丹参水溶性成分与脂溶性成分抑菌作用的考察

高效液相色谱法测定丹参胶囊脂溶性和水溶性成分含量＊张珺;程月发;张爱兵【摘要】目的：采用高效液相色谱法分别建立同时测定丹参胶囊中脂溶性成分二氢丹参酮I、隐丹参酮、丹参酮I及丹参酮IIA和水溶性成分丹参素、原儿茶醛、迷迭香酸、丹酚酸B及丹酚酸A的含量的方法。

方法：脂溶性成分：采用Welch ultimate XB-C18（250 mm×4.6 mm，5μm）色谱柱，以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱，流速1 mL·min-1，检测波长为270 nm。

水溶性成分：采用Thermo Syncronis C18（250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱，以甲醇-乙腈-0.02%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱，流速1 mL·min-1，检测波长为286 nm。

结果：丹参素、原儿茶醛、迷迭香酸、丹酚酸B、丹酚酸A、二氢丹参酮I、隐丹参酮、丹参酮I和丹参酮IIA分别在0.472-9.44μg（r=0.9998）、0.352-7.04μg（r=0.9999）、0.244-4.88μg（r=1.0000）、2.268-45.36μg（r=0.9999）、0.168-3.36μg（r=0.9999）、0.088-1.76μg（r=0.9999）、0.18-3.6μg（r=0.9999）、0.208-4.16μg（r=0.9999）和0.17-3.4μg（r=0.9999）呈良好的线性关系；加样回收率在97.48%-98.59%之间。

结论：该方法稳定，重复性好，可用于丹参胶囊含量的测定。

%This study was aimed to establish a HPLC method for the content determination of liposoluble components, such as dihydrotanshione I, croptotanshinone, tanshinone I and tanshinone IIA, as well as the content determination of water-soluble components, such as danshensu, protocatechuic aldehyde, rosmarinc acid, salvianolic acid B,and salvianolic acid A in Danshen capsule simultaneously. For liposoluble components, the determination was performed on a Welch ultimate XB-C18 column (250 mm × 4.6 mm, 5 μm) by gradient elution usingacetonitrile-water as the mobile phase. The flow rate was 1 mL·min-1. And the detection wavelength was set at 270 nm. For water-soluble components, the determination was performed on a Thermo SyncronisC18 column (250 mm × 4.6 mm, 5μm) by gradient elution using methanol-acetonitrile-0.02%phosphoric acid as the mobile phase. The flow rate was 1 mL·min-1. And the detection wavelength was set at 286 nm. The results showed that there were good linear relationships between components of peak areas and the ranges were 0.472-9.44 μg (r = 0.999 8) for danshensu,0.352-7.04 μg (r = 0.999 9) for protocatechuic ald ehyde, 0.244-4.88 μg (r =1.000 0) for rosmarinc acid,2.268-45.36 μg (r = 0.999 9) for salvianolic acid B, 0.168-3.36 μg (r = 0.999 9) for salvianolic acid A, 0.088-1.76 g(r=0.999 9) for dihydrotanshione I, 0.18-3.6μg (r=0.999 9) for croptotanshinone, 0.208-4.16μg (r=0.999 9) for tanshinone I, and 0.17-3.4μg (r=0.999 9) for tanshinone IIA. Average recoveries of the method were between97.48%and 98.59%. It was concluded that the analysis was stable and reproducible, which can be used as a method for the analysis of Danshen capsule.【期刊名称】《世界科学技术-中医药现代化》【年(卷),期】2014(000)012【总页数】6页(P2740-2745)【关键词】丹参胶囊;脂溶性成分;水溶性成分;高效液相;含量测定【作者】张珺;程月发;张爱兵【作者单位】河北联合大学冀唐学院唐山 063300;河北联合大学冀唐学院唐山063300;河北省唐山市药品检验所唐山 063000【正文语种】中文【中图分类】R284.1丹参胶囊作为临床常用中成药，具有活血化瘀的功效。

丹参的水溶性成分的分离与纯化一、实验目的对丹参药材中脂溶性成分，利用大孔吸附树脂进行脂溶性成分纯化研究二、实验原理丹参是中国传统中药, 是山东省的地道药材。

其主要功效为祛瘀止痛、活血通经、清心除烦。

广泛应用于治疗冠心病、中风、微循环障碍等疾病据文献报道, 丹参中的化学成分主要为脂溶性与水溶性两大类。

其中α脂溶性成分主要有三种: 丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA 和隐丹参酮, 目前多以丹参酮Ⅱ A 或以丹参酮Ⅰ、二氢丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA 及隐丹参酮等多种脂溶性成分联合作为含量测定的指标。

大孔吸附树脂具有吸附性和筛选性，其吸附性是由范德华引力或产生氢键的结果，分子筛选性是有其本身多孔性结构所决定的。

通过吸附和分子筛原理，有机化合物根据吸附力的不同及分子量的大小，在大孔吸附树脂上经一定的溶剂洗脱而达到分离、纯化、除杂、浓缩等不同目的。

三、仪器与材料1、丹参药材、乙醚、乙醇、蒸馏水、丹参素对照品、、大孔树脂等2、高效液相色谱仪、电子天平、蒸发仪、水浴锅、锥形瓶等四、实验内容1、提取1.1 丹参脂溶性成分初提物的制备取粉碎的丹参药材50g，90%乙醇水浴回流三次，每次10倍量、1.5h。

