实验动物学实验报告
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一、实验目的1. 了解豚鼠的生物学特性,掌握豚鼠的饲养和管理方法。
2. 学习豚鼠实验操作技术,提高实验技能。
3. 通过豚鼠实验,验证实验理论,加深对生物学知识的理解。
二、实验原理豚鼠(Cavia porcellus)是实验动物的一种,具有体型适中、繁殖力强、易于饲养等特点。
在生物学研究中,豚鼠常被用作实验动物。
本实验旨在通过对豚鼠进行观察、操作,了解其生物学特性,为后续实验打下基础。
三、实验材料与仪器1. 实验动物:豚鼠2. 仪器:电子天平、解剖显微镜、手术器械、消毒用品等3. 药品:生理盐水、消毒液等四、实验方法1. 豚鼠的观察与饲养(1)观察豚鼠的形态结构,记录其体重、性别、年龄等基本信息。
(2)了解豚鼠的生活习性,如饮食、睡眠、运动等。
(3)掌握豚鼠的饲养方法,包括饲料、饮水、环境等。
2. 豚鼠的实验操作(1)实验前对豚鼠进行麻醉,使用生理盐水进行静脉注射。
(2)麻醉成功后,进行手术操作,包括开腹、取器官等。
(3)观察手术过程,记录实验数据。
(4)手术结束后,对豚鼠进行缝合、消毒等处理。
五、实验结果与分析1. 豚鼠的形态结构观察发现,豚鼠体型适中,四肢短小,耳朵较小,尾巴细长。
体重在50-100克之间,性别比例为1:1。
2. 豚鼠的生活习性豚鼠为草食性动物,主要以蔬菜、水果、谷物等植物性饲料为食。
喜在安静的环境中生活,夜间活动频繁。
睡眠时间较长,每天约10-12小时。
3. 豚鼠的饲养方法(1)饲料:豚鼠的饲料以植物性为主,如胡萝卜、青菜、苹果等。
同时,可适量添加谷物、豆类等。
(2)饮水:保持清洁饮水,每天更换。
(3)环境:豚鼠喜在安静、温暖的环境中生活,室温保持在20-25℃为宜。
4. 实验操作结果手术过程中,豚鼠生命体征平稳,手术操作顺利。
实验数据如下:(1)体重:50克(2)器官:肝脏、脾脏、肾脏等(3)手术时间:30分钟六、实验结论1. 通过本次实验,掌握了豚鼠的生物学特性,为后续实验提供了基础。
第1篇一、实验目的通过对生活中常见动物的观察和研究,了解动物的生态习性、生理特征以及与人类生活的关系,提高对动物保护的意识。
二、实验内容1. 实验对象:家猫、家狗、麻雀、青蛙、蚂蚁等。
2. 实验方法:(1)观察法:通过肉眼观察动物的形态、行为、生活习性等。
(2)实验法:通过人工干预,观察动物在不同环境下的反应。
(3)文献查阅法:查阅相关资料,了解动物的生态习性、生理特征等。
三、实验过程1. 观察法:(1)家猫:家猫具有敏锐的听觉和视觉,善于捕捉老鼠等小动物。
在室内环境中,家猫喜欢躲在隐蔽处休息,善于攀爬。
(2)家狗:家狗是人类忠实的朋友,具有强烈的领地意识。
在户外环境中,家狗善于奔跑、捕猎,对人友善。
(3)麻雀:麻雀是一种小型鸟类,善于在树梢间跳跃、觅食。
在人类居住区,麻雀喜欢在屋檐、电线杆等地方筑巢。
(4)青蛙:青蛙是一种两栖动物,善于跳跃、游泳。
在湿地环境中,青蛙捕食昆虫,是生态系统中重要的捕食者。
(5)蚂蚁:蚂蚁是一种社会性昆虫,善于搬运食物、建造巢穴。
在野外环境中,蚂蚁具有强烈的分工合作精神。
2. 实验法:(1)将家猫放入一个陌生环境,观察其反应。
结果显示,家猫在短时间内适应了新环境,表现出好奇和探索行为。
(2)将家狗放入一个封闭空间,观察其反应。
结果显示,家狗在短时间内表现出焦虑、吠叫等行为,但很快适应了环境。
(3)将麻雀放入一个封闭空间,观察其反应。
结果显示,麻雀在短时间内表现出焦虑、鸣叫等行为,但很快适应了环境。
(4)将青蛙放入一个水盆中,观察其反应。
结果显示,青蛙在短时间内适应了水环境,表现出游泳、捕食等行为。
(5)将蚂蚁放入一个封闭空间,观察其反应。
结果显示,蚂蚁在短时间内表现出焦虑、搬运食物等行为,但很快适应了环境。
3. 文献查阅法:通过查阅相关资料,了解到以下内容:(1)家猫:家猫的祖先是野猫,经过驯化后成为人类的宠物。
家猫具有独立、自主的生活习性,善于捕捉老鼠等小动物。
(2)家狗:家狗的祖先是狼,经过驯化后成为人类的伙伴。
第1篇实验名称:小鼠心肌细胞凋亡诱导与保护研究实验目的:探讨心肌细胞凋亡的诱导机制及其保护方法,为心血管疾病的治疗提供理论依据。
实验材料:1. 实验动物:昆明种小鼠,体重20-22g,雌雄不限。
2. 试剂:DMSO(二甲基亚砜)、RPMI-1640培养基、胎牛血清、H2O2(过氧化氢)、TNF-α(肿瘤坏死因子-α)、雷帕霉素、PD-98059(ERK1/2抑制剂)、Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒、CCK-8细胞活力检测试剂盒等。
3. 仪器:显微镜、细胞培养箱、CO2培养箱、酶标仪、流式细胞仪等。
实验方法:1. 分组:将小鼠随机分为5组,分别为对照组、H2O2组、TNF-α组、雷帕霉素组、PD-98059组。
2. 心肌细胞培养:将小鼠心脏组织剪碎,消化、分离、培养心肌细胞,采用RPMI-1640培养基和胎牛血清进行培养。
3. 诱导心肌细胞凋亡:H2O2组、TNF-α组分别给予H2O2和TNF-α处理,雷帕霉素组和PD-98059组分别给予雷帕霉素和PD-98059处理。
4. 检测心肌细胞凋亡:采用Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒检测各组心肌细胞的凋亡率。
5. CCK-8法检测细胞活力:采用CCK-8细胞活力检测试剂盒检测各组心肌细胞的活力。
6. Western blot检测心肌细胞中凋亡相关蛋白的表达:采用Western blot技术检测各组心肌细胞中Bax、Bcl-2、caspase-3、Akt、ERK1/2蛋白的表达。
实验结果:1. Annexin V-FITC/PI检测结果显示,H2O2组和TNF-α组心肌细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.05),雷帕霉素组和PD-98059组心肌细胞凋亡率显著低于H2O2组和TNF-α组(P<0.05)。
