发酵作业指导书

发酵的操作规程发酵是一种利用微生物代谢产物进行食品加工、改变食品性质的传统技术。

下面是发酵的操作规程。

一、发酵前准备1. 确定所要制作的食品种类和所使用的微生物菌种。

2. 准备好所需的原材料，包括主要原料和辅助原料。

3. 准备好所需要的设备和器皿，包括发酵罐、发酵器、温度计、PH计等。

4. 对发酵设备进行清洗消毒，确保无细菌和微生物残留。

5. 对所需的原材料进行清洗处理，除去杂质和有害物质。

二、制作发酵基质1. 根据所选用的原料制作发酵基质，一般包括水、面粉、糖、盐等。

2. 按照一定的比例将原料混合均匀，加入适量的水进行搅拌，直到形成较为稠密的糊状物。

3. 将制作好的发酵基质放置在发酵罐中，盖上盖子，进行静置。

三、接种微生物菌种1. 根据所选用的微生物菌种进行培养，保证菌种活性和纯度。

2. 取适量的培养菌种，加入发酵基质中，进行均匀的混合。

3. 注意保持发酵基质的温度和PH值，确保菌种得到良好的生长环境。

四、发酵过程控制1. 控制发酵温度，一般根据菌种的适宜生长温度进行调节，保持在适宜的范围内。

2. 控制发酵时间，根据所制作食品的要求和菌种的生长特性，确定合适的发酵时间。

3. 监测发酵过程中的PH值和酸碱度，保持在适宜的范围内。

4. 监测发酵过程中的氧气含量，及时补充新鲜空气，保证菌种的氧气供应。

5. 定期对发酵过程进行观察和抽样检测，判断发酵的进程和品质。

五、完成发酵1. 根据发酵的需要和所制作食品的要求，确定发酵时间并进行定时监测。

2. 当发酵时间结束后，停止继续添加发酵基质或菌种，即可完成发酵过程。

3. 停止发酵后，对发酵食品进行冷却处理，降低食品的温度。

4. 对发酵食品进行质量检测，包括外观、口感、气味等方面的评估。

5. 根据发酵食品的要求和市场需求，进行进一步的加工和包装。

六、清洁消毒1. 发酵过程结束后，对使用的设备和器皿进行彻底的清洗。

2. 使用合适的清洁剂和消毒剂进行清洗和消毒。

微生物发酵操作规程一、实验设备和试剂准备1.高压灭菌锅、培养箱、离心机、培养基培养室等设备准备就绪。

2.需要的试剂：培养基、酸碱调节液、营养添加剂、抗泡剂等。

二、细菌接种制备1.从新鲜培养基中挑取一颗菌落，转移到含有适宜培养基的烧杯中。

2.经过短暂的助培养，取适量细胞悬液，加入100毫升含有适宜培养基的培养瓶中。

3.在培养箱内以适宜温度和湿度条件下培养，促进菌体生长。

三、发酵条件控制1.调节培养基的pH值，保持在适宜的范围内。

2.控制培养温度，根据菌株的要求进行调整。

3.控制培养瓶内的搅拌速度和气体流量，以促进氧气和营养物质的供应。

4.根据需要加入抗泡剂，以减少发酵液中的泡沫产生。

四、发酵液的取样分析1.每隔一段时间，取样一次，分析发酵液中细菌生长、代谢产物等指标。

2.制备适当稀释样品，用于测定细菌数量、酶活性等。

3.进行物质的检测，如氨基酸、糖类、酸碱度等。

五、产物提取和纯化1.使用合适的方法取得目标产物，如离心沉淀、超滤、渗析等。

2.对提取的产物进行纯化处理，如柱层析、薄层层析等。

六、发酵液的处理和消毒1.停止发酵后，对发酵液进行处理，如沉淀、浓缩、干燥等。

2.对设备和周边环境进行彻底消毒，以防止交叉污染。

七、记录和数据分析1.记录每次操作的日期、时间、温度、搅拌速度等关键参数。

2.记录细菌生长情况、培养基的消耗情况、产物产率等数据。

3.对数据进行分析，评估发酵过程中的效果，并根据需要进行进一步优化。

八、安全措施1.在操作中需穿戴实验服、手套和口罩，保持良好的个人卫生习惯。

2.注意保持操作区域的卫生，及时清理和消毒。

3.使用酒精灯、高压灭菌锅等设备时，注意安全操作，避免火灾和烫伤。

通过严格遵守微生物发酵操作规程，可以提高发酵过程的可重复性和稳定性，确保所得产物的质量和产出。

同时，规程中的安全措施也能有效保护操作人员的安全。

生物科学实验操作作业指导书实验一：制备酵母发酵剂材料：- 酵母粉- 白砂糖- 温水- 塑料瓶- 漏斗- 纸巾- 酒精灯或电炉操作步骤：1. 将塑料瓶清洗干净，并用热水消毒。

