植物组织培养 (2)

第二章(2)植物组织培养操作技术1 灭菌用物理或化学方法，杀死物体表面和孔隙内一切微生物或生物体，即所有生命的物质全部杀死。

2 灭菌方法2.1培养基灭菌一般高压湿热灭菌，某些激素、维生素采用过滤灭菌。

2.2玻璃器皿灭菌干热灭菌：160～180℃,1.5～2.0h；湿热灭菌：121℃, 20～40min。

接种前用酒精棉球擦试，并在酒精灯火焰上灼烧灭菌。

2.3接种工具灭菌用前干热灭菌：160～180℃,1.5～2.0h；用前湿热灭菌：121℃, 20～30min。

接种前用酒精棉球擦试，浸入95%酒精液中，并在酒精灯火焰上灼烧灭菌。

2.4实验服、口罩、滤纸灭菌湿热灭菌：121℃,20～30min。

实验服灭菌后置于缓冲间或密封好。

2.5接种室灭菌紫外灯照射(接种室、超净台、接种箱)：波长260nm，距离小于1.2m，20～30min。

臭氧灭菌机：1～2h；熏蒸灭菌：5～8ml/m3甲醛+5g/ m3高锰酸钾；冰醋酸；1～3%高锰酸钾或3%来苏儿。

接种台喷雾消毒：75%酒精。

2.6接种材料灭菌灭菌步骤：①流水冲洗或洗衣粉漂洗②用化学灭菌剂浸润灭菌，最好加吐温-80等表面活性剂(灭菌液的0.5%)，一般70%酒精30S，0.1～1%升汞5～8 min。

③无菌水冲洗3～5次。

2.7物体表面灭菌2.7.1灭菌方式：喷雾、涂抹杀菌2.7.2范围：桌面、墙面、双手、材料表面2.7.3消毒剂：70%酒精；1～2%来苏水；0.25～1%新洁尔灭；洗衣粉；吐温-802.8培养室灭菌新建培养室用前一定要彻底熏蒸1次。

隔2～5天用洗衣粉水或来苏水拖地1次，用高锰酸钾擦架1次。

3无菌操作3.1作好接种前准备3.1.1接种室的灭菌3.1.2超净工作台的灭菌3.1.2.1 开风机前将紫外灯打开30min以上3.1.2.2 之后开风机15min3.1.2.3 用95%酒精洗工作台面3.1.3接种器皿、用具的灭菌用具先用95%酒精浸泡，后于酒精灯外焰灼烧。

第三节植物组织培养操作技术（2）一、授课章节第三节植物组织培养操作技术（2）。

二、学时安排2学时。

三、教学目标1．掌握培养基的作用。

2．掌握培养基中生长调控物质的作用。

3．了解培养基的类型。

四、教学重点、难点分析重点：培养基的基本成分。

难点：培养基中生长调节物质的作用。

五、教具电化教学设备。

六、教学方法讲授法，演示法。

七、教学过程Ⅰ.导入培养基是进行植物组织培养的基质，进行植物组织培养必须掌握培养基的基本知识，今天我们就学习培养基的种类和基本成分。

II.新课三、培养基制备技术（一）配制培养基的目的配制培养基的目的是人为提供离体培养材料的营养源。

配制的不同培养基，是为满足不同类型植物材料对营养的不同需要。

没有一种培养基能够适合一切类型的植物组织或器官，在建立一项新的培养系统时，首先必须找到一种合适的培养基，培养才有可能成功。

（二）培养基的种类1.培养基的种类划分2.常用培养基的配方和特点 目前已公开报道的基本培养基有许多种类，各有不同的特点和适用范围，在植物组织培养生产中应根据不同的植物种类和培养部位及不同的培养目的选用不同的培养基。

