神经干细胞(NSC) 标记物

5种肿瘤干细胞标志物在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义蔡传书;王培荣;黄雄;吕文龙【期刊名称】《中国老年学杂志》【年(卷),期】2016(036)023【摘要】目的：探讨CD133、滋养层细胞表面抗原－2（TROP－2）、CD44、三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2（ABCG2）及神经营养因子受体p75（p75NTR）五种肿瘤干细胞（CSC）标志物在非小细胞肺癌（NSCIC）组织中的表达及其与临床病理参数间的关系。

方法选取80例NSCLC组织、33例癌旁组织、28例正常组织为研究对象，采用免疫组化法检测各组织中 CD133、CD44、TROP－2、ABCG2及 p75NTR蛋白表达的差异，分析其与NSCLC患者病理参数的相关性。

结果（1）CD133、CD44、TROP－2、ABCG2及p75NTR在NSCLC组织中的阳性率分别为80．00％、87．50％、50．00％、62．50％、68．75％；在癌旁组织中的阳性率分别为6．06％、30．30％、15．15％、21．21％、12．12％；在正常组织中的阳性率分别为46．43％、10．71％、21．43％、21．43％、21．43％，各指标在不同组织间的阳性率比较差异均有统计学意义（ P＜0．05）。

（2）随着细胞分化程度的降低， NSCLC 组织中的CD133、CD44、TROP－2、ABCG2及p75NTR的阳性率均呈上升趋势（P＜0．05），CD133、TROP－2阳性率与 NSCIC患者年龄、淋巴结转移、TNM分期有关（P＜0．05），ABCG2及 p75NTR 阳性率与 NSCIC 患者年龄及远处转移有关（P＜0．05）。

结论 NSCLC 组织中 CD133、CD44、TROP－2、ABCG2及p75NTR的表达水平异常，且均与NSCLC肿瘤细胞分化密切相关。

【总页数】3页(P5905-5907)【作者】蔡传书;王培荣;黄雄;吕文龙【作者单位】福建医科大学附属第一医院放疗科，福建福州 350005;福建医科大学附属第一医院放疗科，福建福州 350005;福建医科大学附属第一医院放疗科，福建福州 350005;福建医科大学附属第一医院放疗科，福建福州 350005【正文语种】中文【中图分类】R73【相关文献】1.肿瘤干细胞标志物CD133在非小细胞肺癌中的表达及临床意义 [J], 魏益平;王梅;华平;吴澄;曹永科;杨艳旗;陈炬;张惠忠2.肿瘤干细胞标志物CD44在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义 [J], 王鑫;吉亚君3.肿瘤干细胞标志物LGR5、Nanog在结肠腺癌组织中的表达及其临床意义 [J], 常戈鋆;陈利娟;陈慧莉4.乳腺癌肿瘤干细胞标记物CD44^+ESA^+CD24^(-Λow)在非小细胞肺癌组织中的表达及其意义 [J], 吕志强;李海刚;张惠忠;范苗静;沈溪明;何欣欣5.肿瘤干细胞标志物CD133、CD44、SOX2、OCT4、ALDH1在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义 [J], 梁洪享;钟竑;罗勇;黄燕;丁昭珩;丁罡因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

CD133和CD34CD133是一种独特的干细胞标志，分子量为120kDa，具有5个跨膜区，曾命名为AC133。

2000年，在英国Harrogate举行的第7届人类白细胞分化抗原国际工作会议（7th International Workshop on Human Leucocyte Differentiation Antigens，HLDA7）上被正式命名为CD133。

CD133抗原可被3种CD133抗体识别：克隆AC133、293C3和AC141。

AC133直接与CD133/1糖基化抗原表位结合，可用于从外周血、骨髓、脐带血及其它组织中分析和分选CD133+细胞。

单克隆抗体293C3和AC141识别抗原表位CD133/2，主要用于MACS分选后CD133+细胞的荧光染色。

多数情况下CD133/1和CD133/2识别同种细胞，只是有表达强度的差别，但是在骨髓增生异常综合征（myelodysplastic syndrome，MDS）和某些急性髓性白血病（acute myeloid leukemia，AML）中发现CD133/1和CD133/2表达不同，或者正常表达强度紊乱。

造血系统中，CD133在35-75%的CD34+细胞亚群上表达，主要见于人类胎肝、骨髓、脐带血、外周血中CD34bright干细胞和前体细胞，包括CD34bright、CD38neg/dim、HLA-DRneg/dim、CD90+和CD117+细胞。

