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制备固定化酶的依据
1.固定化酶必须能保持酶原有的专一性、 1.固定化酶必须能保持酶原有的专一性、高效催化 固定化酶必须能保持酶原有的专一性 能力和常温、常压下能起催化反应等特点。 能力和常温、常压下能起催化反应等特点。 2.固定化酶应能回收、贮藏，利于反复使用。 2.固定化酶应能回收、贮藏，利于反复使用。 固定化酶应能回收 3.固定化酶应用于机械化和自动化操作 固定化酶应用于机械化和自动化操作， 3.固定化酶应用于机械化和自动化操作，所用载体 常有一定的机械强度。 常有一定的机械强度。 4.固定化酶应能保持甚至超过原有酶液的活性 固定化酶应能保持甚至超过原有酶液的活性。 4.固定化酶应能保持甚至超过原有酶液的活性。即 要保护活性中心基团。 要保护活性中心基团。 5.固定化酶应能最大程度与底物接近 固定化酶应能最大程度与底物接近， 5.固定化酶应能最大程度与底物接近，从而提高产 具有最小的空间位阻。 量。具有最小的空间位阻。 6.固定化酶应有最大的稳定性 固定化酶应有最大的稳定性。 6.固定化酶应有最大的稳定性。 7.固定化酶应易与产物分离 固定化酶应易与产物分离。 7.固定化酶应易与产物分离。
随着固定化技术的发展，出现固定化菌体 1973年 随着固定化技术的发展，出现固定化菌体 。1973年，日 本首次在工业上应用固定化大肠杆菌菌体中的天门冬氨 酸酶，由反丁烯二酸连续生产L 天门冬氨酸。 酸酶，由反丁烯二酸连续生产L-天门冬氨酸。 在固定化酶和固定化菌体的基础上，70年代后期出现了 在固定化酶和固定化菌体的基础上，70年代后期出现了 固定化细胞技术 技术。 1976年 固定化细胞技术。 1976年，法国首次用固定化酵母细胞 生产啤酒和酒精，1978年日本用固定化枯草杆菌生产淀 生产啤酒和酒精，1978年日本用固定化枯草杆菌生产淀 粉酶，开始了用固定化细胞生产酶的先例。 粉酶，开始了用固定化细胞生产酶的先例。 1982年 日本首次研究用固定化原生质体生产谷氨酸， 1982年，日本首次研究用固定化原生质体生产谷氨酸， 固定化原生质体生产谷氨酸 取得进展。固定化原生质体由于解除了细胞壁的障碍， 取得进展。固定化原生质体由于解除了细胞壁的障碍， 更有利于胞内物质的分泌， 更有利于胞内物质的分泌，这为胞内酶生产技术路线的 变革提供了新的方向。 变革提供了新的方向。

蛋白类酶主要由蛋白质组成，酶蛋白的侧链基团是指组成蛋白质 的氨基酸残基上的功能团。主要包括氨基、羧基、巯基、胍基、 酚基、咪唑基、吲哚基等。这些基团可以形成各种副键，对酶蛋 白空间结构的形成和稳定有重要作用。侧链基团一旦改变将引起 酶蛋白空间构象的改变，从而改变酶的特性和功能。
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氨基修饰

采用某些化合物使酶分子侧链上的氨基发生改变，从而改 变酶蛋白的空间构象的方法称为氨基修饰。

修饰反应尽可能在酶稳定条件下进行，并尽量不破坏酶活 性功能的必需基团，使修饰率高，同时酶的活力回收高。 （1）pH与离子强度

pH决定了酶蛋白分子中反应基团的解离状态。由于它们的 解离状态不同，反应性能也不同。
（2）修饰反应的温度与时间

严格控制温度和时间可以减少以至消除一些非专一性的修 饰反应。

(4)分离：酶经过大分子结合修饰后，不同酶分子的修饰效果往往有所差别，需要通过凝 胶层析等方法进行分离，将具有不同修饰度的酶分子分开，从中获得具有较好修饰效果 的修饰酶。
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大分子结合修饰的作用：

