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时间分辨荧光免疫分析法检测C反应蛋白方法的建立及应用

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Ｅ ｔ ｂｉｈ ｅ ｔａ ｄ ａ ｐｉａ ｉｎ ｏ ｉ － ｓ ｌｅ ｌｏ ｏｍｍ ｕ ｏ ｓ ａ ｏ ｅｅ ｔ ｇ ｓａ ｌ ｍ ｎ ｎ ｐ ｌ ｔ ｆ ｍｅ ｒ ｏｖ ｄ ｆ ｒ ｉ ｓ ｃ ｏ ｔ ｅ ｕ ｎ ａ ｓ ｙ ｆ ｒ ｔ ｃｉ ｄ ｎ
Ｃ— ａ ｔ ｅ ｐ ｏ ｅ ｎ ｒ ｃ ｉ ｒ ｔ ｉ ｅ ｖ
ｃ ｄ ｄ ｗ ｔ ＲＰ ｍｏ ｏ ｌｎ ｌａ ｔ ｏ ｉｓ ｈ ｎ ｔ ａｅ ｉ ＲＰ ａ ｔ ｅ ｄ Ｃ Ｐ ｐ ｌｃ ｏ ａ ｎｉ ｏ ｙ Ｂ ＤＡ— ｕ ， ｅｆ － ｏ ｅ ｉｈ Ｃ ｎ ｃ ｏ ａ ｉ ｄｅ ，ｔ ｅ ｒ ｔ ｄ ｗ ｔ Ｃ ｎ ｉ ｎ ａ Ｒ ｏ ｙ ｌｎ ｌａ ｔ ｄ — ＣＰ ｎ ｂ ｅ ｈ ｇ ｎ ｂ Ｅ ｔ ｕ ｈ ｌ
中 图分 类 号 ： ３２ ３ Ｒ ９ ． 文 献标 志码 ： Ａ 文 章 编 号 ：０２２ ６ ２ １ ）３０ ２ －３ １０ －６ Ｘ（００ ２ －０６０
本研究成功制备 Ｃ Ｐ多克 Ｒ
隆抗体一 Ｃ Ｄ — ｕ Ｂ Ｐ Ａ Ｅ ”荧光标记物并建立 了 Ｔ ＦＡ检测 Ｃ Ｐ的方法 ， 为临床检测 Ｃ Ｐ提供 了新的思路 ， ＲＩ Ｒ 此 Ｒ 亦为 Ｔ － Ｒ
ｍａ ｅ ｉ ｕ ｒ ｉｓ ｌｅ ｎ ｔ ｂ ｏｐ ｉｎ ｗ ｒ ｅｅ ｔｄ ｔｅ ｆ ｏ ｅ ｃ ｎ ｌ— ｅｅ ｒｍｅ ＲＰ ｐ ｌｃｏ ａ ｔ ｏ ｙ ｄ ｎ ｏ ｒｌ ｗｅ ｅ ｄ ｓｏｖ ｄ ａ ｄ ｉ ａ ｓ ｒ ｔ ｅｅ ｄ ｔｃｅ ；ｈ ｕ ｒ ｓ ｅ ｔ ｌ ｌ ｄ ｐ ｂ ａ ｓ ｏ ｌ ｙａ ｂ ｉ ｒＣ ｏｙ ｌｎ ｌａ ｉ ｄ — ｎ ｂ