常用的培养基配方：表1 常用培养基配方只含有无机盐、蔗糖、维生素和水等最基本成分的合继代培养中促进培养物快速增殖的培养基，也称扩繁培养基。

培养基主要有水、无机盐、有机物、植物生长调节物质、培养基的支持材料五大类组成。

1.水水是植物原生质体的组成成分，也是一切代谢过程的介质和溶媒。

它是生命活动过程中不可缺少的物质。

配制培养基母液时要用蒸馏水，以确保母液及培养基成分的精确性，防止贮藏过程发霉变质，大规模生产时可用自来水。

但在少量研究上尽量用蒸馏水，以防成分的变化引起不良效果。

2.无机元素(1)大量元素指浓度大于0.5 mmol／L的元素，有N，P，K，Ca，Mg，S等。

常由KN03、NH4NO3、KH2P04、NaH2P04、KCl、MgS04·7H20、CaCl2·2H20等化合物来提供。

一、基本过程−−−→−−−→→脱分化再分化外植体（离体的组织、器官或细胞）愈伤组织根、芽或胚状体完整植株1.外植体由活植物体上切取下来以进行培养的那部分组织或器官叫做外植体。

一般取植物幼嫩部位（如茎 尖）或花药等。

2.愈伤组织原指植物体的局部受到创伤刺激后，在伤口表面新生的组织。

它由活的薄壁细胞组成，可起源于植物体任何器官内各种组织的活细胞。

其特点是：排列疏松、无规则、高度液泡化、呈无定形状态的薄壁细胞，具有未分化特性。

知识点睛第10讲 植物组织培养技术愈伤组织形成过程中，没有叶绿素和叶绿体的形成，所以愈伤组织形成初期不需要充足的光照。

通常使用细胞分裂素和生长素比例在1:l来诱导植物材料愈伤组织的形成。

3.胚状体胚状体是在离体植物细胞、组织或器官培养过程中，由一个或一些体细胞，经过胚的发生和发育过程，形成与合子胚相类似的结构。

一般专指在组织培养条件下产生的非合子胚。

诱导胚状体需要的条件，因植物种类、部位和培养时组织细胞所处状况的不同而异。

胚状体的诱导与外植体所处生理状况，内源激素的变化及遗传性、倍性等都有密切关系。

①胚状体的产生不需要任何激素，如烟草、曼陀罗和水稻等的花药培养。

②培养中需要生长激素或细胞分裂素或二者的组合，如檀香和石刁柏的愈伤组织培养。

③需先在有激素的培养基上诱导，然后转入低浓度激素或无激素的培养基中，如胡萝卜在诱导愈伤组织时需2,4-D，但由愈伤组织诱导出胚状体时，则需在没有2,4-D的培养基培养。

④某些天然产物，如椰乳，西瓜汁，酵母提取物，酪朊水解物或腺嘌呤等都有利于胚状体的发生。

二、理论基础：植物细胞的全能性1. 细胞全能性的定义：指已经分化的细胞，仍然具有发育成完整个体的潜能。

2. 在生物的生长发育过程中，细胞并不表现出全能性，而是分化成各种组织和器官。

3. 细胞具有全能性的原因：含有该种生物全部遗传信息。

4. 细胞的全能性高低比较：①一般，细胞分化程度越高，全能性越低②受精卵>生殖细胞>体细胞③植物体细胞>动物体细胞三、条件1.离体2.无菌3.一定的营养物质：水、无机盐、蔗糖（提供碳源和调节渗透压）、维生素等4.植物激素在配制好的培养基中，常常需要添加植物激素。

植物组织培养一．实验原理根据植物细胞具有全能性，利用植物体离体的器官如根、茎、叶、茎尖、花、果实等组织（如形成层、表皮、皮层、髓部细胞、胚乳等）或细胞（如大孢子、小孢子、体细胞等）以及原生质体,，放在适当的人工培养基上进行培养，这些器官或组织就会进行细胞分裂，形成新的组织。