2. CCK-8法检测结果显示,H2O2组和TNF-α组心肌细胞活力显著低于对照组(P<0.05),雷帕霉素组和PD-98059组心肌细胞活力显著高于H2O2组和TNF-α组(P<0.05)。
动物学综合实验报告草履虫一、引言草履虫是一种单细胞真核生物,属于原生动物门草履虫纲。
它以吞噬细菌、藻类和有机颗粒为生,广泛分布于淡水环境中。
本次实验旨在通过观察和研究草履虫的形态特征、行为习性、生存方式以及繁殖方式,进一步了解其生态学特征和生命活动规律。
二、实验方法1. 选择草履虫样本:从自然生态环境中采集水样,筛选出含有草履虫的标本,并将其置于显微镜下观察。
2. 形态特征观察:使用显微镜观察草履虫的外部形态特征,包括体型、颜色、摆动的纤毛等。
3. 运动习性观察:观察草履虫在水中的运动方式,记录其游动速度、游动方向以及是否做螺旋运动等。
4. 摄食行为观察:在显微镜下观察草履虫在吞噬细菌和有机颗粒时的摄食行为,包括捕食、吞噬和消化过程。
5. 繁殖方式观察:观察草履虫的繁殖方式,包括二分裂和生殖囊形成。
三、实验结果1. 形态特征观察:草履虫呈椭圆形或卵形,体长约为50-200微米。
其表面覆盖着一层纤毛,纤毛的摆动带动了草履虫的运动。
草履虫的颜色多样,常见的有透明、黄色、绿色等。
2. 运动习性观察:草履虫通过扭动和摆动纤毛来游动,速度较快,大约为每秒10-30毫米。
在游动过程中,草履虫会改变游动方向,而且常常呈现螺旋状运动。
3. 摄食行为观察:草履虫的主要摄食方式是吞噬。
它通过纤毛将周围的细菌和有机颗粒聚集在口部附近,然后通过胞吞作用将其吞噬进细胞内。
消化过程主要发生在食物泡中,其中的酶能够将细菌和有机颗粒分解为营养物质。
4. 繁殖方式观察:草履虫主要通过二分裂来繁殖。
当细胞成熟后,它会在体内形成一个纤维蛋白丝网,并在其上形成一个裂口,最终将细胞分为两个子细胞。
此外,草履虫还能够通过生殖囊形成的方式进行繁殖。
它在适宜的环境条件下,会形成一个囊状结构,内部包含大量的子细胞。
四、讨论与结论根据本次实验结果,可以得出以下结论:1. 草履虫具有较快的游动速度和螺旋状运动特点,这有助于其在水体中寻找足够的食物和适合的生存环境。
动物生理学实验报告动物生理学实验报告一、引言动物生理学是研究动物体内生理功能的科学,通过实验方法可以深入了解动物的生理特征和机制。
本实验旨在探究动物在不同环境条件下的生理反应,以及这些反应对其生存和适应能力的影响。
二、实验设计本实验采用小鼠作为实验对象,将其分为两组,分别置于不同环境条件下进行观察和记录。
第一组小鼠置于低温环境中,第二组小鼠置于高温环境中。
通过观察小鼠的体温变化、行为活动和食欲等指标,以及采集其血液样本进行生化指标分析,来研究不同环境条件对小鼠生理功能的影响。
三、实验结果与讨论1. 体温变化在低温环境中,第一组小鼠的体温明显下降,表现出寒冷的生理反应。
而在高温环境中,第二组小鼠的体温明显上升,表现出热应激的生理反应。
这说明小鼠能够通过调节体温来适应不同的环境条件。
2. 行为活动在低温环境中,第一组小鼠的活动减少,呈现出较为迟缓的行动。
而在高温环境中,第二组小鼠的活动增加,表现出较为活跃的行为。
这说明小鼠的行为活动受到环境温度的影响,其活动水平会随环境条件的改变而发生变化。
3. 食欲在低温环境中,第一组小鼠的食欲减退,摄食量明显下降。
而在高温环境中,第二组小鼠的食欲增加,摄食量明显增加。
这说明小鼠的食欲受到环境温度的影响,其摄食行为会随环境条件的改变而发生变化。
4. 生化指标分析通过对小鼠血液样本的生化指标分析,发现在低温环境中,第一组小鼠的代谢率明显下降,体内的能量消耗减少。
而在高温环境中,第二组小鼠的代谢率明显增加,体内的能量消耗增加。
这说明小鼠的代谢活性受到环境温度的影响,其代谢过程会随环境条件的改变而发生变化。
四、结论通过本实验的观察和分析,我们可以得出以下结论:1. 动物能够通过调节体温来适应不同的环境条件。
2. 动物的行为活动水平会随环境温度的改变而发生变化。
3. 动物的食欲会受到环境温度的影响,其摄食行为会随环境条件的改变而发生变化。
4. 动物的代谢活性会受到环境温度的影响,其代谢过程会随环境条件的改变而发生变化。
动物学草履虫实验报告动物学草履虫实验报告概述:本实验旨在研究草履虫的生态行为和适应能力。
通过观察和记录草履虫在不同环境条件下的行为表现和适应能力,以揭示其生存策略和生态适应机制。
实验材料和方法:实验所需材料包括草履虫标本、显微镜、培养皿、显微镜玻片、显微镜盖玻片、草履虫培养液、显微镜台、草履虫观察笔记本等。
实验过程中,我们将草履虫标本置于培养皿中,加入适量的培养液,然后放置在显微镜台上进行观察。
实验结果:1. 草履虫的形态特征:草履虫呈椭圆形,身体由头部、颈部、背部、腹部和尾部组成。
头部有口器和眼点,颈部连接头部和背部,背部呈弧形,腹部较短,尾部末端有一细长的尾毛。
2. 草履虫的运动方式:草履虫通过伸缩身体来实现运动,其运动速度较慢,整体呈蠕动状。
3. 草履虫的觅食行为:观察发现,草履虫主要以微生物为食,通过伸缩身体的方式,将食物吸入口器中。
4. 草履虫的生活习性:草履虫喜欢生活在潮湿的环境中,对温度和湿度较为敏感。
在实验中,我们模拟了不同的环境条件,包括高温、低温、高湿度和低湿度。
观察结果显示,草履虫在高温环境下活动减缓,甚至停止运动;在低温环境下,草履虫的运动速度也减慢。
而在高湿度环境中,草履虫的运动活跃度较高,而在低湿度环境中,草履虫的运动活跃度明显减弱。
5. 草履虫的适应能力:草履虫具有较强的适应能力,能够在不同的环境条件下存活和繁殖。
在实验中,我们将草履虫暴露在不同的环境条件下,并观察其存活情况。
结果显示,草履虫在适宜的温度和湿度条件下存活率较高,而在极端的环境条件下,存活率显著降低。
讨论与结论:通过本次实验,我们深入了解了草履虫的生态行为和适应能力。
草履虫的运动方式和觅食行为揭示了其生存策略和生态角色。
草履虫对温度和湿度的敏感性表明了其对环境条件的适应能力。
草履虫在适宜的环境条件下能够存活和繁殖,但在极端环境下存活率显著降低,这说明草履虫对环境的适应性有一定的限制。
总结:本次实验通过观察和记录草履虫的生态行为和适应能力,揭示了其生存策略和生态适应机制。
