盐酸甜菜碱安全性的初步评价

中国兽医学报２００２年５月第２２卷第３期Ｃｈｉｎ　Ｊ　Ｖｅｔ　Ｓｃｉ Ｍａｙ　２００２ Ｖｏｌ．　２２ Ｎｏ．　３３０９

盐酸甜菜碱安全性的初步评价

汪以真，，王友明’，傅剑云’（１浙江大学饲料科学研究所教育部动物分子营养学重点实验室，浙江杭州３１００２９

２．浙江省卫生防疫站，浙江枕州３１０００９）

摘耳：通过大民、小双急性经口辛性试脸，大久蓄积毒性试脸致突史试脸（小裁徽杖试脸和小民精子崎形试脸），探讨

了业胶粉莱城作为ｔ禽钩并添加荆的安全性。枯果表明，盆故错莱碱属实际无毒奥物质无明显蓄积作用。无致史变

性，是一种安全的炯料添加荆。

关．诩：盐改粉莱城；安全性．评价；佣料添加别；小民；大及

中．分类号：３８１６．７文艘标识码：Ａ文＊０４：　１００５－４５４５（２００２）０３－０３０９－０２

甜菜碱的化学本质是三甲墓甘氛酸，在动物体甲基代谢

中起粉非常，要的作用川。它能促进畜禽生长，降低胭体脂肪

沉ＶＬ．ｘ７提高奋ｔ胭体品质和肉的色、香和味！，７．因而广泛

用于，禽饲料添加剂。甜菜碱的毒性较小，大鼠静注２．４　ｇ／ｋｇ

未见毒性产生，小鼠皮下注射ＬＤ。为１８．１　ｇ／ｋ彭ｓｊ，但有关盐

吐甜菜杖的安全性毒理学评价尚未见报道

１材料与方法

１．１交试一盐酸甜菜碱，浙江大学饲料科学研究所生产，

样品为白色晶体

１．２劝．昆明种小鼠，浙江省药检所实验动物中心提供

（合格证号：浙动字第２２－９６０１０１７）；ＳＤ大限．浙江省实验动物

中心提供（合格证号：浙实脸动物质ｔ准字９６００１号）。

１．３阳性对抓物环碑胜胺，上海第十二制药厂生产。

１．４急性．性城挂［．ｌ取健康小鼠、大眼各４０只（小眼体重

１８－２２　ｇ，大眠１８０－２２０　ｇ），观察１周后，随机分成４个剂ｆ

组（每组１０只，雌雄各半），即２．１５，４．６４，１０．００和２１．５０　ｇ／

ｋｇ．样品用燕抽水配制，按等容ｆ法（小叹每１０　ｇ体，。．２

ｍＬ，大叹每１００　ｇ体重２　ｍＬ）月胃接毒。采用２４　ｈ一次经口

祖胃方式。染毒后，每日观察动物中毒症状和死亡情况，记下

２周内动物效．采用Ｈｏｒｎ法计算ＬＤ。及其９５％可信限［ｌｓｌ

１．５留粗每性试脸Ｃ｝７取健康大鼠５０只，体重（２００士２０）

ｇ，采用２０　ｄ蓄积法按体重随机分组，每组１０只，雌雄各半。

按１／２０，１／１０，１／５，１／２　ＬＤ，ｕ剂量，设样品每公斤体重０．３，

０．　６，１．　２，３．　０　ｇ　４个剂ｆ组和燕馏水对照组。样品用蒸馏水配

制，经口每天灌胃１次，连续２０　ｄ，每４ｄ称重１次。

试验开始至染毒结束后７ｄ每夭观察大眼的一般状况、

中毒症状和死亡情况．根据大限死亡情况确定蓄积毒性强度。

用ｔ－检脸法检侧染毒４，８，１２，１６和２０　ｄ以及停止染毒后第７

天各剂ｔ组与对照组大鼠体重的差异性Ｃ－７

１．‘二橄核试脸Ｃ－７取健康小鼠５０只（体重２２＾－２６　ｇ），

住机分成５组，设样品每公斤体重１．２５，２．５０和５．　００　ｇ　３个

剂ｆ组，另设空白对照（燕匀水）和阳性对照（环碑酸胺４０

ｍｇ／ｋｇ）．每组１０只小鼠，雌雄各半．样品用燕馏水配制，按每

１０ｇ体重０．　１ｍ Ｌ计算妞＂￥。采用间隔２４　ｈ２次给样品，第

收稿日期，２００１－０４－１４

ｉ４项目浙江省重点攻关项目（９５２０２３Ａ），国家自然科学荃金

资助琐目（３９８７０５９３）

作．抽介汪以１Ｅ（１９６５－－），男，徽搜，博士．２次给样后６ｈ处死动物，取其脚骨骨位制片，甲醉固定，

Ｇｉｅｍｓａ　（ｐＨ＝　６．　４　）染色，镜检。每只动物观察１　０００个骨位嗜

多染红细胞（（ＰＣＥ），同时计数正染红细胞（ＮＣＥ）及含徽核的

嗜多染红细胞（ＭＮＰＣＥ　）。计算徽核千分率（ＭＮ编），以卡方

检验法检侧受试物荆ｔ组与阴性对照组间差异的显著性川．

１．７精子一形试脸ＣＣ取健康雄性小眼５０只（体重２３－－２７

妒，如上１．‘分组。样品用燕谊水配制，按每１０　ｇ休重０．１

