生物显微技术复习概要
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七年级生物上册复习提纲七班级学生只有通过反复地复习、思考,才能逐步全面、深刻地领悟其中生物知识深奥的含义。
这是整理的七班级生物上册复习提纲,希望你能从中得到感悟!七班级生物上册复习提纲(一)练习使用显微镜一、1. 显微镜的结构镜座:稳定镜身;镜柱:支持镜柱以上的部分;镜臂:握镜的部位;载物台:放置玻片标本的地方。
中央有通光孔,两旁各有一个压片夹,用于固定所观察的物体。
遮光器:上面有大小不等的圆孔,叫光圈。
每个光圈都可以对准通光孔。
光线用来调节光线的强弱:反光镜:可以转动,使光线经过通光孔反射上来。
其两面是不同的:镜筒:上端装目镜,下端有转换器,在转换器上装有物镜,后方有准焦螺旋。
准焦螺旋:粗准焦螺旋(又称粗调):转动时镜筒升降的幅度大;细准焦螺旋(又称细调)。
转动方向和升降方向的关系:顺时针转动准焦螺旋,镜筒下降;反之则上升三、显微镜的使用P37-38 的图要掌握1、观察的物像与实际图像相反。
2、放大倍数=物镜倍数X目镜倍数3、放在显微镜下观察的生物标本,应该薄而透明,光线能透过,才能观察清楚。
因此必须加工制成玻片标本。
七班级生物上册复习提纲(二)生物和生物圈▲生物的特征:1、生物的生活需要营养2、生物能进行呼吸3、生物能排出体内产生的废物4、生物能对外界刺激做出反应5、生物能生长和繁殖6、由细胞构成(病毒除外)▲调查的一般方法步骤:明确调查目的、确定调查对象、制定合理的调查方案、调查记录、对调查结果进行整理分析、撰写调查报告生物的分类(根据形态结构分:动物、植物、其他生物;根据生活环境分:陆生生物、水生生物;根据用途分:作物、家禽、家畜、宠物)▲生物圈是所有生物的家▲生物圈的范围:(大气圈的底部:可飞翔的鸟类、昆虫、细菌等;水圈的大部:距海平面150米内的水层;岩石圈的表面:是一切陆生生物的"立足点')生物圈为生物的生存提供了基本条件:营养物质、阳光、空气和水,适宜的温度和一定的生存空间▲环境对生物的影响非生物因素对生物的影响:光、水分、温度等▲光对鼠妇生活影响的实验P15▲探究的过程:1、提出问题2、作出假设3、制定计划4、实施计划5、得出结论6、表达和沟通▲对比实验(P15)▲生物因素对生物的影响:最常见的生物间关系是捕食关系,还有竞争关系、合作关系、寄生关系▲生物对环境的适应和影响现在生存的每一种生物,都是有与其生活环境相适应的形态结构和生活方式。
高中生物学涉及的重要方法技术概述一、题型特征本类题目多就教材中涉及的重要方法技术及其应用予以考查,题目侧重于对方法技术的理解及其与应用实例间对应关系的考查,尤其对显微观察法、假说—演绎法、样方法、标志重捕法及同位素标记法的应用考查频度相对较高。
二、方法技巧准确解答此类问题的关键,首先应对教材中涉及的几类生物学常用方法技术熟记于心,其次要梳理、归纳各类研究方法技术对应的应用实例或应用拓展,在二轮复习期间,宜对相关方法技术及应用实例进行集中排查,并进行专项集训,以求加深对相关方法技术的理解与记忆。
三、专项归纳1.高中生物实验常用的方法技术:如右图所示2.高中生物教材涉及的方法技术归纳如下:(1)显微观察法:观察多种多样的细胞;观察花生子叶细胞的着色情况;观察DNA和RNA在细胞中的分布;观察叶绿体和线粒体;观察质壁分离及其复原;观察根尖分生区组织细胞的有丝分裂;观察蝗虫精母细胞的减数分裂;观察低温诱导染色体数目的变异;观察酵母菌种群数量的变化;观察土壤中的小动物等。
(2)差速离心法:分离细胞器;制备细胞膜。
(3)密度梯度离心法:证明DNA半保留复制。
(4)细胞染色法:活细胞染色(健那绿染色线粒体);碘染色法(证明光合作用产生淀粉);死细胞染色(醋酸洋红、龙胆紫、改良苯酚品红染液、甲基绿—吡罗红等)。
(5)同位素标记法:分泌蛋白的合成和运输(3H);鲁宾和卡门证明光合作用释放的O2来自H2O(18O);卡尔文循环:14CO2→14C3→(14CH2O);DNA半保留复制的实验证据(15N);噬菌体侵染细菌实验(32P、35S)等。