Ａ ｓｒｃ： ｊｃｉｅ Ｔ ｒｐｒ ４ ７ｂｓ ｃｌ ｓｌ ｐ ｅｙ）１１ 一ｈｎｎｈｏｎ － ９ｄ—ａ ｏｙ ｃａｉ （ Ｃ Ｄ ｂ ｔ ｔＯｂｅｔ ｏ ｅａｅ ，－ｉ ｈ ｒ ｕ ｈｎ１一 ，０ｐｅａｔｒｌ ｅ －ｉ ｒ ｘｌ ｃ Ｂ Ｐ Ａ） ａ ｖ ｐ （ ｏ ｆ ｏ ｏ ｉ ２， ｃ ｂ ｉ ｄ ｃ ｅ ｔ，ａｄｔ ｅｒｓｌ ｄｆ ｏ ｉ ｍ ｎ ａｓｙ（ Ｒ Ｉ ｈｌ ｅ ｎ ｍ — ｏ ｅ ｕｒ ｍ ｕ ｏｓａ Ｔ ＦＡ）ｏ — ａｔ ｅｐｏ ｉ（ Ｒ ）ｗ ｓｅｔ ｌｈｄ ａ ｉ ｅ ｖ ｌ ｏ ｆ ｒ ｃ ｖ ｒｔｎ Ｃ Ｐ ａ ｓ ｂｉ ｅ ．Ｍｅｈｄ Ｂ Ｐ Ａ Ｃｅ ｉ ｅ ａ ｓ ｔｏ ｓ Ｃ Ｄ
ＺＨＡＮＧ ｎ。Ｌｌ Ｙ － ａ Ｘｉ Ｕ ｕ ｙ ｏ．ＸＵ Ｙ ｎ－ｈ ｕ，ＭＡ Ｘｕ — ｉ ＡＮ ｎ Ｅ ｕ ｚ ｏ ｅｍｅ ，Ｙ Ｈｏ ｇ。ＺＨＯＮＧ — ｃ Ｒｕ ｇ ｍｇ
（ ｏ ｅｅｏ ｉ ｃ ｎｅ ｎ ｉ ｎ ｉ ｅｉ ， ｅ ｇ Ｕ ｉ ｒ ｔ ｏ ｃｎｌ ｙ Ｂ ｇ １０ ２ Ｐ Ｒ Ｃ ｉ ） Ｃ ｌｇ ｆ Ｓｉ ｃ ｄ Ｂｏ ｇｎ ｒ ｇ Ｂ ｎ ｎ ｅ ｉ Ｔ ｈ ｏ ｇ ， ｅ ｎ ０ １４， ． ． ｈｎ ｌ ｆＬ ｅ ｅ ａ ｅ ｅ ｎ ｖ ｓｙ ｆ ｅ ｏ ａ
摘要 ： 目的
制备 ４７ （ ，一 氯磺酸基苯基 ）１ １一 一，０菲哕啉－，一 ２ ９二羧酸 （ Ｃ Ｄ 鳌合剂 ， 以其建立时 间分辨荧光 Ｂ Ｐ Ａ） 并
免疫分析（ Ｒ Ｉ 技术检测 Ｃ反应蛋 白（ Ｒ ） Ｔ ＦＡ） Ｃ Ｐ 的方法 。方法
用二甲基 甲酰胺 （ ＭＦ 溶解 自制 Ｂ Ｐ Ａ后 测定其 Ｄ ） Ｃ辨 荧 光免 疫分 析法 检 测 Ｃ反 应 蛋 白方 法 的建 立 及应 用
张 欣。 刘煜 盎 ， 薛运周 。 马雪梅 ， 闫 红， 钟儒 刚 （ 京工 业大 学生命 科 学与 生物 工程 学院 ， 北 北京 １０ ２ ） ０ １４