再适合的光照、温度和一定的营养物质与激素等条件下，愈伤组织便开始分化，产生出植物的各种器官和组织，进而发育成一棵完整的植株。

二．实验药品及仪器试剂：氯化钙(CaCL2.2H2O) 硫酸亚铁 (FeSO4 .7H2 O) 硝酸钾(KNO3)硫酸铜(CuSO4 .5H2 O) 硫酸镁(MgSO4.7H2O) 氯化( CoCL2 .6H2 O)硫酸铵(NH4NO3 ) 甘氨酸磷酸二氢钾(KH2PO4) 盐酸硫胺素硫酸锰(MnSO4.4H2O) 盐酸吡哆素硫酸锌(ZnSO4.7H2O) 烟酸硼酸(H3BO3) 肌醇碘化钾(KI) 蔗糖钼酸钠(Na2MoO4.2H2O) 琼脂乙二胺四乙酸二钠盐Na2-EDTA.2H2O仪器：培养室，高压灭菌锅，水浴锅，解剖刀，烧杯，量筒，培养皿，棉线，超净工作台，分析天平，长镊子，容量瓶，移液管。

三．实验步骤1.培养基的配方：化合物数量化合物数量氯化钙(CaCL2.2H2O) 440 硫酸亚铁 27.80(FeSO4 .7H2 O)硝酸钾(KNO3) 1900 硫酸铜 0.025(CuSO4 .5H2 O)硫酸镁(MgSO4.7H2O) 370 氯化钴 0.025( CoCL2 .6H2 O)硫酸铵(NH4NO3 ) 1650 甘氨酸 2磷酸二氢钾(KH2PO4) 170 盐酸硫胺素 0.1硫酸锰(MnSO4.4H2O) 22.3 盐酸吡哆素 0.5硫酸锌(ZnSO4.7H2O) 8.6 烟酸 0.5硼酸(H3BO3) 6.2 肌醇 100碘化钾(KI) 0.83 蔗糖 30000钼酸钠(Na2MoO4.2H2O) 0.25 琼脂 10000乙二胺四乙酸二钠盐 37.25 氢离子浓度 1.585微摩/升(Na2-EDTA.2H2O) (PH5.8)按上述配方制作培养基2.培养基灭菌将配好的培养基加入琼脂加热溶解，调至pH 5.8 ，趁热分装于100 mL 培养瓶中，每瓶约15 mL 。

《植物组织培养》试题(一)一、填空题(每空1分,共20分，)1、一般培养室控制的温度是________，培养基常选用的pH值是________。

2、在组织培养中，培养基常用____________法灭菌，不耐热物质用_________法灭菌。

3、非洲菊的叶片_______,故没有直立的茎，在组织培养的继代过程中用________法繁殖。

4、1962年，Murashige 和Skoog为培养烟草细胞设计了____培养基，其特点是__________浓度较高，且为较稳定的_______________。

5、从单个细胞或外植体形成的愈伤组织，大致要经历 ______、____和＿＿＿期。

6、6-BA / NAA 的高低决定着外植体的发育方向，其比值高时________，比值低时_______________。

7、脱毒苗培养的常用两种方法是_______和__________。

8、菊花在生产实践中常用 _______法繁殖，在组织培养可用______作为外植体进行培养。

9、草莓属于_____科植物，用微尖培养草莓主要使其＿＿＿＿，从而提高产量和质量。

二、判断题（每题2分,共10分，）（）1、对外植体材料用酒精消毒目的只是灭菌。

（）2、菊花属于球根花卉，而兰花属于宿根花卉。

（）3、诱导愈伤组织重新脱分化出各种不同的器官和组织，这个过程称为脱分化。

（）4、MS0培养基是没有激素的培养基。

（）5、受精卵和体细胞都具有全能性。

三、名词解释（每题2分，共10分）1、细胞全能性2、灭菌3、玻璃化现象4、指示植物5、驯化四、选择题（每题1分,共10分）（）1、下列哪种不是原生质体分离所用的酶A 纤维素酶B 半纤维素酶C果胶酶D淀粉酶（）2、下列哪种不是组织培养常用的维生素A：维生素B2 、B：维生素B1 、C：维生素B6、 D：维生素C（）3、在花药培养中下列哪种不是花粉的发育过程。