合并滤液并回收溶剂。

残渣用氯仿萃取溶解3次，每次50ml，合并氯仿液，回收氯仿，残渣用适量乙醇溶解，备用2、大孔吸附树脂使用2.1三种不同的大孔吸附树脂对丹参素的静态吸附量考察精密称取大孔树脂各1g，置100ml烧杯中，精密加入上样溶液20ml，每隔5min振摇10s，持续120min，然后静置过夜，使其达到饱和吸附，过滤取续滤液，通过0.45μm的微孔滤膜，上高效液相色谱仪测定丹参素的含量，按公式计算树脂的饱和吸附量静态饱和吸附量=[（初始浓度—吸附后浓度）×吸附液体积]／树脂量（mg.g-1）。

2.2 各种大孔树脂对丹参总黄酮的静态吸附-洗脱性能将2.1中过滤的大孔树脂精密加入70%乙醇20ml，时时振摇，持续120min，静置过夜，过滤取续滤液，通过0.45μm的微孔滤膜，用高效液相色谱法计算丹参素的含量静态洗脱率=（洗脱剂浓度×洗脱剂体积）／饱和吸附量×100%。

丹参活性成分的现代中药药理研究进展分析丹参又称赤参、紫丹参、红根等，主要生长于生于山坡草地林边道旁，或疏林干燥地上。

其味苦，微寒。

研究表明丹参的活性成分有脂溶性性质的和水溶性性质的两部分组成[1]，脂溶性性质的成分主要包括丹参酮，而水溶性质的成分主要包括迷迭香酸、丹酚酸、丹参素等。

丹参主要应用于瘀血、疼痛、月经不调、痛经经闭、产后瘀滞腹痛、关节痹痛、跌打瘀肿、温病心烦、血虚心悸、疮疡肿毒、丹疹疥癣等疾病的治疗。

随着对丹参活性成分药用价值的研究不断深入，其在肿瘤疾病、心血管疾病和其它方面的应用价值也被逐渐发掘，本文主要对丹参活性成分的现代中药药理作用进行综述，具体信息如下。

1 在肿瘤方面的药用效果丹参酮是丹参的活性成分之一，近些年的研究发现其在肿瘤的预防和治疗具有重要的意义，主要通过抑制肿瘤细胞繁殖、促进肿瘤细胞分化与凋亡来其作用。

1.1 抑制肿瘤细胞繁殖：有关研究人员通过把含有丹参酮色素的1 6种活性成分（从丹参根部分离获取）对3种肿瘤细胞胞株进行处理2天后，结果发现这3中肿瘤细胞的繁殖增加速度降低程度明显。

主要起作用机制是丹参酮中菲环结构与DNA分子相结合，呋喃环、醌类结构能够形成自由基从而使DNA受到破坏，防止肿瘤细胞DNA形成[4]。

1.2 促使肿瘤细胞分化：研究发现做好肿瘤细胞分化工作对于肿瘤疾病的治疗十分关键。

通过实验发现丹参酮ⅡA把肿瘤恶性细胞分化成对人体无伤害的良性细胞，而对良性细胞不具有杀伤能力。

1.3 促使肿瘤细胞凋亡：细胞凋亡是指为维持内环境稳定，由基因控制的细胞自主的有序的死亡，它涉及一系列基因的激活、表达以及调控等的作用，它并不是病理条件下，自体损伤的一种现象，而是为更好地适应生存环境而主动争取的一种死亡过程。

实验发现丹参酮ⅡA 具有调控基因表达的作用，从而达到促使肿瘤细胞凋亡的作用。

2 心血管疾病方面的效果2.1 丹参素能够起到抑制血栓的出现[2]：具有遏制血小板凝结的作用；能够促进血小板膜的循环，使其流动性加快；丹参素可在很大程度上让人体的抗凝和纤溶活性得到改善，能够促进环腺苷酸（cAM P）的产生。

文章编号:167424616(2009)012045204#文献综述#丹参的化学成分及其药理作用研究概述徐丽君黄光英华中科技大学同济医学院附属同济医院中西医结合研究所,武汉430030丹参(Sa lvia m ilti orrhiza Bge)是唇形科植物,药用其干燥的根及根茎。

丹参主产四川、山东、浙江等省,现全国大部分地区有分布。

丹参始载于5神农本草经6,列为上品。

以后历代本草均有收载,5本草纲目6记载,丹参色赤味苦,气平而降,阴中之阳也。

入手少阴、厥阴经。

心与包络血分药也。

5妇人明理论6曰:四物汤治妇人病,不问产前、产后、经水多少,皆可通用。

/惟一味丹参散,主治与之相同0。

丹参除了有以上功效外,现代医学研究和临床实践还表明,丹参有扩张冠状动脉、增加冠状动脉血流量、减慢心率、改善心肌缺氧之功效,常用于治疗冠心病、心绞痛、胸闷、心悸等症。

