中国药物与临床２０１０年２月第１０鲞箜 塑 ！堕垦 ！ 望鱼 ！！： ！ ！ ： ！： ： ！： 二至颗粒剂质量标准的建立 王薇刘祖雄林海 二至颗粒剂是由女贞子、墨旱莲两味中药组成。是由《中 国药典））２００５年版的二至丸改变剂型而成的颗粒剂。具有补 益肝。肾、滋阴止血之功效。主治肝肾阴虚、眩晕耳鸣、咽干鼻 燥、腰膝酸痛、月经量多等症［１］。现常用于治疗贫血、神经衰 弱、高血压病、慢性肝炎、肺结核等属肝肾阴虚者［２Ｊ。本文采用 薄层色谱法（ＴＬＣ）对制剂中女贞子、墨旱莲进行定性鉴别。采 用高效液相色谱法对齐墩果酸进行含量测定。 １仪器与试药 １ １００高效液相色谱（ＨＰＬＣ）仪，包括１ ＩＯＯＨＰＬＣ工作站、 Ｇ１３１１Ａｑｕａｔ泵、Ｇ１３１４紫外检测器（美国Ａｇｉｌｅｎｔ公司）； ＡＢ２０４一Ｎ电子分析天平『梅特勒一托利多仪器（上海）有限 公司］：硅胶Ｇ薄层板（德国Ｍｅｒｃｋ公司）。 齐墩果酸对照品（中国药品生物制品检定所）；女贞子、 墨旱莲中药材（武汉市医药公司）；二至颗粒剂（自制）；其他 辅料均为药用规格；试剂为分析纯。 ２方法与结果 ２．１ ＴＬＣ鉴别 ２．１．１女贞子：分别称取供试品０．５ ｇ，女贞子对照药材１ ｇ 及不含女贞子的阴性对照品０．５ ｇ，加甲醇２０ ｍｌ，加热回流提 取３０ ｍｉｎ，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇５ ｍｌ使溶解，作 为供试品溶液、对照药材溶液及不含女贞子的阴性对照液。 另取齐墩果酸对照品，加无水乙醇制成每１ ｍｌ含ｌ ｍｇ的溶 液，作为对照品溶液。照薄层色谱法…试验，吸取上述４种溶 液各５ ｌ，分别点于同一硅胶Ｇ薄层板上，以三氯甲烷一甲醇 （８０：２）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以磷钼酸试液，在１１０ ℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材和对照 品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰。 ２．１．２墨旱莲：分别称取供试品１ ｇ，墨旱莲对照药材１ ｇ及 不含墨旱莲的阴性对照粉末１ ｇ，加乙醇２０ ｍｌ，浸泡３ ｈ，超 声处理３０ ｍｉｎ．滤过，滤液挥干，残渣加无水乙醇１ ｍｌ使溶 解，作为供试品溶液、墨旱莲对照药材溶液和不含墨旱莲的 阴性对照液。照薄层色谱法…试验，吸取上述３种溶液各４ ｌ，分别点于同一硅胶Ｇ薄层板上，以正己烷一乙酸乙酯（９０： １０）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯（３６５ ｎｎ＇１）下检视。 供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的 荧光斑点。 ２．２含量测定 ２．２．１色谱条件：采用Ａｉｃｈｒｏｍ Ｂｏｎｄ－－ｌＣ１８（４．６ ｍｍｘ２５０ ｍｍ，５ ｍ）色谱柱；流动相：甲醇一水一冰乙酸（８６：１４：０．０３）；检 作者单位：４３００７０广州军区武汉总医院药剂科（王薇、刘祖 雄）；咸宁学院药学院（林海） ・１７７・
