酶法制备巴旦杏蛋白工艺
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木瓜蛋白酶生产工艺
木瓜蛋白酶是一种由木瓜果实中提取的天然酶制剂,具有广泛的应用领域,如食品加工、医药制造和纺织印染等。
下面介绍一下木瓜蛋白酶的生产工艺。
一、原料准备:
采用新鲜成熟的木瓜果实作为原料,果实应经过洗净、去皮和去籽等处理,然后切成小块备用。
二、榨汁提取:
将木瓜果块放入榨汁机中进行榨汁,获得木瓜浆。
榨汁过程中可以加入适量的酶源促进蛋白酶的产生。
三、发酵过程:
将木瓜浆通过过滤和杀菌等工艺处理,然后将其倒入发酵罐中。
可以加入适当的培养基和营养源来促进微生物的生长和蛋白酶的产生。
四、菌种培养:
将所选的产木瓜蛋白酶的微生物菌种接种到发酵罐中,并进行适当的培养条件控制,如温度、pH值和氧气供应等。
培养时
间一般为24-48小时。
五、酶的分离和提取:
将发酵罐中的培养液进行离心分离,分离出固体的微生物细胞。
然后通过酒精沉淀、低温冷冻、脱水和干燥等工艺,提取木瓜蛋白酶。
六、酶的精制:
通过离子交换层析、凝胶过滤和超滤等工艺,对提取的酶液进行精制,去除杂质和其他不需要的成分,提高酶的纯度。
七、包装和贮存:
将精制后的酶液进行包装,常见的包装形式有液体剂和固体剂。
然后对包装好的产品进行质量检验和贮存,保证酶的稳定性和活性。
通过上述生产工艺,可以得到高纯度、稳定性好的木瓜蛋白酶。
在生产过程中,需要严格控制各个环节的温度、pH值和微生
物的生长条件等,以保证酶的质量和产量。
此外,还需要进行严格的质量检验和贮存,确保产品的安全和有效性。
附件1:用胰蛋白酶酶解蛋白的基本方法基本原理:将蛋白样品还原并烷基化后,用胰蛋白酶把蛋白酶解成肽段,然后用液相色谱/质谱仪对其进行分析。
试剂、生产厂家以及产品编号:使用方法:1.取约1毫克的总蛋白样品放入离心管中,加入1毫升6M的Guanidine(配制在100mMNH4HCO3中,PH 8.0)溶液,得到1mg/mL的蛋白溶液。
2.加入20微升1M的DTT到上述离心管中,震荡混合5秒钟。
3.将上述离心管恒温在37℃条件下反应1小时(以还原蛋白中的双硫键)。
4.加入25微升1M新鲜配制在1M NaOH中的Iodoacetic acid,在避光、室温条件下放置30分钟。
5.将以上样品平均注入两个(每个约注入500mL)具有分离10kDa以下蛋白的Centriconfilter,以12000rpm离心50分钟。
6.在以上离心管中分别加入200mL 0.1M的NH4HCO3,并离心30分钟。
多次重复此操作,以使蛋白样品中的Guanidine含量降到0.5M左右。
7.将以上两个离心管滤层上的蛋白样品,分别、多次加入总量约500mL 0.1M的NH4HCO3溶液以完全溶解,并将这些含有蛋白样品的溶液转移到装有20mL的Trypsin试管中,再加入500mL 0.1M的NH4HCO3溶液。
使试管中液体的总量为1000mL,Trypsin约占总量的1/50。
8.将上述试管恒温在37℃水浴中反应16小时。
9.分别吸取上述样品500mL到两个Centricon filter中,以13400rpm离心50分钟。
这样可以除去多余的Trypsin,终止酶切反应。
(为节省时间,这里的过滤步骤可省略)10.将上述两个离心管下部的滤出液收集到一个离心管中,在35℃下真空干燥浓缩60分钟。
此过程有助于NH4HCO3的分解并挥发,降低样品中盐的浓度。
继续干燥浓缩至样品量到100mL左右。
11.加0.1%的甲酸溶液定量到所需要的样品浓度,并注意观察样品溶液是否澄清。
木瓜蛋白酶的生产过程1.材料准备:生产木瓜蛋白酶的关键材料是木瓜果肉。
新鲜、成熟的木瓜果肉是首选材料,因为它含有丰富的蛋白酶酶源。
其他所需材料包括维生素、糖、盐和发酵基质等。
2.果肉处理:将木瓜果肉经过清洗、去皮去籽等处理,然后剁碎成细小的颗粒状。
细碎的果肉便于酶的分离和提取。
3.酶的提取:将细碎的果肉加入适量的缓冲液中,使果肉与缓冲液的比例合适。
然后用搅拌器或搅拌棒进行搅拌,破碎细胞壁,使酶释放到溶液中。
4.澄清和过滤:将搅拌后的果肉与提取液进行分离,采用澄清法或过滤法将酶液中的果肉残渣去除。
过滤可以使用滤纸、纱布或特殊的滤网等。
5.稳定和富集:将已澄清的酶液进行稳定处理,添加适量的酶稳定剂和防腐剂,在适宜的温度下进行保藏。
同时,也可以利用浓缩和富集等工艺步骤提高酶的含量。
6.发酵过程:取适量的酶液与发酵基质进行混合,然后将混合物装入发酵罐中。
发酵过程需要控制合适的温度、湿度和通气条件等因素,使菌株能够生长繁殖,并产生丰富的酶。