此外，CD133也见于这些组织的一小部分CD34-细胞，在成熟的血细胞上不表达。

与CD34抗原不同的是，CD133在晚期祖细胞，如前B细胞、红系集落形成单位（colony forming unit-erythrocyte, CFU-E）、粒系集落形成单位（colony forming unit-granulocyte, CFU-G）上不表达。

最近发现CD133也表达于内皮前体细胞、胎儿神经干细胞和发育中的上皮细胞。

Wnt通路调控胚胎早期神经发育的研究进展摘要：Wnt通路是胚胎早期神经发育的关键调控通路之一。

该通路在神经干细胞增殖、分化和迁移等过程中发挥着重要作用。

Wnt通路主要包括Wnt蛋白家族、Frizzled受体 family、β-连环蛋白等重要因子。

Wnt蛋白通过结合Frizzled和LRP受体形成受体复合体,引导β-连环蛋白信号转导进入细胞内,影响下游基因的表达调控细胞功能。

Wnt通路失调与多种神经系统疾病的发生发展密切相关。

本文查阅国内外相关文献发现，Wnt通路失调易导致神经系统发育异常。

Wnt通路调控胎儿期赖氨酸水平也影响神经细胞的增殖分化。

本文为进一步阐明其在神经疾病发生机制中的重要参与提供了理论依据。

关键词：Wnt通路；胚胎；早期神经发育；神经干细胞神经系统的发育始于胚胎时期，并在出生后仍在继续。

胚胎早期神经发育的关键事件包括神经干细胞的增殖、分化和迁移。

神经发育过程中存在多种细胞参与，神经胶质细胞、中间神经元及其他神经元间形成的连接[1]。

如胚胎干细胞中神经运行过程中获得的(神经诱导)可由骨形态发生蛋白、成纤维细胞生长因子和Wnt信号传导控制[2]。

可见，神经诱导是神经干细胞发育成神经细胞的最初步骤，并且与胚胎身体轴的发育密切相关[3]。

神经发育缺陷可导致严重且常见的结构性出生缺陷，例如颅面异常和先天性心脏病[4]。

而Wnt通路是神经细胞神经传导过程中较为重要的通路之一。

研究显示，Wnt-1和 Wnt-3a 基因编码富含半胱氨酸的分泌信号的 Wnt 家族成员，在发育中的神经管的背侧中线共表达，与背侧模式一致[5]。

Wnt 信号传导介导胚胎发生过程中的主要发育过程，并调节成年哺乳动物干细胞的维持、自我更新和分化[6]。

也有研究显示，Wnt/β-catenin 可调节神经祖细胞的自我更新及促进分化[7]。

同时，神经祖细胞在神经发育过程中能够产生颗粒神经元[8]。

在神经系统中，Wnt通路参与了神经干细胞的增殖、分化和迁移等过程。

组织工程的三要素及其功能1.支架：诱导立体定向生长、诱导血管生长、供给营养物质及生长因子，处理代谢废物，模拟细胞外基质的微环境.2.种子细胞:可来源于自体细胞、同种异体细胞、异体细胞、干细胞；可通过单层贴壁生长、悬浮生长、三维立体生长等方式来培养。

3.生长因子：可刺激种子细胞的生长和分化，调节种子细胞的活性。

组织工程的操作过程选择合适的支架材料→对支架进行塑形→在支架上种植活细胞→添加合适的生长因子→种子细胞沿支架材料多向生长，形成三维立体组织(在生物反应器中）→移植到人体内→重建该组织功能→新生组织中血管生成→支架材料溶解→新生组织最终与人体内环境融合支架材料的选择标准1．具有生物相溶性及功能2．表面理化性质易于细胞的粘附和增殖3．可控的生物降解和生物吸收性质4．有很好的机械强度,可承受压力,例如骨组织支架材料5．三维支架材料具有多孔性，使各个微小的结构可以相互连通6．没有免疫原性7．不会引起感染8．性质稳定干细胞是一类幼稚型细胞,具有增殖和分化的潜能以及自我更新的能力,可以分化形成各种成熟的体细胞类型。