将塑料瓶沿纵向切割一条长约10厘米的缝隙，并对折将其打开，使其成为一个小漏斗。

2. 取适量的酵母粉，倒入一个干净的容器中。

3. 加入适量的白砂糖，在酵母粉上撒上一层糖。

4. 将温水倒入塑料瓶中，闭上盖子，摇晃均匀，将盖子重新打开，等待一段时间，观察是否有气泡产生。

5. 若有气泡产生，说明酵母发酵剂制备成功，将其过滤至另一个干净的容器中。

6. 将制备好的酵母发酵剂保存在冰箱中以延长其储存寿命。

实验二：观察酵母的呼吸作用材料：- 酵母发酵剂- 糖水溶液- 试管- 橡皮塞- 数字温度计操作步骤：1. 准备多个试管，并在每个试管中分别加入适量的糖水溶液。

2. 在其中一个试管中添加适量的酵母发酵剂，用橡皮塞封闭试管口。

3. 在剩余的试管中分别分别加入热水、冷水和常温水，作为对照组。

4. 使用数字温度计分别测量各试管中液体的温度，并记录下来。

5. 观察每个试管中是否产生气泡，并记录下观察结果。

6. 根据观察结果，分析酵母在不同温度下的呼吸作用是否受到影响。

实验三：观察叶绿素的光合作用材料：- 鲜绿色植物叶片- 高锰酸钾溶液- 试管- 温水- 酒精灯或电炉- 针筒操作步骤：1. 准备多个试管，并在每个试管中加入适量的高锰酸钾溶液。

2. 从不同植物中采集新鲜的绿色叶片，并将其放入试管中。

3. 使用针筒将试管中的气体抽出，以创建真空条件。

4. 将部分试管放在光照区域，部分试管放在遮光区域，作为对照组。

5. 观察每个试管中的颜色变化，并记录下观察结果。

6. 根据观察结果，分析叶绿素在光照条件下是否参与光合作用。

实验四：观察细菌的生长条件材料：- 琼脂培养基- 干净的培养皿- 细菌培养液- 干净的棉签- 酒精灯或电炉操作步骤：1. 将琼脂培养基倒入干净的培养皿中，使其均匀分布，并让其凝固。

实验一腐乳制作一、实验目的1.理解和掌握腐乳的加工原理。

2.掌握腐乳的酿造过程和工艺要点。

二、实验原理豆腐乳是我国独特的传统发酵食品，是用豆腐发酵制成。

民间老法生产豆腐乳均为自然发酵，现代酿造厂多采用蛋白酶活性高的鲁氏毛霉或根霉发酵。

豆腐坯上接种毛霉，经过培养繁殖，分泌蛋白酶、淀粉酶、谷氨酰胺酶等复杂酶系，将豆腐中的有效物质分解，同时在长时间后发酵中与添加的辅料一起形成腐乳特有的色、香、位、体。

三、实验材料与设备1. 菌种：毛霉斜面菌种2.实验材料：马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA），葡萄糖，纱布，无菌水，豆腐坯，红曲米，面曲，甜酒酿，白酒，黄酒，食盐等。

3.仪器和器具250mL三角瓶，接种针，小笼格，喷枪，小刀，带盖广口玻瓶，恒温培养箱，。

四、实验方法与步骤1.工艺流程毛霉斜面菌种→扩大培养→孢子悬浮液→豆腐坯→接种→培养→晾花→加盐→腌坯→装瓶→后熟→成品2.操作要点2.1孢子悬液制备（1）毛霉菌种的扩培：将毛霉菌种接入PDA斜面培养基，于25℃培养2-3d进行活化；将斜面菌种转接到盛有种子培养基的三角瓶中，于20-25℃培养6-7d，要求菌丝饱满、粗壮，孢子生长旺盛，备用。

种子培养基：取大豆粉与大米粉质量比为1:1混合，装入三角瓶中，料层厚度为1-2cm，加入5%水。

加纱布包口，0.1MPa灭菌30min。

（2）孢子悬液制备：于上述三角瓶中加入无菌水100mL，充分震摇，用无菌双层纱布过滤，滤渣倒回三角瓶，再加100mL无菌水洗涤1次，合并滤液于第一次滤液中，装入喷枪贮液瓶中供接种使用。