ｍＬ计算徽胃ｆ．每天滋胃１次，连续５ｄ，对照组也同样处

理。在首次给样品的第３５天，颐椎脱臼处死小鼠．取两侧附

泉，放人盛有生理盐水的平皿中剪碎，经４层旅镜纸吸撼．直

接涂片，自然干操，甲醉固定，用ｌｅｏ伊红染色，高倍镜下检查

精子形态．每只小鼠检查完整精子１　０００个，记录璐变精子的

类型和盆目．计算琦形率（％）同样以卡方检验法栓侧差异的

显着性ｃｅ１

２结果与讨论

２．１急性毒性健脸见表１，经Ｈｏｒｎ氏法计算，盐酸甜菜孩

对小鼠雌、雄性经口ＬＤ，。值为５．８４　ｇ／ｋｇ．９５％可信限为４．３０

￣７．９４　ｇ／ｋｇ；对雌性大眼经口ＬＤ，。为６．　８１　ｇ／ｋｇ，对雄性大眼

经Ｑ　Ｌ玖。为５．８４　ｇ／ｋｇ．９５％可信限为４．　３０＾－７．　９４　ｇ／ｋｇ。根

据急性毒性分级标准，该样品为实际无毒类。

２．２，积．性试脸见表２，３。试验期间各组大限呈阶段性

增长，在同一染毒时间中，各剂ｔ组大既的体，与对照组比较

无显若差异性（Ｐ＞０．０５），停止染毒后第７天，０．３，１．　２和３．。

ｇ／ｋｇ剂量组雌性大鼠的体重分别比对照组增加明显（尸＜

０．０５），但雄性大双各剂量组体重未见明显增加．试脸大鼠死

亡情况无剂ｔ反应关系。可以认为盐酸甜菜喊无明显蓄积作

用。

表１盐映钳莱城对小众、大筑经口息性毒性试脸姑采

性别／（９｝１　ｆ．　ｋｇ－　０小叹大胜

死亡数／只死亡率／％死亡数／只死亡率／％

：：：。

功

１００

１００堆性

。

２０

ｊ００

１００５

５

尹口

眨口０／

１／

５／

５／。

２０

１００

１０００／Ｅ

Ｉ／５

５／５

５／５雌性２．１５

４．６４

１０．００

２１．５０

２．１５

４．６４

１０．００

２１．５０

万方数据３１０中国兽医学报２００２年５月第２２卷第３期Ｃｈｉｎ　Ｊ　Ｖｅｔ　Ｓｃｉ Ｍａｙ　２００２ Ｖｏｌ．　２２ Ｎｏ．　３

表２盆酸甜莱械蓄积毒性试脸大及休重变化

性别剂ｆ／（８・ｋ８－＇）染毒时间／／ｄ

０ ４日１２ １６ ２０

０ｃｘ１Ｍ）０．　：５

雄性：．：

雌性０（对照）

０．　３

０．　６

１．　２

３０１８４．　４士１２．　２

１８６．２士９．　５

１８１．　２士７．　２

１８４．　８士１２．　６

１９０．４士５．４

１８０．６士５．　６

１７３．　６士１０．　４

１８０．８士１１．　１

１８１．　４士９．　３

１７７　．６十４．　９２３０．　４士１８．　６

２１８．　０生１６．　２

２１５．　２士２０．　５

２００．　４士１１．　７

２２２．６士１５．　５

１８７．　０士５．　６

１９１．　０士１０．０

１８７．　４士１３．　１

１９２．　２士８．２

１９４．　８＋４．　２２５７．　２土２６．　３

２４４．　２士１７．　０

２３５．　３士３５．　７

２２８．　８士１２．　３

２５０．　５士１９．８

１９６．０上１０．　７

１９６．　２士Ｂ．　０

１９７．　０士１６．９

１９９．　０士１３．８

１９７．　８土５．　９２７４．　０士２８．８

２５７．　６士１５．　５

２５０．　５士４３．　９

２４２．　０士１９．　６

２６５，３士２３．９

１９５．　６士７．　４

２０２．　６士１１２

２００．０士１８．　７

２０６．　０士１３．２

２０６．　４士５．　４２９１．　０士３３．　１

２５９．　２士１２．９

２６２．　０士４９．　８

２５０．　３士１９．　８

２７９．　３土３１．　３

１９８．　４士８．４

２１０．４士１０．　９

１９４．　３士１１．　７

２１０．　８士１６．　５

２０９．　０士１０．０２９７．　６士３９．　６

２７１．　４士１３．　９

２８６．　３士６８．　７

２７５．　５士２６．　５

３０２．　５土３４．　３

１９９．　８士８．０

２１２．　４士１２．　７

１９５．　０士１７．　０

２１４．　３士１７．　１

