常用的急性肝损伤动物模型

一、四氯化碳急性肝损伤模型[造模原理]四氯化碳(CCl4 )是无色透明液体,不溶于水.CCl4的毒性主要与其活性代谢产物有关.在肝内CCl4惊NADPH和肝微粒体细胞色素P450混合功能氧化酶的作用,生成活泼的三氯甲基自由基和氯自由基.这些自由基能与细胞内和细胞膜上大分子发生共价结合,引起富含不饱和脂肪酸的生物膜发生脂质过氧化,导致膜结构和功能完整性的破坏,肝细胞损伤坏死.三氯甲基自由基还能抑制细胞膜和微粒体膜上该泵的活性,食Ca2+内流增加,从而引起细胞中毒死亡;三氯甲基自由基能与蛋白质形成共价键,损害线粒体,使还原型辅酶Ⅰ(NADH)及ATP在肝内生成减少,脂肪酸氧化抑制,影响肝脏能量生成障碍,并使三酰甘油和脂肪酸在肝细胞内蓄积.[实验动物]体重18-22g的小鼠、体重150-180的大鼠或体重4-45kg的家兔.[操作方法]用CCl4 在不同动物可以多种方法引起急性肝损伤.一般用花生油将CCl4 稀释为所需浓度. CCl4 致急性肝损伤所需剂量和用法见表8-1[模型评价与注意事项]1.( CCl4肝损伤模型是最常用的急性肝损伤模型,造模方法简单,成功率高,重复性好，价格低廉。

2．CCl4剂量不宜过大，以免造成动物中毒死亡。

3：CCl4是无色澄清的有毒液体，有特殊气味，难溶于水。

CCl4 一般用花生油、橄榄油、豆油等植物油混合成所需浓度，有时也可与矿物油(如液体石蜡)混合。

以植物油为例，10％CCl4的配制方法是：取5ml植物油和5g阿拉伯胶，置于乳钵中研匀，再加lOml纯CCl4。

研匀，然后加蒸馏水lO~15ml调成乳状，最后加蒸馏水至lOOml，用前摇匀。

4．用CCl4复制肝损伤模型的主要缺点是,不同动物个体肝损伤的程度差异较大. 还有研究表明，小鼠接受CCl4后肝脏病理学改变与血清ALT等生化指标改变的相关性不如大鼠好。

5 CCl4 液体和蒸气可以从呼吸道、皮肤吸收,对人体有一定毒性，操作时应注意防护.二、D-半乳糖胺急性肝损伤模型[造模原理]D-半乳糖胺(D-galactosamine)引起急性肝损伤的机制尚不完全清楚。

CCl4致急性肝损伤模型肝功能进展研究【实验目的】（1）观察不同浓度CCl4造模后，血清ALT、AST变化及大鼠肝损伤后自我修复情况。

（2）观察两种造模方式，即单次给药造模（第1d）和两次给药造模（第1d和5d）大鼠血清ALT、AST变化及大鼠肝损伤后自我修复情况。

（3）根据大鼠血清ALT、AST变化及大鼠肝损伤后自我修复情况，选择CCl4造模浓度和造模方式，以便决定药物干预时机。

【实验动物】SPF级雄性SD大鼠24只，体重200±20g。

饲养条件：6只/笼，群养，自由进食饮水，饲养温度20～25℃，湿度40%～70%，给予标准的光照周期（12h光照/12h 黑夜），饲养室条件始终保持稳定，以保证试验结果的可靠性。

【实验方法】（1）大鼠分组及造模：大鼠适应性饲养1周后，随机分为4组：正常对照组、30%CCl4剂量组、40%CCl4剂量组、50%CCl4剂量组，每组6只。

实验开始时，除正常组给予橄榄油（1ml/kg）外，30%CCl4剂量组、40%CCl4剂量组和50%CCl4剂量组大鼠分别一次灌胃给予相应浓度（v/v）四氯化碳-橄榄油溶液（1ml/kg）。