2.2 接种孢子用刀将豆腐坯划成4.1cm×4.1cm×1.6cm的块，将笼格经蒸汽消毒、冷却，用孢子悬液喷洒笼格内壁，然后把划块的豆腐坯均匀竖放在笼格内，块与块之间间隔2cm。

再用喷枪向豆腐块上喷洒孢子悬液，使每块豆腐周身沾上孢子悬液。

2.3培养与晾花将放有接种豆腐坯的笼格放入培养箱中，于20-25℃下培养，最高不能超过28℃。

××××有限公司标准安全操作规程文件编号：XXX-XXX-XXX发酵罐操作规程编制：审核：批准：版本：受控状态：20××年10月10日发布20××年10月10日实施标准、完整的Word版文档，下载后可根据实际工作情况适当修改，自由编辑，适合相关行业人员参考，实际使用请删除本行文字。

发酵罐操作规程1、进罐前准备工作：清洗发酵罐；电极标定；装好pH电极、溶氧电极；放出蒸汽发生器中的污水；贮水箱中加满水；培养基配制好后倒入发酵罐，调至适当体积及pH；打开搅拌；检查罐上各种盖帽，旋紧。

2 灭菌操作：2.1打开蒸汽发生器，机器自动进水，水位达到要求后开始加热。

2.2打开蒸汽发生器后面的球阀。

2.3夹层进汽预热。

打开夹层进汽阀门，打开夹层排汽阀门，夹层开始进汽预热。

打开排气阀，排出冷空气。

待温度上升至95-98℃时关闭夹层蒸汽，停止搅拌。

2.4取样阀进汽。

打开罐底侧面蒸汽阀，打开罐底放料阀（此阀顺时针开，逆时针关，与普通阀门正好相反），蒸汽进入发酵罐。

微开取样阀。

2.5空气管进汽。

关好空气进气阀，打开蒸汽进汽阀，蒸汽进入过滤器。

先从尾阀排出少量冷凝水，关小尾阀，打开过滤器下面的进汽阀，蒸汽从空气管进入发酵罐。

2.6灭菌。

控制排气阀大小，控制空气口、出料口进汽量，将温度控制在灭菌所需温度，维持一定时间。

2.7冷却。

关闭蒸汽阀，待压力下降至0.2-0.3kg/cm2时，缓慢打开空气阀及尾阀，吹干过滤器。

打开冷却水及相关阀门，将控制程序切换到冷却模式(自动控温)，罐内迅速降温。

待罐压降至0.2-0.3kg/cm2时，打开空气进气阀，保持罐内压力。

2.8接种。

放出罐中空气,将罐压降至0,在火焰保护下接种。

3发酵。

控制适当通气量，将罐压控制在0.3-0.5kg/cm2，标定溶氧至100%。

将状态模式切换到发酵。

发酵过程中要经常观察温度、搅拌、泡沫、溶氧、通气量罐压等，确保设备正常运行。

《食品发酵工程原理》实验指导书实验一甜酒酿的制作一、实验目的1.通过甜酒酿的制作了解酿酒的基本原理。

2.掌握甜酒酿的制作技术。

二、实验要求三、实验原理以糯米（或大米）经甜酒药发酵制成的甜酒酿，是我国的传统发酵食品。

我国酿酒工业中的小曲酒和黄酒生产中的淋饭酒在某种程度上就是由甜酒酿发展而来的。

甜酒酿是将糯米经过蒸煮糊化，利用酒药中的根霉和米曲霉等微生物将原料中糊化后的的淀粉糖化，将蛋白质水解成氨基酸，然后酒药中的酵母菌利用糖化产物生长繁殖，并通过酵解途径将糖转化成酒精，从而赋予甜酒酿特有的香气、风味和丰富的营养。

