原发性皮肤T细胞淋巴瘤的T细胞受体基因重排分析

皮肤T细胞淋巴瘤中CD25的表达与组织学分级及患者对地尼白介素的治疗反应相关Talpur R.;Jones D.M.;Alencar A.J.;M. Duvic;吴佳纹【期刊名称】《世界核心医学期刊文摘：皮肤病学分册》【年(卷),期】2006(0)5【摘要】Denileukin diftitox (Ontak ), a recombinant fusion protein of diphtheria toxin and ligand, IL-2, binds to the IL-2 receptor, is internalized, and causes cell death. Denileukin diftitox was approved for the treatment of cutaneous T-cell lymphomas (CTCLs) with CD25+ expression. We prospectively stained lesional skin biopsy specimens from 113 mycosis fungoides and S′ ezar y Syndrome patients for activation markers CD25 and CD30 to correlate expression with clinical tumor-node metastasis (TNM) stage, histologic grade, and response to denileukin diftitox. High expression was defined as positivity of ≥ 20% of lesional T-cells using immunohistochemistry (IHC). CD25 and CD30 expression was more common in lesions from advanced patients (P = 0.04 and 0.002, respectively). Advanced TNM(T3 or T4) was significantly associated with intermediate grade (P = 0.002) and large-cell transformation histology (P = 0.04). Of interest, clinical responses were observed in 78.5% of patients with high CD25 expression versus 20% with low to undetectable CD25 expression (P = 0.01) among 24 patients receiving standard 5-day infusions of denileukin dift itox at 18 μ g/kg/day. These data suggest thathigh CD25 expression by IHC is associated with advanced CTCL and with clinical response to denileukin diftitox therapy.【总页数】1页(P17-17)【关键词】CD25;细胞生长;蕈样肉芽肿;淋巴瘤;免疫组化法;细胞阳性率;临床反应;活检标本;淋巴结转移;白喉【作者】Talpur R.;Jones D.M.;Alencar A.J.;M. Duvic;吴佳纹【作者单位】Department of Dermatology, University of Texas MD Anderson Cancer Center, 1515 Holcombe Boulevard, Houston, TX 77030-4095, United States Dr.【正文语种】中文【中图分类】R739.5【相关文献】1.慢性心力衰竭患者T细胞CD25表达水平及卡维地洛对T细胞体外活化CD25表达的作用 [J], 王昌会;徐岩;吴继雄;王爱玲2.CD4～+CD25～+调节性T细胞、血清CRP、IL-35水平在慢性牙周炎患者中的表达及其与病变程度相关性探讨 [J], 刘淑琴; 罗玉; 彭二梅3.通过多重PCR/异源双链分析皮肤T细胞淋巴瘤(蕈样肉芽肿/Sézary综合征)和良性炎症性疾病患者的T细胞受体γ基因重排:临床、组织学和免疫表现型结果的相关性 [J], Ponti R.;Quaglino P.;Novelli M.;M.G. Bernengo;刘艳4.原发性皮肤大B细胞淋巴瘤患者中与疾病特异性存活时间相关的bcl-6和MUM1/IRF4蛋白的表达:组织芯片研究 [J], Sundram U.;Kim Y.;Mraz-Gernhard S.;李政霄5.FDA批准地尼白介素-2治疗皮肤T细胞淋巴瘤 [J], 罗恒因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

形态学整合入门——ALL形态学、免疫表型和染色体核型与基因重排或突变在实验室诊断中，ALL诊断与AML有许多相似之处。

尤其是诊断的开始阶段，两者有时较难区分，合称急性白血病。

ALL诊断的线索也始于血常规和骨髓形态学检查。

但在后续检查中，相对而言，免疫表型分析比AML为重要。

这里简要介绍ALL形态学与免疫表型和细胞遗传学与基因重排或突变类型之间的一些关系。

一、分类2016版WHO修订的原始淋巴细胞白血病/淋巴瘤中，将原始淋巴细胞肿瘤分为（急性）原始B淋巴细胞白血病（B acute lymphoblstic leukaemia，B-ALL）/原始B淋巴细胞淋巴瘤（B lymphoblastic lymphoma，B-LBL）、（急性）原始T淋巴细胞白血病（T acute lymphoblstic leukaemia，T-ALL）/原始T淋巴细胞淋巴瘤（T lymphoblastic lymphoma，T-LBL）和原始NK淋巴细胞白血病/淋巴瘤，3个大类。