(6)纸层析法:绿叶中色素的提取和分离;选修1胡萝卜素的鉴定。
(7)对比实验法:探究酶活性的最适温度和最适pH;探究酵母菌细胞呼吸的方式;探究生长素类似物促进扦插枝条生根的最适浓度;选修1探究果胶酶活性的最适条件等。
(8)设置梯度实验法:探究酶活性的最适温度和最适pH;探究生长素类似物促进扦插枝条生根的最适浓度;选修1探究果胶酶活性的最适条件等。
使用高倍显微镜观察几种细胞1、高倍镜的使用步骤找(低倍镜下找到物像)移(将物像移至视野中央)转(转动转换器换上高倍镜)调(调节光圈和细准焦螺旋,使视野明亮,物像清晰)2、实验原理:(1)放大倍数的计算:显微镜的放大倍数等于目镜放大倍数与物镜放大倍数的乘积(2)放大倍数的实质:放大倍数是指放大的长度或宽度,不是指面积或体积3、目镜与物镜(1)结构对比目镜(无螺纹)物镜(有螺纹)(2)物镜越长,放大倍数越大,距离装片距离越近;目镜越长,放大倍数越小。
4、成像特点及装片移动规律(1)成像特点:放大倒立的虚像,倒立是指上下、左右均颠倒的,相当于将实物水平旋转180度(2)移动规律:相对于视野中央,“偏向哪儿向哪儿移”。
(3)显微镜视野中观察到的细胞质流动方向和实际流动方向相同。
5、高倍镜与低倍镜的比较物像大小视野内细胞数目视野亮度物镜与玻片距离视野范围高倍镜大少暗近小低倍镜小多亮远大6、污点存在位置的判断:污物可能存在于物镜,目镜或装片上污物移动在装片上移动装片污物移动在目镜上污物不动转动目镜污物不动在物镜上7、显微镜下细胞数目的计算(1) 视野中的细胞呈一行排列,则视野中的细胞数目与放大倍数成反比;比如:低倍镜下,视野中被m个细胞充满,在此基础上放大c倍,则视野中能看到个细胞。
(2) 视野中细胞充满排布,则视野中的细胞数目与放大倍数的平方成反比比如:低倍镜下,视野中一行能看到n个细胞,在此基础上放大d倍,则视野中一行能看到个细胞。
8、显微镜使用的注意事项:(1)当标本颜色浅或染色较浅时,观察时视野要调暗,不可选用凹面反光镜和调大光圈,应选用平面反光镜和调小光圈。
(2)由于显微镜成的是,上下、左右倒立的像,若要将右上方的细胞移到视野中央,应将装片往右上方移动。
(3)在转换高倍镜后,不能用粗准焦螺旋,不能上升镜筒。
(4)在高倍镜的使用过程中,只能用细准焦螺旋来进行微调。
显微技术知识点总结显微技术是一种能够观察微观世界的重要工具,它包括光学显微镜、电子显微镜和荧光显微镜等多种类型。
通过显微技术,我们可以观察到微小细胞、微生物、晶体结构等微观世界的结构和特征,为科学研究和工程应用提供了重要的数据和信息。
光学显微镜光学显微镜是最早发展起来的显微技术,其原理是利用透镜对光线进行加工,使得通过物镜的光线使得物体成像,并将其放大。
由调焦系统和成像系统组成。
光学显微镜具有成本较低,使用方便等优点,因此在学术研究和生产实践中得到了广泛的应用。
电子显微镜电子显微镜是利用电子束进行成像的显微技术。
相比光学显微镜,电子显微镜能够获得更高的分辨率、更大的放大倍数以及更好的深度信息。
电子显微镜主要有透射电子显微镜(TEM)和扫描电子显微镜(SEM)两种类型。
透射电子显微镜主要用于观察金属、晶体、细胞等样品的内部结构,而扫描电子显微镜主要用于观察样品表面的形貌和成分分布。
电子显微镜在材料科学、生物学、医学等领域都有重要的应用价值。
荧光显微镜荧光显微镜是一种利用荧光材料发光的显微镜,能够观察到样品中的荧光成分。
荧光显微镜主要有激发和发射两种光路,通过选择性的激发和检测荧光信号,可以观察到样品中特定的生物分子、蛋白质等成分。
荧光显微镜在生物医药、生物学和材料科学等领域有广泛的应用。
显微技术在生物学显微技术在生物学研究中具有重要的应用价值。
通过显微技术,我们可以观察到细胞、细胞器、细菌、病毒等微生物的形态结构,了解它们的功能和特征。
在分子生物学研究中,荧光显微镜能够观察到特定的蛋白质、核酸或其他生物分子的成分和分布,为生物学研究提供了重要的实验数据。