随着发酵时间延长，甜酒酿中的糖分逐渐转化成酒精，因而糖度下降，酒度提高，故适时结束发酵是保持甜酒酿口味的关键。

四、实验所用仪器及材料手提高压灭菌锅，不锈钢丝碗，滤布，烧杯，不锈钢锅。

糯米、酒药。

五、实验步骤和方法1洗米蒸饭将糯米淘洗干净，用水浸泡4h, 捞起放于置有滤布的钢丝碗中，于高压锅内蒸熟（约0.1Mpa, 9min），使饭“熟而不糊”。

2淋水降温用清洁冷水淋洗蒸熟的糯米饭，使其降温至35℃左右，同时使饭粒松散。

3落缸搭窝将酒药均匀拌入饭内，并在洗干净的烧杯内洒少许酒药，然后将饭松散放入烧杯内，搭成凹形圆窝，面上洒少许酒药粉。

盖上培养皿盖。

4保温发酵于30℃进行发酵，待发酵2天后，当窝内甜液达饭堆2/3高度时，进行搅拌，再发酵1天左右即可。

六、实验注意事项1 蒸好的饭应凉至35度以下，以防烫死酒曲中是微生物。

2 装熟糯米的用具应做好消毒，以防杂菌污染。

七、实验预习要求提前预习霉菌和酵母菌的发酵原理。

八、实验报告要求1 发酵期间每天观察、记录发酵现象。

2 对产品进行感官评定，写出品尝体会。

实验二活性干酵母的酒精发酵一、实验目的酒精发酵是典型的糖的无氧酵解途径。

通过实验让学生理解糖的无氧酵解途径并了解厌氧发酵的工艺过程。

二、实验原理在无氧的培养条件下，酵母菌利用糖发酵为酒精和二氧化碳的作用即为酒精发酵，反应式为：C6H12O6 2C2H5OH ＋2CO2通过对表观发酵度的测定，可以判断酒精发酵的进程。

青霉素发酵使用手册北京东方仿真技术有限公司二零零五年八月一、背景知识1、菌种介绍青霉是产生青霉素的重要菌种。

广泛分布于空气、土壤和各种物上，常生长在腐烂的柑桔皮上呈青绿色。

目前已发现几百种，其中产黄青霉(Penicillum chrysogenum)、点青霉(Penicillum nototum)等都能大量产生青霉素。

青霉素的发现和大规模地生产、应用，不仅对抗生素工业的发展起了巨大的推动作用，而且加上其他抗生素的广泛使用，比如像磺胺药物，使人类的平均寿命，再次延长了四岁。

此外，有的青霉菌还用于生产灰黄霉素及磷酸二酯酶、纤维素酶等酶制剂和有机酸。

1981年报导，疠孢青霉是纤维素酶的新来源，它能分解棉花纤维。

2、发酵工艺本仿真软件针对其中发酵过程进行了仿真模拟。

3、青霉素的单位目前国际上青霉素活性单位表示方法有两种：一是指定单位（unit）；二是活性质量（μg），最早为青霉素规定的指定单位是：50mL肉汤培养基中恰能抑制标准金葡萄菌生长的青霉素量为一个青霉素单位。