A营养细胞发育途径 B 生殖细胞发育途径C 胚状体发育途径D 花粉均等分裂途径（）4、下列哪种激素不属于生长素类①IAA ②IBA ③6-BA ④NAA（）5、在未成熟胚胎培养中下列哪种不常见的生长方式A“胚性”生长B早熟萌发C先胚根后胚芽D先形成愈伤组织再分化（）6、适于花粉培养的最佳时期是＿＿A双核期B单核期C多核期D无核期（）7、下面哪种是MS培养基大量元素所用药剂A 硫酸镁B 硫酸亚铁C硫酸锌 D 硫酸铜（）8、下列哪种不是在MS培养基起作用的有机物A氨基酸 B 肌醇 C 维生素 D 琼脂（）9、常见的组织培养程序包括①取材②接种③灭菌④做培养基A①②③④B①④③②C①③②④D①④②③（）10、和组织培养相似的代名词是A 克隆B有性生殖C孤雌生殖 D 单性生殖五、简答题（共50分）1、6-BA在组织培养中有何作用？(6分)2、述活性炭在组织培养中有哪些作用及使用注意事项？(6分)3、什么叫花粉看护培养法？原理是什么？(6分)4、尖培养脱毒的原理是什么？接种时应注意什么？(6分)5、移栽驯化香石竹时怎样选用基质和搭配基质？(6分)6、接种室有哪些技术要求？(6分)7、用湿热法进行高压灭菌的大致步骤有哪些？(7分)8、怎样用指示植物法鉴定草莓是否含有病毒？(7分)《植物组织培养》试题 (二)一、填空题(每空1分,共20分)1、在分离原生质体酶溶液内，需加入一定_____稳定剂，其作用是_______________。

植物组织培养的方法植物组织培养（Plant tissue culture）是指利用无菌条件下培养植物细胞或组织，以实现繁殖、繁育新品种、生物合成化合物、环境污染处理等目的的技术。