吸光度 ； Ｂ Ｐ Ａ分别标记铕 （ ｕ 、 Ｒ 以 ＣＤ Ｅ ¨） Ｃ Ｐ多克隆抗体制备 Ｃ Ｐ多克隆抗体－Ｃ Ｄ —ｕ Ｒ Ｂ Ｐ Ａ Ｅ ”荧 光标记物 ； 以纳米磁 珠为固相载体包被 Ｃ Ｐ 克隆抗体 ， Ｒ单 分别加入 Ｃ Ｐ抗原及 Ｃ Ｐ多克隆抗体－Ｃ Ｄ —ｕ ， Ｒ Ｒ Ｂ Ｐ ＡＥ “ 应用六合一 板式 检测仪
ＢＣＰ ＤＡ— Ｅｕ” ｗａ ｅ ｒ ｄ ｂ ａ ｅｉ ｇ ｔ ｅ Ｅｕ” ｓｐｒｐａｅ ｙ ｌｂ ｌｎ ｈ
，
ＣＲＰ ｏｙ ｌｎ ｌａ ｔｂｏ ｔ ｐ ｌｃｏ ａ ｎ ｉ ｄｙ ｗｉｈ ＢＣＰＤＡ ； ａ ｎ ｔ ｃ ｏ ａ ｔｅｅ ｒ ｎ— Ｍ ｇ ｅ ｃ ｍｉｒ ｐ ｒｉｌ ｓｗｅｅ ｅ ｉ
～
３ ６０ ｎｍ ，ｔｅ ＣＲＰ ｐ ｌｃｏ ａ ｔｂ ｄｙ ＢＣＰＤＡ— ” ｆｕ ｒ ｓ ｅ ｃ ｍｉｓｏ ｐ ｃｒ ｓ ｇ ｔｗ ｔ ３７ ｍ ｈ ｏｙ ｌｎ ｌａ ｉ ｏ — ｎ Ｅｕ ｌ ｏ ｅ ｃ ｎ ｅ ｅ ｓ ｉｎ ｓ ｅ ｔａ ｗａ ｏ ｈ ３ ｎ ＵＶ ｘ ｉ ｉｎ， ｉ ｅ ｃｔ ｏ ａｔ
检测 Ｃ Ｐ荧光强度。结果 自制 Ｂ Ｐ Ａ吸收光谱为 ２ ０～３０ｎ 用 ３ ７ｎ 的紫外 光激发得到 Ｃ Ｐ多克 隆抗 Ｒ ＣＤ ２ ６ ｍ， ３ ｍ Ｒ 体．Ｃ Ｄ ．ｕ 的荧光发射光谱 ， Ｂ Ｐ ＡＥ” 利用 Ｔ ＨＡ可检测到 ０ １ｍ ／ Ｒ ． ｇ Ｌ的 Ｃ Ｐ抗原。结论 Ｒ ＦＡ的推广应用提供 了理论依据 。 Ｉ 关键词 ： 时间分辨荧光免疫分析法 ； ； 铕 Ｃ反应蛋 白
ｏｅ ｃ ｎｃ ｎ ｅ ｓｔ ｆＣＲＰ ｗａ ｅ ｅ ｔｄ ｕ ｉｇ Ｐｅｋｉ ｍｅ ｔｃｏ ． Ｒｅ ｕｌｓ Ｔｈ ｂｓ ｒ ｔｏ ｐ ｔａｏ ｒ ｓ ｅ ｅ ｉｔ ｎ ｉｙ ｏ ｓ ｄ ｔｃ ｅ ｓｎ ｒ ｎ Ｅｌ ｒｄｅｅ ｔｒ ｓ ｔ ｅ ａ ｏ ｐ ｉｎ ｓ ｅｃｒ ｆＢＣＰＤＡ ｓ２ ０ ｗａ ２