7.发酵结束后,进行酶液的提取和纯化。
通常采用加热杀菌、固液分离、过滤、浓缩等步骤对发酵液进行处理,除去微生物和杂质,并得到纯净的酶液。
8.酶液的活性测定和品质检测:利用标准测定方法对木瓜蛋白酶液的酶活进行测定,以评估酶液的品质和活性水平。
常用的活性测定方法包括凝胶电泳法、酶联免疫吸附测定法等。
9.包装和贮藏:将酶液进行分装和灭菌包装,然后存放在低温下进行贮藏。
包装后的酶液需要标示清楚产品名称、规格、生产日期和有效期等信息。
总而言之,在木瓜蛋白酶的生产过程中,关键步骤包括木瓜果肉处理、酶的提取和分离、酶液的稳定和富集、发酵过程、酶液的提取和纯化、活性测定及品质检测、包装和贮藏。
这些步骤的严格控制可以保证木瓜蛋白酶的质量和活性,以满足市场需求。
苦杏仁醇溶蛋白酶解抗氧化肽的制备工艺优化徐杨林,严宏孟,高蕾,伊力夏提·艾热提,靳红,周建中(新疆农业大学食品科学与药学学院,新疆乌鲁木齐 830000)摘要:以苦杏仁醇溶蛋白为原料,采用甲醛电位滴定法以水解度和自由基清除率为评价指标对风味蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和胃蛋白酶五种生物酶在最适条件下对苦杏仁醇溶蛋白的酶解效果进行酶的优选。
在单因素实验的基础上,以酶添加量、底物浓度、pH、时间为自变量,通过四因素三水平Box-Bohnken响应面分析法对生物酶解工艺进行优化。
结果表明碱性蛋白酶为酶解苦杏仁醇溶蛋白的最优选择,预测最优工艺条件为时间:4.12 h、酶添加量5208.93 U/g、底物浓度3.21%、pH 9.22,根据最终试验目的,选取条件为:时间:4.0 h、酶添加量5000.0 U/g、底物浓度3.0%、pH 9.0。
通过验证试验得出响应值DH%为26.74%±0.54%,DPPH自由基清除率为97.86%±0.58%,与预测值相差较小,故此条件下酶解苦杏仁醇溶蛋白抗氧化肽为最优工艺。
关键词:苦杏仁;分级蛋白;生物酶;响应面法;甲醛电位滴定法文章篇号:1673-9078(2021)06-201-210 DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2021.6.1111 Optimizing Antioxidant Peptide Preparation using the Proteolysis of the Prolamins Produced by Prunus dulcis var. amaraXU Y ang-lin, YAN Hong-meng, GAO Lei, YILIXIATI Aireti, JIN Hong, ZHOU Jian-zhong(College of Food Science and Pharmacy, Xinjiang Agricultural University, Urumqi 830000, China) Abstract: The degree of hydrolysis, as measured by potentiometric titration in the presence of formaldehyde, and free radical scavenging rate in five bioenzymes, namely flavor proteases, alkaline proteases, papains, neutral proteases, and pepsins were compared to identify the bioenzyme with the best proteolytic performance against the Prunus dulcis var.amara prolamins under optimal conditions. The effects of independent variables such as enzyme addition, substrate concentration, pH and reaction time were explored via single-factor experiments. Box-Behnken response surface methodology considering these four factors at three levels was then used to optimize the proteolysis of these five bioenzymes. The results demonstrate