根据其分化潜能大小可分为全能干细胞、万能干细胞、多能干细胞、专能干细胞。

干细胞的分类Totipotent：受精卵,可分化形成所有体细胞类型Pluripotent:胚胎干细胞，分化形成三个胚层来源的细胞Mutipotent：骨髓间充质干细胞等，分化形成单一胚层来源的细胞Unipotent:各组织内干细胞，只能分化形成该组织细胞干细胞来源胚胎来源：胚胎干细胞：ES细胞胚胎性腺轴细胞:EG细胞（生殖嵴干）畸胎瘤细胞：EC细胞胎儿来源：脐带、胎盘、羊水成体来源：骨髓：造血干细胞、间充质干细胞组织:神经、骨骼肌等组织内专能干细胞ES细胞来源于5—7天未植入囊胚内细胞团,具有自我更新的能力（每一次分裂形成两个细胞,其中一个继续分化，另一个保留下来,仍是ES细胞）,是万能干细胞,可分化形成三个胚层来源的细胞。

小鼠胚胎中脑神经干细胞分离、培养及分化刘兵;刘洪涛;戴冀斌;彭超华;黄娟【摘要】目的:探讨小鼠胚胎中脑分离神经干细胞的体外培养方法,以获取高纯度的神经干细胞,为神经干细胞的深入研究提供试验材料。

方法:无菌条件下分离孕12~13 d小鼠胚胎中脑曲,制成单细胞悬液,碱性成纤维生长因子(bFGF)和B27存在的培养基中培养扩增,通过免疫细胞化学染色鉴定神经干细胞及子代细胞的分化方向,流式细胞术检测TH阳性神经元比例。

结果:培养的部分细胞体外分裂增殖,同时表达神经干细胞特异性抗原nestin,并向神经细胞和胶质细胞分化并经流式细胞仪检测自然分化为多巴胺能神经元的比例为3.25%。

结论:小鼠胚脑中脑存在具有多分化潜能的神经干细胞,它们能在体外稳定培养、传代和分化。

【期刊名称】《长江大学学报：医学卷》【年(卷),期】2006(000)012【总页数】4页(P)【关键词】神经干细胞;培养;分化;中脑【作者】刘兵;刘洪涛;戴冀斌;彭超华;黄娟【作者单位】长江大学医学院;武汉大学医学院;武汉大学医学院;湖北荆州;湖北荆州;湖北武汉【正文语种】中文【中图分类】Q813神经干细胞(neural stem cells, NSCs)是一类广泛存在于胚胎及成体中枢神经系统的早期未分化细胞，被认为是神经系统的“发源地”[1]。

应用神经干细胞移植的方法修复神经系统脑的损伤与治疗人类神经退行性疾病中更显示出其优越性,其中最具有代表性的就是怕金森病，然而，这种方法在患者中广泛应用的障碍就是胚脑移植的问题。

本试验对小鼠胚胎中脑神经干细胞的分离和培养进行了尝试，为神经干细胞的进一步研究奠定基础。

1 材料与方法1.1 材料1) 实验动物孕12～13 d昆明小鼠(E12～13 d，SPF级)，由武汉大学医学院实验动物中心提供。

2) 试剂 DMEM/F12培养基，特优级胎牛血清(FBS),B27均购自GIBCO公司；碱性成纤维生长因子(bFGF)购自Peprotech公司；胰酶(Trypsin)、DNA酶1(DNase1)、左旋多聚赖氨酸(PLL)和DAPI购自SIGMA公司。

不同来源间充质干细胞标志物汇总（全）（图片来源网络）间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSC）是一种源于中胚层的早期干细胞，具有多向分化潜能，特定的条件下可分化为骨细胞、软骨细胞和神经细胞等，支持造血，具备低免疫原性和免疫调节活性，具有广泛的科研和临床应用价值。

主要存在于结缔组织和器官间质中，以骨髓中含量最为丰富，少量存在于血液及其他组织中。

近年来随着基础科研和临床研究的不断深入，MSC在医学领域的应用价值也得到了极大肯定，但仍然存在一些问题，如：缺少特异性表面标志物，鉴定困难；多次传代后分化能力不能保留；诱导分化调控机制尚不明确等，都是有待于进一步研究和讨论的。

MSC主要关键基因和表面分子包括CD73、CD90、CD105，表达极少或无表达CD11b、CD19、CD34、CD45和HLA-DR，其中不同来源之间的MSC标志物存有一定差异性，这里列出来供大家参考。