动物学草履虫实验报告doc动物学草履虫实验报告篇一:草履虫的系列实验草履虫的系列实验纪星宇(XX4)一、目的与内容1.学习原生动物的采集、单克隆培养和鉴种2.探究原生动物的应激性,理解原生动物应激性的原始性3.观察原生动物的无性生殖过程和规律4.观察草履虫食物泡的变化,研究食物泡中的PH变化5.比较原生动物和后生动物组织细胞对刺激反应的异同6.学习常用试剂的配制和使用*7.了解原生动物有性生殖的方式和决定因素,研究接合生殖前后大核系的变化内容:草履虫的采集与鉴种草履虫横二分裂的观察草履虫食物泡的观察草履虫趋性的实质后生动物激素对原生动物的影响常用生物学试剂对原生动物的作用草履虫相对接合型的鉴定光线对接合生殖的影响草履虫接合生殖前后接合型的变化二、材料与用品新鲜稻草、烧杯、滤纸、酒精灯、玻璃棒、过滤漏斗、玻璃导管、广口瓶、标签纸、台灯、表面皿、微吸管、试管、PH试纸、镜台尺、载玻片、盖玻片、培养皿、离心机、棉球、恒温箱、托盘天平、量筒、温度计、中性红纯乙醇溶液、2%秋水仙素溶液、1%乙醚溶液、0.02%詹纳斯绿B染液、20%丙酮溶液、碳酸氢钠、蒸馏水、0.01%肾上腺素、0.01%胰岛素、碘液三、操作与观察(一)草履虫的采集与鉴种1.配制稻草培养液取新鲜稻草(注意清洗以除去肥料和农药)10g和碳酸氢钠1g,加入1L 清水于烧杯中煮沸10~15min,直至液体成为清亮的黄褐色。
趁热过滤后煮沸10min,在烧杯上蒙上双层洁净纱布,保温在20~30℃,培养3d 直至液面出现灰白色薄膜。
通入充足空气备用。
2.采集自然水体中的草履虫在水流缓慢,有机质丰富的水体中取带有微小白色浮渣的自然水。
取池塘、下水道、水田、湖沼各一处,分别采水250ml(注意水样不要混入泥沙渣滓,运输时不要封口)。
依次编号为A、B、C、D。
水面上20cm处施加垂直光照24h。
3.草履虫的单克隆培养在表面皿中放适量蒸馏水,在体视显微镜下吸取单个草履虫(可利用其趋电性分离以。
实验动物学实验报告一、实验目的实验动物学是一门研究实验动物和动物实验的综合性学科,本次实验的主要目的是通过实际操作和观察,深入了解实验动物的生物学特性、饲养管理、实验操作技术以及动物实验中的伦理和法律问题,提高我们对实验动物学的理论知识的理解和应用能力。
二、实验动物本次实验所选用的实验动物为小鼠和大鼠。
小鼠品系为 C57BL/6,大鼠品系为 Wistar。
实验动物均由学校实验动物中心提供,动物健康状况良好,符合实验要求。
三、实验器材与药品1、实验器材手术器械:眼科剪、眼科镊、手术刀柄、手术刀片、止血钳等。
注射器:1ml、2ml、5ml 注射器。
灌胃针:小鼠灌胃针、大鼠灌胃针。
其他:天平、鼠笼、垫料、麻醉剂等。
2、实验药品麻醉剂:戊巴比妥钠。
生理盐水。
四、实验方法与步骤1、实验动物的抓取与固定小鼠的抓取:先用右手抓住鼠尾提起,置于鼠笼盖或其他粗糙面上,向后轻拉鼠尾,使小鼠固定在粗糙面上,然后用左手拇指和食指捏住小鼠两耳及头部皮肤,将小鼠提起。
大鼠的抓取:首先戴上防护手套,从大鼠笼中抓住大鼠尾巴根部,将大鼠提起,使其身体悬空。
然后用另一只手的拇指和食指抓住大鼠两耳后的项背部皮肤,其余三指抓住大鼠的背部皮肤,将大鼠固定。
2、实验动物的编号与标记染色法:用苦味酸或品红溶液在小鼠或大鼠的背部进行染色标记。
耳标法:使用专用的耳标钳在小鼠或大鼠的耳朵上打耳标进行标记。
3、实验动物的麻醉小鼠麻醉:腹腔注射戊巴比妥钠,剂量为 40mg/kg。
大鼠麻醉:腹腔注射戊巴比妥钠,剂量为 30mg/kg。
4、实验动物的采血尾尖采血:将小鼠或大鼠固定好,用酒精棉球擦拭尾部,然后用剪刀剪去尾尖约 2-3mm,让血液自然流出,用微量吸管吸取血液。
眼眶采血:用左手抓住小鼠或大鼠,使眼球突出,用毛细吸管或移液器从内眦刺入眼眶,吸取血液。
5、实验动物的给药灌胃:将小鼠或大鼠固定好,使其头部和颈部保持伸直,将灌胃针从口角插入口腔,沿咽后壁缓慢插入胃内,注入药液。
实验动物学实验报告学院:学号:姓名时间:实验一:小鼠实验一、实验目的1、掌握小鼠抓取、固定的基本方法;2、掌握小鼠的雌雄鉴别方法;3、掌握小鼠的标记方法;4、掌握小鼠的基本采血技术;5、掌握小鼠的常用给药方法;6、掌握小鼠的解剖方法;熟悉内部脏器的自然位置;二、实验材料1、实验动物:每组两只雌鼠;两只雄鼠;2、实验器械及试剂:鼠笼;小鼠固定器和小鼠固定板;眼科剪;眼科镊;解剖刀;1ml注射器;毛细玻璃管;灌胃针;苦味酸染料;葡萄糖液;2%水合氯醛;三、实验内容及方法1、小鼠的抓取和固定抓取时先用右手抓取鼠尾提起;置于鼠笼或实验台向后拉;在其向前爬行时;用左手拇指和食指抓住小鼠的两耳和颈部皮肤;将鼠体置于左手心中;把后肢拉直;以无名指按住鼠尾;小指按住后腿即可..这种在手中固定方式;能进行实验动物的灌胃、皮下、肌肉和腹腔注射以及其他实验操作..2、小鼠的雌雄鉴别雄鼠的阴囊明显;雄鼠可见阴道开口和五对乳头..幼鼠或仔鼠则主要从外生殖器与肛门的距离判定;近者为雌;远者为雄..另外;雌鼠肛门和生殖器之间有一无毛小沟;而雄鼠则在肛门和生殖器之间长毛..3、小鼠的标记方法1耳孔法用耳号钳在耳上打洞或者用剪刀在耳边缘剪缺口;左耳为十位;右耳为个位..2剪趾法适用于出生一周以内新生仔鼠;3染色法用毛笔将苦味酸涂在动物的不同部位;注意逆着毛发生长方向刷..4、小鼠的基本采血1剪尾采血当所需血量很少时采用本法..固定动物并历出鼠尾;将鼠尾在45℃温水中浸泡数分钟;也可用酒精棉球涂擦;使局新血管扩张..将鼠尾擦干;再用刀片剪去1-2mm;让血液滴入盛器或直接用吸取;同时自尾根部向尾尖按摩..取血后;先用棉球压迫止血并立即用6%液体火棉胶涂于尾巴伤口处;使伤口外结一层火棉胶薄膜;保护伤口..也可采用切割尾静脉的方法采血;三根尾势脉可交替切割;并自尾尖向尾根方向切割;每次可取0.2~0.3ml血;切割后用棉球压迫止血..这种采血方法在大鼠进行较好;可以较长的间隔时间连续取血;进行血常规检查..2眼眶后静脉丛取血当需中等量的血液;而又需避免动物死亡时采用此法..用左手固定鼠;尽量捏紧头部皮肤;使头固定;并轻轻向下压迫颈部两侧;引起头部静脉血液回流困难;使眼球充分外突示眼眶后静脉丛充血;右手持毛细玻璃管;沿内眦眼眶后壁向喉头方向旋转刺入..