其不仅可以大幅度提高植物材料的品质和数量，还可以在无限制地产生同一种植物。

方法一：赤潮法（Embryogenesis）这一方法是利用赤潮细胞发生器官（如胚性板）的细胞分化，诱导植物组织的胚胎发生，进而实现植物再生。

该方法适用于很多种植物，如玉米、大麦、水稻等。

步骤为：1. 准备培养基：含有赤潮素、氨基酸、维生素、植物激素和适当的糖类和盐类的基础培养基。

2. 处理材料：将植物的姿态板或种子材料在高温（35-40C）下进行消毒，使其无菌。

3. 材料分离：将消毒材料放入无菌条件下进行材料分离。

4. 培养细胞：将细胞或组织放入含有培养基的无菌培养皿中，保持恒定的温度、湿度和光照条件，促进发生素感应化。

5. 发生胚胎体：促进胚胎形成，通过培养发生胚胎胶囊或胚胎体。

6. 块茎冷藏：利用低温存储胚胎体或胚胎胶囊。

方法二：组织培养（Organogenesis）组织培养方法是通过培养植物的基本组织如叶片、茎尖、芽分根进而再生整个植株。

步骤为：1. 材料处理：对种子或植株进行表层消毒处理。

2. 制备组织片：将消毒好的植株切成组织片段，如茎尖、叶片等。

3. 培养基准备：准备无菌的培养基，其中含有植物的必需胰凡陈列如糖类、氨基酸、维生素、生长因子和植物激素等。

4. 组织分化：将组织片段放入含有培养基的培养皿中，使其分化成根、茎、叶等。

5. 干涸与移栽：将培养的加上适量水后，移栽到含有生长素适量的培养基中，促进植物以正常生长的形式营养。

方法三：悬浮细胞培养（Suspension Culture）在此方法中，使用悬浮培养细胞进行植物细胞或组织的生物合成和生物转化。

步骤为：1. 培养基准备：通常使用植物基础培养基加入氨基酸、维生素和植物激素等。

2. 细胞处理：将细胞分散在含有培养基的匀浆器中，使其悬浮在培养基中。

植物组织培养第2章培养基及其配制培养基及其配制目的要求：1、了解几种常用培养基的特点；2、掌握培养基的主要成分及其作用；3、掌握培养基的配制方法。

培养基(culture medium) :---是植物组织培养的重要基质。

(土壤+自养条件) ---不同种植物的组织对营养有不同的要求，甚至同一种植物不同部位的组织对营养的要求也不相同，只有满足了它们各自的特殊要求，它们才能很好地生长。

因此，没有一种培养基能够适合一切类型的植物组织或器官，在建立一项新的培养系统时，首先必须找到一合适的培养基，培养才有可能成功。

一、培养基的种类最早的培养基: 是Sacks(1680)和Knop(1681),根据植物从土中主要是吸收无机盐营养，设计出了由无机盐组成的Sacks和Knop溶液.常用的培养基及特点如下：(1) MS培养基1962年，Murashige和Skoog,培养烟草细胞。

特点：无机盐和离子浓度较高，为较稳定的平衡溶液；硝酸盐含量较其他培养基为高；应用广泛―基本培养基。

(2) B5培养基1968年，Gamborg等，培养大豆根细胞。

特点：含有较低的铵，对有些植物的生长有抑制作用；适宜于双子叶植物特别是木本植物。

(3) White培养基1943年，White,培养番茄根尖。

特点：无机盐数量较低，适于生根培养。

(4)N6培养基1974年，朱至清等，水稻等禾谷类作物花药培养。

特点：成分较简单，KNO3和(NH4)2SO4含量高。

在国内已广泛应用于小麦、水稻及其他植物的花药培养和其他组织培养。

(5) KM―8P培养基1974年，原生质体培养。

特点：有机成分较复杂，它包括了所有的单糖和维生素，广泛用于原生质融合的培养。

二、培养基的成分水、无机盐、有机物、天然复合物、植物激素、培养体的支持材料、抗生素、活性炭等。

(一)水是植物原生质体的组成成分，也是一切代谢过程的介质和溶媒。

它是生命活动过程中不可缺少的物质。

配制培养基母液时要用蒸馏水，以保持母液及培养基成分的精确性，防止贮藏过程发霉变质。

植物组培实验报告实验二、培养基的配制及灭菌一、实验目的1、熟悉植物组织培养的一般工作流程。

2、了解培养基的成分、类型及特点。

3、能正确进行培养基的配制及灭菌操作。

二、实验原理植物组织培养是一项技术性强、无菌条件要求高的工作，对场地有一定的要求，需配备必要的仪器设备和器皿、器械，还必须熟练掌握每个环节的操作技术。

植物组织培养的一般程序包括拟定培养方案、初代培养、继代扩繁、生根壮苗培养及驯化移栽，其基本操作技术包括培养基的配制及灭菌、外植体的选择与消毒、无菌接种与培养、试管苗生根与驯化移栽等。