在神经科学研究中,电子显微镜能够观察到神经元的突触结构和神经网络的连接关系,帮助我们了解大脑结构和功能。
显微技术在材料科学显微技术在材料科学中也有广泛的应用。
通过电子显微镜,我们可以观察到金属、陶瓷、聚合物等材料的微观结构和晶体结构,了解其性能和性质。
七年级生物显微镜的知识点介绍生物显微镜是生物学实验室的重要工具,七年级的学生也需要掌握一些基本的显微镜知识来帮助他们在实验中观察样品。
以下是七年级生物显微镜的知识点介绍。
一、显微镜的类型生物显微镜主要分为两种类型:光学显微镜和电子显微镜。
光学显微镜使用光线来观察样品,价格便宜且易于使用;而电子显微镜则是利用电子束来取代光线观察物品,其分辨率更高。
二、显微镜部件的名称显微镜主要由以下部件组成:1. 目镜:放置在显微镜上方的镜片,用来放大物品。
2. 物镜:放置在显微镜下方的镜片,也用来放大物品。
3. 粗调焦轮:用来调节物品的大致焦点。
4. 细调焦轮:用来调节物品的细节焦点。
5. 台面:用来放置样品的平面。
6. 光源:提供光线来观察样品。
三、显微镜的使用方法1. 准备样品:将物品放置在玻片上,加入少量液体,然后用另一张玻片覆盖,并用手轻压使其均匀分布。
2. 调节目镜:看透目镜,然后调整粗调焦轮使样品清晰地出现在视野中。
3. 调节物镜:将物镜旋转到视野中央,并使用细调焦轮调整物镜,以获得清晰的图像。
4. 移动样品:如果需要查看更多的样品区域,可以移动样品或者转动物镜。
四、显微镜常见问题1. 照明不足或者过度:这可能导致样品看不清楚,需要调整光源。
2. 焦距错误:可能导致样品模糊或者不清晰,需要调整粗调焦轮和细调焦轮。
3. 灰尘或污渍:这会干扰样品的观察,需要注意清洁。
五、安全注意事项使用显微镜时,需要遵循以下安全注意事项:1. 提醒学生不要用手触摸显微镜上的镜片。
2. 避免在放置玻片时将玻片磨损或划伤。
3. 避免在镜片上滴液体或者其他材料。
4. 注意安全使用电子显微镜,因为使用电子束而不是光线来观察样品,这对操作人员的安全构成潜在威胁。
本文对七年级学生需要掌握的生物显微镜知识进行了介绍。
这些基本的知识点可以帮助学生在实验中正确使用显微镜,获得更好的实验结果。
生物初一上册知识点显微镜学习七年级生物知识点再苦再累也要坚强,只为那些期待眼神。
小编整理了关于生物初一上册知识点,希望对大家有帮助!生物初一上册知识点:显微镜练习使用显微镜1、细胞是生物体结构和功能的基本单位。
2、显微镜的结构:镜座、镜柱、镜壁、反光镜、遮光器、载物台、压片夹、通光孔、物镜、转换器、镜筒、目镜、细准焦螺旋、粗准焦螺旋。
3、实验室光线较暗,应使用大光圈、凹面镜;实验室光线较亮时,应使用小光圈、平面镜。
4、显微镜的放大倍数为目镜倍数×物镜倍数,放大倍数越大,视野中的细胞数目越少。
从目镜内看到的像是倒像(左右倒、上下倒)。
[实在不理解就把书反过来看就行了]5、顺时针(向外)转动准焦螺旋,镜筒下降;反之则上升。
观察植物细胞观察动物细胞6、显微镜下的标本应该薄而透明,光线能透过,才能观察得到。
7、常用的玻片标本有三种:切片、涂片、装片。
8、制作临时装片的步骤:①用洁净的纱布将载玻片和盖玻片擦拭干净②在载玻片中央滴一滴液体(清水、生理盐水)③取材料、放置材料(叶内侧、内侧壁)④盖盖玻片(避免出现气泡)⑤染色(一侧滴,另一侧吸引)9、动植物都有的细胞结构为:细胞膜、细胞质、细胞核。
植物细胞还有细胞壁、液泡(细胞液中溶解着多种物质,如糖分),绿色部分的细胞中有叶绿体。
