宿主菌

当产生是外源蛋白需要复杂的糖基化和翻译后修饰 时，低等真核细胞就不能适应，要用动物细胞组织培养 来达到。
4、哺乳动物细胞
哺乳动物细胞在表达时有正确的氨基酸排列，而且所 有转录后处理与在整个动物中相同，在某种情况下可能转 录后修饰有些不同但它可提供最接近于天然副本的产物， 此外多数产物可以分泌到胞外。
但动物细胞生长缓慢，培养基价格昂贵，蛋白表达水 平较低。用于重组DNA 生产蛋白的最常用的宿主是CHO （中国仓鼠卵巢细胞）。
人们对大肠杆菌的生理学和遗传学背景了解得比其 他任何生物深。有利于进行复杂的基因操作； 大肠杆菌有相当高的生长速率，并能长到高细胞浓 度（50g/l）； 大肠杆菌能生长在简单的便宜的培养基上。
基因工程菌养
大肠杆菌不是完美的宿主:
主要问题是大肠杆菌分泌(secretion)的蛋白通常 在细胞内，当这些蛋白达到高浓度时，会被水解或形 成不溶的包含体。
构建基因工程菌的宿主-载体系统
构建基因工程菌，必须选择宿主和表达系统，一般希 望翻译后的处理要简单，如果用于食品要考虑宿主菌是 否列入FDA表中，列入的认为是安全的菌。常用的宿主 系统有：
大肠杆菌 G+细菌 低等真核细胞 哺乳动物细胞
基因工程菌培养
1、大肠杆菌
如果产品翻译后不需要修饰，大肠杆菌是最普遍选用 的宿主。 优点：
主要是枯草杆菌产生大量的蛋白酶，会很快降解产 物。而且枯草杆菌基因构建比大肠杆菌困难，质粒稳定 性也比较差，所以在使用上有较大的限制，
3、低等真核细胞
酵母菌 酿酒酵母是第一个被人利用的生物，它的最 大生长速率是大肠杆菌的25%，酵母比最大的细菌大，容 易从发酵液中回收。酵母有简单糖基化能力和分泌蛋白 的能力。这些是它的优点.但酵母达到高表达水平比大肠 杆菌困难，外源蛋白分泌到胞外也有限，现在发展了其 他的酵母如甲醇营养型酵母等。

1.基因工程菌与宿主菌对培养基的要求不同主要表现在以下几个方面。

（1）基因工程菌高密度培养要求高密度发酵是基因工程菌提高外源蛋白表达率的重要策略之一。

为实现高密度发酵，一般采用补料-分批培养方式，既能满足高密度发酵对营养源的需求，又能减少生长抑制物的形成。

因此，对培养基浓度与宿主菌的要求有很大不同。

（2）基因工程菌质粒稳定性和产物表达要求工程菌质粒稳定性对目标产物的高效表达有重要影响。

在实际生产中容易出现质粒不稳定，常见的是分裂不稳定，表现为产生质粒丢失菌，含质粒菌和质粒丢失菌两者的比生长速率出现较大差异，后者易成为优势菌。

因此，在培养基中加入选择性压力如抗生素等，以抑制质粒丢失菌（宿主菌）的生长。

另外，为使菌体生长和产物表达分开，采用两阶段培养，对培养基的要求也不一样，为诱导启动子也需要加入诱导剂等。

（3）基因工程菌培养基设计原则要求使用最低浓度合成培养基以便精确设计营养成分与细菌生长之间的定量关系，同时避免任何不利于菌体生长的营养限制性因素。

在实际发酵中，利用碳源限制的方法直接阻断对数生长期抑制性代谢产物的合成，维持合适的比生长速率生长，减少培养过程中菌体对溶解氧需求，避免副产物的产生，所以，尽可能采用合成培养基。

考前复习：微生物学名词解释1.微生物：是存在于自然界的一大群体形微小，结构简单，肉眼直接看不见，必须借助光学显微镜或电子显微镜放大数百倍、数千倍、甚至数万倍才能观察到的微小生物。

2.细菌L型：细菌细胞壁缺陷型，细菌细胞壁的肽聚糖结构受到理化或者生物因素的直接破坏或合成被抑制，这种细胞壁受损的细菌在高渗环境下仍可存活者称为细菌细胞壁缺陷型。

