下载文档原格式
Plant Genetic Engineering植物基因工程Key Notes: 要点The concept: 概念Genetic manipulation involves inserting foreign genes or modifying the activity of existing genes. Methods to insert foreign genes are coupled with the methods of plant tissue culture to regenerate identical populations of plants with novel characteristics.基因操作涉及插入外源基因或者改变原有基因的活性。
插入外源基因和植物组织培养技术相结合可再生出具有新特征的纯一的植物群体。
Basic genetic manipulation methods: 基因操作的基本方法Agrobacterium tumifaciens is a soil bacterium with a plasmid that inserts foreign DNA into a plant. The plasmid contains a T-DNA transferred into the plant and a VIR region that facilitates transfer of the T-DNA. Binary vectors for genetic engineering consist of one plasmid containing the VIR region and a second containing the T-DNA including the foreign DNA. Where the Agrobacterium system cannot be used, direct gene transfer techniques may be employed, for instance using a DNA particle gun.农杆菌是一种土壤细菌，它含有一个将外源DNA插人植物体的质粒。
植物组织培养plant tissue culture是指将植物的离体器官、组织、细胞以及去除细胞壁的原生质体，甚至幼小的植株，放在无菌条件下，在人工控制的环境条件下，培养在培养基上对其进行克隆，使其生长、分化并成长为完整植株的过程。
外植体explant用于培养的植物胚胎、器官、组织、细胞和原生质体通常称为外植体。
无菌asepsis是进行组织培养的基本要求，指培养的器皿，器械，培养基，外植体等处于无真菌，细菌，病毒等有害生物状态，以保证外植体在培养器皿中正常生长和发育。
植株培养plant culture对完整植株材料的离体无菌培养。
胚胎培养（embryo culture）从果实或种子子房中国分离出来成熟或未成熟的胚进行离体无菌培养的技术。
器官培养organ culture以植物的根茎叶花果实等器官为外植体的离体无菌培养技术。
细胞培养cell culture 在离体条件下对单个细胞或小的细胞团进行培养并使其增殖的技术) 对植物器官或愈伤组织上分离出的单细胞，花粉单细胞，或很小的细胞团进行培养，形成单细胞无性系或再生植株的技术。
原生质体培养protoplast culture指将植物细胞的细胞壁通过物理或化学的方法去除，然后再进行培养。
原生质体培养的最大用处是体细胞杂交。
初代培养primary culture将外植体进行的第一次培养，称为初代培养。
继代培养subculture组织培养中，外植体或培养物培养一段时间后，为了防止培养的细胞老化，或培养基养分利用完而造成营养不良及代谢物过多积累二产生的毒害的影响，要技术将其转接到新鲜的培养基中继续进行培养，使其能够顺利地增殖、生长、分化，成长完整的植株。
这一过程称为继代培养。
植物离体培养plant culture in vitro由于外植体已脱离了母体，因此植物组织培养又称为植物离体培养。
组织培养tissue culture是对植物体的各部分组织，或对植物器官培养产生的愈伤组织进行培养。
组织培养（1）
植物离体培养（Plant in vitro culture）是指通过无菌操作，把植物体的各类结构材料，即外植体（Explant）,接种于人工配制的培养基上，在人工控制的环境条件下，进行离体培养的一套技术与方法，通常称之为植物组织培养（Plant tissue culture），或植物的细胞与组织培养。
通过组织培养进行再生的步骤，包括培养基的制备、外植体的选择、消毒、接入，芽的诱导、根的诱导、移裁等几个阶段。
一、培养基的制备
在建立一个新的实验体系时，为了能研制出一种适合的培养基，最好先由一种已被广泛彩的基本培养基开始，烟草的培养采用的·植物学论文是MS基本培养基。
在实际培养过程中，分为三种培养基进行使用：
1、诱导愈伤组织的培养基：MS+6-BA2+NAA0.5
2、诱导芽的培养基：MS+6-BA2+NAA0.1
3、诱导根的培养基：MS+6-BA2+IBA0.5
各种培养基所用琼脂为9g/L，蔗糖均为30g/L，PH为5.5-6.0，配制后高温灭菌·动物/水产论文备用。
二、外植体的选择
植物细胞全能性是植物细胞的一种重要属性，也是组织培养的重要理论基础。
任何一个植物细胞都具有的产生一个完整植株的固有能力称做“细胞的全能性”。
因此可选取烟草根、茎、叶等的任何一部分，作为组织培养的外植体。
但在选择时应注意所选部位无病虫害、生长旺盛。