外周血（Peripheral derived blood）来源[1]阳性：CD105, CD90, CD73, CD73, CD44, CD90.1, CD29, CD105, CD106, CD140α阴性：CD34, CD19, CD11b骨髓（Bone marrow）来源[2]阳性：CD105, CD13, CD140b, CD147, CD151, CD276, CD29, CD44, CD47, CD59, CD73, CD81, CD90, CD98阴性：CD14, CD31, CD34, CD45皮肤（Skin）/包皮（foreskin）来源[3]阳性：CD29, CD44, CD73, CD90, CD105, vimentin阴性：CD34, CD45, HLADR脂肪（Adipose）来源[4]阳性：CD9, CD29, CD44, CD54, CD73, CD90, CD105, CD106, CD146, CD166阴性：CD14, CD31, CD34, CD45, CD133, CD144, HLA-DR,STRO-1尿液（Urine）来源[5,6]阳性：CD29, CD44, CD54, CD73, CD90, CD105, CD166,STRO-1, Oct-4, Klf-4, Sox-17, vimentin阴性：CD41, HLA-DR心（Heart）来源[7]阳性：CD44, CD105, CD29, CD90阴性：CD14, CD45, CD34, CD31牙（Dental）来源[8,9]阳性：CD13, CD29, CD44, CD49, CD73, CD90, CD146, STRO-1, Oct-3/4, NANOG, SSEA-3阴性：CD14, CD31, CD34, CD45, HLADR骨骼肌（Skeletal muscle）来源[10]阳性：CD29, CD44, CD49E, CD56, CD73, CD90, CD105, HLA-I阴性：CD34, CD45胰腺（Pancreas）来源[11]阳性：CD105, CD90, CD73, CD44, CD29, CD13, nestin,vimentin, CD146, NG2, α-SMA, PDGF-R β阴性：CD31, CD34, and CD45, CK19, CA19.9肺（Lung）来源[12]阳性：CD73, CD90, and CD105, vimentin, prolyl-4- hydroxylase阴性：CD14, CD34, CD45胚胎干细胞（ESC）[13]阳性：CD29, CD44, CD73, CD105, SSEA-4阴性：CD34, CD45, HLADR诱导多能干细胞（iPSC）[14]阳性：CD29, CD44, CD166, CD73, CD105, KDR, MSX2阴性：CD34, CD45, HLADR沃顿果冻（Wharton jelly）来源[15]阳性：CD44, CD73, CD90, CD105, CD166阴性：CD14, CD34, CD45胎盘（Placenta）来源[16,17]阳性：CD105, CD73, CD90c-kit, Thy-1, Oct-4, SOX2, hTERT, SSEA-1,3,4, TRA-1阴性：CD34, CD45, CD14 or CD11b, CD19, HLA-DR脐带（Umbilical cord）来源[18]阳性：CD73, CD90, CD105, Oct-4, Nanog, ABCG2, Sox-2,Nestin阴性：CD34, CD45, CD19, HLA-DR绒毛（Chorionic villi）来源[19]阳性：CD44, CD117, CD105, α-SMA, CD49, CD146, CD106, CD166, Stro-1, vWF阴性：CD34, CD45, CD19, HLA-DR绒毛膜（Chorionic membrane）来源[20]阳性：CD44, CD49, CD56, CD73, CD90, CD105阴性：CD45, CD34, CD14, CD31, EPCAM, HLA-DR脐带血（Cord blood）来源[17]阳性：CD29, CD 73, CD105, CD44, Oct-4, Sox-1, Sox2, NANOG, ABCG2, Nestin阴性：CD34, CD45子宫内膜（子宫内膜）来源[21]阳性：CD73, CD90, CD105, CD166, HLA-ABC, Oct-4阴性：CD14, CD34, CD45, HLA-DR羊膜（Amniotic membrane）来源[22,23]阳性：CD73, CD90, CD105, Oct-4, SSEA-4, Tra-1阴性：CD11b, CD14, CD19, CD79α, CD34, CD45, HLA-DR羊水（Amniotic fluid）来源[24]阳性：CD73, CD90, CD105, CD166, MHC class I, Oct-4, EA- 1阴性：CD 45, CD40, CD34, CD14, HLA- DR参考文献：1.Li S, Huang K-J, Wu J-C, Hu MS, Sanyal M, Hu M, Longaker MT, Lorenz HP. Peripheral blood-derived mesenchymal stem cells: candidate cells responsible for healing critical-sized calvarial bone defects. Stem Cells Transl Med. 2015;4(4):359–68.2. Amati E, Perbellini O, Rotta G, Bernardi M, Chieregato K, Sella S, Rodeghiero F, Ruggeri M, Astori G. High-throughput immunophenotypic characterization of bone marrow- and cord blood-derived mesenchymal stromal cells reveals common and differentially expressed markers: identification of angiotensin-converting enzyme (CD143) as a marker differentially expressed between adult and perinatal tissue sources. Stem Cell Res Ther. 2018;9(1):10.3. Park JR, Kim E, Yang J, Lee H, Hong SH, Woo HM, Park SM, Na S, Yang SR. Isolation of human dermis derived mesenchymal stem cells using explants culture method: expansion and phenotypical characterization. Cell Tissue Bank. 2015;16(2):209–18.4. Schäffler A, Büchler C. Concise review: adipose tissue-derived stromal cells—basic and clinical implications for novel cell-based therapies. 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中药调控神经干细胞促进中枢神经系统神经再生与修复的研究
进展
庄朋伟;张艳军
【期刊名称】《中国医药生物技术》
【年(卷),期】2008(003)002
【摘要】传统观点认为，中枢神经系统（central nervous system，CNS）在损
伤后缺乏自身修复能力。