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科技成果——时间分辨荧光测控分析技术

科技成果——时间分辨荧光测控分析技术

科技成果——时间分辨荧光测控分析技术
成果简介
时间分辨荧光免疫分析法（TRFIA）具有灵敏度高、特异性强、不受背景荧光干扰等特点，在即时检验（POCT）领域有极高的发展潜力。

目前市场上的TRFIA分析仪以中大型为主，手持式极少。

本项目围绕小型化、低成本等理念，将TRFIA技术应用到POCT 领域。

该小型化TRFIA测控模块，尺寸小、成本低、检测速度快、重复性好、适用于多种稀土螯合物。

在无滤光片条件下，基本达到了小型化TRFIA测控模块的性能极限。

性能优势
（1）使用双自由度调光法，更优良；
（2）单次采样即可满足精度要求，采样时间更短；
（3）单/双通道可节省两块滤光片，成本低一半；
（4）采用基于多点采样数据拟合法的荧光物质浓度测定法。

技术成熟度原理样机
国家重大科学仪器设备专项（2012YQ3026102）：核酸扩增产物实时荧光快速检测关键技术及部件开发，完成TRFIA分析仪的核心模块——TRFIA测控模块的研究。

合作方式合作开发。

双标记AFP及Free-β-HCG时间分辨荧光免疫分析法的建立

双标记AFP及Free-β-HCG时间分辨荧光免疫分析法的建立

及 临床意义 ［ ］ Ｊ ．临床肿瘤学杂 志 ，０９，４ ３ ：０ －１． ２０ １ （ ）２ ７２ １
中的肿瘤细胞 ， 被认为是检测恶性积 液中肿瘤 细胞 的较 为有 效的方法之一 。随着分 子生 物学 等相关 检测技术 的发展 以
及人 们对 Ｇ Ｕ 一 研究 的不断 深入 ， Ｌ Ｔ １在肿瘤 的发生 、 Ｌ Ｔ１ ＧＵ 一
ｔ ｅ ｉ ｅ ｌ ｏ ｐ ｏ ｕ ｅ Ｐ ２ ｔ ｒ ｕ ｈ ａ ｔ ａ ｏ ｆｐ ４ ４ ＭＡＰ ａ ｐ ｈ ｌａ ｃ ｌ ｔ ｒｄ ｃ ＧＥ ｈ ｏ ｇ ｃ ｉ ｔ ｎ ｏ ４ ／ ２ ｌ ｖｉ Ｋ ｎｄ ｕ —
ｐ ｇｏ ｓｎ ｐｔ ｎ ｔ ｏ ｌｓ ａ ｏ ｃｌ ｃ ｃ ｏ ａ Ｊ ．Ｃ ｃ ， ｒ ｎｓ ａ ｅｔ ｗ ｈ ｒ ｑ ｍ ｍ ｅ ａ ｉ ｍ ［ ］ ａ ｅ ｏ ｉ ｉ ｉ ｓｉ ａ ｕ ｌ ｒｎ ｎ ｒ
要还集中在应用免 疫化 学方法检测 组织 学标本上 。研 究建 立简便、 快速、 敏感的 Ｇ Ｕ 一 检测方法成为研究的热点。使 Ｌ Ｔ１ 用逆转录一 聚合酶链 反应 （ ＴＰ Ｒ） 术可 以对恶性 积液 中 Ｒ —Ｃ 技 癌细胞核 ｍ Ｎ Ｒ Ａ定量分析 ， 从而在转录水平 上检测恶性积液
［］ 丽， ８王 刘欣 ， 孙乃英 ． Ｉ— ｔ Ｇ Ｕ 一 在子 宫 内膜癌 中的表 达 Ｈ Ｆｌ 和 Ｌ Ｔ１ ｅ 及意义 ［ ］ 国际肿瘤学杂志 ， ０ ， （ ） １２１４ Ｊ． ２ ９３ ２ ： － ． ０ ６ ５ ５ ［］ 晶， ９余 黄云超 ， 张丽娟 ， ． Ｉ １ 等 Ｈ Ｆ 和 Ｇ Ｕ 一 在卵巢癌中的表 达 一 Ｌ Ｔ１
２０ ９ ４ ：１ １ — ２ ． ０３， ７（ ） ０ ５１ ４ ０
［２ Ｂ ｒ ｅ Ｅ Ｒ ｅｒ ， ｉ ｒ ， ｔ ．Ｇ Ｕ １ｇ ｃ ｅ ｒ ｓ ｒ １ ］ ｕ ｔ ｎＤ ， ｅ ｅ Ｉ Ｗｅ ｅ Ｋ ｅ ａ Ｌ Ｔ ｌ ｏ ａ ｐ ｔ ｓｉ ｌ ｓ １ ｕｓ ｔ ｎ － ｏ ｅ： ｇ】 ｓ ｓ ｖ ａ ｅ ｏ ｍ ｌ ａ ｃ ｉ ｂｄ ｖｙ ｆ ｓ ｎ ［ ］ ｒ Ａｈ ｝ ｎｉ ｅｌｒ ｒ ｆ ａｇｎ ｙ ｎ ｏ ｙ ａ ｔ ｅ ｕｉ ｓ Ｊ ． ｉｌ ｅ ｔ ｌ ｋ ｉ ｙ ｉ ｌ ｎ ｃｉ ｆ ｏ
c反应蛋白的测量方法

