复方中草药对鲤肝脏转氨酶的影响

第２６卷第１１期　２００７年１１月　

球产　

ＦＩＳＨＥＲＩＥＳ　Ｖ０１．２６　Ｎｏ．１ｌ　

ＮＯＶ．２ｏ０７　

复方中草药对鲤肝脏转氨酶的影响　田海军，陈建国，龙　勇，杨治国，林　伟　（信阳农业高等专科学校，河南信阳４６４０００）　

摘要：在饲料中添加复方中草药对鲤的正常鱼体和利用鱼类败血病的病原菌导致其肝受损后的鱼　体进行药效试验，测定投喂前后血清生化指标中转氨酶浓度变化，表明该复方中草药对正常鱼体的肝　脏具有保护作用，同时对鱼类败血病病原菌所致的肝损伤有一定的恢复和治疗作用。　关键词：鲤；复方中草药；肝损伤；转氨酶　中国分类号：￥９６３．７３　文献标识码：Ａ　文章编号：１００３—１１１１（２００７）１１－０６２５－０３　

肝脏是鱼类机体物质能量代谢过程中具有重　要而特殊功能的脏器。鱼类生活在水中，周围环境　存在着许多可致肝病的病毒、细菌及其他代谢毒　素，尤其在养殖密度过高情况下，这种感染机会更　多，加之人工投喂的饲料由于保管不善，都会引起　急性、亚急性或慢性肝病。鱼类患肝病后，轻者食　欲减退、生长缓慢，重者死亡率可达５０％～６０％ＬＩ］。　人们在设法解决鱼类肝病时，考虑到鱼类的生长安　全和鱼类作为食品对人类的影响，选择天然、高效、　毒副作用小，抗药性不显著，资源丰富以及性能多　样的中草药符合无公害水产养殖的要求。　生产实践证明了中草药在水产上的应用效果。　黄连、大黄及花粉均对鲤（Ｃｙｐｒｉｎｕｓ　ｃａｒｐｉｏ）的非特异　性免疫功能具有增强作用［２　；投喂含ｌ％大蒜添加　剂的饵料，对牙鲆（Ｐａｒａｌｉｃｈｔｈｙｓ　ｏｌｉｖａｃｅｕｓ）的厌食症　和肝病很有效果，且减少了鱼的死亡并有增重效　果；某些中药制剂能激发中国对虾免疫系统的功　能，诱导血凝素活力，溶菌活力升高，提高机体的非　特异性体液免疫功能＿３］。但中草药对于鱼类肝脏　的保护和治疗作用却少见报道，本试验旨在探索复　方中草药对患败血病的病鱼肝功能损伤的治疗和　恢复效果。　

１材料与方法　１．１试验材料　本校实习渔场的鲤（４０．４－５）ｇ／尾。　１．２药品　鱼类败血病病原菌购于湖北省武汉市水生生　物研究所嗜水气单胞菌的标准株。　

中草药复方由茵陈、地锦草、大黄、黄芩等多味　中草药组成。　１．３试验仪器　日立７０２０全自动生化分析仪、电子天平等。　１．４试验方法　中草药根据复方及添加浓度粉碎后，按试验设　计浓度与饲料粉料充分搅拌混合待用。试验在１．３　ｍ　Ｘ　１．０　ｍ　Ｘ０．８　ｍ水族箱内进行，微流水养殖，水　深０．５　ｍ。试验鱼暂养７　ｄ，待鱼全部适应环境、正　常摄食后开始试验。试验共分３个阶段，各组设重　复，试验数据取平均值。分组情况见表１、表２。　第一阶段（复方中草药对正常鱼体的保健试　验）：选择表观正常鱼体按表１分组情况进行投喂，　饲养７　ｄ为一个疗程，测定血清中谷丙转氨酶（Ｇｒ＇ｒ）　和谷草转氨酶（ＧＯＴ）浓度，并与对照组比较，由此　判断复方中药对肝功能转氨酶浓度的影响情况。　第二阶段（嗜水气单胞菌对正常鱼体的肝损　伤试验）：另选用相同规格的鲤按照表２分组进行　致病试验，即在试验鱼体注射致病菌（１．０　Ｘ　１０。／　尾），注射７　ｄ后随机抽取数尾鱼测定血清转氨酶　的浓度。　第三阶段（复方中草药对致病菌导致肝脏损　伤鱼体的治疗试验）：按照表２的分组情况将已经　被病原菌感染致使肝损伤的鱼体随机分组，并按此　表投喂中草药复方，７、１４　ｄ后分别进行血清转氨酶　浓度的测定，分别与肝损伤后的自然存活的鱼体和　空白对照组鱼体血清转氨酶浓度进行比较，由此判　断由鱼类败血病病原菌导致的肝损伤在中草药复　方治疗下的恢复情况。　