生物初一上册知识点(一)细胞核是遗传信息库,遗传信息存在于细胞核中1、多莉羊的例子p55,2、细胞核中的遗传信息的载体——DNA3、DNA的结构像一个螺旋形的梯子4、基因是DNA上的一个具有特定遗传信息的片断5、DNA和蛋白质组成染色体不同的生物个体,染色体的形态、数量完全不同;同种生物个体,染色体在形态、数量保持一定;染色体容易被碱性染料染成深色;染色体数量要保持恒定,否则会有严重的遗传病.6、细胞的控制中心是细胞核生物初一上册知识点(二)新生命的开端---受精卵1、经细胞分化形成的各种各样的细胞各自聚集在一起才能行使其功能,这些形态结构相似、功能相同的细胞聚集起来所形成的细胞群叫做组织.2、不同的组织按一定的次序结合在一起构成器官.动物和人的基本组织可以分为四种:上皮组织、结缔组织、肌肉组织、神经组织.四种组织按照一定的次序构成,并且以其中的一种组织为主,形成器官.3、够共同完成一种或几种生理功能的多个器官按照一定的次序组成在一起构成系统.八大系统:运动系统、消化系统、呼吸系统、循环系统、泌尿系统,神经系统、内分泌系统、生殖系统.4、动物和人的基本结构层次(小到大):细胞→组织→器官→系统→动物体和人体5、植物结构层次(小到大):细胞→组织→器官→植物体6、绿色开花植物的六大器官营养器官:根、茎、叶 ;生殖器官:花、果实、种子7、植物的组织:分生组织、保护组织、营养组织、输导组织等。
七年级生物显微镜知识点显微镜是生物学研究中非常重要的工具。
通过显微镜,我们可以观察到细胞、细胞器、细菌等微小生物和结构。
在七年级生物学的学习中,了解显微镜的原理和使用方法是非常重要的。
本文将介绍七年级生物学中常见的显微镜知识点。
一、显微镜的种类显微镜有光学显微镜和电子显微镜两种。
光学显微镜使用可见光对样本进行检测,可以看到细胞、细胞器等结构;电子显微镜使用电子束对样本进行检测,可以看到更小、更具体的细胞结构和分子结构。
二、显微镜的原理光学显微镜的原理是利用透镜对光进行聚焦,使观察者可以看到被放置在显微镜下的样本。
样本由明亮部分和暗部分组成,它们对光的反射和吸收不同,通过镜片把这些光聚集到观察镜中就可以得到图像。
电子显微镜的原理是使用电子束对样本进行成像。
电子显微镜具有比光学显微镜更高的分辨率,更能够看到微小的结构。
三、显微镜的使用方法使用显微镜需要注意以下几点:1. 准备样本:样本需要制备好,通常使用载玻片将样本准备出来。
2. 调整光源:显微镜需要足够的光源才能使样本看得更清晰。
调整合适的角度和亮度可以取得更好的效果。
3. 调整目镜与物镜:目镜和物镜需要进行配合,调整合适的倍数,使得图像更清晰。
4. 调整焦距:借助焦平面或调节物镜镜头的位置来获得清晰图像。
亦可使用卡片、毛玻璃板等来快速调节焦距。
四、显微镜的维护使用显微镜需要注意它的维护。
以下是一些常见的维护方法:1. 保持干燥清洁:显微镜需要保持干燥和清洁,不能受到灰尘和水滴的污染。
2. 将显微镜盖子盖上:使用完毕后需要将显微镜盖子盖上以防止附着在镜片上不必要污物,腐蚀物也会伤害电镜中的真空环境。
3. 用专业清洁纸擦拭:使用专业清洁纸对显微镜的镜头进行擦拭。
总之,了解显微镜的原理、使用方法和维护是非常重要的。
通过显微镜的应用,我们可以更好地观察生命的微观世界,进一步深化对生命科学的认识和理解。
生物显微镜知识点(一)引言概述:生物显微镜是一种用于放大生物样本的工具,它能够使我们更加深入地观察和研究微小的生物结构和细胞。
本文将介绍生物显微镜的主要知识点,包括光路原理、显微镜种类、镜头和倍率选择、样本制备以及显微镜的维护保养。
正文:一、光路原理1. 显微镜的基本光路是什么?2. 透射光和反射光在显微镜中的作用是什么?3. 应该如何调节光源亮度和明暗场对比度?4. 什么是调焦和聚焦,它们的原理是什么?5. 相位对比显微镜是如何工作的,它有什么优点?二、显微镜种类1. 简述亮场显微镜、相差显微镜和荧光显微镜的原理和应用领域。
2. 相间显微镜和偏光显微镜的特点和用途是什么?3. 紫外显微镜的原理和在生命科学中的应用。
4. 透射电子显微镜和扫描电子显微镜的区别和使用场景。
5. 透视显微镜和共聚焦显微镜的特点和优势。
三、镜头和倍率选择1. 物镜和目镜的作用是什么?2. 什么是镜头的倍率,不同倍率的镜头适用于哪些观察对象?3. 低倍率和高倍率显微镜的主要区别和应用场景。