可治疗心肌梗塞、心肌炎,可改善急性症状和心电图缺血性改变,这也证明了丹参/一味丹参抵四物0的说法。

近年随着研究的深入,对于其化学成分组成、药理作用特点及机制等有较全面和系统的认识。

现将丹参研究的进展概述如下。

1化学成分[1–4]丹参的化学成分分为脂溶性和水溶性两大类,现分别予以介绍。

1.1脂溶性成分丹参的脂溶性大多为共轭醌、酮类化合物,具有特征的橙黄色和橙红色。

其主要包含以下物质:丹参酮Ñ、丹参酮ÒA、丹参酮ÒB、丹参酮Õ、丹参酮Ö、隐丹参酮、羟基丹参酮、丹参酸甲酯、次甲基丹参醌、紫丹参甲素、紫丹参乙素、戊素、丹参新酮、1,2二氢丹参醌、丹参醇Ñ、丹参醇Ò、丹参醇Ó、3A2羟基丹参酮ÒA、降丹参酮、1,2,15,162四氢丹参醌、异丹参酮Ñ、异丹参酮Ò、异隐丹参酮、丹参醌A、丹参醌B、丹参醌C、丹参醌D、二氢次丹参醌、二萜萘嵌苯酮、丹参螺旋缩酮内酯、丹参酚、丹参醛。

丹参中脂溶性成分的提取方法的探究丹参中脂溶性成分的提取方法的探讨【摘要】目的丹参中脂溶性成分丹参酮ⅡA是丹参制剂中重要的活性成分,也是成品的主要检测指标,通过对丹参酮ⅡA提取方法的研究,对丹参制剂提取工艺的优化具有重要的现实意义。

方法根据当前丹参制剂的生产工艺出发,在提取时间、溶媒倍数、提取温度、溶媒浓度等方面进行筛选试验,利用高效液相色谱法进行含量测定。

结果丹参的最佳提取重要条件为,4倍量90%的乙醇,70℃温浸小时,通过实验证明采用以上所述的丹参提取方法,干燥过程同样采用低温减压浓缩的丹参提取物中丹参酮ⅡA转移率超过50%。

结论本方法简便,快速,利于有效成分保留,适用于丹参中脂溶性成分的提取,对于丹参制剂的生产工艺优化有指导意义。

【关键词】丹参酮ⅡA 提取方法工艺优化丹参为唇形科鼠尾草,属多年生草本植物丹参的干燥根,其活性成分可分为脂溶性成分和水溶性酚酸成分,前者主要包括丹参酮ⅡA、丹参酮I和隐丹参酮等;后者主要包括丹参素、原儿茶醛、咖啡酸、丹酚酸B和丹酚酸C等。

本文以脂溶性成分丹参酮ⅡA为指标对提取方法进行研究。

丹参酮ⅡA在临床上具有很好的药理活性,有抗凝血、促纤溶作用。

我们以丹参酮ⅡA这一活性成分为指标,从提取时间、提取溶媒倍数、提取温度、提取溶媒浓度等方面进行试验,以筛选提取条件,为提取工艺优化奠定基础。

1 药品与试剂丹参(蓟县野生药材),丹参酮ⅡA对照品(购于中国药品生物制品检定所),甲醇(分析纯)、乙醇(药用级)、蒸馏水。

2 方法色谱条件的确定高效液相色谱仪:SP-8100。

色谱柱:YMC C18分析柱(×150mm)。

流动相:甲醇-水(75∶25)。

检测波长:270nm。

流速:1ml/min。

对照品溶液的制备精密称取丹参酮ⅡA对照品,用分析甲醇配制成浓度为/ml的对照品溶液。

3 试验及结果试验用丹参药材中丹参酮ⅡA的含量测定取丹参粉末(过三号筛),精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加甲醇50ml,密塞,称定重量,加热回流1小时,放冷,密塞,再称定重量,用甲醇补足重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。

丹参的主要化学成分、药理作用和功效（1）主要化学成分丹参的化学成分主要有两大类：脂溶性的丹参酮类化合物和水溶性的酚酸类化合物。

脂溶性成分属醌、酮型结构的有：丹参酮，隐丹参酮，异丹参酮，异隐丹参酮，羟基丹参酮，丹参酸甲酯，亚甲基丹参醌，二氢丹参酮，丹参新醌A、B、C、D,二氢异丹参酮，新隐丹参酮，去羟新隐丹参酮，代号为Ro-090680的2-异丙基-8-甲基菲-3, 4-二酮，去甲丹参酮，丹参二醇A、B、C，丹参新酮，1-氢丹参新酮，1-氢丹参酮，1-氧代异隐丹参酮，3a-羟基丹参酮IIA, 1, 2-二氢丹参醌，醛基丹参酮，亚甲二氢丹参酮，7伏羟基-8, 13-松香二烯-11, 12-二酮，1，2，5，6-四氢丹参酮，4-亚甲丹参新酮，丹参酚醌，鼠尾草呋萘嵌苯酮，丹参内酯，二氢丹参内酯，丹参螺缩酮内酯，表丹参螺缩酮内酯，丹参螺缩酮内酯I,就是丹参隐螺内酯，表丹参螺缩酮内酯I,就是丹参隐螺内酯，鼠尾草酮，鼠尾草酚酮，丹参酮二酚。