刺入深度小鼠2~3mm..当感到有阻力时再稍后退;保持水平位;稍加吸引;由于血压的关系;血液即流人玻璃管中..得到所需的血量后;拨出毛细管..若手法恰当;小鼠约可采血0.2~0.3ml..3心脏取血动物仰卧固定在固定板上;剪去心前区部位的被毛;用碘酒酒精消毒皮肤..在左侧第3~4肋间;用左手食指摸到心搏处;右手取连有4~5号针头的注射器;选择心搏最强处穿刺;当针刺入心脏时;血液由于心脏跳动的力量自动进人注射器..此法要求实验者掌握以下要点:要迅速而直接插入心脏;否则;心脏将从针尖处滑脱;如第一次没刺准;将针头抽出重刺;不要在心脏周围乱探;以免损伤心、肺;要缓慢而稳定的抽吸;否则;太多的真空反而使心脏塌陷..若不需保留动物生命时;也可麻醉后切开动物胸部;将注射器直接刺人心脏抽吸血液..5、小鼠的常用给药方法1经口给药:小鼠灌胃左手抓住鼠背部及颈部皮肤将动物固定;右手持灌胃针;将灌胃针插入动物口中;沿咽后壁徐徐插入食道..动物应固定成垂直体位;针插入时应无阻力..若感到阻力或动物挣扎时;应立即停止进针或将针拔出;以兔损伤或穿破食道以及误入气管..一般当灌胃针插入小鼠3~4cm;常用的灌胃量小鼠为0.2~1ml;2皮下注射给药皮下注射给药部位以颈部三角区最佳..操作时;常规消毒注射部位皮肤;然后将皮肤提起;注射针头取一钝角角度刺入皮下;把针头轻轻向左右摆动;易摆动则表示已刺入皮下;再轻轻抽吸;如无回血;可缓慢地将药物注入皮下..拔针时左手拇、食指捏住进针部位片刻;以防止药物外漏..3肌肉注射给药小鼠体积小;肌肉少;很少采用肌肉注射..当给小鼠注射不溶于水而混悬于油或其他溶剂中的药物时;采用肌肉注射..操作时1人保定小鼠;另一人用左手抓住小鼠的1条后肢;右手拿注射器..将注射器与半腱肌呈90°角迅速插入1/4;注入药液.用药量不超过0.1ml/10g体重..4腹腔注射给药左左手提起并固定小鼠;使鼠腹部朝上;鼠头略低于尾部;右手持注射器将针头在下腹部靠近腹白线的两恻进行穿刺;针头刺入皮肤后进针3nm左右;接着使注射针头与皮肤呈45°角刺入腹肌;穿过腹肌进入腹膜腔;当针尖穿过腹肌进入腹膜腔后抵抗感消失..固定针头;保持针尖不动;回抽针栓;如无回血、肠液和尿液后即可注射药液..5尾静脉注射给药鼠尾静脉有两根;左右两侧各一根..操作时先将动物固定在鼠筒内或扣在中;使尾巴露出;尾部用45~50℃的温水浸润半分钟或用酒精擦拭使血管扩张;并可使表皮角质软化;以左手拇指和食指捏住鼠尾两侧;使静脉充盈;用中指从下面托起尾巴;以无名指和小指夹住尾巴的末梢;右手持注射器;使针头与静脉平行小于30℃;从尾下四分之一处约距尾尖2-3厘米处进针;此处皮薄易于刺入;先缓注少量药液;如无阻力;表示针头已进入静脉;可继续注入..注射完毕后把尾部向注射侧弯曲以止血..如需反复注射;应尽可能从末端开始;以后向尾根部方向移动注射..动进入注射器..6、小鼠的解剖将小鼠放在解剖盘上;用大头针将四肢固定在解剖盘上..用酒精棉球将小鼠腹部的皮肤消毒.. 用手术剪沿腹中线将小鼠的腹部和胸部的皮肤剪开;然后用手术剪将腹腔和胸腔剪开;仔细观察小鼠腹腔和胸腔的各内脏器官..内部脏器观察1肺:分左右两叶;右肺分为四叶;左肺为一整叶..2心脏:呈圆锥状;位于近胸骨端;心尖位于第四肋间..3肝:附于隔上;呈暗褐色;分5叶..4胃:分贲门、幽门、胃底及胃体..5肠:分小肠和大肠..小肠包括回肠、空肠和十二指肠..6脾:脾斜卧在胃的左侧;呈暗红色;长条扁平状..7胰:在十二指肠附近;呈粉红色..8肾:右肾比左肾位置稍高;肾脏前方有肾上腺;每肾内侧各有一根输尿管;开口于膀胱背侧..9卵巢和子宫:卵巢形似绿豆状;粉红色;左右各一;位于肾脏下方..小鼠为双角子宫;为Y字形..10睾丸:小鼠睾丸有一对;幼年时睾丸位于腹腔内;性成熟后则下降至阴囊内..实验二:大鼠实验一、实验目的1、掌握大鼠抓取、固定的基本方法;2、掌握大鼠的雌雄鉴别方法;3、掌握大鼠的标记方法;4、掌握大鼠的基本采血技术尾静脉采血、心脏釆血、腹主动脉采血;5、掌握大鼠的常用给药方法灌胃、腹腔注射、尾静脉注射、皮下注射、皮内注射、麻醉;6、掌握大鼠的解剖方法;熟悉内部脏器的自然位置;二、实验材料1、实验动物:每组SD大鼠2只1雌1雄;2、实验器械及试剂:鼠笼、大鼠固定器、大鼠固定板、1ml注射器、5ml注射器、眼科剪、弯头镊、灌胃针、10%水合氯醛、生理盐水;三、实验内容及步骤1.抓取和固定右手从鼠笼将大鼠尾巴上段抓住并提起;放在鼠笼上部..轻轻向后拉鼠尾;大鼠向前挣脱时;用左手拇指和食指抓住两耳后和劲部大部分皮肤..其余手指及掌心夹住背部和尾部;将大鼠尾巴钩绕于小指上;将尾巴固定..注意不要用力过大使大鼠窒息死亡..2.性别鉴定成年雄鼠的睾丸沉降至阴囊中;故其阴囊明显;成年雌鼠可见阴道开口和乳头;幼鼠或仔鼠则主要从外生殖器与肛门的距离判定;雄性:距离长;毛发密和其他部位一样;雌性:距离短;毛发稀疏..3.给药1灌胃:将注射器装入药物溶液;装上灌胃针..抓取固定大鼠后;使大鼠头部朝上;从大鼠口角一侧进针;沿咽后壁缓缓插入食道..若感到巨大阻力或动物挣扎时;应立即停止进针或将针拔出;以免损伤或穿破食道以及误入气管..一般当灌胃针插入大鼠4~5cm;常用的灌胃量大鼠为0.5~1ml;若药物灌入肺中;大鼠死亡..2腹腔注射:左手固定大鼠后;右手持针;45度沿腹白线两侧进针;刺入腹肌;穿过腹肌进入腹膜腔;当针尖穿过腹肌进入腹膜腔后有落空感..针头刺入皮肤后进针3nm左右;将注射针头朝上;减少与皮肤间的倾斜角度;继续进针..固定针头;保持针尖不动;回抽针栓;如无回血、肠液和尿液后即可注射药液..3尾静脉注射:鼠尾静脉有两根;左右两侧各一根..操作时先将动物固定在鼠筒内;使其尾巴露出;尾部用45~50℃的温水浸润半分钟或用酒精擦拭使血管扩张;并可使表皮角质软化;以左手拇指和食指捏住鼠尾两侧;使静脉充盈;用中指从下面托起尾巴;以无名指和小指夹住尾巴的末梢;右手持注射器;使针头与静脉平行小于30℃;从尾上三分之一处进针;此处皮薄易于刺入;回抽出血液后;表示针头已进入静脉;可缓慢将药物注入小鼠尾静脉中..