造模开始后，大鼠禁食过夜，分别于造模后第3h、12h、24h、48h、72h、96h、第5d、6d、7d眼眶取血（取血前大鼠禁食12h），测定血清ALT、AST值。

各组大鼠于末次取血后，脱颈椎处死，解剖观察肝脏外观变化，并留取肝组织标本备用。

（2）血清制备及ALT、AST测定：大鼠眼眶取血（取血前禁食12h），用1.5ml EP管取血约1ml，血液取出后，先4℃静置30～50min，再4℃，3000r/min，离心15min，吸取上层血清分装保存。

通常，血清中Alt、AST在室温（25℃）可保存2天，在4℃可保存一周，在-20℃可保存1个月。

血清取出后，分别按ALT、AST测试盒说明书测定大鼠血清ALT、AST值。

（3）肝脏处理及标本制备：大鼠取血后脱颈椎处死，解剖，肉眼观察肝脏外观形态后，取出整个肝组织，用生理盐水清洗两次，吸干后称重，计算肝脏脏器系数。

脂多糖诱导小鼠急性肝损伤模型的建立程訸;葛晶晶【期刊名称】《汕头大学医学院学报》【年(卷),期】2015(28)3【摘要】目的:建立脂多糖(LPS)诱导小鼠急性肝损伤模型。

方法:20只雄性昆明小鼠随机分为对照(腹腔注射相同体积NS)和LPS(腹腔注射LPS(8、15、20 mg/kg))组。

6 h后,观察小鼠肝脏形态变化,测定血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平。

结果:与对照组比,LPS组能剂量-依赖地致小鼠肝脏肿大,中央静脉周围炎性细胞聚集,血清ALT、AST水平升高(P<0.05、P<0.01)。

结论:成功建立LPS诱导小鼠急性肝损伤模型,为急性肝损伤的致病机制以及药物干预治疗提供有效的动物模型。

【总页数】3页(P150-151)【关键词】脂多糖;急性肝损伤;动物模型【作者】程訸;葛晶晶【作者单位】清远市妇幼保健院【正文语种】中文【中图分类】R96【相关文献】1.细胞自噬在D-氨基半乳糖/脂多糖诱导的小鼠急性肝损伤模型中的保护作用及机制 [J], 时红波;时红林;张向颖;陈德喜;段钟平;任锋2.脂多糖诱导小鼠肝损伤模型及致死模型的建立 [J], 刘韦成;陶德定;胡俊波;王晶;罗学来;李兆明;邓豫;曹小年;杨熹;李川;金源;李小兰3.滴注空气在脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤模型建立过程中的作用 [J], 原铭贞;高广媛;李波;董春玲;王司仪;梁豪君;刘相良;孙笑非4.D-氨基半乳糖联合脂多糖诱导小鼠慢性肝损伤模型的建立 [J], 翟亚南;王晶晶;李梦;池亚菲;孟霞;彭博雅;焦昆;卢静5.脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤模型的建立 [J], 王玉明因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

大鼠急性肝损伤（肝郁脾虚证）病证结合模型的研究建立適宜于抗急性肝损伤（肝郁脾虚证）中药复方活性发现、药效评价和新药研发的方证相应动物模型。

依照中医病因病机演变规律和现代病理机制研究，抽提适宜于急性肝损伤（肝郁脾虚证）大鼠动物模型评价的证候、确定积分，根据药证相符原则选定逍遥丸和水飞蓟宾葡甲胺片为模型反证药物，大鼠每天腹腔注射猪血清，并按分组给予不同配比高脂低蛋白饲料及食用乙醇进行诱导；共7 d。

实验期间每日观察大鼠的体重、食量、饮水量及一般观察并对其进行中医证候积分，实验结束检测大鼠血清ALT，AST，PA，TBIL，TBA等肝功能指标的水平，检查肝组织病理学变化。

在造模1周后，各模型组的大鼠均达到明显急性肝损伤程度，且大鼠主证、次证均符合肝郁脾虚证的证候表现。

与正常对照组比较，血清ALT和AST活性升高，TBIL和TBA含量升高，PA含量降低；肝组织病理形态学检查显示各模型组的大鼠均出现炎细胞浸润、嗜酸性变或嗜酸性脂肪变，反证药物组可不同程度改善上述病变表现。