4. 如何选择合适的眼睛镜和支架?5. 什么是数字变焦和光学变焦?四、样本制备1. 生物样本的处理过程包括哪些步骤?2. 如何制作并染色生物组织切片?3. 什么是抗原恢复,常用的抗原恢复方法有哪些?4. 样本固定的方法和注意事项。
5. 如何正确的封装和存储生物样本?五、显微镜的维护保养1. 显微镜的日常清洁和维护工作有哪些?2. 什么是显微镜的校正和调整,如何进行?3. 如何正确存放显微镜和镜片,以便延长使用寿命?4. 常见的显微镜故障及解决办法。
5. 如何选择合适的配件和附件,以提高显微镜的性能?总结:通过本文的介绍,我们了解了生物显微镜的基本原理和光路,以及不同种类的显微镜和其应用领域。
我们还学习了镜头和倍率的选择方法,样本制备的步骤及其问题。
此外,我们掌握了显微镜的维护保养知识,以确保显微镜的正常工作和延长使用寿命。
对于生物学和医学领域的研究人员来说,这些知识点都是非常重要的,它们将有助于我们更好地进行显微观察和研究。
生物显微技术生物显微技术第一章1、生物显微技术:是应用各种光学显微镜或电子显微镜观察和辨认微小生物(动物、植物和微生物)的细胞形态及其显微、亚显微结构,也包括植物染色体技术与原位杂交等新的方法和技术。
2、列文虎克发明显微镜。
罗伯特胡克用自己设计与制造的显微镜(放大倍数为40-140倍)观察了软木(栎树皮)的薄片,第一次描述了植物细胞的构造,并首次用拉丁文cellar(小室)这个词来称呼他所看到的类似蜂巢的极小的封闭状小室(实际上只是观察到到纤维质的细胞壁)。
第二章1、材料采集注意事项:①选择新鲜的、健康的、有代表性的实验材料;②在保证材料完整的条件下,注意实验材料要“精而小”,而不是“大而多”;③注意实验材料的生长季节和发育时期;④选用刀刃锋利的刀片,切割时用力应均匀,避免组织破裂,影响制片效果;⑤实验材料选好后,应在极短的时间内杀死和固定。
2、切取纵切面时应注意使刀的切向与根茎的长轴方向平行。
这种切面分为两种①、径切面②、切向切面(弦切面)3、固定:应用某种方法以最快的速度,将生物细胞或组织杀死,投入某类化学药液中,借助化学药品的作用使细胞组织保持原来的形状与结构。
4、固定时的注意事项:①材料新鲜:组织采集与分割后须立即固定。
否则时间相隔过久,体积就要收缩变形或发生自溶现象。
一般以神经、造血组织自溶速度较快,胰腺、胃肠道的粘膜亦较易发生改变。
②防止变形:对一些柔嫩或薄的材料如神经、肠系膜等,应先平铺于吸水纸上再固定,可防止因蛋白质凝固而引起的扭转变形。
对含气而浮于液体表面的组织如肺等,可缚以重物使其下沉,或吸出肺内气体,使其下沉于固定剂内。
③固定剂用量:一般为组织体积的10~20倍。
避免组织内水分在固定时渗出,影响固定剂的浓度。
勿使组织贴于瓶底或瓶壁,以免影响固定剂的渗入。
在平时往往用棉花垫以瓶底,而使固定剂能均匀地渗入。
④固定时间:根据组织的不同种类、性质、大小,固定剂种类、性质、渗透力的强弱而定。
八年级生物显微镜知识点
随着生物学研究的深入,显微镜的重要性也越来越显著。
在生物实验室中,显微镜是必不可少的工具。
那么,本文将为大家介绍八年级生物显微镜知识点。
让我们一起来了解一下吧。
I. 显微镜的种类
在生物学实验中,常用的显微镜有光学显微镜、电子显微镜、荧光显微镜、激光共聚焦显微镜等。
本文重点介绍光学显微镜。
II. 光学显微镜结构
1. 目镜:位于显微镜的上部,用于放大显微镜底物的像;
2. 物镜:位于显微镜的下部,通过对显微镜底物进行放大以形成像;
3. 样品台:用于放置样品;
4. 光源:通过样品台,照亮样品;
5. 对焦轮:用于调节物镜与样品之间的距离。
III. 光学显微镜使用
使用光学显微镜需要经过以下步骤:
1. 将样品放在样品台上;
2. 调节光源,照亮样品;
3. 选择合适倍数的物镜;
4. 使用对焦轮将物镜与样品之间的距离调整到合适位置;
5. 通过目镜观察样品。
IV. 光学显微镜的配件
在进行光学显微镜实验时,还需要一些配件,如目镜清洁杆、差分干涉仪、热像仪等。
V. 光学显微镜的应用
生物学研究中,光学显微镜的应用非常广泛,例如:
1. 观察细胞和细胞器的结构与形态;
2. 研究昆虫、植物和动物的组织构造;
3. 研究微生物的形态、数量和分布。
总结:
如上述所述,八年级生物显微镜知识点是非常重要的。
光学显微镜的应用性广泛,其结构也比较简单,使用也比较方便。
介绍完毕,希望本文能对大家有所帮助。
医学微生物学属和奴卡氏菌属菌属1.布鲁氏菌属形态、染色、种类和所致疾病十六、动物源性细菌2.耶尔森氏菌属鼠疫杆菌的形态、染色、致病物质和所致疾病3.炭疽芽抱杆菌1.流感嗜血杆菌形态、染色、抵抗力、所致疾病和防治原则形态、染色、培养特性及所致疾病十七、其他细菌p.百日咳鲍特氏菌3.幽门螺杆菌形态、染色、所致疾病和防治原则形态、染色、培养特点及所致疾病十八、枝原体(支原体)十九、立克次氏体十、衣原体二^一、螺旋体4军团菌5.铜绿假单胞菌6.弯曲菌属1.生物学性状2.主要病原性枝原体1.生物学性状2.主要病原性立克次体1.生物学性状2.主要病原性衣原体1.钩端螺旋体2.密螺旋体3.疏螺旋体1.概述传播途径及其所致疾病形态、染色、色素及所致疾病= 生物学性状、致病性及其防治原则枝原体的概念、培养特性及其与细菌L 型的区别(1)肺炎枝原体所致疾病(2)溶脲脲原体所致疾病概念、形态、染色及其培养特性普氏立克次氏体、斑疹伤寒立克次氏体、恙虫病立克次氏体和伯氏考克斯氏体(Q 热柯克斯体)的传染源、传播媒介和所致疾病概念、形态、染色及培养特性(1)沙眼衣原体的亚种和所致疾病(2)肺炎衣原体所致疾病形态、染色、培养特性、所致疾病和防治原则梅毒螺旋体的形态、染色、所致疾病及其防治原则伯氏疏螺旋体的形态、染色及所致疾病真菌及其分类、形态与结构、培养特性及致病性。
第二章 显微镜及其附加设备 第一节 显微镜的光学原理 放大镜 放大镜的放大率公式,通常采用以下形式: Γ=250/ f ′ 由上式可知,放大镜的放大率仅由其焦距所决定,焦距越小则放大率越大。由于单透镜有相差存在,加上加工的原因,不能期望以减少凸透镜的焦距来获得很大的放大率。简单放大镜放大率都在10×以下。构造相对复杂的为解剖显微镜,它由几个透镜组成,其放大率在200×以下。 放大镜的放大倍数越高,其焦距越短, 工作距离也越短。 凸透镜的成像规律为: 若u>2f,则2f>v>f,异侧倒立缩小的实像 若2f>u>f,则v>2f,异侧倒立放大的实像 若u=f,则v→∞,不成相 若u分辨率 分辨率是指能区分两个物点间最小距离的能力。两物点间的最小距离称为分辨距离。分辨距离越小,分辨率越高,也就是分辨细微结构的能力越大。 普通光学显微镜分辨率的极限是0.2μm。可把物体放大1500倍 。 放大率 放大率就是放大倍数,是指被检验物体经物镜放大再经目镜放大后,人眼所看到的最终图象的大小对原物体大小的比值,是物镜和目镜放大倍数的乘积。 总放大率=物镜放大率×目镜放大率 显微镜的放大倍数是指对物体长度的放大。 显微镜放大率公式:Γ=250Δ/ f1 f2 式中:Δ为光学筒长,一般为160mm; 250为明视距离,单位为mm; f 1为物镜的焦距;f 2为目镜的焦距。 在考虑其总放大倍率的同时,首先应选取所用物镜的放大倍数,其次才考虑目镜的放大倍数。其原因在于显微镜的成像质量主要取决于物镜的分辨率。 镜口角 孔径角又称“镜口角”,是物镜光轴上的物体点与物镜前透镜的有效直径所形成的角度。 孔径角越大,进入物镜的光通亮就越大,它与物镜的有效直径成正比,与焦点的距离成反比。 数值孔径 数值孔径(NA):是物镜前透镜与被检物体之间介质的折射率和孔径角半数的正玄之乘积。用公式表示如下:NA=hsinu/2 。 它与分辨率成正比,与放大率成正比,与焦深成反比,NA值增大,视场宽度与工作距离都会相应地变小。 数值孔径与其他技术参数有着密切的关系,它几乎决定和影响着其他各项技术参数。必须指出,为了充分发挥物镜数值孔径的作用,在观察时,聚光镜的NA值应等于或略大于物镜的NA值。