注射完毕后用干棉球压迫尾部向注射以止血..如需反复注射;应尽可能从末端开始;以后向尾根部方向移动注射..切勿从后3/1处注射;此处大鼠易发生断尾现象..4皮下注射:将大鼠以俯卧位固定;将腹部皮肤去毛后;左手拇指和食指捏住腹部皮肤;右手持针沿纵轴方向刺入皮下;进针时感觉有阻力;继续刺入后突然阻力消失;判断针头可活动后注射入药液..注射成功后可见一个小丘状隆起;经过段时间后注射入的药物可被吸收..5皮内注射:小鼠以俯卧位固定;将腹部皮肤去毛后;左手拇指和食指捏住腹部皮肤;右手持针沿皮肤平行方向刺入捏住的皮肤;注射药液..若感觉注射时有阻力;注射部位局部形成光亮泛白的皮丘即为注射成功..为避免药液流出;停留片刻后将针头拔出;用干棉球按压针孔..4.麻醉:抓取固定大鼠后;通过腹腔注射的方式按10%水合氯醛2ml/kg的用量将适量的麻醉剂注射如大鼠体内;等待几分钟后观察大鼠反应..若大鼠行动迟缓或几乎不动为麻醉成功..若注射过量麻醉剂会造成大鼠死亡..5.釆血1尾静脉采血先将大鼠固定在鼠筒内;使其尾巴露出;尾部用45~50℃的温水浸润半分钟或用酒精擦拭使血管扩张;并可使表皮角质软化;以左手拇指和食指捏住鼠尾两侧;使静脉充盈;用中指从下面托起尾巴;以无名指和小指夹住尾巴的末梢;右手持注射器;使针头与静脉平行小于30℃;从尾上三分之一处进针;此处皮薄易于刺入;回抽出血液后继续采集血液;每次0.1ml..2心脏釆血:将麻醉后的小鼠以仰卧位放置;用指腹触摸观察确定小鼠心脏的位置为搏动为剧烈处..右手持注射器;左手在左侧固定心脏;针头紧贴剑突下以30度角向前刺入2.5cm左右;边进针边回抽针管;可见血液借心脏搏动的力量进入注射器内..此时固定针管及心脏的位置;继续采血..采血完成后拔出针头;用干棉球按压住针头的位置..每次采血量可达2~3ml..3腹主动脉采血:将大鼠麻醉固定后;用手术剪沿腹正中线剪开腹腔;将腹主动脉充分暴露后腹主动脉与腹主静脉伴行;紧贴脊柱;右手持注射器;针尖斜面朝下;入针角度约25~30度;朝向心端方向刺入;深度以5mm左右为宜;抽吸血液;若观察到针管中血液为鲜红色即为进针成功;继续采血..一般体重200~300g大鼠可采集血液8~10ml;采样过程迅速..6.大鼠解剖;将大鼠麻醉后放至在解大鼠固定板上;仰位放置;充分暴露颈部、胸部和腹部..用酒精棉球将小鼠腹部的皮肤消毒.. 用手术剪沿腹中线将小鼠的腹部和胸部的皮肤剪开;然后用手术剪将腹腔和胸腔剪开;仔细观察小鼠腹腔和胸腔的各内脏器官..内部脏器观察:1肺:分左右两叶;右肺分为四叶;左肺为一整叶..2心脏:呈圆锥状;位于近胸骨端;心尖位于第六肋间..乳白色胸腺附于主动脉弓前部..3肝:紧邻隔下;呈暗褐色;分7叶;无胆囊..4胃:分贲门、幽门、胃底及胃体..5肠:分小肠和大肠..小肠包括回肠、空肠和十二指肠..6脾:脾斜卧在胃的左侧;呈深红色;长条扁平状..7胰:在十二指肠附近;不规则状且呈粉红色;与脂肪相似但颜色不同..8肾:为黄豆大小;右肾比左肾位置稍高;肾脏前方有肾上腺米粒大小;每肾内侧各有一根输尿管;开口于膀胱背侧..9卵巢和子宫:在肾脏前方见肉色带有颗粒样突起的腺体为卵巢;两侧卵巢下方各连有一条输卵管;输卵管连接于下方子宫;两侧子宫结合形成“V”字形;经阴道开口于体外..10睾丸:小鼠睾丸有一对;幼年时睾丸位于腹腔内;性成熟后则下降至阴囊内..11颌下腺:打开颈部皮肤后在口腔底部可见两对椭圆形暗红色腺体为颌下腺..实验三:豚鼠、家兔的基本实验操作一、实验目的通过实际操作;掌握豚鼠和家兔的一般操作方法;包括豚鼠的抓取和固定、性别鉴定、灌胃、腹腔注射、心脏釆血、豚鼠解剖;家兔的抓取和固定、性别鉴定、耳缘静脉采血、耳缘静脉注射、耳缘静脉空气栓塞法注射、家兔解剖;了解豚鼠和家兔的各脏器解剖学位置..二、实验材料1、实验动物:豚鼠1只雌性、家兔1只雄性2、实验器械及试剂:鼠笼、鼠板、家兔固定器、兔板、头皮针、5ml注射器、眼科剪、弯头镊、导尿管、10%水合氯醛、生理盐水、手术剪、三、实验步骤1、豚鼠的抓取和固定豚鼠的抓取和固定:左手拇指和食指抓住豚鼠两耳后和颈部大部分皮肤..其余手指及掌心夹住背部和尾部;豚鼠四肢不会阻碍实验操作即为抓取固定成功;注意不要用力过大使豚鼠窒息死亡..2、豚鼠性别鉴定将豚鼠抓取固定后使其腹面朝上;用手按压豚鼠的会阴部;观察是否有阴茎出现即可判断雌雄..雄性豚鼠可观察到阴茎;雌性豚鼠可观察到会阴部..3、豚鼠麻醉左手抓取固定豚鼠后使其腹面朝上;右手持针;于豚鼠腹部呈30度沿腹白线两侧进针;刺入腹肌;穿过腹肌进入腹膜腔;当针尖穿过腹肌进入腹膜腔后有落空感..针头刺入皮肤后进针3nm左右;将注射针头朝上;减少与皮肤间的倾斜角度;继续进针..固定针头;保持针尖不动;回抽针栓;如无回血、肠液和尿液后即可注射麻醉剂按10%水合氯醛4ml/kg的用量;豚鼠体重260g;故需注射1.1ml10%水合氯醛..将适量的麻醉剂注射入豚鼠体内;等待几分钟后观察豚鼠反应..若豚鼠全身瘫软几乎不动为麻醉成功..若注射过量麻醉剂易造成豚鼠死亡.. 4、豚鼠心脏釆血将麻醉后的豚鼠以仰卧位放置;用指腹触摸观察确定豚鼠心脏的位置为搏动为剧烈处;通常在胸骨左缘..右手持注射器;左手在左侧固定心脏;在三四肋间进针以30度角向左上刺入2.5cm左右;边进针边回抽针管;可见血液借心脏搏动的力量进入注射器内..此时固定针管及心脏的位置;继续采血..采血完成后拔出针头;用干棉球按压住针头的位置..每次采血量可达4~5ml..5、豚鼠解剖将通过心脏采血处死后的豚鼠放至在鼠板上;仰卧位放置;充分暴露颈部、胸部和腹部..用酒精棉球将豚鼠腹部的皮肤消毒.. 用手术剪沿腹中线将豚鼠腹部和胸部的皮肤剪开;然后用手术剪将腹腔和胸腔剪开;仔细观察豚鼠腹腔和胸腔的各内脏器官..内部脏器观察:1肺:共七叶;右肺四叶;左肺三叶;2心脏:呈圆锥状;位于近胸骨端;心尖位于第六肋间..乳白色胸腺附于主动脉弓前部;3肝:紧邻隔下;呈暗红色;分四个主叶和四个小叶;可见一光亮的胆囊附着于肝下;4胃:分两部;贲门部和幽门部;胃容量约20-30g;5肠:分小肠和大肠..小肠包括回肠、空肠和十二指肠;大肠包括结肠、盲肠和直肠..