在B系和T系中再分为特定类型和非特定类型，见表1。

表1 原始淋巴细胞白血病/淋巴瘤分类（WHO，2016）原始B淋巴细胞白血病/淋巴瘤（B-ALL/LBL）B-ALL/LBL伴t(1;19)(q23;p13.3);CF3-PBX1B-ALL/LBL伴重现性遗传学异常暂定类型：B-ALL/LBL伴BCR-ABL1样B-ALL/LBL伴t(9;22)(q34.1;q11.2);BCR-ABL1暂定类型：B-ALL/LBL伴iAMP21B-ALL/LBL伴t(v;11q23.3);KMT2A重排B-ALL，非特定类型（NOS）B-ALL/LBL伴t(12;21)(p13.2;q22.1); ETV6-RUNX1原始T淋巴细胞白血病/LBL（T-ALL/LBL）B-ALL/LBL伴超二倍体暂定类型：早T前体原始淋巴细胞白血病B-ALL/LBL 伴低二倍体 T-ALL ，非特定类型（NOS ） B-ALL/LBL 伴t(5;14)(q31.1;q32.3);IL3-IGH* 暂定类型：原始NK 淋巴细胞白血病/淋巴瘤*原始淋巴细胞可<> 二、诊断初诊ALL 病例，由形态学的基本诊断，免疫表型确定系列，到WHO 分类的特定类型和非特定类型的诊断，归纳的总结见图1。

骨髓穿刺淋巴瘤免疫分型标准一、概述。

骨髓穿刺在淋巴瘤的诊断、分期及治疗监测中具有重要意义。

淋巴瘤免疫分型则有助于明确淋巴瘤的细胞起源、分化阶段以及特定的免疫表型特征，从而为精准诊断和个性化治疗提供依据。

二、常用标记物及其意义。

（一）B细胞相关标记物。

1. CD19.- 几乎所有正常和恶性B细胞均表达CD19。

它是B细胞系特异性抗原，在B细胞发育的早期就开始表达，从祖B细胞到成熟B细胞阶段持续存在。

在骨髓穿刺淋巴瘤免疫分型中，CD19阳性有助于确定肿瘤细胞是否来源于B细胞系。

2. CD20.- CD20是一种跨膜磷蛋白，表达于除浆细胞（终末分化的B细胞）外的几乎所有B细胞发育阶段。

在淋巴瘤免疫分型中，许多B细胞淋巴瘤，如弥漫大B细胞淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤等常表达CD20。