降低波长λ值,使用短波长光源。 增大介质n值和提高NA值。 增大孔径角。 增加明暗反差。 焦深 焦深为焦点深度的简称,即在使用显微镜时,当焦点对准某一物体时,不仅位于该点平面上的各点都可以看清楚,而且在此平面的上下一定厚度内,也能看得清楚,这个清楚部分的厚度就是焦深。 焦深与总放大倍数及物镜的数值孔镜成反比。焦深大,分辨率降低。 镜像亮度 镜像亮度是指显微镜观察中的图像明暗程度。 NA值越大,镜像的亮度就越大,总放大倍数就越好。 视场亮度 视场亮度是显微镜所观察的整个视场(或视野)的明暗程度。 它与物镜、目镜、聚光镜、视场光阑、光源等因素有关。 视场亮度大,镜像亮度大。 视场直径 视场直径也称视场宽度,是指在显微镜下看到的圆形视场内所能容纳被检物体的实际范围。 视场直径23最为科学,大视场容易引起场曲。F=FN/M; F: 视场直径,FN:视场数,M:物镜放大率。视场数(Field Number, 简写为FN),标刻在目镜的镜筒外侧。由公式可看出: 1.视场直径与视场数成正比。 2.增大物镜的倍数,则视场直径减小。因此,若在低倍镜下可以看到被检物体的全貌,而换成高倍物镜,就只能看到被检物体的很小一部份。 覆盖度 覆盖度:显微镜的光学系统也包括盖玻片在内。由于盖玻片的厚度不标准,光线从盖玻片进入空气产生折射后的光路发生了改变,从而产生了相差,这就是覆盖差。 国际上规定,盖玻片的标准厚度为0.17mm, 许可范围在0.16-0.18mm., 工作距离
工作距离也叫物距,即指物镜前透镜的表面到被检物体之间的距离 。 平时习惯所说的调焦? 机械筒长 从镜筒的肩部(目镜下缘)到物镜螺旋肩部之间的长度叫机械筒长,一般它的长度为160mm。 焦点:决定图像是模糊还是清晰?焦点与焦距有关,且可以通过聚焦旋钮控制。样本载玻片上的盖片厚度也会影响图像对焦。正确的盖片厚度应标注在物镜的侧面。 分辨率:图像中的两个像素达到多近的间距时会分辨不清?分辨率与物镜的数值孔径(数值孔径越大,分辨率越高)以及通过透镜的光线波长(波长越短,分辨率越好)有关。 调节不同参数产生的效果 亮度:表示图像有多明亮?亮度与照明系统相关,因而可以通过改变灯的电压/电阻器,以及调节聚光器和光圈/针孔孔径进行更改。此外,亮度还与物镜的数值孔径有关(数值孔径越大,图像越明亮)。 对比度:样本周围区域的光照差别怎样?对比度与照明系统相关,可以通过改变光线强度以及光圈/针孔孔径对其进行调节。除此之外,对样本进行化学着色也可以增强对比度。 明视距离 从眼球的水晶体到放大的虚像之间的距离叫明视距离 ,它的长度为250mm,这是观察显微镜中物像最适宜的距离。 一、物镜 物镜分前透镜和后透镜。 高倍镜为弹簧物镜。 (一)几个概念 1、齐焦 反映某一倍数的物镜观察图像清晰后,在转换至另一倍率的物镜时,其成像亦应基本清晰,且物镜光路也基本合轴,中心不偏离。 2、色差 3、球差 4、场曲 2、透镜的像差 某一物点发出的光束,经过透镜以后,仍然是同心光束,还都会聚在一点,由这种方式形成的像点称为理想像点。由理想像点构成与原物形状、颜色完全相似的像,称为理想像。 实际上,从一点发出的光束在通过透镜后并不完全会聚于一点,而是分布在空间一个很小的区域内,成为一个模糊的斑点或称弥散圈。同样,一个物体通过透镜后也不可能形成一个与原物体完全相似的像。造成这些缺陷的主要原因是透镜本身存在的各种像差。 像差 单色相差 轴上点的单色像差―― 球差 慧差 像散 轴外点的单色像差― 场曲 畸变 复色像差――----色差 1)轴上点的单色像差――球差 由光轴上一点发出的光线经透镜折射后,不再是同心光束,入射光线的孔径角不同,其出射光线与光轴交点的位置就不同,相对于理想像点有不同的偏离,这就是球差。孔径角越大,则光线的折射率越大。 球差及球差的消除 球差 球差也称球面差、球面像差,指透过透镜边缘的光线曲折度大于透过中央部分的现象,会聚的焦点参差不齐,使成像不清晰,有时变形。 2)轴外点的单色像差 (1)慧差 慧差即慧形像差,又叫侧面球差。它是光轴外一点发出宽光束通过透镜折射会聚所形成的一种像差。其形成原因是由于透镜边缘一带的光线与透镜主轴一带的光线所会聚的焦点位置和影像大小有差别。得到的影像的一端宽大虚散而较暗,另一端则窄小清晰而较亮,严重影响图像的清晰度。 慧差(Coma) 靠近光轴的物点发出的大孔径光线不聚焦于一点 Y