在以后，证明了一个青霉素单位相当于0.6μg青霉素钠。

因此青霉素的质量单位为: 0.6μg青霉素钠等于1个青霉素单位。

由此，1mg青霉素钠等于1670个青霉素单位(unit)。

二、反应机理介绍菌种介绍 :　青霉是产生青霉素的重要菌种。

广泛分布于空气、土壤和各种物上，常生长在腐烂的柑桔皮上呈青绿色。

目前已发现几百种，其中产黄青霉(Penicillum chrysogenum)、点青霉(Penicillum nototum)等都能大量产生青霉素。

青霉素的发现和大规模地生产、应用，不仅对抗生素工业的发展起了巨大的推动作用，而且加上其他抗生素的广泛使用，比如像磺胺药物，使人类的平均寿命，再次延长了四岁。

此外，有的青霉菌还用于生产灰黄霉素及磷酸二酯酶、纤维素酶等酶制剂和有机酸。

1981年报导，疠孢青霉是纤维素酶的新来源，它能分解棉花纤维。

青霉菌菌丝与曲霉相似，但没有足细胞。

发酵操作规程一、引言发酵是一种生物技术，用于转化有机物质为有用产物。

在食品加工、酿酒、酸奶等行业中，发酵是一个重要的步骤。

为了确保发酵的效果和安全性，需要遵循一些操作规程。

本文将介绍发酵操作规程，包括发酵前的准备工作、发酵过程中的控制和监测，以及发酵后的处理措施。

二、发酵前的准备工作1. 确定发酵的目标和产物：在开始发酵前，需要明确发酵的目的和预期产物，以便进行后续的操作和监测。

2. 选择发酵菌种：不同的产物需要不同的发酵菌种，根据目标产物的要求选择合适的菌种，并进行培养和增殖。

3. 准备发酵基质：- 根据菌种的生长需要，选择合适的基质，如麦芽、淀粉等。

- 对基质进行适当的处理，如研磨、消毒等，以保证基质的质量和卫生。

- 按照配方准确称量和混合基质的组分。

4. 准备发酵容器：- 选择合适的发酵容器，如发酵罐、培养皿等，并进行清洗和消毒。

- 确保容器的密封性和通气性，以便控制发酵过程中的气体交换。

5. 准备发酵环境：- 根据菌种的需求，调节适宜的温度、湿度和酸碱度等环境条件。

- 保持发酵环境的清洁和卫生，以防止有害微生物的污染。

三、发酵过程的控制和监测1. 控制发酵条件：- 在发酵过程中，根据菌种的需求，控制恰当的温度、湿度和pH值等条件，以促进菌种的生长和代谢。

- 定期检查和调整发酵环境，确保环境条件的稳定性。

2. 监测发酵进程：- 定期取样并测量关键参数，如菌种数量、产物浓度、酸碱度等，以了解发酵进程的变化。

- 根据监测结果，及时调整操作参数，以确保发酵的顺利进行。

3. 防止污染：- 严格控制发酵容器和设备的卫生状况，定期清洗和消毒。

- 在操作过程中，避免外界的污染，如杂菌、灰尘等。

- 采取适当的防护措施，如穿戴干净的工作服、戴口罩等，以防止人员对发酵过程的污染。

四、发酵后的处理措施1. 停止发酵：- 在达到预期产物或发酵结束的时候，停止提供发酵菌种所需要的营养物质和环境条件。

- 停止搅拌或通气等操作，以防止污染和产物的破坏。

《质量管理制度》7.0酿造酱油关键控制点及作业指导书关键控制点；工艺点：制曲发酵一.制曲要求自始至终温度控制在31-37℃的品温，绝不能超过40℃。

房内干湿球温差前中期要求±2℃，后期要求±1℃。

温度要求：静止培养时约31-32℃生长旺盛时约35-37℃时约31-32℃成熟后期应控制在32-33℃制曲后期，菌丝以生孢子，此时要求干湿球温差±1℃，以利于孢子发育（夏天可能要用水淋晒曲房地面------保湿，冬天可能要用外加温------保温）。

鼓风要求：原料升温后立即开鼓风机进行通风，一定要注意料层通风均匀，整个料层要通风到，防止风走短路。

一般要求前期风量可适量，中期生长旺盛，一定要鼓大风，到成熟后期又要适当减少，通风量与料的品温相适应，灵活掌握，但绝不能停止鼓风。

翻曲（疏松开始发黄的曲料）要求：每批要求翻曲三次。

一般要求是升温后5小时左右一次翻曲。

一次翻曲5---7小时二次翻曲。

二次翻曲后约5---7小时三次翻曲。

翻曲不要疏漏，要贴边、贴底。

黄曲要防止水毛产生，产生水毛是感染杂菌的现象，能及时处理应立即处理（如检测温度，干湿温差是否正常，通风是否正常等）。

凡感染水毛应做曲具彻底清洗或消毒。

曲室及工具要定期清洗消毒。

二.成曲质量要求：⑴26---36小时成品出曲；⑵外观：米曲霉生长丰满、菌丝密而粗壮、黄绿色、无结块，粒粒均匀，手感疏松柔软有弹性，不扎手、无水、手发黑等现象。

⑶气味：应具有曲固有的香气，不应有氨味和酸败味等不良气味；⑷气味：应具有曲固有的香气，不应有氨味和酸败味等不良气味；⑸成曲含水分应在25-34%之间。

关键控制点；工艺点：晒露发酵1.检查发酵池及连接管道是否完好，有无渗漏；2.成品曲料倒入发酵池后，定量加入规定浓度的盐水；3.制得的成曲出曲，把曲全部倒入发酵池中，按曲一份，盐水三份比例加入20°Bé盐水，搅拌均匀，第一天搅拌3次，第二天搅拌2次，第三天搅拌1次，第四天到第十天每天搅拌1次。