腹腔注射猪血清+高脂低蛋白饲料（895%玉米粉、10%猪油、05%胆固醇）+10%食用乙醇连续造模7 d，经药物反证，可建立拟临床肝郁脾虚证的急性肝损伤大鼠模型，具有成模耗时短、死亡率低、动物状态与临床患者证候表现相近等特点，可适用于抗急性肝损伤（肝郁脾虚证）中药复方活性发现、药效评价、新药研发和临床方证相关性研究与机制探讨。

标签：急性肝损伤；肝郁脾虚证；病证结合；大鼠；动物模型Research on rat models of acute liver injury with syndrome ofliver depression and spleen deficiencyHUANG Nana1，2，SUN Xiaoqian2，YANG Qian3，LI Xiaoyu1，SUN Rong1*（1 Shandong Academy of Chinese Medicine，Ji′nan 250014，China；2 Shandong University of Traditional Chinese Medicine，Ji′nan 250355，China；3 Rizhao City Hospital of Traditional Chinese Medicine，Rizhao 276800，China）[Abstract]This paper aimed to establish animal models which are suitable for the activity found，efficacy evaluation of herbs resistant to acute liver injury with syndrome of liver depression and spleen deficiency and new drug research and development based on corresponding of formula and syndrome The symptoms that are suitable for evaluating the rat models of acute liver injury with syndrome of liver depression and spleen deficiency were extracted according to the evolution rule of theetiology and pathogenesis in traditional Chinese medicine and the modern pathological mechanism Xiaoyao pill and silibin meglumine tablets were used as drug counter evidence for models in accordence with the principle of consistence of prescription and syndrome Rats model were fed with highlipid and lowprotein fodder of different proportion and induced by intraperitoneal injection with pig serum，intragastric administration with edible alcohol once a day for 7 days Daily record of body weight，daily food intake and daily water intake were conducted day after day in experimental session Symptoms were also observed and evaluated by score at the same time The contents of ALT，AST，PA，TBIL and TBA in serum were detected and histopathological changes of liver were checked at the ending of experiment Obvious acute liver injury occurred to all rats in model groups at 1 week following model induction Both main symptoms and secondary symptoms were consistent with syndrome manifestation of liver depression and spleen deficiency Compared with normal control group，the activity of ALT，AST and contents of TBIL，TBA in serum increased and the content of PA decreased Liver tissue pathological morphology showed inflammatory cells infiltration，eosinophilic or eosinophilic adipose change in hepatocytes of rats in model groups All the above lesions manifestation could be improved by drug counterevidence By the disproof of medicine，rat models of acute liver injury with syndrome of liver depression and spleen deficiency could be induced by fed with highlipid and lowprotein fodder which contained 895% cornstarch，10% lard and 05% cholesterol，intraperitoneal injected with pig serum，intragastric administrated with edible alcohol for 7 days The rat models with a low mortality could be induced in a short time and animal status were similar to syndrome performance of patients So the rats models are suitable for the activity found，efficacy evaluation and drug discovery of herbs resistant to acute liver injury with syndrome of liver depression and spleen deficiency，and also can be used in the research of correlation between prescription and syndrome and its mechanism[Key words]acute liver injury；liver depression and spleen deficiency；combination of disease and syndrome；rat；animal modeldoi：10.4268/cjcmm20162318急性肝损伤主要是由病毒感染、药物服用不当、过量饮酒、高脂饮食因素造成的急性肝功能异常为代表的疾病。