3.质粒：质粒是细菌染色体外的遗传物质，存在于细胞质中。

为闭合环状的双链DNA，带有遗传信息，控制细菌某些特定的遗传性状。

4.芽孢：某些细菌在一定的环境条件下，胞质脱水浓缩，在菌体内形成一个圆形或卵圆形小体，是细菌的休眠形式，成为芽胞。

5.性菌毛：仅见于少量G-菌，数量少，一个菌只有1-4根，比普通菌毛长而粗，中空呈管状。

6.鞭毛：许多细菌，包括所有的弧菌和螺菌，约半数的杆菌和个别球菌，在菌体上附有细长并呈波状弯曲的丝状物，少仅1-2跟，多者达数百根，这些丝状物称菌毛，是细菌的运动器官。

7.荚膜：某些细菌在其细胞壁外包绕一层粘液性物质，为多糖或蛋白质的多聚体，用理化方法去除后并不影响菌细胞的生命活动。

8.热原质：或称致热源，是细菌合成的一种注入人体或动物体内能引起发热反应的物质，称为热原质。

9.抗生素：某些微生物代谢过程中产生的一类能抑制或杀死某些其他微生物或肿瘤细胞的物质。

10.细菌素：某些菌株产生的一类具有抗菌作用的蛋白质称为细菌素。

11.灭菌：杀灭物体上所有微生物的方法，包括杀灭细菌芽胞、病毒和真菌等在内的全部病原微生物和非病原微生物。

12.消毒：杀死物体上或环境中的病原微生物并不一定能杀死细菌芽孢或非病原微生物的方法。

13.防腐：阻止或抑制微生物生长繁殖的方法。

14.无菌操作：无菌是不存在活菌的意思，多是灭菌的结果。

15.溶原性细菌：宿主菌在温和噬菌体感染后，以前噬菌体形式与细菌基因整合，使宿主菌称为溶原性细菌。

16.转化：是受菌体直接摄取供体菌的DNA 片段而获得新的遗传性状的过程。

常住菌名词解释常住菌，又被称为“共生菌”或“宿主菌”，是指在人体或其他生物体内持续存在的微生物。

常住菌与宿主之间形成了一种共生关系，它们可以相互受益并协同作用。

本文将对常住菌进行详细解释。

首先，常住菌是指那些在宿主体内长期存在的微生物群落。

人体或其他生物体内有大量的微生物，这些微生物包括细菌、真菌和病毒等。

常住菌与宿主之间建立了一种稳定而持久的生态系统，它们共同维持着生物体内的平衡状态。

常住菌对宿主有很多益处。

首先，它们可以帮助宿主体内的消化道维持正常的功能。

常住菌可以分解食物中的纤维素和其他难以消化的物质，从而帮助宿主吸收更多的营养物质。

此外，它们还可以合成一些必要的维生素，如维生素K和B族维生素，供宿主体内吸收利用。

其次，常住菌还对宿主的免疫系统有重要的影响。

它们能够促进免疫系统的发育和功能，增强宿主的抵抗力。

常住菌通过抑制病原微生物的生长和繁殖，维持宿主体内的微生态平衡，从而预防感染和疾病的发生。

对于人类来说，常住菌还与许多疾病的发生和发展密切相关。

一些研究表明，肠道常住菌与肥胖、炎症性肠病、自身免疫疾病等疾病的发生有一定关联。

科学家们正在努力研究这种关联，并尝试利用调整常住菌群落的方式来预防和治疗这些疾病。

最后，我们应该注意保护和维护常住菌的生态平衡。

一些因素，如不良的饮食习惯、滥用抗生素、应激等，都可能对常住菌的群落结构产生负面影响。

因此，我们应该注重营养均衡的饮食，减少滥用抗生素的情况，避免过度应激，以维持宿主体内常住菌的多样性和稳定性。

总之，常住菌是存在于人体或其他生物体内的微生物群落。

它们与宿主之间形成了一种共生关系，对宿主的消化、免疫和健康等方面都有重要影响。

保持常住菌的平衡和多样性对于宿主健康至关重要。

我们应该加强对常住菌的研究，并采取相应的措施来保护和维护宿主体内的微生物群落。