芦丁的提取与定性

芦丁的提取分离与鉴定实验原理芦丁是一种营养丰富的天然食品添加剂，其含量丰富，口感好，是人们烹饪和食用的重要原料之一。

由于芦丁具有肥胖抑制、血糖稳定、免疫调节、血压降低、预防动脉粥样硬化等功效，它已经受到了越来越多人的喜爱，在作为保健品、膳食补充剂、饮料添加剂等应用领域中也受到了广泛的应用。

由于芦丁含量的高低及其含有的其他物质的复杂性，对芦丁的提取、分离和鉴定均具有重要意义。

芦丁提取是将芦丁从原料中提取出来的一系列活动，是分离和芦丁的前提操作，根据芦丁提取和萃取的原理，采用萃取溶剂改变物质的性质，把有机溶液中的活性成分萃取到有机溶剂层中，从而实现物质提取和分离。

现在，人们主要采用水萃取和溶剂萃取法，才有了提取芦丁的方法。

芦丁分离是在提取溶液中，把芦丁成分从别的成分中分离出来的一系列活动。

它是一种双相分离技术，其中一相是芦丁本身，另一相是其它物质，应用各种不同的物理技术将两相分离。

例如，采用凝胶渗透色谱、高效液相色谱等分离技术，把芦丁内含物与其他物质分离出来。

芦丁鉴定是指在提取和分离完成后，根据物理化学性质和生物学活性，严格检验芦丁的各种特征，明确原料中芦丁的地位，确定提取的芦丁来源、质量或活性的活动。

采用的鉴定方法有荧光光谱分析、层析分析、热分析法、表面活性剂法等。

以上是芦丁提取、分离与鉴定的实验原理，它的实验操作要求十分严格，可以有效提高芦丁产品的质量。

现在，芦丁提取、分离和鉴定技术已经取得显著进展，使得芦丁产品更有保证、更安全。

不仅如此，它还能够进一步提高芦丁产品的活性和质量，为人们提供更高质量的保健产品。

四、芦丁的鉴定
定性反应鉴别见附录。
（一）芦丁的酸水解
称取精品芦丁2g
置500ml烧瓶中
加2%的H2SO4200ml
加热回流1小时
放冷，静置，抽滤
酸性滤液沉淀
中和冷水洗两次，干燥
用95%乙醇25 ml最后称重，计算收率。
浓缩
黄色细针状结晶
浓缩液（槲皮素）
（供糖的鉴定）
补充知识:
关于苷（gān）和甙(dài):苷类（glycosides，旧称甙）又称配糖体，是糖或糖的衍生物的半缩醛羟基与另一类非糖物质中的羟基以缩醛键（甙键）脱水缩合而成的环状缩醛衍生物，水解后能生成糖与非糖化合物。目前国际上通用“苷”如“皂苷”，而过去习惯使用的中文名称“甙”目前已不再使用如“皂甙”现统称“皂苷”。
展开剂：正丁酵-醋酸-水（BAW）（4：1：5）上层，悬挂并利用上层展开剂纸色谱分离。
显色剂：苯胺以及邻苯二甲酸混合试液，喷后105℃烘10分钟。显棕红色斑点。
注意事项:纸层析展开时可事先用铅笔在裁剪好的层析纸上画出展开起点(即点样的位置)和预制终点(即展开完毕后展开液的前沿)，这样方便进行测量计算比移值。另外由于糖液一般无色，因此点样位置也可事先用铅笔点出标记，注意如果糖液浓度过低（实验时应尽量将糖液蒸发浓缩至3毫升以内）则应多次点样以达到浓集的目的，否则展开后的点不够明显。点样时也需要注意点样液斑不易扩散太大，应控制液斑直径在3 mm以内，同时各点样点之间应尽量保持距离不可过于靠近，否则展开后可能得到较大的样班，而且不同样斑之间可能重合相互干扰而不易测量比移值。下图给出正确的纸层析法标示。
综合化学实验:芦丁的提取分离和鉴定
芦丁简介:
芦丁（Rutin）又名芸香苷化学式: C27H30O16·3H2O，是一种浅黄色针状结晶有机化合物，广泛存在于自然界植物中，是一种被人们广泛使用的有机天然产物。目前已发现含有芦丁的植物至少在70种以上，常见的如烟叶、槐花、荞麦和蒲公英中均有不同含量。尤其以中药槐米（豆科、槐属，槐树Sophorajaponica的花蕾）和荞麦中含量最高，因此槐米可作为大量提取芦丁的天然植物原料。