急性酒精性肝损伤小鼠模型及早期诊断指标GSTA1的研究刘芳萍;马欣;赵常伟;常轶聪;蔺月霞;李敏敏;刘颖姝;周琼;李植【摘要】为研究谷胱甘肽S转移酶A1(GSTA1)在肝损伤早期诊断中的价值,本试验通过检测血清谷丙转氨酶(GPT)及肝组织指标丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)变化,成功复制急性酒精性肝损伤小鼠模型;通过时间-效应和剂量-效应关系研究血清中GSTA1和ALT变化.结果显示,给予小鼠灌服乙醇溶液后,2h血清中GSTA1含量变化与对照组相比差异极显著(P＜0.01),而ALT活性变化在6h才显示出一定的差异性(P＜0.05);当乙醇剂量为10 mL/kg体重时,血清中GSTA1含量变化与对照组相比差异极显著(P＜0.01),而当乙醇剂量达到14 mL/kg体重时,ALT活性变化与对照组相比差异极显著(P＜0.01).表明在急性酒精性肝损伤模型中,GSTA1的含量变化在肝损伤早期就可检测出来,作为肝损伤标记物,GSTA1比ALT更敏感.【期刊名称】《中国兽医杂志》【年(卷),期】2015(051)007【总页数】3页(P86-88)【关键词】GSTA1;急性酒精性肝损伤;动物模型;早期诊断指标【作者】刘芳萍;马欣;赵常伟;常轶聪;蔺月霞;李敏敏;刘颖姝;周琼;李植【作者单位】东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨150030;东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨150030;东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨150030;东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨150030;东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨150030;东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨150030;东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨150030;东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨150030;东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨150030【正文语种】中文【中图分类】S865.1+3研究表明，急性酒精性肝损伤的发病机制与其代谢产物引起的肝脏氧化应激[1]及肝细胞凋亡[2]密切相关。

肝损伤动物模型的研究进展肝损伤是指肝脏组织受到破坏、细胞受损或炎症反应，导致肝功能下降的一种疾病。

肝损伤的原因包括感染、药物、酒精、营养不良、免疫方面等多种因素。

为了深刻了解肝损伤的病理机制及治疗方法，需要建立一些肝损伤动物模型进行实验研究。

下面就肝损伤动物模型的研究进展进行详细介绍。

1. 感染模型病毒感染是引起肝损伤的一种常见原因，因此，通过感染肝炎病毒来建立肝损伤模型是一种常用的方法。

例如，可以通过注射乙型肝炎病毒(HBV)来建立乙型肝炎肝损伤模型，通过给小鼠、大鼠等注射包涵体携带丙型肝炎病毒(HCV)进行感染，然后检测其肝脏的生化指标(如血清谷草转氨酶、血清谷丙转氨酶等)和炎症指标(如肝脏组织病理学变化)，以评估感染的效果。

2. 药物模型药物毒性是另一种常见的肝损伤原因。

目前已经有很多药物(包括解热镇痛药、抗生素、抗肿瘤药物等)被证实可以引起肝损伤。

例如，可以通过使用大剂量的对乙酰氨基酚、氨唑啉、甲氨蝶呤等药物来诱导小鼠或大鼠的肝损伤模型。

具体操作方法是先按一定剂量注射这些药物，然后等待一定时间，再取出其肝脏进行检测，以评估药物对肝脏的损伤效果。

3. 酒精模型酒精也是亲肝毒素之一，长期饮酒会导致肝损伤。

通过让实验动物长期接触高浓度的酒精来建立酒精肝模型。

具体操作方法是将酒精加入动物饮水或食物中，在一定时间内持续暴露，然后取出肝脏进行检测。

目前已经有很多酒精肝模型，如可接受的饮水酒精模型、高脂饮食酒精模型等。

4. 荷尔蒙模型荷尔蒙也可以影响肝脏的健康，例如内分泌失调、怀孕等因素都可能导致肝损伤。

通过控制荷尔蒙水平来建立荷尔蒙肝损伤模型。

例如，可以在大鼠身上通过手术移除或移植卵巢来模拟荷尔蒙失调的状况。

综上所述，建立肝损伤动物模型是深入探究肝损伤病理机制、寻求有效治疗方法的重要手段。

不同的肝损伤模型有其独特的实验思路和方法，可以根据不同的需要选择合适的模型进行研究。

肝损伤动物模型的造模方法
1. 化学物质诱导，这是最常用的方法之一，可以使用一些化学
物质如四氯化碳（CCl4）、醋酸乙酯（TAA）、二甲基硫醚（DME）
等来诱导肝损伤。