三、实验内容1、培养基的成分以MS培养为例，其成分可以分为水、无机盐、有机物、天然复合物、培养体的支持材料等五大类。

１．水作用：原生质体的组成成分，代谢过程的介质和溶媒。

它是生命活动过程中。

配制：培养基母液时要用蒸馏水：配培养基时可用自来水。

但在少量研究上尽量用蒸馏水。

２．无机元素大量元素，指浓度大于0.5mmol/l的元素，有Ｎ、Ｐ、Ｋ、Ｃa、Ｍg、Ｓ等。

其作用是：(1)N功能：是蛋白质、酶、叶绿素、维生素、核酸、磷脂、生物碱等的组成成分，是生命结构和功能物质不可缺少的。

供应形式：含有ＮＯ3－N又含ＮＨ4－N。

ＮＨ4－N对植物生长较为有利。

在制备培养基时以这两种形式供应。

供应的物质有ＫＮＯ3、、ＮＨ4ＮＯ3等。

有时，也添加氨基酸。

(2)P功能：是磷脂的主要成分，而磷脂又是细胞膜、细胞核的重要组成部分。

磷也是核酸、ＡＴＰ、辅酶等的组成成分。

组织培养中，磷不仅增加养分、提供能量，而且也促进对Ｎ的吸收，增加蛋白质在植物体中的积累。

供应形式：常用的物质有ＫＨ2ＰＯ4或ＮaＨ2ＰＯ4等。

(3)K功能：Ｋ对碳水化合物合成、转移、以及氮素代谢等有密切关系，它具有活化酶的作用。

Ｋ增加时，蛋白质合成增加，维管束、纤维组织发达，对胚的分化有促进作用。

但浓度不易过大，一般为１～３mg/l 为好。

供应形式：制备培养基时，常以ＫＣl、ＫＮＯ3 等盐类提供。

试卷编号NO：高等函授教育《植物组织培养》试题学号：姓名：一名词解释：（10*2分=20分）1、植物细胞组织培养2、细胞全能性3、脱分化4、外植体5、试管苗驯化6、间接不定芽发生7、双极性8、微体嫁接9、人工种子10、体细胞无性系变异二填空：（30*1分=30分）1、目前植物组织培养应用最广泛的方面是和。

2、由脱分化的细胞再分化出完整植株有两种途径，一种叫做，另一种叫做。

3、培养用具的常用灭菌方法有、、。

4、某些生长调节物质及抗生素、酶类物质遇热不稳定，对其灭菌时不能进行，而要进行。

5、一般来说，黑暗条件下有利于的增殖，而往往需要一定的光照。

6、植物离体授粉技术通常包括、、三个方面。

7、一般液体培养的继代时间较短，继代一次；而固体培养继代时间可以长些，继代一次。

8、外植体器官发生的三种途径包括、、。

9、从再生植株倍性来看，小孢子培养通常产生植株，胚培养通常产生植株，通常产生三倍体植株。

10、脱毒苗鉴定与检测的主要方法有、、、。

11、在生长素中，对于许多作物花粉的启动、分裂、形成愈伤组织和胚状体起着决定性作用，但是对却有抑制作用。

12、用平板培养法培养单细胞或原生质体时，常用来衡量细胞培养效果。

13、用药剂处理是诱导染色体加倍的传统方法。

三计算题（1*10分=10分）某培养基的配方是MS＋BA 2.0mg/L＋NAA 0.5mg/L＋2.5%蔗糖＋0.7％琼脂粉。

MS母液的浓度分别是：大量元素２０倍，微量元素500倍，铁盐100倍，有机物５０倍；BA母液浓度1.0 mg/ml ，NAA母液浓度0.1mg/ml。

要配制400ml 该培养基，需要吸取各种母液各多少ml？分别称取蔗糖、琼脂粉各多少克？（要求写出计算步骤）四简答题（5*5分=25分）1、造成组织培养过程中发生污染的原因有哪些？如何有效控制污染？2、简述外植体消毒的一般步骤。

3、胚培养在科学研究及生产实践中有哪些应用？4、结合花粉培养，简述看护培养法。

一、植物组织培养的广义含义(tissue culture)在无菌条件下，将离体植物的器官、组织、细胞或原生质体在人工配制的培养基上，并给予适当的培养条件使其长成完整植株的过程或生产具有经济价值的其他产品的技术。

