分解纤维素的细菌分离

(2)纤维素分解菌能产生纤维素 酶分解纤维素，从而使菌落周围形 成透明圈。
透明圈
实验方案流程图：
土壤 取样
选择培 养基
➢ 该培养基是固体培养 基还是液体培养基？
➢ 目的是什么？
实验方案流程图：
土壤 取样
选择培 养基
梯度 稀释
实验方案流程图：
土壤 取样
选择培 养基
梯度 稀释
源自文库
刚果红鉴别培养基的配方 纤维素 5-10g
移液枪
如何取样？（地点？方法？） 如何筛选？（培养基？设置对照） 如何培养？（温度？时间？）
如何设置实验组和对照组？
选择培养基 （纤维素为碳源）
涂布
全营养培养基
0.1ml菌液 （LB培养基）
涂布 0.1ml菌液
实验组
如何设置培养条件？
32℃恒温培养箱
对照组
如何鉴别纤维素分解菌？
刚果红染色法
(1)刚果红可以与纤维素形成红 色复合物，但并不和水解后的纤维 二糖和葡萄糖发生这种反应。
“变废为宝” 的探险家
-----分解纤维素的微生物的分离
大豆秸秆
我国是一个农业大国 ，全国秸秆每年的产 量达到9亿多吨
玉米秸秆
水稻秸秆
秸秆焚烧
露天焚烧秸秆是一种严重违 法行为。《环境保护法》、 《大气污染防治法》、《治 安管理处罚法》、《消防法 》等有关法律规定，禁止露 天焚烧秸秆，违者将依法处 以500—2000元罚款，情节 严重的，将依法予以行政拘 留；对造成他人人身、交通 、火灾等安全事故，由司法 机关依法严惩。
酵母膏 1g
KH2P涂培O4布 养到 基0.鉴 上25别g
琼脂
15g
土豆汁 100ml
刚果红溶液 10mg/ml
将上述物质溶解后，用蒸
馏水定容到1000ml。
实验方案流程图：
土壤 取样
选择 培养 基
梯度 稀释
涂布到鉴 别培养基 上
挑选 菌落
视频展示：生物兴趣小组实验过程
实验结果：
透明圈
动手操作：平板划线法分离纯化纤维素分解菌
对照组：卷烟纸＋
未灭菌的土壤
灭菌的土壤
结论：土壤中有 分解纤维素的微 生物。
2018年11月21日
提出课题：从土壤中筛选分解纤维素的微生物
实验设计：
如何取样
• 地点？ • 方法？
如何筛选 如何培养
• 设置对 照？
• 培养基？
• 温度？ • 时间？
枪头
接种环 铲子 涂布器
试管若干
酒精灯
锥形瓶
滤纸
培养皿
每生产1吨乙醇需要3-4吨粮食，成本在 2500左右。
降低成本！！ 任重道远！！
秸秆用途 饲料 肥料 能源 其它
“种出来” 的 生物质能源
纤维素是葡萄糖首尾相连的高分子化合物， 是地球上含量最丰富的多糖类物质
纤维素酶
是一种复合酶，一般 认为它至少包括三种 组分，即C1酶，Cx 酶和葡萄糖苷酶
纤维素
C1酶 CX酶
纤维二糖 葡萄糖苷酶 葡萄糖
2018年11月11日
实验组：卷烟纸＋
课题延伸
（一）挑选出有透明圈的菌落一定是纤维素分解 菌吗？如何验证？
课题延伸
（二）土壤中筛选的菌种可以直接发酵降解秸秆， 用于工业生产吗？
工艺应用：秸秆纤维素发酵生产燃料乙醇
根据现有年产1万吨纤维素酶和5000吨秸秆 乙醇生产线试运行情况来看，每生产1吨乙 醇需要6.5-7吨秸秆，成本在3000元左右。