丹参环庚三烯酚酮等；属其他类型结构的有：降鼠尾草氧化物,弥罗松酚,鼠尾草酚,柳杉酚等。

水溶性成分酚性酸化合物有：丹参酸A、B、C,丹参酸A又称丹参素，其结构为D（+）-0-（3, 4-二羟基苯基）乳酸，丹参酸B是由3分子的丹参素和1分子的咖啡酸缩合形成的，就是丹参酚酸B;丹参酸C是2分子丹参素的缩合物；丹参酚酸A、B、C、D、E、G；迷迭香酸，迷迭香酸甲酯，紫草酸草酸单甲脂，紫草酸二甲酯，紫草酸乙酯，紫草酸B,原儿茶醛，咖啡酸，异阿魏酸等。

还含黄芩甙，异欧前胡内酯，熊果酸，快谷甾醇，胡萝卜甙，5-（3-羟丙基）-7-甲氧基-2-（3'-甲氧基4-羟苯基）-3-苯并［b］呋喃甲醛，替告皂甙元，豆甾醇等。

（2）药理作用和功效丹参有祛瘀止痛、活血通经、清心除烦的功效。

现代药理学的研究表明, 它具有多方面的药理作用。

对心血管系统可增加冠脉流量、降低心肌兴奋性和传导性,对急性心肌缺血缺氧所致的心肌损伤具有明显保护作用。

关于丹参的化学成分与药理作用分析摘要】目的: 对丹参的相关资料进行汇总，分析其化学成分和药理作用，为临床医疗提供运用的依据。

方法: 查阅与丹参相关的文献资料，进行分类汇总与分析。

结果: 丹参的化学成分主要分为脂溶性与水溶性两种，两种成分的药理作用侧重点不同。

但整体上来说，丹参的药理作用广泛，不但对消化系统与心血管系统都有所影响，并且具有抗肿瘤、抗菌、消炎的作用。

结论: 丹参的药理作用稳定，值得临床推广应用。

【关键词】丹参化学成分药理作用丹参最初记载于《神农本草经》中，并被列为上品药材。

其中有记录丹参味苦、微寒，被列入肝、心经，具有凉血消痈、活血通络、清心除烦、祛淤止痛的治疗功效[1]。

丹参( Salvia miltiorrhiza Bunge)是一种唇形科的植物，它的根茎以及干燥根可以在春季与秋季进行采挖，去除表面的泥沙，干燥过后即可入药。

在中医上，通常用丹参来治疗胸腹刺痛、瘫痕积聚、热痹疼痛、心烦不眠、心绞痛、疮疡肿痛、经闭痛经、月经不调、肝脾肿大等，因此，中医治疗上有“ 一味丹参，功同四物”的说法。

在西医临床治疗上，丹参是一味常用的医疗药物，常用在缺血性脑血管病与冠心病的治疗上，且治疗效果很好，但丹参已被临床医疗证实具有活血化瘀的药理活性，因此，具有出血倾向的患者要谨慎使用。

目前以丹参为主药材制作的药剂主要有冠心丹参片、复方丹参片与丹参注射液，其中冠心丹参片与复方丹参片主要用在治疗心脑血管类疾病上，并且已经被收录进中国药典。

1 化学成分目前临床上已经分离并鉴定出了50多种丹参的有效化学成份。

主要有水溶性与脂溶性两大类。

丹参的水溶性成分主要有丹参素［β－( 3、4-二羟基苯基)乳酸］和原儿茶醛以及β-谷甾醇等，其中的丹酚类还具有保护细胞、调血脂、抗血栓形成、抗凝血、抗氧化的作用。

而丹参的脂溶性成分主要为二氢丹参酮Ⅰ、丹参酮I、丹参酮ⅡB、异丹参酮Ⅱ、异丹参酮、丹参新酮、隐丹参酮、异隐丹参酮、丹参酮ⅡA等多种菲醌衍生物，其中的丹参酮类主要有抗炎、抗菌与改善血液循环的作用。

·药品质量控制·高效液相色谱法同时测定丹参药材水溶性和脂溶性成分的含量*翟学佳1,徐锦凤2(1.华中科技大学同济医学院附属协和医院药剂科,武汉430022;2.武汉市中心医院心电图室,430014[摘要]目的建立丹参药材水溶性成分中丹参素、原儿茶醛、丹酚酸B 和脂溶性成分中二氢丹参酮I 、隐丹参酮、丹参酮I 、丹参酮I I A 的含量测定方法。

