LSC-C-SC.2-011 氨基酸生产ISO文件 苯丙发酵三级文件之30m3种子罐实消标准操作规程
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lsc-C-SC.2-011 1-2
**集团氨基酸事业部
1目的：通过建立种子罐实消操作规程，以规范种子罐实消操作。
2范围：本标准适用于发酵车间种子罐。
3责任：发酵车间操作人员、发酵车间主任对本规程实施负责，QA 监督。
4内容：
4.1实消内容
负责种子罐实消工作，以保证培养基消后无菌度。
4.2操作程序
4.2.1关闭空气进气阀门，全开排气阀门，卸去罐内压力。
压力表上显示为“0”，取出PH、溶氧电极安装孔内的孔塞。
注意：此时罐内必须没有压力。
将标定好的PH、溶氧电极安装到罐体电极插孔内（电极标定参考电极标定操作规程），电极用螺母固定好与控制系统相连。
4.2.2发酵罐体进行无菌空气试压，固定好罐盖螺栓，注意：发酵罐盖密封垫应放平衡，螺栓应对称；螺栓和各接口螺母牢靠即可。
不要拧得过紧，防止损坏螺栓和橡胶密封圈。
关闭液氨第一阀、接种口阀、排气阀、取样口第一阀、罐底第一阀，慢慢开启无菌空气阀门向罐内通入空气，待罐内压力上升到0.11——0.13MPa 稳定后，关闭空气进气阀；开始用5%洗衣粉水进行试压，具体操作为把配制好的洗衣粉水喷洒到接种口阀上看是否有气泡冒出，若无则阀门无泄漏，否则要进行更换。
观察压力表有无变化，压力表与罐体接触处喷洒配制好的洗衣粉水，观察有无气泡冒出。
搅拌轴封喷洒配制好的洗衣粉水，观察气泡情况，确认搅拌轴封是否密封。
罐面视镜周边喷洒，观察密闭性。
全开取样阀门第二阀，使取样口全部浸入装有配制好的洗衣粉水内，观察有无气泡，来判断取样第一阀阀门的完好性。
无误后关闭阀门，全开取样第一阀阀门，同样方法来验证取样第二阀阀门气密性。
罐底阀第一阀气密性验证，关闭阀门罐底第二阀、罐底蒸汽阀、罐底排污阀，开启罐底第一阀小排气同样用配制好的洗衣粉来验证是否有气泡冒出；随后打开排污阀门及小排气。
对于刚刚装入的PH、溶氧电极螺母外壳喷洒洗衣粉水，观察是否有气泡冒出来判断电极接口的密闭性。
空气通入后维持时间为20 分钟，若压力表无变化证明罐体气密性良好可以使用。
4.2.3罐体空气试压结束后，慢慢开启排气阀，要求排气阀门全开，卸去罐内压力。
压力表上显示为“0”，打开罐盖。
lsc-C-SC.2-011 **集团氨基酸事业部2-2 4.2.4打料检修、试压结束后关闭阀门罐底第一阀、取样口第一阀，打开阀门打料阀将配制好的培养基料液打入发酵罐内。
关闭罐盖。
4.2.5实消开启控制系统搅拌电源进行低速运转。
注意：培养基实消灭菌过程中蒸汽将会带入一定量的凝结水，使培养基的体积升高。
因此培养液加入罐内后应补加水至工艺要求的体积，初次使用发酵罐实消时应当减少配料时加入水的量，待明确实消过程增加的凝结水量后再调整配料体积。
4.2.6升温：先关闭阀门循环水阀，再开启阀门列管排空阀，最后开启列管蒸汽阀。
进行夹套排空同时对于发酵料液进行预热。
待发酵罐温度上升到60 度后，关闭列管蒸汽阀门。
1）检查阀门进气阀、液氨阀门、罐底第二阀、排污阀是否全部关闭，微开阀门各个小排气；全开阀门罐底第一阀。
2）慢慢开启罐顶蒸汽阀门通过空气管道、罐底蒸汽阀通过放料管道分别向罐内通入蒸汽；3）实消取样口阀门开启顺序开启取样口蒸汽、取样口第一阀、第二阀；冲视镜阀门开启顺序视镜蒸汽第二阀、小排气、第一阀。
微开的阀门使其有少量蒸汽流出。
4）罐温达到灭菌温度后，根据蒸汽进入量调节罐顶、罐底蒸汽阀门，并调节排气阀开度，使罐压稳定在0.11——0.12MPa 之间，温度控制在121——123℃，实消一般维持保压时间为30 ——40min。
注意：实消过程压力最高不得超过0.15MPa，超压可能会损坏设备并出现危险，且由于高温或者时间太长对于培养基营养也造成一定的破坏。
在实消过程中阀门排空阀应一直处于开启状态。
发酵液升温的时间应控制在一定时间内，如果升温时间太短，发酵罐顶部温度有可能达不到灭菌温度，造成灭菌不彻底。
4.2.7计时结束后，先关闭排气阀；从罐底蒸汽来讲先关闭罐底第一阀、然后再关闭蒸汽阀；罐面关闭各个小排气，在关闭罐底蒸汽阀；冲视镜先关闭小排气，再关闭视镜蒸汽第一阀，最后关闭视镜蒸汽第二阀。
取样口蒸汽关闭依次为取样口第一阀、取样口第二阀、取样口蒸汽阀。
使取样口蒸汽阀未开，然后对于取样口第二阀也未开有少量蒸汽流出。
水系统关闭排空阀，开启循环水进水阀；然后开始降温。
同时打开空气进气阀门向罐内通入空气，调节排气阀门。
保证罐压维持在0.05——0.1MPa，空气流量在300——400m3/h。
注意：在降温过程中必须注意罐顶压力表的示数，适当调节空气进气阀，使罐压维持在0.05MPa左右。
不得过低，否则极易吸入外界空气造成发酵染菌。
4.2.8实消结束，做好实消记录
5相关记录
5.130m3种子罐实消标准操作规程记录。
