6-2 光度分析法的设计在进行比色及光度分析时，首先要利用显色反应把待测组分转变为有色物质；然后在一定测量条件下测定吸光度；再通过一定的定量分析方法，才能获得较满意的分析结果。
所以，光度分析法的条件选择包括：显色反应条件：显色剂、显色条件；光度测量条件：测量波长、参比、吸光度范围。
一、显色反应显色反应：将被测组分转变为有色物质的反应。
显色剂：能与被测组分反应使之生成有色物质的试剂。
显色反应可分两大类：络合反应和氧化还原反应。
例：邻二氮菲与Fe2+络合使得原本颜色很浅的Fe2+转变为红色的邻二氮菲亚铁络合物。
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例：用过硫酸胺将接近无色的Mn2+氧化为紫色的MnO4络合反应是最主要的显色反应。
1、对显色反应的要求(1)选择性要好：显色剂最好只与一种被测组分起显色反应。
(2)灵敏度要高：由于吸光光度法一般是测定微量组分，灵敏度高的显色反应有利于测定。
灵敏度的高低可从摩尔吸光系数值的大小来判断，一般要求ε至少在104～105。
但应注意，灵敏度高的显色反应，并不一定选择性就好，对于高含量的组分不一定要选用灵敏度高的显色反应。
(3)对比度要大：即如果显色剂有颜色，则显色产物与显色剂的最大吸收波长的差别——“对比度”或“反衬度”要大，一般要求在60nm以上。
(4)显色产物要稳定、组成要恒定：这样可以保证测量结果有良好的重现性和足够高的准确度，实验条件也易于控制。
显色化合物的组成若不确定，测定的重现性就较差；若易受空气的氧化、日光的照射而分解，就会引入测量误差。
2、显色剂：主要有两大类(1) 无机显色剂许多无机试剂能与金属离子起显色反应，如Cu2+与氨水形成深蓝色的络离子Cu(NH3)42+，SCN-与Fe3+形成红色的络合物Fe(SCN)2+或Fe(SCN)63-等。
但是多数无机显色剂的灵敏度和选择性都不高。
其中性能较好，目前还有实用价值的有硫氰酸盐、钼酸铵、氨水和过氧化氢等。
(2)有机显色剂许多有机试剂，如邻二氮菲、双硫腙、二甲酚橙等，在一定条件下能与金属离子形成稳定的、具有特征颜色的金属螯合物，其灵敏度和选择性较高，是光度分析中研究最多、应用最广的一类显色剂。
