2020高考生物浙江专用大二轮复习讲义:专题八 生物技术实践 第17讲 Word版含答案
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第17讲微生物的利用与酶的应用
[考纲要求] 1.大肠杆菌的培养和分离。2.分离以尿素为氮源的微生物。3.果汁中的果胶和果胶酶。4.α淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测。
1.培养基与微生物培养
提醒(1)LB固体培养基添加琼脂等凝固剂,用于单菌落的分离。
(2)全营养LB培养基与尿素固体培养基:①全营养LB培养基(含琼脂糖)是基础培养基;②尿素固体培养基:选择培养基(如以尿素作为唯一氮源的尿素培养基)和鉴别培养基(如尿素培养基中加入酚红)。
(3)加入尿素前的固体培养基用高压蒸汽灭菌法灭菌,尿素溶液用G6玻璃砂漏斗过滤。2.灭菌与消毒的比较
3.微生物分离的两种常用方法的比较
提醒划线分离操作的注意事项
(1)每次划线之前及最后一次划线之后都需要灼烧接种环。
(2)灼烧接种环,待其冷却后才能伸入菌液,以免温度太高杀死菌种。
(3)划线时最后一区域不要与第一区域相连。
(4)划线用力大小要适当,防止用力过大将培养基划破。
4.大肠杆菌的培养与分离操作
(1)原理
①接种在LB液体培养基中使其快速分裂增殖。
②将待检测微生物样品通过划线分离法或涂布分离法接种在LB固体培养基上,样品中的每一个细胞都可以生长繁殖形成单个菌落。
(2)流程
5.分离以尿素为氮源的微生物
(1)实验原理
①筛选以尿素为氮源的微生物,使用以尿素为唯一氮源的选择培养基进行培养。
②有些细菌合成的脲酶能通过降解尿素作为其生长的氮源。
③细菌合成脲酶能将尿素分解成氨,使培养基的碱性增强,pH升高,从而使加入酚红指示剂的培养基变红。
(2)操作步骤
提醒分离以尿素为氮源的微生物中的易错点
(1)误以为分离以尿素为氮源的微生物时,配制的培养基中加入酚红作为酸碱指示剂,加入琼脂作为凝固剂。应加入琼脂糖作为凝固剂。
(2)误以为降解尿素的反应中反应物只有尿素。降解尿素的反应中反应物除了尿素外还有水。
(3)误以为尿素灭菌采用高压蒸汽灭菌法。尿素遇高温会分解,所以其灭菌方法为G6玻璃砂漏斗过滤除菌。
6.探究酶活性最适条件和用量的实验设计
(1)探究影响果胶酶活性因素实验的分析
①实验原则:遵循单一变量原则、对照原则,严格控制变量,尽量减少无关变量的影响。
②实验原理:果胶酶活性受温度、pH或酶抑制剂的影响,在最适温度或pH时,其活性最高,果肉的出汁率、果汁的澄清度都与果胶酶的活性大小呈正相关。
(2)三个实验的变量分析
提醒关于果胶的两点说明
(1)果胶的作用:粘合细胞。
(2)果胶的鉴别方法:果胶不溶于乙醇,滴加95%的乙醇出现沉淀。
7.固定化酶的制作原理、方法及作用
(1)固定化酶的制作原理、方法
(2)α淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测
1.微生物利用的正误判断
(1)从有机废水中分离能分解有机物的微生物时,接种后的培养皿需要放在光照培养箱中培养(×)
提示异养微生物不需要光照。
(2)消毒的原则是既杀死材料表面的微生物,又减少消毒剂对细胞的伤害(√)
(3)每一次划线后都要将接种环灼烧(√)
(4)除第一次划线外,每一次划线的起点都是第一次划线的末端(×)
提示除第一次划线外,每一次划线的起点都是上一次划线的末端。
(5)筛选能分解尿素的细菌所利用的培养基中,尿素是唯一的氮源(√)
(6)可分解尿素的细菌在分解尿素时,可以将尿素转化为氨,使得培养基的酸碱度降低(×) 提示氨使培养基的酸碱度升高。
(7)划线分离操作简便,但涂布分离更容易得到单菌落(√)
(8)高压蒸汽灭菌法是进行各种无菌操作都需要进行的灭菌方法(×)
(9)利用LB液体培养基和LB固体培养基分别对微生物进行分离培养和扩大培养(×)