that alkaline proteases outperform the other enzymes when using the Prunus dulcis var. amara prolamins as substrate. The optimal conditions were determined to be as follows: a reaction time of 4.12 h; a total of 5208.93 U/g of the enzyme should be added; the substrate concentration should not exceed 3.21%; and the pH should be maintained at 9.22. Final evaluations using these conditions allowed for an additional round of refinement and we determined that the optimal conditions are as follows: a reaction time of 4.0 h; 5000.0 U/g of enzyme; substrate at 3.0%; and the pH at 9.0. These conditions were then validated by the evaluation of the end product with these processed petides increasing the DH% and DPPH free radical scavenging rate to 26.74%±0.54% and 97.86%±0.58%, respectively. These values are very similar to the predicted values from our in silico evaluation, confirming that these are the optimal conditions for the proteolysis of the prolamin proteins produced by Prunus dulcis var. amara.Key words: Prunus dulcis var. amara, graded protein, bioenzymes, response surface methods, potentiometric titration引文格式:徐杨林,严宏孟,高蕾,等.苦杏仁醇溶蛋白酶解抗氧化肽的制备工艺优化[J].现代食品科技,2021,37(6):201-210,+192XU Y ang-lin, Y AN Hong-meng, GAO Lei, et al. Optimizing antioxidant peptide preparation using the proteolysis of the prolamins produced by Prunus dulcis var. amara [J]. Modern Food Science and Technology, 2021, 37(6): 201-210, +192收稿日期:2020-12-01基金项目:国家重点研发计划项目(2019YFD1002300)作者简介:徐杨林(1997-),男,在读研究生,研究方向:农产品精深加工及植物蛋白工程通讯作者:周建中(1979-),男,博士,副教授,研究方向:农产品精深加工及植物蛋白工程杏原产于我国,有文献记载的栽培时间就有4000多年之久[1],主要集中在我国的北方各地,以新疆、吉林、辽宁、山东、陕西地区最多[2]。
菠萝蛋白酶生产工艺
菠萝蛋白酶是一种能够降解蛋白质的酶,广泛应用于食品、酒类、制酶等行业中。
下面我将介绍菠萝蛋白酶的生产工艺。
菠萝蛋白酶的生产工艺主要包括以下几个步骤:原料准备、发酵、分离提纯和产品包装。
首先是原料准备。
菠萝蛋白酶的原料主要是新鲜菠萝。
首先将新鲜菠萝去皮、去核,然后用搅拌机将其搅碎成糊状物。
得到的菠萝糊经浸泡蛋白酶活性稳定剂,以提高蛋白酶的活性和稳定性。
接下来是发酵。
将经过处理的菠萝糊加入到发酵罐中,并加入适量的发酵基质,如糖、氨基酸等。
在适当的温度和pH条件下,接种适量的菌种,进行发酵培养。
发酵过程中需要控制好温度、pH值和搅拌速度等参数,以促进菌种生长和蛋白酶的产生。
发酵完成后,进行分离提纯。
首先对发酵液进行离心,分离出菠萝蛋白酶。