方法采用高效液相色谱法测定,色谱柱为汉邦C 18色谱柱(4.6m m×250mm ,5μm ;流动相A 为0.1%甲酸-水(V /V ,流动相B 为乙腈,线性洗脱梯度为0~10m i n ,B 相10%~20%,10~27m i n ,B 相20%~33%,27~30m i n ,B 相33%~70%,30~50m i n ,B 相70%~85%;柱温:20℃;流速:1m L ·m i n -1;进样量:10μL ;检测波长:280n m 。

结果丹参素、原儿茶醛、丹酚酸B 、二氢丹参酮I 、隐丹参酮、丹参酮I 和丹参酮I I A在0.0372~118.0000,0.0174~8.9000,0.141~450.000,0.0188~56.8000,0.0497~158.0000,0.02 15~78.5000,0.0962~308.0000m g ·L -1浓度范围内均呈良好线性关系(R 2≥0.9992;各成分的平均加样回收率均在98.5%~101.5%,R S D 均<1.98%(n =6;日内日间精密度良好,R S D 均<2.16%。

结论该方法简便、准确、重复性好,可用于丹参药材的含量测定。

[关键词]丹参;丹参素;丹酚酸B ;二氢丹参酮I ;色谱法,高效液相[中图分类号]R 282.71;R 927.2[文献标识码] A [文章编号] 1004-0781(200910-1345-04S i m u l t a n e o u s D e t e r m i n a t i o n o f H y d r o p h i l i c a n dL i p o p h i l i c C o m p o u n d s i nR a d i x S a l v i a eM i l t i o r r h i z a e b y H P L CZ H A I X u e -j i a 1,X U J i n -f e n g 2(1.D e p a r t m e n t o f P h a r m a c y ,U n i o nH o s p i t a l A f f i l i a t e dw i t hT o n g j i M e d i c a l C o l l e g e ,H u a z h o n g U n i v e r s i t y o f S c i e n c e a n d T e c h n o l o g y ,W u h a n 430022,C h i n a ;2.D e p a r t m e n t o f E C G ,C e n t r a l H o s p i t a l o f W u h a n C i t y ,W u h a n 430014C h i n aA B S T R A C T O b j e c t i v e T o e s t a b l i s h a m e t h o d f o r d e t e r m i n a t i o n o f t h e h y d r o p h i l i c o f d a n s h e n s u ,p r o t o c a t e c h u i c a l d e h y d e ,s a l v i a n o l i c a c i dBa n dl i p o p h i l i cc o m p o u n d s o f d i h y d r o -t a n s h i n o n eI ,c r y p t o t a n s h i n o n e ,t a n s h i n o n e I a n dt a n s h i n o n e I I A i nR a d i x S a l v i a e M i l t i o r r h i z a e .Me t h o d s C h r o m a t o g r a p h y w a s p e r f o r m e d o n a L i c h r o s p h e r -C 18c o l u m n (250m m ×4.6m mi .d .;5μm p a r t i c l e s i z e .T h e s e p a r a t i o n w a s a c h i e v e db y a l i n e a r g r a d i e n t e l u t i o n .M o b i l e p h a s e w a s t h e m i x t u r e o f s o l v e n t A(1%a q u e o u s f o r m i c a c i d a n ds o l v e n t B(a c e t o n i t r i l e .T h e g r a d i e n t e l u t i o n w a s c o n d u c t e da s f o l l o w s :10%-20%Bi n 0-10m i n ,20%-33%Bi n 10-27m i n ,33%-70%Bi n 27-30m i n ,a n d 70%-85%Bi n 30-50m i n .T h e i n j e c t i o n v o l u m e o f 10μLa n d t h eU Vw a v e l e n g t h o f 280n mw e r e u s e d i n t h e a n a l y s i s .T h e f l o wr a t e w a s 1.0m L ·m i n -1a n d t h e c o l u m n o p e r a t e d a t 20℃.R e s u l t s Ag o o d l i n e a r i t y w a s ob t a i n e dw i t ht h ec o r r e l a t i o nc o e f f i c i e n t s o f t a n s h i n o l ,p r o t o c a t e c h u a lde h y d e ,s a l v i a n o l i ca c i dB ,d i h y d r o -t a n s h i n o n e I ,c r y p t o t a n s h i n o n e ,t a n s h i n o n eIa n dt a n s h i n o n eI I A r a n g e df r o m 0.0372-118.0000mg ·L -1,0.0174-8.9000m g ·L -1,0.141-450.000m g ·L -1,0.0188-56.8000m g ·L -1,0.0497-158.0000m g ·L -1,0.0215-78.5000m g ·L -1,0.0962-308.0000m g ·L -1(R2≥0.9992,r e s p e c t i v e l y .Th e a v e r a g e r e c o v e r y r a t e s o f t h e f o u ri n v e s t i g a t e d c o m p o u n d s w e r e i nt h e r a n g e o f 98.5%-101.5%f o r a l l w i t h R S Db e l o w 1.98%(n =6.T h e i n t r a -d a y a n d i n t e r -d a y p r e c i s i o n o f t h e a s s a y w e r e n o m o r e t h a n 2.16%(n =6. C o n c l u s i o n T h e m e t h o di s a c c u r a t e a n dr e l i a b l e w i t h g o o dr e p r o d u c i b i l i t y ,a n d c a nb e u s e da s a d e t e r m i n a t i o n s t a n d a r d f o r R a d i x S a l v i a e M i l t i o r r h i z a e .K E YWO R D S R a d i x S a l v i a e M i l t i o r r h i z a e ;D a n s h e n s u ;S a l v i a n o l i c a c i dB ;D i h y d r o -t a n s h i n o n e I ;H P L C丹参系唇形科植物丹参(S a l v i a m i l t i o r r h i z aB g e .的干燥根及根茎,味苦,性微寒,具有祛瘀镇痛、活血通经、清心除烦的作用,广泛用于冠心病、肝炎、月经紊[收稿日期]2008-11-26[基金项目]*国家重点基础研究发展计划(973计划项目(基金编号:2005C B 523402[作者简介]翟学佳(1983-,女,湖北武汉人,药师,硕士,从事药物质量标准研究。