(1)通过修饰提高酶活力：每分子核糖核酸酶与6.5分子的右旋糖酐 结合，可以使酶活力提高到原有酶活力的2.25倍；每分子胰凝乳蛋 白酶与11分子右旋糖酐结合，酶活力达到原有酶活力的5.1倍。 (2)通过修饰降低或消除酶蛋白的抗原性：酶对人体来说是一种外源 性蛋白。当酶进入体内会成为一种抗原，刺激体内产生抗体；酶再 次进入体内，抗体就能和酶特异性结合，酶失去催化功能。二者的 特异结合是由它们之间特定的分子结构引起的。通过酶分子修饰， 使酶结构发生改变，可大大降低甚至消除酶的抗原性，从而保持催 化功能。


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2 酶分子修饰的基本要求和条件

Chapter 5: The Victorian Period （维多利亚时代）part 1 Historical Background➢Time Span (para.1, p156)1837-1901 to coincide with the reign of Queen Victoria（维多利亚女王的统治时期）➢Victorian Period can be divided into 3 parts/stages:The early Victorian period（早）The mid-Victorian period（中）The late Victorian period（晚）Victorian Period is an extremely diverse and contradictory age. (para.1, p156)维多利亚时代是一个极其多样化和矛盾的时代。

imperial expansion, political reform, scientific progress帝国扩张，政治改革，科学进步Cruel exploitation, social injustice, desperate poverty残酷的剥削，社会不公，极度的贫困It was an age of “paradise for the well-to-do, a purgatory for the able, and a hell for the poor. 那是一个富人的天堂，能人的炼狱，穷人的地狱的时代。

-John Morley 早期的维多利亚时代(para.2, p156)1.Industrial Revolution （工业革命）→introduction of coal & steam engine(煤和蒸汽机)→transportation --> world trade market(运输—世界贸易市场)→profound economic & social changes（深刻的经济社会变革）2.Industrial Revolution (工业革命)→make up a new kind of working class(组成了一种新的工人阶级)→horrifying slums & cramped row housing(可怕的贫民窟和拥挤的排屋)→A huge gap between the rich and the poor(贫富之间的巨大差距)3. THE REFORM BALL of 1832 (议会通过选举改革法案)①It extended the voting rights to the men of the middle class.它扩大了中产阶级男性的投票权。

Chapter 5 英汉词法翻译技巧第二节省略法（omission）省略译法——是指出于译文语法和习惯表达法的需要，把原文中需要而译文中又不需要的单词、词组等在翻译过程中加以省略的翻译方法。

原文中有些词在译文中不译出来，是因为译文中虽无其词而已有其意，或者在译文中是不言而喻的。

换言之，省略是删去一些可有可无的，或者是那些如在译文中保留下来则会使语言表达累赘啰嗦或不合汉语语言表达习惯的词语，而不是把原文的某些思想内容删去。

省略法一般用于以下两种情况：一是从语法角度进行省略；二是从修辞角度进行省略。

一、从语法角度英汉两种语言在语法上差异较大，如：英语有冠词，汉语没有；英语重形合、连接词较多，汉语重意合、连接词较少；英语介词丰富，多达280多个，汉语介词较少，只有30来个；英语中经常使用代词，尤其是经常使用人称代词、关系代词等，汉语中代词则用得较少。

因此，英译汉时可在不损害准确传达原文内容的前提下根据具体情况将冠词、连接词、介词、代词等省略，使译文练达晓畅。

省略冠词1) A teacher should have patience in his work. （表类别）2)The horse is a useful animal.3)The moon was slowly rising above the sea. （独一无二）4)He left without saying a word.5)Robert said he was getting a dollar a mile. 每开一英里就赚一块钱6)The children are of an age.省略连接词7)He looked gloomy and troubled. （并列）忧愁不安8)Despite the privation, and the mounting toll of dead and wounded, however, morale remained intact, andpeople still smile in the street. 尽管供应不足，伤亡增加，然而士气并未受到影响。