慧差的校正: 复合透镜; 非球面透镜; 2)轴外点的单色像差 2)像散 当轴外一点发出很细的光束投射在透镜上成像时,由于细光束的光束轴与法线不重合,其出射光束不再存在对称轴,而只存在一个对称面(子午面)。与此细光束对应的微小波面并非旋转对称,在不同方向上有不同的曲率,因此形成像散光束。存在着像散的光学系统,不能使物面上所有物点形成清晰的像点群。 (3)场曲:即像场弯曲。每个物点都能得到一个清晰的像点,但是整个像面不是一个平面,而是一个回转曲面。因此,像平面是不清晰的。当使用存在场曲的镜头拍摄时,如果景物中间部分清晰,则边缘部分模糊;反之,当景物边缘部分清晰时,则中间部分模糊。 场曲 :曲也称像场弯曲,指整个像平面是一个曲面,这样的像平面是不清晰地。 (4)畸变 产生畸变的原因是在一对物、像共轭平面上,垂轴放大率随视场大小而改变,不再保持常数,使像相对于物失去了相似性。如果主光线和高斯像面焦点的高度随视场增大而大于理想像高,即为正畸变,又叫枕形畸变;如果主光线和高斯像面焦点的高度随视场增大而小于理想像高,即为负畸变,又叫桶形畸变。
3)复色像差--色差 1.位置色差 描述轴上物点用不同色光成像时成像位置差异的像差称为位置色差,也称为轴向色差。同一透镜对不同色光有不同焦距。当透镜对于光轴上一点成像时,按色光的波长的由短到长,每种色光形成的像点离开透镜由近到远地排列在光轴上,这就是位置色差。 2.倍率色差 当光学系统校正了位置色差以后,可认为两种色光的像面重合在一起。但对于轴外点来说,由于不同色光的焦距不等而放大率不等,因而有不同的像高。光学系统对不同色光的放大率的差异称为倍率色差,也称放大率色差或垂轴色差。倍率色差破坏轴外点像的清晰程度,造成白色像的模糊。 色 差 的 消 除 色差是指光线通过一个透镜后,不能使所有颜色的光都聚在一个焦点上,而是残次不齐的。 (二)物镜种类 功能:a 产生物体的第一次倒立实像 b 放大作用 1.按介质来分: 干燥系物镜 油浸系物镜 水浸系物镜 油镜的使用方法 (1)首先用低倍干系物镜找出要观察的区域。 (2)当标本被照明时,把一滴(不要多于一滴)浸油准确地滴到盖玻片上的照明区域,并注意不要在滴入的浸油里混有气泡。 (3)在现代显微镜中,用干系物镜聚焦标本后可以在不改变粗调和细调的情况下转动物镜转换台直接把油浸物镜浸到油里。 (4)当油浸物镜已经浸入浸油之后,用细调进行进一步的调节直到像被清晰地聚焦,并在细调旋钮的刻度尺上记下所转动的刻度。当第一次聚焦使用固定的低倍干系物镜时,每次使用油浸物镜的聚焦都需要相同的调节,即沿着同样的方向使细调转动相同的刻度。 2.物镜种类 消色差物镜Ach 消除红蓝光的色差 ,由含铅的火石玻璃单凹透镜粘合成 复消色差物镜APO:能消除红、绿、蓝光的色差,校正红蓝二色光的球差。特种玻璃或萤石、氟石等材料制成 半复消色差物镜FL:校正红蓝二色光的色差和球差, 氟石等材料制成 平场物镜Plan:增加一块半月形的厚透镜,视场平坦,视场较大,工作距离也增大。 Plan Ach、 Plan APO、 S Plan、 S PLan APO 特种物镜 带校正环物镜 带彩虹光阑的物镜 相衬显微镜(ph) 无应变物镜(PO或POL) 无荧光显微镜(UVFL) 无罩物镜(NC) 长工作距离物镜(倒置)
170;表示所适用的显微镜机械筒长,即从物镜的肩部到目镜上缘的距离为170mm。 0.17:表示物镜所要求的盖玻片厚度为0.17mm。 PL APo;表示物镜的矫正程度为平面复消色差,NPL表示标准平面消色差。 100(或40):表示物镜的放大倍数为100(或40)倍。 Oil;表示物镜的浸润介质为油浸。物镜没有标记这种字母,表示介质为空气的干系物镜。 0.65:表示物镜的数值孔径(即镜口率)为0.65,这是决定物镜性能的非常重要的参数。