发酵操作规程范文一、目的1.保证发酵过程的顺利进行，确保发酵产品质量。

2.提高发酵产品的产量和发酵效率。

3.保障操作人员的安全。

二、操作前准备1.仔细检查发酵设备，确保设备完好无损。

2.准备好所需的原料和发酵菌种。

3.清洗发酵罐，确保表面干净。

4.检查发酵罐中的温度计、压力表等仪器的准确性。

三、操作步骤1.将所需原料按照配方准确称量出来。

2.熟化原料：根据工艺要求进行原料熟化处理，提高发酵效果。

3.发酵罐和相关设备除菌：用蒸汽、高温等方式对设备进行除菌处理，以防止细菌或其他有害微生物的侵入。

4.填充原料：将配制好的原料倒入发酵罐中。

5.接种菌种：将选好的发酵菌种加入发酵罐中，注意保持洁净。

6.采样检测：每次接种后，要取一定量的样品进行检测，以确保发酵菌株的纯度和活性。

7.调节发酵条件：根据发酵菌种的特性，调节发酵罐的温度、湿度、氧气供应等条件，提供适宜的生长环境。

8.监测发酵过程：发酵过程中要定期监测温度、压力、溶解氧浓度等指标的变化，并及时采取措施进行调整。

9.发酵产物分离：发酵结束后，将发酵产物通过过滤、离心等方式进行分离。

10.产品处理：根据产品的要求，对分离后的产物进行干燥、粉碎、包装等处理。

四、注意事项1.严格按照操作规程进行操作，避免误操作引起事故。

2.定期检查和维护发酵设备，保持设备的正常运转。

3.发酵操作需要保持洁净，防止细菌和其他有害微生物的侵入。

4.发酵过程中，注意温度、湿度、氧气供应等因素的调节，确保发酵条件的稳定。

5.在发酵过程中，及时进行采样检测，掌握发酵的进展情况。

6.发酵结束后，要及时对发酵罐和相关设备进行清洗和消毒，以防止细菌滋生。

7.严禁在发酵过程中随意开启发酵罐的闸门或打开安全阀，防止发酵液外泄或发生爆炸等危险。

8.严禁未经授权的人员擅自操作发酵设备，发生人身伤害或设备故障等问题，责任自负。

五、紧急处理措施1.发生发酵液外泄的情况时，应迅速关闭闸门或阀门，以防漏出，并通知相关人员及时处理。

生物制药技术专业制药实训指导书一、实训目的通过仿真软件的模拟演练和药物生产的实操训练，使学生综合运用以前所学的全部知识，进行药物生产及加工的具体实践，使学生具有独立的操作能力，是培养学生综合运用所学知识的过程，是知识转化为能力和能力转化为工程素质的重要阶段。

待学生走上工作岗位后既能担负起企业技术改造的任务，也能适应生物药品生产企业和医疗单位对药学人才的需求。

二、实训时间每班一周，食品生物技术（生物制药方向）1030113班第7周，食品生物技术（生物制药方向）103014班第8周三、实训地点仿真实训室、设备及制剂生产实训室、分离纯化实训室、图书馆。

四、实训指导教师赵德胜、韩文请、张锐五、实训具体安排：（一）实训要求：1、学生实训前要认真学习青霉素生产工艺过程，熟悉青霉素仿真软件的使用及药物生产相关设备的结构和使用，禁止学生现学现用和不规范操作设备；2、学生分组进行实训，但要求每位同学均动手操作；3、实训期间学生必须遵守实训室的一切规章制度，违者按相关规章制度进行处罚；4、在企业参观时严格遵守企业的相关规定；5、学生必须做好实训期间的生产纪录。

（二）实训内容：1、青霉素发酵及提取仿真软件的使用；2、制药生产设备的认识与实操；（三）实训生产记录：要求实训中要有生产记录，如实记录生产过程的控制情况。

1、每台仪器、设备的结构及准确操作。

2、生产期间的管理：要求有项目、有时间、有数据、有措施。

（四）总结：1、对本次生产过程及结果做出分析；2、就本次实训过程中的收获及不足做出客观的评价；3、对实训中存在的不足及要改进的地方做出建议。

（五）论文：1、每位学生在实训结束后要交一份有关实训内容的报告。

2、实训报告应包括如下内容：①封面②目录③任务书④正式报告⑤工艺流程图⑥小组工作分工记录表3、实训报告正式报告按论文格式编写，应包括一下几方面：①引言（或绪论）②正文③结论④参考文献六、考核：1、按照实训内容认真做好实训笔记，整理收集相关资料；实训完成后，整理书写成实训总结报告。

发酵工程实验指导书（2014版）宁波大学海洋学院2014.09发酵工程实验指导书目录实验一乳酸菌的分离与初步筛选实验实验二乳酸菌的初步鉴定实验实验三乳酸菌菌种保藏实验实验四乳酸菌的培养与发酵实验实验五乳酸菌发酵产物的分析与测定实验六发酵罐操作训练发酵工程实验指导书（2014版）３实验一 乳酸菌的分离与初步筛选实验一、 实验目的及要求1、 掌握从环境样品中分离所需微生物的一般操作2、 掌握平板划线分离菌种的原理和操作方法3、 掌握利用透明圈法获得单菌落菌株的原理。

二、 实验原理自然样品中存在混杂的微生物，通过选择性培养基及样品稀释使形成细胞分散液，再通过固体培养基在合适的培养条件下培养形成单菌落，由此得到分离的纯培养菌株。