收稿日期：２００７—０１—１５；修回日期：２００７－０３—２９．　基金项目：信阳农业高等专科学校青年科研专项基金资助项目．　作者简介：田海军（１９８０一），男，助教，硕士，研究方向：水产动物病理与病害研究；Ｅ—ｍａｉｌ：ｔｈｊ＿６６６＠１６３・ｃｏｒｎ・　水产科学　第２６卷　表１　正常鱼体的保健试验分组　

注：数量均为５Ｏ尾，表２同　表２肝脏损伤鱼体的药效试验分组　

２结果与分析　２．１关于血清转氨酶　血清生化指标ＧＰＴ目前仍被认为是反映肝损　伤的敏感指标，ＧＰＴ绝大部分位于细胞浆，而ＧＯＴ　主要位于线粒体，少部分位于细胞浆。肝损伤较轻　时，仅限细胞膜的通透性增加，细胞浆内的ＧＰＴ释　放入血，在肝细胞受损严重时，线粒体里的ＧＯＴ释　放入血　ｊ。本试验结果以ＧＰＴ浓度变化为主，结合　参照ＧＯＴ的浓度变化，来确定复方的疗效。　２．２复方中草药对正常鱼体的保肝效果　第一阶段试验过程中，复方中草药以０、５０、　１００、２００　ｍｇ／ｋｇ拌饲投喂试验鱼体，鱼体血清中　ＧＰＴ和ＧＯＴ均不同程度降低（表３），经ｔ检验，各　复方组与空白组之间差异显著，各复方组之间差异　也显著。随复方中草药在饲料中添加质量分数的　升高，鱼体血清中ＧＰＴ和ＧＯＴ的下降幅度也随之　增大，可以明显的看出两中药复方具有保肝的功　效。各试验组与对照组均未见异常情况，只有高剂　量试验组鱼体摄食量略低于其他试验组鱼体的摄　食量，这可能与饲料中添加的中药气味对试验鱼摄　食有一定影响的缘故。　

表３　不同质■分数复方中草药对正常鱼体血清生化指标的影响　血清生化指标对照组复方３组复方２组复方１组　Ｐ　ＧＰＴ　５７±１．３４　５１±１．２８　４８±１．３６　４４±１．４７＜０．０５　ＧＯＴ　９２±１．６５　８７±１．３７　８５±１．３１　８３±１．３８＜０．０５　