2.实验方法
芦丁粗品
0.5g芦丁粗品
1g芦丁粗品
按1:200加水，煮沸溶 解，趁热抽滤 滤液
放置析晶
2%H2SO4 80ml，直火回 流，加热30min，抽滤
芦丁精品
沉淀
滤液（PC）
水洗至中性，95%EtOH重 结晶 滤液
槲皮素精品
芦丁的精制：取0.5g芦丁粗品，置500mL烧杯中，
按1:200加水，加热至沸，使之充分溶解。
趁热过滤，滤渣再加入300mL水，直火加热0.5h。
趁热过滤，合并两次滤液。
放置，析出沉淀，抽滤，干燥得淡黄色芦丁粗品。
二 芦丁的精制和水解
一 实验原理 1.芦丁的精制是根据芦丁在热水中溶解度大，冷水中溶解度小的性 质进行重结晶而获得芦丁粗品。
2.芦丁是黄酮苷类，可进行酸水解，苷键断裂生成苷元槲皮素，葡 萄糖和鼠李糖。
4.熔点测定：芦丁
熔点测定：槲皮素
THANKS
一，芦丁的提取
1.实验原理：芦丁在冷水中的溶解度为1:10000，在热水中的 溶解度为1：200，在冷乙醇中的溶解度为1:650.因此，采用 水煎法提取芦丁经济，效率高。
2.实验方法
槐米20g，研碎
药渣
滤液
300ml，煎煮0.5h，过滤 滤液
芦丁粗品
取20g槐米，研碎。
置于400mL沸水中，直火煎煮1h(需补充蒸发掉的水分)。
（2）因糖的极性差异造成Rf值，与对照品比较鉴定
（3）黄酮类的显色反应特异性较强，故可与聚酰胺产 生氢键缔合，常用于分离和鉴别。
1.糖的纸色谱（圆形滤纸）鉴定 取澄清的水解液20mL，加碳酸钡中和至中性，滤去生成的硫 酸钡沉淀，滤液浓缩至小体积1mL，供纸色谱点样用。

O
O Ac O Ac
OH
OH
O
OH OH
O
O C H 2O O OH
OH OH
OAc OAc O
O
O C H 2O
O OAc
OAc OAc
O Ac OAc
❖ 三、实验试剂与器材
❖ 实验材料：槐米、槲皮素和芦丁标准品
❖ 试剂：蒸馏水、碳酸钙、浓盐酸、镁粉、pH试纸、 1%氢氧化钠、浓硫酸、α－萘酚试剂、50%乙醇、 1%三氯化铝－甲醇试剂、1%醋酸镁－甲醇试剂、 1%槲皮素标准品；1%芸香甙标准品、正丁醇、冰 醋酸、水、苯胺－邻苯二甲酸试剂、石灰乳、硼砂。
实验二 芦丁的提取与定性反应
概述
芦丁的提取与定性反应
❖ 黄酮类化合物广泛存在于自然界，是一类重要的天然有机化 合物。其不同的颜色为天然色素家族添加了更多色彩。这类 含有氧杂环的化合物多存在于高等植物及羊齿类植物中。
❖ 黄酮类化合物在花、叶、果等组织中多以苷的形式存在，而 在木部坚硬组织中，多以游离苷元形式存在。
❖（1）利用芦丁可溶于热水，难溶于 冷水的性质进行提取；再利用芦丁 在热乙醇和冷乙醇中溶解度差异较 大的性质进行精制。
❖（2）利用芦丁可被稀酸水解，生成 苷元和糖，通过纸色谱和薄层色谱 进行检识
OH
槲皮素
OH 3' 4'
HO
O
7
5
3
OH
芦丁的提取与定性反应
芦丁
HO
O
OH
O
OH
OH
芦丁十乙酰化物
A cO
3-OH，5-OH
将样品溶于1ml乙醇，加入2%二氯氧锆-柠檬 酸溶液，摇匀，观察颜色变化。将反应液均分成 两份，向其中一份滴加柠檬酸甲醇溶液，另一部 分加等量醇溶液作对照。比较颜色变化。