这一标记物不仅可用于诊断，还可作为利妥昔单抗等治疗性单克隆抗体的靶点。

3. CD22.- CD22主要表达于成熟B细胞表面，在B细胞活化过程中起调节作用。

它在大多数B细胞淋巴瘤中表达，与CD19和CD20等标记物共同用于确定B细胞淋巴瘤的免疫表型。

（二）T细胞相关标记物。

1. CD3.- CD3是T细胞表面的重要标记物，存在于所有成熟T细胞表面。

它由多个亚基组成，在T细胞受体（TCR）信号转导中起关键作用。

在骨髓穿刺免疫分型中，CD3阳性表明细胞可能为T细胞来源，有助于区分T细胞淋巴瘤和其他类型的淋巴瘤。

2. CD4.- CD4主要表达于辅助性T细胞（Th细胞）表面，与MHC - II类分子结合，在免疫应答的调节中发挥重要作用。

在T细胞淋巴瘤中，如外周T细胞淋巴瘤，部分肿瘤细胞可表达CD4，通过检测CD4表达情况有助于对T细胞淋巴瘤进行进一步的分型和分析。

3. CD8.- CD8表达于细胞毒性T细胞（CTL）表面，与MHC - I类分子结合，识别并杀伤靶细胞。

在某些T细胞淋巴瘤中，CD8的表达情况可以为肿瘤的诊断和分型提供线索。

（三）其他标记物。

外周T细胞淋巴瘤（非特指型）诊疗规范（征求意见稿）苏州大学附属第一医院血液科1. 概述外周T细胞淋巴瘤（Peripheral T-cell lymphoma, PTCL）是一组起源于胸腺后成熟T 淋巴细胞的淋巴系统恶性肿瘤。

NCCN2014版明确指出PTCL包括4类亚型：外周T细胞淋巴瘤-非特指型（Peripheral T-cell lymphoma, not otherwise specified, PTCL-NOS），血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤（angioimmunoblastic T-cell lymphoma, AITL），间变大细胞淋巴瘤（anaplastic large cell lymphoma, ALCL）和肠病相关T 细胞淋巴瘤（Enteropathy associated T-cell lymphoma, EATL）。

外周T细胞淋巴瘤，非特指型（PTCL-NOS）是PTCL中最常见的亚型。

所谓“非特指型”，是强调这一亚型与已明确的各种独立的成熟T细胞淋巴瘤均不符合，即PTCL-NOS其实是一大组不属于已明确的任何一类独特亚型的成熟T细胞淋巴瘤。

PTCL-NOS是一类异质性疾病，在细胞形态学、遗传学、分子生物学和临床表现等方面均无特异性。

本病属于排除性诊断，即只有在排除其它独立分型的T细胞淋巴瘤后，方能做出PTCL-NOS的诊断。

本病临床表现为侵袭性病程，对化疗不敏感，易复发，5年生存率仅为25～45%。

2. 流行病学PTCL-NOS是最常见的T细胞淋巴瘤亚型。

在西方国家，PTCL-NOS占所有NHL的7%～10%，占PTCL发病的30%。

而亚洲国家发病率更明显高于欧美，占所有NHL的15%～22%，占PTCL发病的50%。

发病常见于中老年人，中位年龄55岁，儿童少见。

男性多见，男女比例约为2:1。

3. 病因及发病机制本病病因尚未明确，可能与EBV感染有一定关系，也可能与自身免疫功能降低或周围环境影响有关。

TCR重排一、临床意义：近年来小儿急性淋巴细胞白血病的发生日趋增多, 并且在成年人的发病率也呈增长的趋势, 虽然部分患者经过化疗或干细胞移植, 能够达到临床或血液学的完全缓解( Complete Remission, CR) , 但白血病微小残留病(Minimal Residual Disease, MRD) 导致白血病复发的问题一直困扰着医务人员。

目前检测MRD 的手段很多, 如流式细胞仪检测白血病细胞、RT-PCR 检测白血病基因等方法, 其中白血病基因检测具有灵敏度高的特点具有很高的参考价值。

然而淋巴细胞白血病因为不具有高特异性的白血病基因, 所以在MRD 的监测上比较困难。

1、TCR基因重排技术是检测淋巴细胞克隆性增生的金标准，应用于恶性淋巴瘤的早期诊断和鉴别诊断有重大意义，特别是对于经常规HE、免疫组化检测仍不能确诊的病例有较好的用途和前景。

非霍奇金淋巴瘤是发生于单一亲本细胞的单克隆恶性增殖，瘤细胞的基因重排高度一致。

而正常淋巴组织和良性淋巴组织增生性疾病呈多克隆性，因此可作为非霍奇金淋巴瘤的基因标志。

TCRγ或TCRβ基因重排常作为T 细胞淋巴瘤的基因标志，阳性率可达70%～80%。

为非霍奇金淋巴瘤的诊断、分型及评估预后提供参考依据。

由此可见TCR 基因重排是淋巴细胞恶性增生的特异性标志。

2、我们通过对T 细胞受体(Tcell receptor , TCR) 检测以及它们在监测MRD 中的临床意义的研究, 观察到这种TCR基因重排的检测持续阳性的患者, 更容易导致白血病的早期复发。