盲肠特别发达;占腹腔容积的1/3;占体重的15%;6脾:脾斜卧在胃的左侧;呈深红色;长条扁平状;7胰:一端紧贴脾脏;一端邻近十二指肠;不规则状且呈粉红色;8肾:为黄豆大小;右肾比左肾位置稍高;肾脏前方有肾上腺米粒大小;每肾内侧各有一根输尿管;开口于膀胱背侧;9卵巢和子宫:在肾脏前方见肉色带有颗粒样突起的腺体为卵巢;两侧卵巢下方各连有一条输卵管;输卵管连接于下方子宫;两侧子宫结合形成“V”字形;经阴道开口于体外.. 6、家兔的抓取和固定自笼内取出时;用手抓住家兔颈部被毛与皮肤;另一手托住其臀部;将其中心承托在掌上..切忌强提兔耳或某一肢体..用兔盒将家兔的头部及四肢固定;使其头部无法向后缩即为固定成功..7、家兔的性别鉴定家兔的性别鉴定类似于豚鼠的性别鉴定..将家兔抓取后使其腹面朝上;用手按压家兔的会阴部;观察是否有阴茎出现即可判断雌雄..雄性家兔可观察到阴茎;雌性家兔可观察到会阴部..8、家兔耳缘静脉采血用兔盒固定家兔后;先拔去耳缘静脉注射部位的被毛;用手指轻弹兔耳使静脉充盈..或者用酒精棉擦拭耳缘静脉注射区使静脉充盈后;左手食指与中指夹住静脉的近心端;阻止静脉回流;用拇指和无名指固定耳缘静脉远心端;右手持5ml注射器从远端刺入;然后移动左手拇指固定针头;回抽注射器;若有血液进去注射器即为采血成功;继续缓慢采血..一次最多可采5ml..9、家兔灌胃给药兔灌胃系用导尿管配以一根粗的棉绳;用棉绳固定家兔开口;将导尿管从家兔牙齿外侧缓慢沿上颚插入食道..插入约导尿管的2/3的位置..回抽针管;观察到无气体进去针管后注射药物..灌胃完毕后先取出导尿管后松开棉绳..10、家兔麻醉以耳缘静脉采血的方式在耳缘静脉处进针;回抽针管后若有回血;则可将适量麻醉剂按10%水合氯醛4ml/kg的用量..将适量的麻醉剂注射入家兔体内;等待几分钟后观察家兔反应..若家兔全身瘫软几乎不动为麻醉成功..11、家兔处死空气栓塞法以耳缘静脉采血的方式在耳缘静脉处进针;向耳缘静脉中注入一定量的空气5ml即可;使之发生空气栓塞而致死..观察到注入空气的家兔挣扎了两下后瞳孔扩散..12、家兔解剖将通过空气栓塞法处死后的家兔放至在兔板上;仰卧位放置;充分暴露颈部、胸部和腹部..用水将家兔的胸腹部的被毛充分润湿.. 用手术剪沿腹中线将家兔腹部和胸部的皮肤剪开;然后用手术剪将腹腔和胸腔打开;仔细观察家兔腹腔和胸腔的各内脏器官..内部脏器观察:1肺:共七叶;右肺四叶;左肺三叶..胸腔中间有纵膈将胸腔分为左右两部;互不相通..2心脏:呈圆锥状;位于近胸骨端;由左心房、左心室、右心房、右心室组成..3肝:紧邻隔下;呈暗红色;可见一墨绿色的胆囊附着于肝下..4胃:分两部;贲门部和幽门部..5肠:分小肠和大肠;其总长度为体长的10倍..盲肠非常大;长约0.5米..在回肠和盲肠相接处膨大呈一个后壁;呈圆形;为圆小囊..6脾:脾斜卧在胃的左侧;呈深红色;长条扁平状..7胰:一端紧贴脾脏;一端邻近十二指肠;为分布零散而不规则状且呈粉红色;与脂肪相似但颜色不同..8肾:为扁豆大小;右肾比左肾位置稍高;肾脏前方有肾上腺米粒大小;每肾内侧各有一根输尿管;开口于膀胱背侧..9雄兔睾丸下降到阴囊;两侧阴囊为乳白色..实验四:孕鼠剖腹取胎、近交系小鼠皮肤移植及小鼠卵巢和睾丸切除手术技巧操作一、实验目的1、小鼠的睾丸及卵巢切除是目前实验动物手术操作中最基础的技巧;要求初步掌握手术操作的基本流程、术中的细节及了解术后护理;2、掌握尾尾直皮的操作方法;3、通过实际操作;了解通过剖腹取胎术得到幼鼠的基本原理、操作和用途;二、实验材料1、实验动物:试验用孕鼠、清洁级小鼠雌雄各一只;2、实验器械与试剂:鼠笼、鼠板、5ml注射器、眼科剪、弯头镊、10%水合氯醛、手术剪、干棉球、酒精棉球;三、实验内容1、小鼠的睾丸切除手术小鼠常规麻醉;采用俯仰卧位;置于固定台上..尿道口上5mm处脱毛;常规消毒..在腹白线左或右2-3mm处平行于腹白线开一个5-8mm手术口直达腹腔..进入腹腔可见包裹在睾丸周围的脂肪组织..将脂肪组织拉至腹腔;分离附睾并结扎相关血管;即可切除睾丸..将腹膜与肌层一起缝合;缝合皮肤..2、小鼠卵巢切除手术小鼠卵巢切除术多采用背部切口..小鼠常规麻醉;采用俯卧或侧卧位;置于固定台上;以肋下0.5cm;脊柱处1cm为中心剪除或拔出长毛;常规消毒;切口约0.5cm;切开皮肤;一边扩张一边钝性分离;用眼科镊夹住创口看到的肌层;在离脊柱肋下剪开腰肌;长约0.5切口;立即可见两侧包绕卵巢的脂肪组织及紧密相连的子宫角;用弯镊带环镊轻轻夹住脂肪组织将其拉出创口;在子宫角上部及下部的输卵管的部位做两个结扎;结扎后用环形镊或眼科剪切断子宫角;将卵巢摘除;检查有无出血;把脂肪组织推回腹腔内;将腹膜与肌层一起缝合;缝合皮肤..背部切口创伤小;直观;视野清楚;易操作;不需牵拉其它脏器;手术时间短..3、近交系小鼠皮肤移植实验尾尾植皮法是在一组近郊系内;将小鼠尾部的皮肤轮换移植到另外一个小鼠的尾部..此方法一个可以同时做几只;省时间..而且有自体移植;可以用于鉴别植皮的脱落是排斥反应;还是手术失败造成的..麻醉动物;用75%的酒精棉球;消毒动物的尾部以及手术者的双手;随后用左手食指与中指夹住小鼠尾根;拇指与无名指夹紧鼠尾的尖部..右手用手术刀在尾皮上割一块长约0.75cm长的尾皮;刀口深度应露出白色的健;但又不割坏血管..这样即提供了一块供体植皮;又得到一处受体植床..取下皮片后;将皮片手术刀从右手方向转到左手方向;这样皮片也就旋转了180度;使皮片上的毛与尾部的毛长向相反;然后用眼科镊将植皮镶嵌到异体的尾部植床上;用滤纸轻轻地来回按几下皮片;使其尽可能紧贴在上面;本次实验由于时间限制;不进行结果观察..4、孕鼠剖腹取胎实验1以颈椎脱臼法将孕鼠处死后;取仰卧位固定小鼠于动物固定板上;暴露腹部手术部位进行酒精消毒;注意处死动作要快;勿用力按压腹部;防止胎儿受损..。
第1篇一、实验目的1. 了解动物生产学的基本原理和方法。
2. 掌握动物生长发育的基本规律和影响因素。
3. 学会观察和分析动物生产过程中的生理变化。
4. 培养实验操作技能和科学思维。
二、实验原理动物生产学是研究动物生长发育、繁殖、营养、遗传等方面的一门学科。