高效液相色谱法分析丹参水溶性成分研究概况作者：季庆亮来源：《中国新技术新产品》2011年第04期摘要：丹参是一种传统中药，但其水溶性成分的研究是近年才展开的。

本文概述了高效液相色谱法分析丹参水溶性成分的研究进展。

关键词：丹参；水溶性成分；高效液相色谱法中图分类号：R9 文献标识码：A中药丹参为唇形科鼠尾草属植物丹参的干燥根及根茎，是常用的活血化瘀中药。

丹参活性成分主要分为脂溶性成分和水溶性成分两类。

国内外对丹参及其同属植物的脂溶性成分进行了大量研究，然而中医传统用药方法是用水煎剂，即丹参的水溶性部位。

所以研究丹参水溶性成分更有意义。

现就目前高效液相色谱法分析丹参水溶性成分方面的研究作一综述。

1 丹参素的HPLC测定如注射用丹参（冻干）中丹参素钠的测定，就是以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以二甲基甲酰胺-甲醇-水-冰醋酸（4：4：90：2）为流动相；检测波长为281nm。

代彩芹等报道，用反相HPLC法，以甲醇-0.4%醋酸(5:95)作流动相，检测波长281 nm。

结果样品平均加样回收率为99.71%，RSD为0.96%。

王杰民等采用以甲醇和0.25%醋酸溶液分别为流动相A和B 的梯度洗脱技术，YWGC18H37色谱柱，对羟基苯甲酸为内标，280nm波长处检测。

结果线性关系良好，丹参素的回收率为104.0%±1.7%。

李正国等以水-甲醇-冰醋酸（94：4：0.6）为流动相，用C18-ODS柱测定丹红注射液中丹参素的含量，检测波长278nm,外标法定量分析, 结果样品平均加样回收率为100.90%,RSD为1.41%。

余练康等以甲醇-0.2mol/L的醋酸铵(12:88)为流动相(硫酸调节PH2.2)，测定乐脉颗粒中丹参素的含量。

2 原儿茶醛的HPLC测定向大雄等采用YWG- C18反相柱，甲醇-乙腈-冰乙酸-水（15：5：1：84）为流动相测定了不同丹参制剂中原儿茶醛的含量。

王凌等以甲醇-水(15:85)为流动相(磷酸调节PH2.45)，检测波长281nm,用C18-ODS柱测定原儿茶醛含量。

丹参脂溶性成分的药理学研究进展丹参为多年生草本植物丹参（Salvia miltiorrhiza Bunge）的干燥根及根茎，其有效成分根据溶解性可分为水溶性成分和脂溶性成分。

现代药理学的研究表明，丹参脂溶性成分具有多方面的药理作用，如具有增加冠脉流量、降低心肌兴奋性和传导性、对心肌缺血性损伤的保护作用、还具有抗菌消炎、抗氧化、抗肿瘤、改善肾功能、改善学习记忆以及对脑组织缺血/再灌注损伤的保护作用。

本文就丹参脂溶性成分的药理作用作一综述。

标签：丹参；脂溶性成分；药理作用1 氧化作用赵清等[1]发现丹参能提高血中超氧化物歧化酶（SOD）的活性，具有较强的抗脂质过氧化和自由基清除作用。

杨萍等[2]发现丹参酮ⅡA可抑制过氧化氢诱导的心肌细胞损伤，与模型组比较，丹参酮ⅡA可显著增加心肌细胞活力，降低细胞凋亡率，并呈剂量依赖性显著降低LDH活性及MDA含量，增加总抗氧化能力，以实现其对心肌细胞的氧化应激状态的保护作用，这可能与其增强细胞抗氧化酶活力，降低脂质过氧化反应有关。

因此，在再灌注或恢复供氧早期给予丹参对于减轻心肌细胞损伤有着重要的意义。

2 抗菌、抗病毒作用丹参复方常用于感染性疾病如肺炎、腹泻、痤疮、病毒性心肌炎和肝炎的治疗。

研究表明，丹参酮对多种细菌和病毒均有抑制作用，如丹参酮ⅡA、隐丹参酮对人型结核菌株H37Rv均有较强的抑制作用；隐丹参酮、丹参酮ⅡB具有抗金黄色葡萄球菌及其耐药性菌株的活性。

