ｉ　述６个灵芝菌种【ｆ１　

表现最优　经小区品比试验、　域　试验、大而秋　推Ｊ　‘性试验　发现其均表观¨｛叫　的Ｉ　产高抗特性，　

且，１－长发ｆｉ－优势稳定，＿卜式定　为“仙芝２号”　

（　Ｉ　１）　

图１　“仙芝２号”菌株生长图　

１．２菌丝生长特性分析　

１．２．１蔺丝肜态及平均牛长状态比较，以“沪农　１号”干¨“仙芝ｌ　”为对照品，“仙芝２号”为试　验。　、将从４℃冰箱Ｉ｛Ｊ取ｉ㈨勺斜面菌株接种住２５　ｍＩ　

板　占化，待Ｋ满　板　，Ｊ耳用３　１１１ｒｌｌ无菌打孔器　

将　肜接种块接种全３个２５　ｍＬ平板上，并用封¨　

膜将　板密封，于生化培养输巾２６　黑暗条什ｆ　上ｆ｝　

芥ｌ　２　ｔｌ后，观察菌丝形态、颜色、敏密程度以及生　

长逑发　１．２．２温型试验　接种过　同１．２．１，将“仙芝　

２　”茼种接ｌ２　ＩｌＩ【，分别放　于２５、２６、２７、２８　

ｔ噼条件下进ｆ　培养，｝＝王个温度条件承复３…Ｌ　

ｌ　２　ｔ｛Ｊ．　，将平板取山×、『比，￣Ｉ：４ｔｔ照，以确定菌株合逝　

的培养温度。　１．２．３耐高温试验　随机选收“沪农１号”、“ｆＩＩｌ芝　

２　’、“仙芝Ｉ　Ｋ势较　的灵芝各６株，统汁　

７、８、９月份其傅ｌ｛孢于粉　量，　记录Ｈ平均泓　

度和最高温度，以探究其耐『　温能力，　

１．３产量分析　

１．３．１小区品比试验　Ｊ　｛　比较试验参照　庆武等　

的　法　，以“ｊＪＪ＇Ｉ农１　”币Ｉｌ“仙芝ｌ　”为埘照　

，比较“仙芝２　”缚１　Ｏ０　ｋｇ段木单　十芝产　

和饵ｌ００　ｋｇ段小　茬干孢Ｊ　：：ｌ　的差异　．　

１．３．２　１４域试验产量比较　点区域性试验，以　

始　株“沪农１号”、　“ｆＪＪＩ芝１号”　个品种为刈’　

照，＿ｊ：２００８年开始进行　比较其每１Ｏ０　ｋｇ段木　

Ｉ：芝　：量和每１００　ｋｇ段术　Ｉ＝孢产　的筹　、　

１．４遗传差异性分析　

１．４．１拈抗分析　以“沪农ｌ号”、“仙芝２　”以　

及康小“仙芝　号”为材料，将活化后的３种闲株　

接种　同一培养【【ＩＬ中进行培养，观察　的拈抗　

现象、、　１．４．２遗传多样性分析采川赤芝特性扩增及ＥＲＩＣ—　

ＰＣＲ扩增技术，分别比较“仙芝２　”、“仙芝　

１　一”、“沪农１号”的扩增条带并进行分析，以确　

认　行之间的遗传差异性。　

２讨论与分析　

２．１　丝生长特性分析　

从表ｌ可以看出，“仙芝２号”颜色葺白，蔺　

匍｛｝｛『平贴，致街程度大于“仙芝１号”，小于“沪　

农ｌ　”。　

２　示，“ｆＩＩＪ芝２号”菌丝生长速度为　

．３４３．

　２０１７年３月　第１９卷第３期　中国现代中药Ｍｏｄ　Ｃｈｉｎ　Ｍｅｄ　

０．４３　ｃｍ・ｄ～，略大于“仙芝１号”（０．４１　ｃｍ・ｄ　），　

小于“沪农１号”（０．６６　ｃｍ・ｄ。）。　

表１　菌株的茵丝形态观察结果　

注：＋十＋表示菌丝致密程度一般；＋＋＋＋表示菌丝致密程度较致　密；＋＋＋＋＋表示菌丝非常致密。　

表２灵芝菌株的菌丝生长情况统计　

ｂＤ　＼　咖ｊ　

１５２　００　５Ｏ　Ｏ０　５０　Ｏ０　５０　０　２．２温型比较　

如表３所示，“仙芝２号”的合适培养温度为　２５～２８　ｃ【＝，与对照品及亲本菌株条件一致，最合适　

温度为２５℃或２６　ｑＣ，该结果说明“仙芝２号”温　型调控机制与其他菌株差异不大。　

表３各菌株合适的培养温度　

２．３耐高温能力分析　

如图２所示，“沪农１号”、“仙芝２号”、“仙　

芝１号”在不同温度下孢子粉日均产量存在差异，　田间观察发现在大棚３５℃温度条件下，对照品“仙　

芝１号”、“沪农１号”孢子均已停止弹射，“仙芝　２号”孢子仍能进行弹射，当温度３８℃以上才停止　

孢子弹射。　

Ｂ一１　８—６　８—１１　８—１６　８—２１　８—２６　８—３ｌ　９—５　日期／月一日　图２灵芝孢子粉日均产量变化曲线图　

２．４产量分析　

根据表４可以得知，在小区品比试验产量结果　

当中，“仙芝２号”在干芝产量、干孢产量方面均高　于“仙芝１号”和“沪农１号”。其中，每１００　ｋｇ　

段木单茬中“仙芝２号”干芝产量为１．９２　ｋｇ，同比　“仙芝１号”高出１５．１％，同比“沪农１号”高出　

１４．６％；仙芝２号干孢产量为２．１２　ｋｇ，同比“仙芝　１号”高出２４．１％，同比“沪农１号”高出２４．１％。　

表４　“仙芝２号”小区品比试验产量结果（　±ｓ，ｎ＝２７）