然后采用酒精沉淀、超滤、析出等一系列分离纯化工艺,去除杂质并提高蛋白酶的纯度。
最后是产品包装。
将提纯后的菠萝蛋白酶经过过滤、浓缩等处理,最终得到浓缩度适宜的酶液。
将酶液灌装到容器中,然后进行杀菌、封装等工序,最终得到成品。
总的来说,菠萝蛋白酶的生产工艺是一个较为复杂的过程,需
要进行原料处理、发酵、分离提纯和产品包装等多个步骤。
不同的厂家和工艺流程可能有所不同,但一般都遵循以上的基本流程。
通过科学合理的工艺控制,可以获得高活性和纯度的菠萝蛋白酶产品。
酸性蛋白酶生产工艺流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。
文档下载后可定制随意修改,请根据实际需要进行相应的调整和使用,谢谢!并且,本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料,如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等,如想了解不同资料格式和写法,敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor. I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!酸性蛋白酶生产工艺流程一、菌种选育阶段。
酸性蛋白酶的生产首先需要进行菌种选育。
利用蛋白质酶技术制备乳酪的过程与原理乳酪是一种乳制品,制作乳酪的过程主要包括凝固和脱水两个过程。
其中凝固过程是乳酪制作过程中的核心环节,而蛋白质酶技术则是实现此过程的重要手段之一。
一、乳酪的制作过程
1、凝固过程:将牛奶中的乳清蛋白和酪蛋白分离出来,让酪蛋白凝固成凝胶状,形成固体的焦小块,这就是乳酪。
2、脱水过程:将乳酪中多余的水分脱去。
这一过程主要是通过盐的作用使凝胶收缩,同时减少乳清的排泄,使之在凝胶内相对集中,加速水分的排出。
二、蛋白质酶技术在乳酪制作中的应用
在乳酪制作过程中,加入某些酶能够促进酪蛋白的凝固,从而加速凝胶的形成。
1、凝固酶的种类
在乳酪制作过程中,常用的凝固酶是皮肤素、乳凝菌酶和凝乳酶。
皮肤素是发酵后提取的发酵液,其成分主要是植物性酶。
皮肤素在乳酪制作中的作用是使牛奶中的酪蛋白凝固成厚块。
乳凝菌酶是牛、羊乳中本身自带的酶,其作用也是将酪蛋白凝固成凝胶。
凝乳酶是从猪、牛、羊和老鼠等来源中提取得到的酶,其特点是在酸性条件下也能够产生凝固作用。
2、凝固酶对乳酪制作过程的影响
在乳酪制作过程中,加入适量的凝固酶,不仅可以促进酪蛋白的凝固,还能够提高乳酪的质量和产量,并且缩短制作时间。
同时,凝固酶还能够增加乳酪的口感,改善食品的品质。
三、结语
总的来说,蛋白质酶技术的应用,极大地促进了乳酪制作的发展,对提高乳酪质量,加快生产工艺,改善食品口感等方面产生了积极的作用。
在今后的乳制品制作过程中,必将发挥更加重要的作用。
辅助酶解豌豆蛋白工艺辅助酶解豌豆蛋白工艺辅助酶解豌豆蛋白是一种常见的食品加工工艺,可用于制备豌豆蛋白酸解物。
下面是一个逐步思考的酶解豌豆蛋白的过程:第一步:准备材料首先,需要准备豌豆蛋白和辅助酶。
豌豆蛋白可以从豌豆中提取得到,辅助酶可以是一种特定的蛋白酶,例如胰蛋白酶。
第二步:浸泡豌豆蛋白将豌豆蛋白粉加入适量的水中,使其充分浸泡。
浸泡的时间可以根据具体要求来调整,通常为30分钟至1小时。
第三步:调整pH值根据所使用的辅助酶的最适pH值,调整豌豆蛋白溶液的pH值。
这可以通过加入酸或碱来实现。
以胰蛋白酶为例,其最适pH值通常在7-9之间。
第四步:加入辅助酶将调整后的豌豆蛋白溶液中加入适量的辅助酶。
辅助酶的加入量可以根据所需的酶解程度和时间来确定,通常为1-2%的豌豆蛋白质量。
第五步:酶解反应将加入辅助酶的豌豆蛋白溶液进行酶解反应。
酶解反应的条件可以根据辅助酶的最适反应条件来选择,例如温度和时间。
通常,在中性pH和适宜温度下进行酶解反应,反应时间可以根据需要从几小时到几十小时不等。
第六步:停止酶解当达到所需的酶解程度后,需要停止酶解反应。
这可以通过加热或降低溶液的pH值来实现。
加热可以使酶失活,而降低pH值可以改变酶活性。
第七步:分离酸解物将酶解后的豌豆蛋白溶液进行分离,以获得豌豆蛋白酸解物。
分离可以通过离心、过滤或其他分离技术来实现。
得到的酸解物可以进一步用于制备其他食品或添加到食品中增加营养。
总结:辅助酶解豌豆蛋白是一个多步骤的过程,包括准备材料、浸泡豌豆蛋白、调整pH值、加入辅助酶、酶解反应、停止酶解和分离酸解物。
这个过程可以通过控制反应条件和反应时间来实现不同程度的酶解,从而得到具有不同功能和应用的豌豆蛋白酸解物。