乳酸菌最基本的代谢特性是发酵产酸，待分离样品在合适的培养基和培养条件下，乳酸菌在特定设计的培养基中由于生长产酸产生溶钙形象，从而在培养基中产生透明圈，透明圈直径大小可反映菌落生长产酸量的大小，而不是乳酸菌或不产生酸积累的细菌不能产生透明圈。

三、 实验器材1、 待用分离样品（腌菜，各种泡菜，酸奶，植物汁液，等）；2、 培养基：MRS 培养基或改良乳酸菌分离培养基；无菌水；3、 器皿与设备：培养皿、移液管、试管、三角瓶、接种环、涂布棒、超净工作台、天平、采样瓶，培养箱，等。

四、 方法和步骤 1、 分离样品的采集 采样须知：结合乳酸菌菌种特性（文献资料查阅），获取乳酸菌在自然界或相关产品等的分布规律，设计样品采集范围。

采集样品经适当保存或立即处理。

2、 菌种的分离称取样品5g 或5ml →加到45ml 无菌水的三角瓶中（30℃恒温处理20分为佳）→充分震荡后（含玻璃珠）使其自然沉淀→用1ml 移液管吸取上清菌悬液1ml 至9ml 无菌水试管中→依次进行10倍稀释至10-4~10-5→用移液管吸取1mL 菌悬液至含碳酸钙的MRS 培养基平板中，涂布均匀→30℃恒温培养2~3天→观察菌落，分别挑取生长良好的含透明圈的可疑乳酸菌单菌落，分别移接至普通乳酸菌培养基的斜面试管，菌种编号，30℃恒温培养1~2天，长菌后在4℃冰箱保存待用。

酿酒发酵作业安全作业指南在酿酒过程中，发酵作业是一个关键环节，但同时也伴随着一定的安全风险。

为了确保酿酒发酵作业的安全进行，保障人员的生命健康和设备的正常运行，以下为您提供一份全面的酿酒发酵作业安全指南。

一、作业前的准备1、人员培训参与酿酒发酵作业的人员必须接受专业的培训，了解发酵的原理、工艺流程、安全注意事项以及应急处理措施。

只有具备相关知识和技能的人员才能进行操作。

2、设备检查在作业前，要对发酵设备进行全面的检查。

包括检查罐体、管道、阀门等是否有泄漏、损坏或堵塞的情况。

确保搅拌装置、温度控制系统、压力监测装置等正常运行。

3、原材料准备选用符合质量标准的原材料，避免使用变质、受污染的原料。

同时，要按照配方准确称量和添加原材料，以保证发酵的正常进行。

4、个人防护装备操作人员应穿戴合适的个人防护装备，如工作服、手套、护目镜、口罩等，以防止接触化学物质、高温液体和蒸汽对身体造成伤害。

5、作业环境检查确保作业场所通风良好，无易燃易爆物品。

清理作业区域的杂物，保持通道畅通。

二、作业中的安全操作1、严格遵守工艺流程按照预定的工艺流程和操作规范进行作业，不得随意更改操作步骤和参数。

2、控制温度和压力在发酵过程中，要密切监测温度和压力的变化。

温度过高或压力过大可能导致设备故障、发酵异常甚至爆炸等危险情况。

及时采取降温、泄压等措施，确保在安全范围内运行。

3、防止泄漏定期检查设备的密封性能，发现泄漏及时处理。

如果泄漏的是有毒有害或易燃易爆物质，应立即停止作业，疏散人员，并采取相应的应急措施。

4、搅拌均匀保持发酵液的搅拌均匀，有助于物质的均匀分布和反应的充分进行。

同时，要注意搅拌装置的运行情况，避免出现故障。

5、电气安全确保电气设备的接地良好，避免发生触电事故。

在操作电气设备时，要保持手部干燥，不得湿手操作。

6、防火防爆发酵过程中可能产生易燃易爆气体，要严禁明火，并安装有效的通风和防爆设备。

三、作业后的清理与维护1、设备清理作业结束后，及时对设备进行清理，清除残留的发酵液和污垢。

赖氨酸的发酵调控研究一、实验目的1、了解赖氨酸发酵常用的发酵菌种。

2、掌握L-赖氨酸发酵的工艺控制过程和方法。

3、能熟练运用发酵过程的基本原理，根据实验的不同要求，正确的设计实验方案，并按照实验方案进行实验研究二、实验原理赖氨酸的生产方法有水解法(已淘汰)、合成法、酶法和直接发酵法。