２．３嗜水气单胞菌注射对正常鱼体所导致肝损伤　试验　鱼类败血病病原菌致病后在临床上主要表现　为全身体表充血、出血、腹水、肝肾损伤等症状。由　于鱼类败血病病原菌造成肝脏的损伤，肝细胞变　性，坏死必然造成肝功能障碍。本试验中选用鱼类　败血病病原菌嗜水气单胞菌诱导肝损伤，主要是考　虑到生产中鱼类败血病为爆发型疾病，对水产养殖　业的危害特别严重，使试验结果能服务于生产养　殖。　在试验鱼肌肉注射嗜水气单胞菌３　ｄ后，各试　验组的试验鱼的胸鳍和腹鳍基部开始充血发红，肛　门轻度红肿；５　ｄ后，试验鱼鳍条基部的充血发红更　加明显，体表黏液易脱落，７　ｄ后随机抽取数尾测定　血清转氨酶的浓度（表４），试验鱼血清ＧＰＴ和ＧＯＴ　均有明显的提高。此时解剖观察，可见肝脏肿大、　失去弹性、失去血色，胆囊异常扩张、胆汁充盈，肠　壁变薄。与已报道的养殖生产中出现的鱼类败血　病的症状基本一致。　表４嗜水气单胞菌致病和投喂不同质■分数的复方中草药鱼　体的血液生化指标　ＩＵ／Ｌ　项目　ｊ照组　复方３组复方２组复方１组　ＧＰＴ　ＧＯＴ　ＧＰＴ　Ｇ０Ｔ　ＧＰＴ　ＧｏＴ　Ｇ　Ｇ０Ｔ　０　ｄ／正常鱼体　５７　９２　５８　９１　５７　９０　５８　９４　７　ｄ／病菌感染７　ｄ　１２８　１５０　１２７　１５２　１２６　１４８　１２７　１４９　１４　ｄ／投喂中药７　ｄ　１２５　１４３　１１２　１３５　１０２　１２１　９８　１１９　２１　ｄ／投喂中药１４　ｄ　１２１　１３６　１０３　１１５　８９　１０６　８７　１０２　注：表中的各项数据为同批次试验数据的平均值　２．４不同添加质量分数的复方中草药饵料对肝损　伤鱼体的治疗效果　第三阶段试验的鱼体在投喂中草药饲料７　ｄ　后，体表及鳍条出血症状开始缓解。解剖观察，胆　汁颜色变深。１４　ｄ后，体表及鳍条出血症状基本消　失。解剖观察，复方ｌ组（高剂量组）、复方２组（中　剂量组）肝脏颜色和弹性大致恢复正常，复方３组　（低剂量组）肝脏颜色和弹性略有恢复。同时，对各　试验组试验鱼进行血清转氨酶测定（表３），与对照　组相比，各试验组鱼的血清转氨酶均有不同程度的　降低，表明复方中草药对鱼类败血病病原菌导致鱼　体的肝损伤有一定的恢复和治疗作用。然而，因为　细菌毒素的影响，投喂中药１４　ｄ后其ＧＰＴ和ＧＯＴ　的值与原始值差别仍然很大，说明投喂中药１４　ｄ，　鱼体的肝功能没有彻底恢复。各复方组以复方中　草药１００　ｍｇ／ｋｇ和２００　ｍｇ／ｋｇ添加量时疗效显著，　同时２００　ｍｇ／ｋｇ的添加量比１００　ｍｇ／ｋｇ的添加量疗　效好些。　药效学试验结果显示对于鱼类败血病造成的　鲤鱼肝脏损伤，复方中草药具有降低血清中ＧＰＴ和　第１１期　田海军等：复方中草药对鲤肝脏转氨酶的影响　ＧＯＴ的作用，这对于保护肝脏和治疗因鱼类败血病　而造成的肝损伤具有明显的作用。　本试验使用的复方中草药对鱼类败血病所致　的肝脏的炎症损伤具有恢复作用，分析其机理是抗　炎。复方中的黄酮成分能够通过抑制可诱导的一　氧化氮合酶，减少毛细血管内皮细胞释放一氧化　氮，调节花生四烯酸的代谢，抑制前列腺素Ｅ２　（ＰＧＥ２）和白三烯的合成，其中以黄芩素和黄芩甙　作用最强，而且存在量效关系。炎症组织中ＰＧＥ２　和白三烯炎性介质成分减少后，毛细血管通透性下　降，白细胞游出减少，蛋白渗出亦随之减少，导致炎　症反应减轻，组织肿胀程度下降　。杀菌解毒。　复方中的黄酮、蒽醌、有机酸等有效成分具有强烈　的抑菌作用，对消除细菌毒素对组织的损伤具有很　好的效果。黄芩具有清热解毒作用　，通过降低脑　脊液ｃＡＭＰ含量而拮抗内毒素致热活性，地锦草黄　酮也具有清除和抑制羟基自由基的作用　Ｊ，黄芩、　地锦草还具有止血、改善血管微循环，直接破坏内　毒素的作用¨。。。　２．５药饵制备　由于水产动物生存环境的特殊性，其摄食受天　气、温度、水体环境等的影响较大。此外，中药药饵　的制备工艺较为困难，粉剂在水体中损失较大，煎　制成水剂以后对饲料的适口性影响较大，而提取中　药有效成分的工艺较为复杂，今后药饵的制备工艺　有待进一步的研究。　

３　小结　在饲料中添加复方中草药对正常鱼具有保肝　的功效，并且随添加浓度的升高，鱼血清中ＧＰＴ和　ＧＯＴ的下降幅度也随之增大；复方中草药对因鱼类　败血病而造成的鱼肝损伤有一定的恢复和治疗作　用。　

参考文献：　［１］姜礼燔．鱼类肝脏疾病及防治研究［Ｊ］．水产科技情　报，１９９７，２４（４）：１８８－１９２．　［２］　蔡中华．四种中药对鲤鱼非特异性免疫功能的影响　［Ｊ］．天津农学院学报，１９９８（２）：８６－８９．　［３］　罗日祥．中药活性制剂对中国对虾免疫活性物的诱导　作用［Ｊ］．海洋与湖沼，１９９７，２８（６）：５７３－５７８、　［４］　曹宜，董自波．茵陈蒿汤对小鼠肝损伤的保护作用　［Ｊ］．浙江中医学院学报，２００２（１）：４１＿４３．　［５］　田海军．防治鱼类败血病的中草药复方总黄酮的提取　［Ｊ］．水利渔业，２００５（４）：９８－９９．　［６］侯艳宁，朱秀媛，程桂芳．黄芩甙的抗炎机理［Ｊ］。药学　学报，２０００（３）：１６１－１６４．　［７］　彭芳．黄酮类化合物的生物活性［Ｊ］．国外医药・植　物药分册，１９９８（５）：２０７－２０９．　［８］　穆林．中药清热解毒作用机理探讨［Ｊ］．黑龙江医药，　２００３（１）：４６４７．　［９］刘庆增，王金兰．中药抗内毒素生物活性机理的研究　［Ｊ］．中草药，１９９６（２）：１２１．１２２．　［１Ｏ］董鹏，唐万斌，郭连芳．地锦草止血作用研究［Ｊ］．武警　医学，１９９７（２）：１ｌ７．１１９．