测波长：２１０ ｒｉｍ；流速１．０ ｍｌ／ｍｉｎ；柱温：２５℃；灵敏度： ０．１ＡＵＦＳ；进样量：１０ ｔｘｌ；在该色谱条件下，对照品及样品色谱 峰良好，空白对照对测定无干扰。 ２．２．２对照品溶液的制备：精密称取齐墩果酸对照品适量．加 甲醇制成每１ ｍｌ含５０ ｇ的溶液。 ２．２．３供试品溶液及阴性对照液的制备：精密称取二至颗粒 剂０．２ ｇ，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇５０ ｍ１，密塞。称定质 量，加热回流１ ｈ，放冷，再称定质量，用甲醇补足减失的质 量，摇均，滤过，取续滤液，即得。另取不含女贞子的对照品， 同法制备阴性对照液。 ２．２．４线性关系考察：精密称取齐墩果酸对照品适量．用甲醇 制成１０．８，２１．６，３２．４，５４，８６．４ Ｉｚｇ／ｍｌ系列浓度的溶液，分别精 密量取上述５种浓度溶液１Ｏ ，注入高效液相色谱仪进行 测定。以峰面积比值（』４）与浓度（ｃ）进行线性回归．得回归方 程为： ＝３．５ｘｌＯ Ｃ一１．３ｘ１０ ，ｒ＝０．９９９９。结果表明，齐墩果酸检 测浓度在１０．８—８４．６ ｐ￣ｇ／ｍｌ范围内呈良好的线性关系。 ２．２．５稳定性试验：精密吸取供试品溶液１０ ｌ，分别于０，１， ３，６，９，１２ ｈ进样，测定峰面积，结果１２ ｈ内ＲＳＤ为０．３７％ （ｎ＝６）。 ２．２．６重复性试验：取同一批样品６份，按“２．２．３”项下方法制 备供试品溶液，依法测定齐墩果酸含量并计算样品中齐墩果 酸的含量为１５．１７ ｍｇ，＇ｇ，ＲＳＤ为１．１８％（ｎ＝５）。 ２．２．７精密度试验：精密吸取齐墩果酸对照品溶液１０ ｌ，重 复进样５次，依法测定峰面积，结果ＲＳＤ为０．２５％（ｎ＝５）。 ２．２．８加样回收率试验：精密称取已知齐墩果酸含量的同一 批号的样品６份，分别精密加入一定量的齐墩果酸对照品溶 液，按“２．２．３”项下方法制备供试品溶液．依法测定，计算回收 率。结果见表ｌ。 表１回收率试验结果
２．２．９样品含量测定：取３批二至颗粒剂，按供试品溶液制备 方法制备溶液，分别进样１０ Ｌ，平行测定５次，按外标法以 峰面积计算齐墩果酸的含量，结果批号为０８０８０４，０８０８０８， ０８０８１９的３批样品中齐墩果酸含量分别为１５．０８，１５．１１，
・１７８・ 中国药物与临床２０１ ０年２月第１Ｏ卷第２期Ｃｔｌｉｎｅｓｅ Ｒｅｍｅｄｉｅｓ＆Ｃｌｉｎｉｃｓ．Ｆｅｂｍａｎｒ ２０１０．ｖｏ１．１０．Ｎｏ．２ ｌ５．０５ ｍｇ偿（ｎ＝５）。 ３讨 论 女贞子为方中君药，其主要有效成分为齐墩果酸。《中国 药典｝２００５年版收载的“二至丸”采用薄层色谱法测定制剂中 齐墩果酸含量。本文参照文献［３—５］，采用高效液相色谱法测 定二至颗粒剂中齐墩果酸含量，方法简便，灵敏度高，重复性 好．结果准确。该法可作为二至颗粒剂的质量控制方法。 处方中的女贞子、墨旱莲采用薄层色谱法进行定性鉴 别 结果各薄层斑点不受阴性对照的干扰，专属性较强，斑点 清晰，效果较好，可作为该制剂定性鉴别的方法。 参考文献 １ 国家药典委员会．中国药典．北京：化学工业出版社．２００５． ２ 陈仁寿．国家药典成方实厢手册．南京：江苏科学技术出版社， ２０ｏ７． ３ 谢莹，杭太俊，程赞，等．高效液相色谱法测定中药中齐墩果酸 和熊果酸含量．中国中药杂志，２００１，２６（９）：６１５—６１６． ４ 王红梅，吴叶红，于德堂．高效液相法测定生津胶囊中女贞子齐 墩果酸的含量．黑龙江中医药，２００２，３１（４）：５７—５８． ５ 王薇，覃贝．高效液相色谱法测定芩连颗粒中黄芩苷的含量．