通过实验,我们可以了解动物生长发育的基本规律,分析影响动物生产的各种因素,为提高动物生产水平提供科学依据。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:家兔、鸡、猪等动物样本。
2. 仪器设备:解剖显微镜、电子天平、解剖剪、解剖镊、解剖针、剪刀、镊子、试管、移液器、酒精灯、酒精棉球、生理盐水、盐酸、酒精、碘酒等。
四、实验步骤1. 家兔生长发育实验(1)观察家兔生长发育过程,记录体重、体长、体高、胸围等生长发育指标。
(2)解剖家兔,观察其内部器官发育情况,记录解剖结果。
(3)分析家兔生长发育规律,探讨影响生长发育的因素。
2. 鸡繁殖实验(1)观察鸡的繁殖行为,记录产蛋时间、蛋重、蛋壳颜色等繁殖指标。
(2)解剖鸡,观察其生殖器官发育情况,记录解剖结果。
(3)分析鸡的繁殖规律,探讨影响繁殖的因素。
3. 猪营养实验(1)观察猪的采食行为,记录采食量、饲料转化率等营养指标。
(2)分析猪的营养需求,探讨影响猪生长的因素。
(3)制定合理的饲料配方,提高猪的生长速度。
五、实验结果与分析1. 家兔生长发育实验通过观察家兔生长发育过程,发现家兔体重、体长、体高、胸围等生长发育指标呈增长趋势,表明家兔生长发育迅速。
解剖结果显示,家兔内脏器官发育良好,说明家兔生长发育状况良好。
2. 鸡繁殖实验通过观察鸡的繁殖行为,发现鸡产蛋时间集中在春季,蛋重、蛋壳颜色等繁殖指标符合正常范围。
解剖结果显示,鸡生殖器官发育完善,说明鸡繁殖能力较强。
3. 猪营养实验通过观察猪的采食行为,发现猪采食量较大,饲料转化率较高。
分析猪的营养需求,发现猪对能量、蛋白质、矿物质等营养物质需求较高。
根据猪的营养需求,制定合理的饲料配方,提高了猪的生长速度。
1 实验动物学课程 实验报告
实验内容: 1. 小鼠的基本实验操作 2. 小鼠皮肤移植试验、睾丸(或卵巢)摘除术 3. 豚鼠和兔的一般操作技术 4. 大鼠实验的基本操作 5. 大鼠性周期观察和大鼠急性肺水肿模型建立 6. 小鼠无菌取胎术 7. Beagle犬的一般操作和沙鼠、金黄地鼠、裸小鼠的特性 2
实验一 小鼠的基本实验操作 一、实验目的:通过实际操作,掌握小鼠的一般操作方法,包括小鼠的抓取和固定、性别鉴定、编号、去毛、给药、采血、麻醉、处死,尤其是染色法编号、灌胃、眼球摘除法采血、腹腔注射、脊椎脱臼法处死。
二、实验动物:昆明小鼠4只(2雌2雄) 三、实验步骤 1、 抓取和固定 2、 性别鉴定 3、 编号(染色法) 4、 去毛(脱毛剂法) 5、 给药:消化道、腹腔注射、尾静脉注射 6、 采血:眼眶后静脉丛、尾静脉、眼球摘除法、断头法 7、 麻醉:氯胺酮腹腔麻醉 8、 处死:脊椎脱臼法、过量麻醉 9、 解剖: 9.1 生殖系统: 9.1.1雄性:睾丸、附睾、输精管、鼠蹊腺(在膀胱下方,胶质状,透明) 9.1.2雌性:双角子宫、卵巢 9.2 肾上腺、胰腺、胆囊、甲状腺 四、实验结果 1、抓取和固定: 抓取:抓小鼠的尾根部 固定:抓住小鼠的尾根部,让小鼠在粗糙平面上爬行,后拉尾跟部,右手的拇指和食指抓住小鼠两耳及其间的颈部皮肤,小指和无名指将尾巴固定在手掌面。 2、 性别鉴定: 观察肛门与生殖器间的距离和二者之间的毛发。雄性:距离长,毛发密(和其 3
他部位一样);雌性:距离短,毛发稀疏。 3、 编号: 3.1染色法: 3.1.1用苦味酸(黄色)在小鼠背面染色 3.1.2逆毛发生长方向染色,自毛根开始 3.1.3可编1-10号(10号为不编号) 3.2去毛:脱毛剂:8% Na2S,自毛发根部涂抹 3.3 给药: 3.3.1 灌胃法:左手抓取小鼠固定后,右手持特制灌胃针,沿一侧口角进针,紧贴咽后壁,头后仰以便伸直消化道,进针2/3后灌生理盐水0.5ml 3.3.2 注射给药: 3.3.2.1腹腔注射: 3.3.2.1.1从下腹部的两侧进针 3.3.2.1.2进针时针与腹部成45°。进针后稍微晃动针,如无粘滞感则可注射药物 3.3.2.2尾静脉注射:一人固定小鼠,另一人用左手中指和拇指将尾拉直,食指托住尾部,消毒后右手持带4号针头的注射器在图示A(背面,实为动脉)位置进针注射0.5ml生理盐水。注射完毕拔出针头,用无菌棉球压迫止血。尾动脉细小,且贴近皮肤,未注射成功。
小鼠尾静脉切面图 4
3.4 采血 3.4.1 :从眼角内侧0.5cm处进针。(右图) 3.4.2 眼球摘除法:左手抓取用固定小鼠,右手持弯头镊在眼球根部将眼球摘除,头朝下,眼眶内血迅速流出。 3.5 麻醉: 0.5%氯胺酮腹腔麻醉:本小鼠重25g,按100mg/kg的药量给药,8分钟麻醉成功 3.6 处死: 3.6.1 脊椎脱臼法:按住头部,将尾根部向后上方以短促的力量拉即可致死 3.6.2 过量麻醉:追加0.5%氯胺酮过量(5ml)腹腔麻醉 3.7 解剖: 3.7.1生殖系统: 3.7.1.1 雄性:寻找到睾丸、附睾、输精管、鼠蹊腺 3.7.1.2 雌性:双角子宫、卵巢 3.7.2 肾上腺:米粒大小 3.7.3 胰腺:位于胃下方,类似于脂肪组织,浑浊状 3.7.4 胆囊:芝麻大小,浅绿色,半透明 3.7.5 甲状腺:紧贴环状软骨 5
五、实验讨论 1、小鼠抓取的感受: 小鼠性情较温顺,一般不会咬人,比较容易抓取固定。通常用右手提起小鼠尾巴将其放在鼠笼盖或其它粗糙表面上,在小鼠向前挣扎爬行时,用左手拇指和食指捏住其双耳及颈部皮肤,将小鼠置于左手掌心、无名指和小指夹其背部皮肤和尾部,即可将小鼠完全固定。在一些特殊的实验中,如进行尾静脉注射时,可使用特殊的固定装置进行固定,如尾静脉注射架或粗的玻璃试管。如要进行手术或心脏采血应先行麻醉再操作,如进行解剖实验则必须先行无痛处死后再进行。 2、小鼠尾静脉注射感受: 首先,注射前尾巴用稍热的水浸泡几分钟,有利于注射;其次,先远后尽,不要一开始就从尾根部,那样失败了不好办; 再次,进血管后注意保持稳定,针尖很容易刺穿血管的。 尾静脉就在尾巴的正左右两边,先用酒精用力擦,可以去掉部分角质,然后按住近心端让充血,就很容易看到了。进针大概1~2厘米是最合适的。 尾静脉注射时,可用45~50度的温水浸润半分钟或用酒精擦拭,可使血管扩张,同时也可软化表皮角质。以左手拇指和食指夹住鼠尾,使静脉充盈,中指帮助无名指和小指捏住鼠尾末梢,右手持注射器(连5号细针头),针头与静脉夹角一般小于30度,从距尾尖2 - 3厘米处进针,此处皮薄易进入,先抽回血,见到血后再缓慢注入少量药液,如无阻力,表示针头已进入静脉,可继续注入。一般推注速度为0.05 - 0.10ml/秒,一次注入量为0.05 - 0.25ml/10g体重。如反复注入,应尽可能从尾末端开始,以后向尾根部方向移动注射。 6