Ji-Young Park等[3]研究表明多種丹参酮包括丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA及隐丹参酮等能够选择性抑制SARS-CoV 3CLpro，PLpro和病毒半胱氨酸蛋白酶而发挥抗SARS冠状病毒的作用。

3 抗炎作用JIN Dao-Zhong等[4]研究表明隐丹参酮通过抑制环氧化酶COX-2的活性产生抗炎作用，大鼠口服较低剂量的隐丹参酮即能明显减轻足肿胀，表明隐丹参酮具有显著的抗炎作用。

M-J Don等[5]实验研究表明隐丹参酮可以通过抑制P13K 信号通路的激活，降低Akt和ERK1/2的磷酸化而抑制巨噬细胞的趋化性迁移，从而发挥抗炎活性。

丹参水溶性成分与脂溶性成分抑菌作用的考察（作者:___________单位: ___________邮编: ___________）作者：周静李惠芬王洪志骆达杜凡王宇歆吴咸中【摘要】目的考察丹参中水溶性成分与脂溶性成分的含量及其抑菌作用。

方法采用HPLC法测定丹参素、原儿茶醛和丹参酮ⅡA含量；以平板二倍稀释法统计最小抑菌浓度（MIC），探讨其体外抑菌作用。

结果丹参水溶性成分和脂溶性成分均对金黄色葡萄球菌标准株、临床株；大肠埃希菌标准株；铜绿杆菌标准株；大肠杆菌临床株1、临床株2有抑菌作用，两种抑菌药液均对金黄色葡萄球菌标准株、临床株作用最强，对大肠埃希菌标准株作用相对较弱；水溶性成分的抑菌作用强于脂溶性成分。

结论丹参水溶性成分与脂溶性成分均具有一定的抑菌活性，提示该作用可进一步开发利用。

【关键词】丹参丹参素原儿茶醛丹参酮ⅡA 抑菌Abstract:ObjectiveTo investigate the content of liposoluble and hydrosoluble constituents in Salvia miltiorrhiza Bge. and its antibacterial effect．MethodsThe contents of danshensu,protocateehualdehyde and salviolⅡAwere determined by HPLC and the antimicrobial effect was obseved according to MIC by the method of plate doubling-dilution．ResultsThe liposoluble and hydrosoluble constituents of Salvia miltiorrhiza Bge. had some inhibition on all bacterial species in our experiments, especially the strongest on Staphylococcus aureus，the weakest on Bacillus coli; moreover, the hydrosoluble constituent had stronger effect than the liposoluble one.ConclusionThe antibacterial active components of Salvia miltiorrhiza Bge. need to make better use.Key words：Salvia miltiorrhiza Bge.; Danshensu; Protocateehualdehyde; SalviolⅡA; Antibacterial effect丹参Salvia miltiorrhiza Bge.属唇形科植物，其药用部位为干燥根及根茎，味苦，性微寒［1］，归心、肝经，具有祛淤止痛、活血通经、清心除烦等功效［2］，临床广泛用于活血化瘀、宁心安神、抗菌消炎和心脑血管疾患等症，是国内外现代化中药研究的热点品种之一［3］。

丹参中水溶性活性成分提取工艺的研究作者：秦绪江来源：《中国新技术新产品》2009年第09期摘要：目的：优选丹参中水溶性活性成分提取工艺。

方法：采用正交试验优化丹参水提液的提取工艺；以紫外法和HPLC法检测不同工艺前后有效成分的含量变化，考察不同浓度的醇沉除杂工艺。

结果与结论：丹参水溶性成分提取的最佳工艺为：药材粉碎过20目筛，混匀后用8倍量水浸泡1．5 h，煎煮1．5 h，第2次加6倍量水，煎煮1.0 h，采用50%醇沉。

此方案的酚酸得率、得膏率均较高。

为大生产提取纯化丹参水溶性活性成分提供了实验依据。

关键词：丹参；提取工艺；正交试验丹参为唇形科植物丹参(Salvia miltiorrhiza Bge．)的干燥根及根茎，其味苦，性微寒，具有扩张血管，改善微循环，增加心肌供血量和供氧量、降低心肌耗氧量等作用。

现代药理研究证明：丹参中脂溶性有效成分为丹参酮类，具有抗菌作用，水溶性有效成分则为酚酸类，具有抗氧化，改善心肌缺血等药理作用。

其中丹参素和原儿茶醛是丹参水溶性成分中的主要药效成分。

本文以丹参素和原儿茶醛为指标，采用HPLC检测法，考察丹参水提液在不同浓度醇沉条件对有效成分出膏率、损失率的影响，得出了丹参水提液的最佳提取工艺。

为丹参制剂的前处理提供实验依据。

1 仪器与材料1.1 丹参药材:产地为山东，经鉴定符合《中国药典》2005版一部的要求。

1.2试剂:用于分析数据的试剂均为分析纯或色谱纯。

1.3标准品:丹参素钠、原儿茶醛(中国药品生物制品检定所)1.4仪器:Uv-VIS-NIR分光光度计(日本岛津) ；Waters 515 高效液相色谱仪；BP210S电子天平(德国Sartorius)。