也称离体培养（Invitro culture）。

二、此定义内涵：1、无菌条件（asepsis)：外植体、培养基、培养容器、接种工具、操作环境、培养环境等。

2、外植体（explant）：健康植株的特定部位或组织，如根、茎、叶、花、果实、胚珠、花药和花粉等，选择用于组织培养的起始材料，称之为外植体。

包括营养器官、生殖器官、组织、细胞等。

3、培养基（culture medium)：是植物组织培养的重要基质，它提供植物生长所需的营养物质。

人工配制，成分确定。

4、组培的理论基础：植物细胞的全能性（totipotent）。

5、激素：调控培养物的状态和发育方向，实现不同的实验目的。

6、封闭培养：通过封口材料实现气体交换。

7、培养条件（ culture condiction）:人为控制。

*植物组织培养的狭义含义指对植物体所有组织如分生组织、胚乳组织、薄壁组织、花药组织、愈伤组织的培养。

本课程所涉及的组织培养若无特殊说明均指广义含义。

三、植物组织培养的四要素（1）无菌（2）培养材料：①器官：根、茎、叶、花、果实②组织：花药组织、胚乳、皮层等③细胞：体细胞（2n）、生殖细胞（n）④原生质体（3）培养基（4）培养条件：温度、光照、湿度等四、与组培有关的术语及理论1、植物细胞全能性（totipotent)：植物细胞具有该植物体全部遗传的可能性，在一定条件下具有发育成完整植物体的潜在能力。

原理：植物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因，从理论上讲，植物体的每一个活细胞都应该具有全能性。

潜在全能性的原因：基因表达的选择性。

科学研究表明，处于离体状态的植物活细胞，在一定的营养物质、激素和其他外界条件的作用下，就可能表现出全能性，发育成完整的植株。

植物组培2-愈伤组织的诱导植物组织培养-愈伤组织的诱导一、【实验目的】掌握植物愈伤组织诱导、继代、器官分化的原理。

二、【实验原理】植物组织培养是将植物的器官组织以至单个细胞，应用无菌操作方法，使其在人工条件下，能够分裂、增殖、分化发育成一完整植株的过程。

植物的组织在人工培养条件下，原来已经分化停止生长的细胞，可以重新分裂，形成没有组织结构的细胞团，即愈伤组织，这一过程称为“脱分化作用”。

而已经“脱分化”的愈伤组织，在一定条件下，又能重新分化形成输导系统以及根和芽等组织和器官，这一过程称为“再分化作用”。

植物激素在“再分化”过程中起着重要作用，生长素和细胞分裂素的比例，决定了根和芽的分化。

超净工作台工作原理：本工作台是一种水平单向流型局部空气净化设备室内空气→预过滤器(初滤) →小型离心风机压入静压箱→高效空气过滤器(精滤) →出风面吹出洁净气流(具有一定的、均匀的断面风速）→不断排除工作区原来的空气→形成高洁净的工作环境三、【实验仪器和材料】仪器：培养室，高压灭菌锅，水浴锅，解剖刀，三角烧瓶（100mL ），烧杯，量筒，培养皿，棉线，接种箱或超净工作台，分析天平，长镊子，剪刀，容量瓶，移液管，牛皮纸试剂：乙醇、2 ，4 – D （生长素类似物）、次氯酸钠、6- 苄基氨基腺嘌呤（6-BA ）、MS 培养基、0.1 mol/L NaOH 与0.1 mol/L HCl 材料：绿豆、胡萝卜、自选材料四、【实验步骤】（1）用70～75%的酒精棉擦拭双手和操作台面，进行常规的无菌操作准备。

（2）将植物体用自来水冲洗后,用酒精棉擦拭欲取材部位表面, 或于70%酒精中浸沾数秒钟。

（3）将材料放入已灭菌的100ml烧杯（或试剂瓶）中，加入10%的次氯酸钠溶液，浸泡5分钟。

（4）弃次氯酸钠浸泡液，再加入10%的次氯酸钠溶液，浸泡10分钟。

（5）弃次氯酸钠浸泡液，用无菌水浸泡漂洗3～4次，每次1～2分钟，用无菌镊子搅动。