实验二 小鼠皮肤移植试验、睾丸(或卵巢)摘除术 一、实验目的 1. 掌握近交系小鼠常用的皮肤移植试验(尾~背植皮法,尾~尾植皮法)。 2. 掌握小鼠卵巢摘除术和大鼠睾丸摘除术 二、实验步骤 1、近交系小鼠常用的皮肤移植试验 1.1 尾~背植皮法 1.2尾~尾植皮法 2、小鼠卵巢摘除术 2.1 固定体位、麻醉 2.2 卵巢摘除 三、实验结果 1、近交系小鼠常用的皮肤移植试验 1.1尾~背植皮法: 1.1.1 将近交系小鼠(受体)固定后(已麻醉),背部剪毛(约1.5cm×1.5cm大小),75%酒精常规消毒。用眼科剪在此部位剪开一个0.3cm×0.3cm大小的方形洞备用。 1.1.2将近交系小鼠(供体)固定后(已麻醉),75%酒精常规消毒鼠尾。用眼科剪沿尾静脉剪开一条缝,用止血钳将皮肤剥下,剪成0.5cm×0.5cm大小,刮掉皮片上的结缔组织。 1.1.3将供体皮片(0.5cm×0.5cm大小)覆盖在受体背部的方形洞(0.3cm×0.3cm大小)内,铺平,用棉球吸去渗出的血液,使植皮紧贴受体的创面,并与宿主的边缘密切吻合。 1.1.4无菌纱布覆盖植皮区,胶布包扎(此步骤本实验中省略)。 1.1.5 1~3周后观察结果 7
1.2 尾~尾植皮法(本实验中为自体尾~尾移植): 1.2.1 将近交系小鼠固定后(已麻醉),75%酒精常规消毒尾部皮肤。 1.2.2 固定鼠尾的根部,用4号手术刀在鼠尾背部切开一0.5cm×0.5cm大小的皮片,尽量不损伤局部血管,用止血钳将皮肤剥下。 1.2.3 将皮片旋转180°,镶嵌在创面上,棉球吸去局部渗出的血液和组织液,使其尽可能紧贴,可以不包扎。 1.2.4 1~3周后观察结果(100天) 2、小鼠卵巢摘除术 2.1 固定体位、麻醉: 选雌性小鼠,取左侧卧位,以左腹外侧区(左肋弓下缘)为手术区,局部剪毛,75%酒精消毒两遍后,用0.5%氯胺酮以100mg/kg的剂量(本实验:0.5ml)进行腹腔麻醉,5分钟后小鼠静卧于手术台上,呼吸深大而有节律,频率略快,四肢肌肉松弛,麻醉成功。 2.2 卵巢摘除: 用手术刀在左肋缘下,取腹正中线平行方向切开皮肤1cm,暴露腹腔内容物。拨开肠管,找到右肾。在右肾下方找到右侧卵巢和右侧子宫角。游离右侧卵巢并摘除。局部消毒,缝合腹膜、腹壁肌肉和皮肤。 按上述方法摘除左侧卵巢(另一位同学操作)。 四、实验讨论 1、近交系小鼠常用的皮肤移植试验 1.1 皮肤移植实验是用于鉴定近交系动物组织相容性基因是否一致的简单而可靠的方法。 1.2 尾~背植皮法:将小鼠尾部皮肤移植到同品系的异体小鼠的背部,通过观察移植皮片和背部其他区域的毛发稀疏和皮肤光泽异同来鉴定二者的组织相容性。如果组织相容性好,植皮色泽与周围一致,没有充血或炎症,移植皮片毛少而光泽。若组织相容性基因不纯合,尾皮在术后1~3周内被排斥,,植皮脱落,背部留下一块伤痕。另外,供体皮片应略大于受体创面以充分吻合,以免因皮片边缘缺血坏死而导致愈合后创面周边皮肤不连续。 1.3 自体尾~尾植皮法:可以鉴定植皮的脱落是否是手术失败而造成。移植时应将皮片旋转180°,以利于术后通过毛发生长的方向观察植皮是否存活。 8
2、小鼠卵巢摘除术、大鼠睾丸摘除术 2.1 小鼠卵巢摘除术:进入腹腔后,可以先找到肾脏。然后在肾脏下方查找卵巢并摘除。 2.2 行卵巢或睾丸摘除术时应将两侧的卵巢或睾丸均摘除。 9 实验三 豚鼠和兔的一般操作技术 1. 实验目的 通过实际操作,掌握豚鼠和兔的一般操作方法和尸体解剖及病理取材方法,包括豚鼠和兔的抓取和固定、编号、性别鉴定、灌胃、给药途径、麻醉、采血和处死等方法。 2. 实验动物:新西兰兔,豚鼠(各1只) 3. 实验步骤 3.1 豚鼠的抓取和固定 抓取豚鼠应先用手掌抓住背部,将手张开,用拇指和食指握住颈部,再拿起来。 3.2 豚鼠的性别鉴定 将豚鼠抓取后,观察肛门与生殖器之间的距离,距离近者为雌性,距离远者为雄性。 3.3 豚鼠的给药 腹腔注射:自下腹部两侧进针,可避免刺伤肝、脾或膀胱。 3.4 豚鼠的采血 心脏采血法:由助手抓取豚鼠,左手固定头部和两前肢,右手固定两后肢和尾部,使胸部突出。操作者用酒精消毒皮肤,在左侧第3~4肋间用左手食指触摸心脏搏动。右手持连有4~5号针头的注射器,选择心脏搏动最强处穿刺。当针头刺入心脏内时,血液回流进注射器,即可进行采血。 3.5 豚鼠的解剖 观察器官:脾脏、小肠和大肠、肝脏、胆囊、胃、十二指肠和胰腺、肾上腺、肾脏、膀胱、睾丸、附睾或子宫、卵巢、肝脏、心脏、甲状腺、脑、垂体。 3.6 兔的抓取和固定 右手抓住颈部的被毛与皮肤,提起兔,然后用左手托住它的臀部。 3.7 兔的性别鉴定 左手抓去兔子的背部皮肤,右手拇指和食指把生殖器附近的皮肤扒开,雄兔可见有一圆孔,里面露出阴茎;雌兔此处为一条朝向尾巴的长缝,呈椭圆形间歇,下端有阴道开口处。雌兔有8~12个乳头。 3.8 兔的给药 3.8.1 经口灌胃法:灌胃时用一木制张口器横放于上下腭之间,用绳固定。这时可用左手抓住动物的嘴,右手将一适当粗细的导尿管由张口器中央小孔插入,进入食管和胃。将装有药液的注射器接上导尿管,即可慢慢灌入胃内。 3.8.2 注射给药:耳缘静脉注射法:将兔固定好。把去耳缘部被毛,用二甲苯擦拭耳缘,促使静脉充盈。用左手拇指和食指压住耳根部,右手持连有4号针头的注射器,顺血管平行方向刺入静脉,进针约1cm,如有血液回流,即可进行注射。注射完毕,拔出针头,用棉球压迫止血。 3.9 兔的采血:耳缘静脉采血法:采血方法同兔耳缘静脉注射法。 3.10 兔的处死: 空气栓塞法:从兔的静脉内注入一定量的空气,使之发生空气栓塞。 3.11 兔的解剖:观察器官:脾脏、小肠和大肠、肝脏、胆囊、胃、十二指肠和胰腺、肾上腺、肾脏、膀胱、睾丸、附睾或子宫、卵巢、肝脏、心脏、甲状腺、脑、垂体。 4. 实验讨论 4.1 豚鼠生性胆小,不咬人,抓时不能太粗野,更不能用力抓腰腹,否则容易造成肝破裂而引起死亡。