直接发酵法合成的赖氨酸是一种次级代谢产物。

微生物合成赖氨酸是诱导物的诱导调节、自身产物的反馈调节、自身产物的分解调节、以及细胞膜透性的调节等次级代谢调节综合作用的结果。

谷氨酸棒杆菌合成赖氨酸的自身产物调节作用如图1所示。

图1 谷氨酸棒杆菌合成赖氨酸的自身产物调节作用三、材料与分析方法1、菌种谷氨酸棒杆菌（编号10065，中国微生物菌种保藏管理中心）。

2、培养基（1）斜面培养基：牛肉膏1.1%，蛋白胨1.0%，葡萄糖0.5%，NaCl 0.5%，琼脂0.2%，pH7.0，在0.1Mpa压力下灭菌20min。

（2）种子培养基：糖蜜2.0%，豆饼水解液0.5%，(NH4)2SO4 0.4%，CaCO3 0.5%，K2HPO4 0.1%，MgSO4 0.04%，pH7.0,，于250mL三角瓶内装25mL种子培养基, 在0.1Mpa压力下灭菌20min。

（3）发酵培养基：糖蜜20%，豆饼水解液1.0%，玉米浆（氮源）0.6%，(NH4)2 SO4 2%，K2HPO4 0.1%，MgSO4 0.05%，FeSO4 0.2%，MnSO4 0.2%，pH7.0，于250mL三角瓶装液25mL发酵液，在0.1Mpa压力灭菌20min。

3、分析方法（1）丝氨酸的测定采用变色酸-分光光度法测定（见附录1）。

（2）赖氨酸的测定发酵液中赖氨酸含量的测定采用茚三酮比色法，并加以改进。

吸取发酵液4mL, 6000r/min离心10min去菌体及杂质。

取上清液2mL，加茚三酮试剂（A液：茚三酮1.25g溶于94mL乙二醇甲醚中；B液：CuCl2·2H2O 1.97g溶于32mL 0.1mol/L柠檬酸溶液中；将A、B两液混合，用蒸馏水定容到250mL）4mL，混合，在沸水浴加热20min，冷却后测定475nm处的吸光度值，通过查赖氨酸标准曲线得知发酵液中赖氨酸的浓度。

微生物发酵工程实验指导王金华实验规则1、实验前必须预习实验指导书。

若经提问发现没有预习者，须在教师指定的时间内预习完毕，方得参加实验。

2、实验前须认真检查仪器、试剂、用具及实验材料。

如有破损、短缺应立即报告指导教师，经同意后方可调换和补充。

对玻璃器皿须做好清洗工作。

3、实验过程中不得随便挪动外组的仪器、用具和实验材料。

不得随意拨动仪器开关或电源开关，须按实验要求进行。

4、实验材料、药品的使用，应在不影响实验结果的前提下注意节约，杜绝浪费。

5、实验室应保持肃静，不得谈笑喧哗，不许搞其他动作，以免影响他人实验。

6、清洗仪器、用具、材料时，须将固形物倒入指定容器内，不得直接倒入水槽，以免造成水管堵塞。

7、实验过程中，须按操作规程仔细操作，注意观察试验结果，应及时记录。

不得抄写他人的实验实习记录，否则，须重做。

如有疑问，应向指导教师询问清楚后方可进行。

8、实验完毕后，须将玻璃仪器、用具等清洗干净，按原来的位置摆设放置。

如有破损须报告指导教师，并填写仪器损坏登记簿。

9、在进行实验过程中，不得随意食用原料和加工品。

10、实验结束后，由值日生负责打扫实验室，保持室内整洁，注意关上水、电、窗、门。

实验一培养基的配制及灭菌一、实验目的要求掌握不同类型微生物培养基的配方及其制备方法。

二、仪器设备及原材料高压灭菌锅，250ml三角瓶，纱布，牛皮纸，琼脂，其他化学药品三、常用培养基的配方及制备1、细菌常用培养基（1）LB培养基蛋白胨 1.0%酵母膏 0.5%NaCl 1.0%可溶性淀粉 0.5%琼脂 2.0%pH 7.0 121.3℃灭菌20min。

（2）MRS（乳酸菌分离）牛肉膏0.5%酵母膏0.5%蛋白胨1%葡萄糖1%乳糖0.5%NaCl 0.5% 琼脂2% pH6.8固体培养基加琼脂2%；半固体培养基加琼脂0.75%2、酵母菌常用培养基（1）麦芽糖培养基蛋白胨1%麦芽糖2%酵母膏0.5%琼脂2%自然pH 121.3℃灭菌20min。