1992年，Reynolds和Weiss从成年小鼠纹状体中分离
出了能在体外不断分裂增殖、具有多种分化潜能的神经干细胞（neural stem cell，NSC），这就对CNS发育成熟后不可能再生的理论提出了挑战，同时也为神经系统损伤修复及功能重建带来了希望。

正常情况下CNS内NSC的数目较少，并且
大部分新发生的神经细胞在短期内会死亡，所以中枢神经系统内神经再生的发生频率很低。

【总页数】3页(P134-136)
【作者】庄朋伟;张艳军
【作者单位】300193,天津中医药大学中药学院,天津市中药药理重点实验
室;300193,天津中医药大学中药学院,天津市中药药理重点实验室
【正文语种】中文
【中图分类】R2
【相关文献】
1.中药有效成分促神经再生与修复的实验研究进展 [J], 任志丽;左萍萍
2.神经干细胞移植促进缺氧缺血性脑损伤脑功能修复研究进展 [J], 陈盛;何念海
3.中药对神经干细胞增殖分化及调控的研究进展 [J], 姜英虹;李江丽;句红萍;李军
4.神经干细胞移植对脊髓创伤后神经再生促进作用的研究进展 [J], 杨大伟;靳春杰;吕苓甫;张士俊;李宏伟;孙文涛
5.神经干细胞移植对脊髓损伤后神经再生促进作用的研究进展 [J], 邵春莹;赵晶莹因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

神经损伤修复的方法及中医论治摘要：脑外伤（traumatic brain injury，TBI）多年来一直是致残致亡的重要因素，主要表现为神经细胞损失、细胞间（神经细胞与组织细胞间）、轴突，突触间联系被破坏等。

药物治疗仅仅使损伤部位愈合形成胶质斑痕，而细胞，组织移植治疗可以取代受损部位损失细胞，同时避免胶质斑痕的形成，使脑外伤治疗得到巨大的突破。

最初的移植材料来自于流产的胎儿脑组织，方法也是较为简单的直接移植，取得了明显的效果，但是移植材料来源及伦理学限制使移植治疗在临床应用上一直举步维艰。

传统对神经损伤的修复方式，即手术治疗已经不能满足医疗上的需要，在这种背景下，对新型治疗方式和中医治疗的研究需求加大，进而产生了一系列的研究成果。

关键字：神经；损伤；修复；脑外伤；脊髓1.影响神经损伤修复的因素神经再生过程十分复杂包括以下条件[1]：(1)必须保证神经元的存活，并能启动神经再生所需的代谢反应。

(2)在远离神经损伤的部位（即神经再生的局部环境）能提供良好的营养。

(3)再生后的神经能支配相应组织，并能恢复原有功能。

目前对神经损伤后再生的研究已达到分子水平，其病理过程是受损神经元综合细胞外促进和抑制再生的信号，通过跨膜信号转导启动再生相关基因表达的结果。

在目前研究成果下，原因可能有：(1)神经元本身缺乏再生能力。

(2)神经营养因子生成不足，包括靶源性营养因子的供给因轴突断裂而中断。

(3)细胞外基质不适宜，损伤后产生了神经元生长的抑制因子。

(4)损伤后局部胶质细胞形成坚硬的瘢痕，阻碍轴突的生长、穿过等。

2.理论突破下的神经损伤修复新方法早在20世纪80年代，成年哺乳动物的中枢神经系统（CNS）损伤后不能再生和恢复的理论受到挑战，这种概念上的突破主要基于两方面的实验事实：把外周神经节段移植进脊髓，观察到损伤的脊髓神经纤维能够长距离地延伸，证实成年哺乳动物的脊髓神经元仍然保持着再生的能力，从根本上改变了人们对整个神经再生领域的认识。