c反应蛋白的测量方法

c反应蛋白的测量方法
C-反应蛋白是一种在炎症或组织损伤时产生的蛋白质，它是一
种非特异性的炎症标志物。

测量C-反应蛋白的方法有几种，包括以
下几种常见的方法：
1. 免疫比浊法，这是一种常用的测量C-反应蛋白浓度的方法。

它利用抗C-反应蛋白抗体与样本中的C-反应蛋白结合形成免疫复合物，然后通过测量复合物的光学密度来确定C-反应蛋白的浓度。

2. 免疫荧光法，这种方法利用荧光标记的抗体与C-反应蛋白
结合，然后通过测量荧光强度来确定C-反应蛋白的浓度。

这种方法
通常具有较高的灵敏度和特异性。

3. 酶联免疫吸附法（ELISA），ELISA方法也常用于测量C-反
应蛋白。

它利用酶标记的抗体与C-反应蛋白结合，然后通过酶的底
物来测定C-反应蛋白的浓度。

4. 高灵敏C-反应蛋白（hs-CRP）测定法，这是一种用于测量
C-反应蛋白浓度的高灵敏度方法，通常用于评估心血管疾病风险。

它可以检测到较低浓度的C-反应蛋白，对于一般C-反应蛋白浓度较
低的情况有更好的检测效果。

除了上述方法外，还有一些其他的方法用于测量C-反应蛋白，例如免疫电泳法、免疫扩散法等。

这些方法在实验室和临床诊断中都有广泛的应用，可以帮助医生评估炎症和感染的程度，指导治疗方案的制定。

在选择测量方法时，需要考虑到其灵敏度、特异性、操作简便性以及实验室设备和技术的可用性等因素。

C反应蛋白酶联免疫分析和化学发光免疫分析的建立及其初步应用

C反应蛋白酶联免疫分析和化学发光免疫分析的建立及其初步应用

C反应蛋白酶联免疫分析和化学发光免疫分析的建立及其初步应用薛辉;颜光涛;张凯;林季;王录焕;郝秀华;张晓娟;王晓辉【期刊名称】《标记免疫分析与临床》【年(卷),期】2004(011)003【摘要】采用高纯度的C反应蛋白(CRP)免疫兔,获取高效价的CRP抗体.提取抗血清中IgG,包被酶标板.用生物素标记CRP抗原,辣根过氧化物酶标记亲和素,建立CRP的ELISA和化学发光免疫分析法(CLIA).用ELISA测定正常人80名,心梗患者43例和重症监护室(ICU)病人39例的血清CRP水平,发现心梗患者(27.21±38.67μg/mL)明显高于正常人(0.57±2.99μg/mL)(P《0.05);ICU病人(117.48±97.05μg/mL)明显高于正常人及心梗患者(P《0.001和P《0.01).用CLIA 检测正常人68名,结果为0.77±3.29μg/mL.随机收集病人血清样品73份,分别用免疫比浊法、ELISA和CLIA检测,经统计三种方法高度相关.结果提示:ELISA和CLIA是一种简便、灵敏和特异的CRP测定方法,可用于人血清中CRP的测定.【总页数】4页(P154-157)【作者】薛辉;颜光涛;张凯;林季;王录焕;郝秀华;张晓娟;王晓辉【作者单位】解放军总医院基础所生化室,北京,100853;解放军总医院基础所生化室,北京,100853;解放军总医院基础所生化室,北京,100853;解放军总医院基础所生化室,北京,100853;解放军总医院基础所生化室,北京,100853;解放军总医院基础所生化室,北京,100853;解放军总医院基础所生化室,北京,100853;解放军总医院基础所生化室,北京,100853【正文语种】中文【中图分类】R446【相关文献】1.呕吐毒素化学发光酶联免疫分析方法的建立及应用 [J], 陈永忠;何磊良;王纳纳;吴拥军;屈凌波2.IgG4酶联免疫分析的建立及初步应用 [J], 张凯;颜光涛;郝秀华;薛辉;王录焕;林季3.IgG3酶联免疫分析方法的建立及初步应用研究 [J], 张凯;颜光涛;林季;郝秀华;薛辉;王录焕4.层粘连蛋白酶联免疫分析方法的建立及初步应用 [J], 陈铁河;柴明胜;彭武林;朱伟5.CMLC夹心酶联免疫分析的建立及初步应用 [J], 褚丽萍;刘鉴峰;王彦;张春明因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。