因而在ALL 病程中对TCR基因重排进行动态监测, 极大的提高MRD 检出的特异性和敏感性,对ALL患儿的预后、复发的判断及制定相应的个体化治疗方案有重要的指导意义,可以使患儿最大程度的长期无病生存,减少化疗所致的远期不良反应。

二、检测方法：1、S outhern杂交技术（印迹杂交）优点是稳定、可靠, 被称为基因重排的金标准,缺点是成本较高, 需要较多新鲜组织、操作复杂和费时, 且国内收费标准较低, 无法广泛应用于淋巴瘤的鉴别诊断。

肝脾T细胞淋巴瘤13例临床病理分析及预后陈旭;赵武干;王冠男;李文才【摘要】目的探讨肝脾T细胞淋巴瘤(HSTCL)的临床病理学特点、诊断及鉴别诊断.方法收集13例HSTCL的临床资料并进行形态学观察,应用免疫组化和TCR基因重排检测,并复习相关文献.结果 13例瘤细胞CD2、CD3、CD7均阳性,T细胞限制性胞内抗原TIA-1、CD56部分阳性,细胞毒性相关分子粒酶B(Granzyme-B)、EBER阴性.11例标本TCR克隆性重排检测阳性.13例患者临床治疗方案不同(脾切除术后化疗,保脾化疗,自体造血干细胞移植),随访6～58个月,预后均较差.结论HSTCL是一类罕见的结外侵袭性外周T细胞淋巴瘤,其病理表现多样且独特,结合免疫表型、TCR基因重排可确诊.【期刊名称】《河南外科学杂志》【年(卷),期】2019(025)003【总页数】3页(P1-3)【关键词】肝脾T细胞淋巴瘤;γδT细胞抗原受体;TCR基因重排【作者】陈旭;赵武干;王冠男;李文才【作者单位】郑州大学第一附属医院病理科郑州 450052;郑州大学第一附属医院病理科郑州 450052;郑州大学第一附属医院病理科郑州 450052;郑州大学第一附属医院病理科郑州 450052【正文语种】中文【中图分类】R730.263肝脾T细胞淋巴瘤(Hepatosplenic T cell lymphoma，HSTCL)是一种较罕见的外周T细胞淋巴瘤(Peripheral T cell lymphoma，PTCL)，占非霍奇金淋巴瘤的10%～20%，占所有外周T细胞淋巴瘤的5%以下[1]。

1990年首次提出，1994年被REAL分型确认为一个独立的淋巴瘤亚型。

根据T细胞受体(T-cell receptors，TCR)的不同，HSTCL分为γδ和αβT细胞淋巴瘤两种亚型，前者占绝大多数。

WHO(2001)淋巴造血系统肿瘤分类将其正式归入PTCL，命名为HSTCL。

石蜡淋巴瘤组织中IgH FR3区基因重排引物分析齐宗利1,2,张　宝2,韩西群1,霍　霞2,朱梅刚1,赵　彤1摘要:目的　利用生物信息学方法分析免疫球蛋白重链(I gH )框架区(FR3)基因重排引物并探讨其在石蜡包埋非霍奇金淋巴瘤(NHL )组织中应用价值。

方法　通过ClustalW 软件比较44条有效的I gH 可变区和6条J 区的基因片段,选取I gH FR3区3对(P1,P2,P3)基因重排引物,其中,P2为改进的引物。

另选一对T CRγ引物作为T 细胞淋巴瘤重排引物,通过PCR 扩增,检测经形态学及免疫组织化学确诊的144例石蜡包埋组织标本,包括113例B 细胞淋巴瘤、24例T 细胞淋巴瘤和7例淋巴结反应性增生组织。