中 国药物与临床，２００８，８（８）：６６２—６６３． （收稿日期：２００９—１０—１３） 帕珠沙星注射液在果糖注射液中配伍的稳定－陛实验 诸林俏黄晨 帕珠沙星（Ｐａｚｕｆｌｏｘａｃｉｎ）是第四代喹诺酮抗菌药，主要用 于呼吸道、泌尿道和皮肤组织感染，特别是对复杂性感染、重 度感染和对一般抗感染药有耐药性的细菌有较好的疗效。果 糖是一种左旋六碳糖，为葡萄糖的同分异构体，其作用和用 途与葡萄糖基本相似，但因其代谢不依赖胰岛素，可在无胰 岛素的情况下转换为糖原，故可有效降低血糖波动，用于糖 尿病患者作为糖的代用品［１ ３。根据临床需要，为防治细菌感染 的糖尿病患者用药方便，有时需将帕珠沙星注射液与果糖注 射液配伍使用。但有关两药配伍的稳定性笔者尚未见文献报 道，为此进行如下实验。 １仪器与试药 １．１仪器：ｕｖ一２２Ｏ１型紫外分光光度计（日本岛津）；ＰＨｓ一 ３ｃ型精密酸度计（上海雷磁仪器厂）；电热恒温水温箱（上海 医用恒温设备厂）。 １．２试药：帕珠沙星注射液（四川奥邦药业有限公司，规格１０ ｍｌ：Ｏ．３ ｇ）；果糖注射液（安徽丰原药业股份有限公司）；实验用 水均为纯化水。 ２方法与结果 ２．Ｉ测定波长的选择 配制浓度为１０￣ｇ／ｍｌ的帕珠沙星溶液，以纯化水为空白 在２００—４００ ａｍ波长范围内扫描。结果帕珠沙星在２４９ ｎｍ波 长处有最大吸收，此结果与文献［２］报道一致，在此波长处， 果糖输液几无吸收，对测定无干扰。因此确定２４９ ａｍ为帕珠 沙星的测定波长。 ２．２标准曲线的绘制 精密吸取帕珠沙星注射液１ ｍ１（３０ ｍｇ）置１００ ｍｌ量瓶 中，用纯化水稀释至刻度，摇匀。从中分别精密吸取０．５，１．０， １．５，２．０，２．５，３．０ ｍｌ置５Ｏ ｍｌ的量瓶中制成系列标准溶液，以 纯化水为空白．于２４９ ｎｍ波长处测定吸收度（Ａ），以帕珠沙 作者单位：３２５０２７温州医学院附属第二医院药剂科 星浓度（ｃ）和吸收度 ）进行线性回归，得到回归方程为：Ａ＝ ０．０１６ ３７Ｃ＋０．００２ ８６，ｒ＝－０．９９９７。表明帕珠沙星浓度在３—１８ ｍｌ范围内与吸收度呈良好的线性关系。 ２．３回收率试验 按照“２．２”项的处理方法操作，精密配制４．８…９ ６ １４．４￣ｖｌｍｌ 浓度的帕珠沙星溶液，在２４９ ｎｍ处测定吸收度，代入上述方 程计算，其平均回收率为９９．２３％，ＲＳＤ为０．７５％（ｎ＝３）。 ２．４配伍稳定性试验 ２．４．１配伍溶液的制备：模拟临床用药浓度，精密吸取帕珠沙 星注射液３００ ｍｇ（１０ ｍ１），置１００ ｍｌ量瓶中，加入果糖注射液 至刻度，摇匀，均分２份作为两个试验温度下的配伍液。 ２．４．２外观及ｐＨ值变化：将上述配伍液分别置于２５℃与３７ 。ｃ下，于０、１、２、３、４，６ ｈ观察外观变化，并测定ｐＨ值。结果帕 珠沙星注射液与果糖注射液配伍后，６ ｈ内配伍液均澄明无变 色，未见混浊、沉淀及气泡产生，ｐＨ值无明显变化。结果见表１。 表１ 帕珠沙星注射液与果糖注射液配伍后 不同时间的ｐＨ值变化情况 ２．４．３含量及图谱变化：分别在０、１、２、３、４、６ ｈ各精密量取 配伍液０．４ ｍｌ到１００ ｍｌ容量瓶，依法测定吸收度。并以０ ｈ 时含量为１００％．分别计算其他时间的相对百分含量，结果见 表２。在测定含量的同时，对配伍液进行紫外扫描（２００—４００ ｌｌｍ），结果６ ｈ内ｕｖ波谱形状无变化，未见其他吸收峰产生， 表明帕珠沙星注射液与果糖注射液没有发生反应。 ３讨 论 用紫外分光光度法测定果糖注射液中帕珠沙星的含量， 其测定结果不受输液中成分的影响，并具有回收完全，重现
性好和操作简便等优点，用本法实验帕珠沙星与果糖注射液
