植物组织培养实训指导书班级：园林1421、1521教师：张璐璐实训一植物组织培养室参观与设计一、目的要求通过参观，使学生掌握如何组建植物组织培养实验室；同时，熟悉组培中涉及的各种仪器设备和器皿用具。
二、仪器与用具1 、仪器：超净工作台，空调机，蒸馏水发生器或纯水发生器，高压灭菌锅，低温冰箱、普通冰箱，电炉，显微镜，天平、恒温培养箱，烘箱等设备。
2 、用具：各种培养皿，分注器，各种实验器皿和各种器械用具。
三、方法步骤1 、先由指导老师集中介绍组织培养实验室守则及有关注意事项。
2 、先由指导老师讲解本次实验的目的、仪器设备和器皿用具的名称及实验步骤。
3 、指导老师逐一讲解组培实验室的构建情况，包括准备室（又称化学实验室）、缓冲室、无菌操作室、培养室、驯化室、温室等使用的各种仪器设备和器皿用具的名称用途。
1 ）准备室（化学实验室）面积：20m2 左右用途：器皿洗涤、培养基配置、分装、高压灭菌，植物材料的预处理，重蒸馏水的制备以及进行生理、生化因素的分析，试管苗出瓶，清洗及整理工作。
要求：明亮、通风设备：工作台，橱柜，水池，仪器，药品等2 ）缓冲室面积：约3-5m 2 左右用途：进入无菌室前需在缓冲室里换上经过灭菌的工作服、拖鞋，戴上口罩。
设备：1 盏紫外灯，1 个配电板，石英电力时控器等3 ）无菌操作室（无菌室，接种室）面积：10-20m 2 ，视生产规模和超净工作台数量而定。
用途：材料的灭菌接种，无菌材料的继代，丛生菌的增殖或切割，嫩枝扦插生根等，是关键的部分，关系到培养物的污染率、接种工作效率等重要指标。
要求：干爽安静、清洁明亮、墙壁光滑平整不易积染灰尘，地面平坦无缝便于清洗和灭菌。
门窗要密闭，一般用移动门窗。
设备：超净工作台、空调机，医用小平车，操作台、搁架等。
4 ）培养室面积：视培养架多少及培养物数量而定。
用途：将接种到培养瓶等器皿中的植物材料进行培养的场所。
设备：①培养架与灯光培养架数目多少视生产规模而定，年产4万—10万苗需4—6个培养架；年产10万—20万苗约需8—10个培养架。
组培实验仪器配置清单植物组织培养(Planttissueculture)是以植物生理学为基础发展起来的一门新生的生物技术学，科针对此项目，托普云农特整理出组培实验仪器配置清单供新老客户参考。
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植物组培实验室设置条件及器具一、实验室组成二、基本设备三、培养器皿及实验用具四、无菌条件及创设五、无菌操作六、组培的环境条件和营养条件组织培养实验室布局的总体要求基本实验室辅助实验室实验室组成准备室缓冲室无菌操作室培养室细胞生物学实验室温室生化分析实验室基本实验室布局平面图实验台搁架培养架培养架培养架培养架药品及仪器柜无菌台无菌台搁架拉窗冰箱搁架水槽电炉门 4.5m 3.0m 3.5m 4.0m 准备室缓冲室无菌室培养室组织培养准备实验室缓冲室培养室无菌室（一）无菌室（二） 1 冰箱酸度计电炉天平纯水器培养基分装器搅拌器2、灭菌设备蒸汽压力灭菌锅、干热消毒柜、过滤灭菌装置、喷雾消毒器、紫外灯。
蒸汽压力灭菌锅干热消毒柜无菌瓶顶过滤装置喷雾消毒器（参考图）（参考图）3、无菌操作设备超净工作台无菌接种箱4、细胞培养设备摇床培养架H Z C - 2 5 0 恒温振荡培养箱1 5 0 C 2 5 0 D 光照培养箱5、细胞学鉴定设备光学研究显微镜、实体显微镜、倒置显微镜倒置显微镜光学显微镜1、玻璃器皿三、培养器皿及实验用具培养皿三角瓶培养瓶2、金属材质用具镊子解剖刀接种针无菌条件物理方法：物理灭菌干热、湿热、射线处理、物理除菌、过滤、离心、沉淀等化学方法：消毒剂、抗菌素灭菌1、灭菌方法2、灭菌（1）培养基灭菌：高温高压湿热灭菌法压力在9.8×10 4 —10.8×10 4 Pa 温度在121℃灭菌20—30min （2）玻璃器皿灭菌：蒸汽高压消毒灭菌干热消毒灭菌（3）塑料器皿灭菌：多采用高压蒸汽消毒灭菌（4）金属用具灭菌：灼烧灭菌浸入95%酒精，后置于酒精火焰上灼烧，冷却后使用（5）接种室灭菌空气消毒灭菌接种室超净工作台紫外灯照射70%—75% 的酒精擦洗培养材料的接种紫外灯照射（6）外植体灭菌流水冲洗10—20min 或更长时间70%—75% 酒精中浸泡30s 0.1%—0.2%氯化汞液中浸泡10min左右蒸馏水冲洗4—5次在10%的次氯酸钠、饱和漂白粉浸泡30min左右备用六、无菌操作实验员消毒实验室、无菌台灭菌实验器材的灭菌无菌接种消毒实验台卫生培养室培养1、消毒，更换实验服、帽子与鞋子，进入接种室。