2 实验与结果2.1 色谱条件：色谱柱：ThermoODS-2(150 mm×4．6 mm，5μm)；流动相：甲醇:0.5%冰醋酸(1:7)；流速：1.0 ml／min；柱温：35℃；测定波长：281 nm。

UPLC-MS法测定丹参药品中水溶性成分含量摘要：传统中药丹参，是著名抗衰老中药。

本文介绍了丹参的作用、主要成分及用途，并对丹参国内外研究现状及趋势进行了阐述，还介绍了高效液相色谱-质谱联用的特点，UPLC-MS在中药含量测定中的应用以及中药材在含量测定时的指标成分选择。

我参考有关文献采用UPLC-MS法测定复方丹参片、复方丹参滴丸、丹参注射液中三种水溶性成分迷迭香酸、原儿茶醛、丹酚酸B的含量，采用色谱柱Hypersil GOLD (100 mm×2.1 mm，1.9μm)，以甲醇-水-甲酸为流动相进行梯度洗脱，流速为0.300ml·min-1通过质谱解析以及与对照品比较，运用质谱仪定性分析丹参中各种水溶性成分，并建立了HPLC分析方法同时测定这三种成分的含量。

该方法操作简便、灵敏度高、重现性好，为丹参中药制剂质量标准的研究提供实验依据。

关键词：丹参药品；高效液相色谱质谱联用；水溶性成份UPLC - MS Method for Determination of Water-soluble Components in Salvia Miltiorrhiza and Drug IngredientsAbstract: Traditional Chinese medicine danshen, is famous anti-aging medicine. This paper introduces the function, the main ingredient of salvia miltiorrhiza and USES, and the domestic and foreign research present situation and trend of salvia miltiorrhiza, high performance liquid chromatography - mass spectrometry is introduced in the paper, the characteristics of the application of UP LC - MS in content of traditional Chinese medicine (TCM) and Chinese herbal medicine in the choice of indicator elements in the content determination.My reference literatures UP LC - MS method is used to determine the effect, compound danshen dropping pill, three kinds of water-soluble components in salvia miltiorrhiza injection rosemary acid, protocatechuic aldehyde, Dan phenolic acids content of B, the chromatographic column is 100 mm x 2.1 mm, 1.9 mu m model, with methanol - water - formic acid as mobile phase gradient elution, flow rate of 0.300 ml, min - 1 by mass spectrum analysis, and comparison with the reference substance, using qualitative analysis all kinds of water soluble constituents of salvia miltiorrhiza mass spectrometer and to establish the HPLC analysis method for determine the content of these three components simultaneously.The method is simple, high sensitivity, good reproducibility, to the research of salvia miltiorrhiza quality standards of TCM and to provide experimental basis.Key words: Danshen medicines；Water-soluble components；UPLC-MS目录摘要 (x)Abstract (x)第一章前言 (x)1本论文内容 (x)2研究的目的 (x)2.1 研究的背景和意义 (x)2.2 研究的创新点及难点……………………………………………………………3丹参概述 (x)3.1 丹参的介绍 (x)形态特征………………………………………………………………………生境分布………………………………………………………………………化学成分………………………………………………………………………3.2 丹参的功效及作用 (x)3.3 丹参的发展及研究现状 (x)4主要成分提取和分离的方法 (x)4.1 醇提法 (x)4.2 CO超临界流体萃取技术 (x)2高速逆流色谱法 (x)4.4 超声波提取法 (x)5 丹参有效成分的测定方法 (x)薄层色谱法 (x)紫外分光光度法 (x)气相色谱法法 (x)高效液相色谱法 (x)高效液相色谱—质谱联用概述 (x)液相色谱-质谱联用仪介绍 (x)5.5.2 液相色谱-质谱联用仪的发展 (x)5.5.3 液相色谱-质谱联用仪的特点 (x)6 HPLC-MS在中药含量测定方面研究状况 (x)已知化合物定性分析及结构鉴定中的应用 (x)未知成分定性分析中的应用 (x)药物代谢中的应用 (x)第二章实验部分 (x)1仪器与试剂 (x)1.1仪器 (x)1.2试剂 (x)2方法 (x)2.1 条件的选择 (x)色谱条件 (x)质谱条件 (x)流速的选择 (x)离子化模式的选择 (x)2.1.5 MS条件的选择 (x)定量离子对的选择 (x)对照品溶液的制备 (x)样品溶液的制备 (x)方法学考察 (x)线性关系试验 (x)精密度 (x)重复性 (x)稳定性 (x)加标回收率 (x)样品含量测定 (x)3 结果与讨论 (x)4 展望 (x)结论 (x)参考文献 (x)致谢 (x)第一章前言1 本论文内容传统中药丹参为唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge．的干燥根及根茎，是著名抗衰老中药。