以DG75淋巴瘤细胞系DNA 作为对照组。

结果　引物对P1、P2、P3在B 细胞淋巴瘤检出阳性率分别为7117%(81/113),8213%(93/113)和7611%(86/113),三者检出率差异无统计学意义;在T 细胞淋巴瘤检出率分别1215%(3/24)、1215%(3/24)、1617%(4/24)。

将P1和P2引物组合分析,B 细胞淋巴瘤阳性检出率可以达到9213%。

以上重排引物在7例反应性淋巴结中均未检出。

结论　3对I gH FR3区中,新改进的P2引物在B 细胞淋巴瘤中的检出率最高(82.3%)。

2对I gH FR3区引物联合检测可明显提高石蜡组织中B 细胞淋巴瘤的检出率。

关键词:淋巴瘤;B 淋巴细胞;基因重排;聚合酶链反应;石蜡包埋中图分类号:R 392.12;R 73314 文献标识码:A 文章编号:1001-7399(2008)01-0091-05Ana lysis of im m unoglobuli n heavy cha i n gene rearrangem en t by the fram e reg i on 3pr i m ers and the i r appli ca ti on i n paraff i n 2em bedded lym phoma tissuesQ I Z ong 2li 1,2,ZHANG Bao 2,HAN Xi 2qun 1,HUO Xia 2,Z HU Mei 2gang 1,ZHAO Tong 1(1D epart m ent of Pathology,N anfang M edical U niversity,Guangzhou 510515,China;2the Key I mm unopathology L aboratory ofGuangdong Province,Shantou U niversity M edical College,Shantou 515041,China )Abstract:Purpose To analyze i m munogl obulin heavy chain (I gH )rearrangement by fra me regi on 3(FR3)p ri m ers and t o exp l ore their app licati on in paraffin 2e mbedded ly mphoma tissues .M ethods Three pairs of p ri m ers fr om I gH FR3regi on (P1,P2and P3)were chosen with comparis on of 44I gH variable and 6j oined regi on gene frag ments by the ClustalW s oft w are,of which the P2p ri m er was modified .144cases of hist opathol ogically confir med ly mphop r oliferative sa mp les included 113cases of B cell ly mphoma,24cases of T cell ly mphoma,and 7cases of reactive p r oliferative ly mph nodes .The DNA fr om DG75and Jurkat cell lines were emp l oyed as positive contr ols of B and T cell ly mphoma,res pectively .Results The positive rates of I gH FR3regi on p ri m ers (P1,P2and P3)were 7117%(81/113),82.3%(93/113),and 7611%(86/113)in 113cases of B cell ly mphoma,and 1215%(3/24),1215%(3/24),and 1617%(4/24)in 24cases of T cell ly mphoma,res pectively .There was no significantly statistical difference a mong three I gH FR3p ri m ers in detecti on of 113cases of B cell ly mphomas .The positive rate could be increased t o 9213%by combined use of the P1and P2p ri m ers .There were no positive cases a mong 7cases of p r oliferative ly mphoid tissues .Conclusi on Among 3I gH FR3regi on p ri m ers,ne wly modified P2p ri m er has a high detecti on rate in the gene rearrange ment of paraffin 2e mbedded ly mphoma tis 2sues .The detecti on rate could be increased by combining the t w o I gH FR3p ri m ers in the I gH gene rearrange ment analysis .Key words:ly mphoma;B cell;gene rearrange ment;PCR;paraffin e mbedded tissues收稿日期:2007-05-10　修回日期:2007-12-28基金项目:广东省社会发展攻关项目(No B30101)、广州市科技计划项目(No Z32E4061)作者单位:1南方医科大学南方医院病理科,广州　5105152汕头大学医学院中心实验室,汕头　515041作者简介:齐宗利,男,副教授,博士,E 2mail:qiz ongli@赵　彤,教授,博士生导师,通讯作者。