２０８．８十８．　１３０５．　６士们．２

２８８．　８士１２］

２９４．　５士７５．　３

２８４．８士２９．　８

３１９．０士３８．３

１９０．　８士８．　８

２１７．　０士１７．７＊

１８８．　５士２３．　８

２２０．８士１６．　５＇

２１９．　６士８．　７＇

长尸＜０．　０５

表３盐胶甜莱械对大民蓄积毒性试脸结果表５盐胶甜莱碱小灰精子崎形试脸结果

性别剂量／（９・ｋｇ

０（对照）

０．　７Ｉ）动物数／只死亡动物牧／只死亡率／％组别 抽豆／

（ｍｇ＂　ｋｇ

０

ｔ２５０

２　５００

５　０００

６０ 动物数

］）２只受检精子 致／个精子崎形

教／个嗯

仪

Ｉｃ

Ｅ

ｇ

，阴性对照

雄性

１Ｉ盐酸甜菜雌１０　０００

ｔｏ　０００

１０　０００

８　０００

９　０００ Ｉ．７７

１．６３

１．５？

１．８６

５７口ｔ）．：

环确酸胺

．考文做０

０２０

２０

００

０１

卫土０ｏ（Ｒｆｍ）０．　３

雌性：．：

２．３二徽核试验见表４。阳性对照物（环磷酞胺）可引起

小鼠骨位细胞微核率明显升高，与阴性对照组比较，差异极显

著（Ｐ＜０．　０１）。而在盐酸甜菜碱各剂量组，中，低剂量组细胞

徽核率有所升高，但与阴性对照组比较，差异不显著（Ｐ＞

０－０５），表明盐酸甜菜碱小鼠微核试验结果为阴性．

表４盆酸扮莱碱小筑骨位微核试脸结果［１］

Ｃ２１

组别 Ｍｉｌｔ／动物数检查细胞含徽核ＰＣＥ

（ｍｇ　＂　ｋｇ－｝） ／只数／个数丫个

１０　０００

１０　０００

９　０００１０　０００

１０　０００，：；徽核率

／　０Ｋ

０．　６ ０．８

０７８

０．９

１５．４＇１０田

，

比切阴性对照

盐酸甜菜‘

环瞬胜胺 ０１　２５０

２　５０Ｄ５　０００

４０

・Ｐ＜０．　０１（下同）

２．４精子脚形试验见表５。环磷酞胺可引起小鼠精子畸形［了］

率明显升高，与阴性对照组比较差异极显著（Ｐ＜０－０１）ｅ　３个

剂量组精子畸形率与阴性对照组比较差异不显著（Ｐ＞ ［８１

０．０５），表明盐酸甜菜碱小鼠精子崎形试验为阴性Ｆｉｎｋｅｌｓｔｅｉｎ　Ｊ　Ｄ．Ｍａｒｔｍ　Ｊ　Ｊ．Ｈａｒｎｓ　Ｂ　Ｊ．ｅａ　ａ１．　Ｂｅｔａｉｎｅ－ｈｏｍｅｙ，

ｔｅｍｅ　ｍｅｔｈｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ　ｂｙ　ｄｉｅｔａｒｙ　ｂｅｔａｉｎｅ［１１．１　Ｎｏ，，　１９８３

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Ｓａｕｎｄｅｒｓｏｎ　Ｌ　Ｃ．Ｍａｃｋｉｎｌａｙ　Ｊ．　Ｃｈａｎｇｅｓ　ｍ　ｂｏｄｙ　ｗｅｉｇｈｔ，ｃｏｍｐｏｓｔ

ｔｉｏｎ．ａｎｄ　ｈｅｐａｔｉｃ　ｅｎｚｙｍｅ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｉｎ　．．．ｐｏｎｓ．　ｔｏ　ｄｉｅｔａｒｙ　ｍｅ

ｔｈｉｏｎｉｎｅ，　ｂｅｔａｉｎｅ，　ａｎｄ　ｃｈｏｌｉｍ　ｌｅｖｅｌｓ，　ｉｎ　ｇｒｏｗｉｎｇ　ｃｈｉｃｋｓ　［　１１．

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Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ　ｏｎ　Ｓａｆｅｔｙ　ｏｆ　Ｂｅｔａｉｎｅ　Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ

ＷＡＮＧ　Ｙｉ－ｚｈｅｎ＇，ＷＡＮＧ　Ｙｏｕ－ｍｉｎｇｔ，ＦＵ　Ｊｉａｎ－ｙｕｎ＇ （１．　Ｆｅｅｄ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，　Ｚｈｅｊｉａｎｇ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，　ｔｈｅ