这些化学物质可以通过不同的途径进入动物体内，导致肝细胞损伤和肝功能异常。

2. 手术诱导，通过手术方法，可以直接对动物的肝脏进行切割、缺血再灌注等操作，从而引起肝损伤。

这种方法可以控制损伤的程
度和范围，适用于研究特定类型的肝损伤模型。

3. 遗传工程模型，利用转基因技术或基因编辑技术，可以构建
特定基因缺陷的动物模型，如肝细胞特异性基因敲除或过表达，从
而模拟特定的肝损伤情况。

4. 营养学诱导，通过控制动物的饮食，可以诱导脂肪肝、酒精
性肝病等肝损伤模型。

例如，高脂饮食可以导致脂肪肝，酒精饮食
可以导致酒精性肝病。

5. 辐射诱导，辐射也可以用来诱导肝损伤，如通过X射线或其
他辐射源对动物的肝脏进行照射，引起肝细胞的损伤和炎症反应。

总的来说，选择合适的肝损伤模型方法需要考虑研究的具体目的、动物种类、研究经费和实验条件等因素，并且在进行实验时需要严格控制实验条件，确保模型的可靠性和稳定性。

同时，也要遵守动物实验伦理规范，保障动物的福利和权益。

急性肝损伤试验实验报告实验目的：本实验旨在评估某种药物或化合物对小鼠急性肝损伤的影响，通过测定血清中的肝酶水平、肝脏组织学变化以及相关分子标志物的表达，以确定该药物或化合物的潜在肝毒性。

实验材料：- 健康成年小鼠（C57BL/6J，雄性，体重20-25g）- 待测试药物或化合物- 生化试剂盒（ALT、AST、ALP、总胆红素等）- 组织固定液（10%福尔马林）- 苏木精-伊红（H&E）染色试剂- 实验用仪器（离心机、显微镜、电子天平等）实验方法：1. 小鼠随机分为对照组和实验组，每组10只。

2. 对照组给予等体积的生理盐水，实验组给予一定剂量的药物或化合物。

3. 给药后24小时，收集小鼠血液样本，分离血清。

4. 使用生化试剂盒测定血清中的ALT、AST、ALP和总胆红素水平。

5. 处死小鼠，取出肝脏组织，固定后进行H&E染色。

6. 观察肝脏组织学变化，记录炎症、坏死等病理特征。

7. 通过免疫组化或Western blot方法检测肝脏组织中相关分子标志物的表达。

实验结果：1. 血清生化指标：实验组小鼠血清中的ALT、AST、ALP和总胆红素水平均显著高于对照组（P<0.05），表明药物或化合物可能引起急性肝损伤。

2. 组织学观察：实验组小鼠肝脏组织出现明显的炎症细胞浸润、肝细胞坏死和纤维化，而对照组肝脏组织结构正常。

3. 分子标志物表达：实验组肝脏组织中炎症因子（如TNF-α、IL-6）和细胞凋亡相关蛋白（如Bax、Caspase-3）的表达水平显著升高，而对照组表达水平较低。

讨论：根据实验结果，药物或化合物在给药后能显著升高血清中的肝酶水平，导致肝脏组织学损伤，并激活炎症反应和细胞凋亡途径。

这些结果提示该药物或化合物具有潜在的肝毒性，需要进一步研究其作用机制和安全性。

结论：本实验表明，所测试的药物或化合物在一定剂量下能引起小鼠急性肝损伤，表现为血清生化指标异常、肝脏组织学损伤和分子标志物表达改变。

一、实验目的本研究旨在探讨四氯化碳（CCl4）诱导的大鼠急性肝损伤模型，并观察联苯双酯（DDB）对肝损伤的保护作用，为临床治疗肝损伤提供理论依据。

二、实验材料1. 实验动物：6-8周龄雄性SD大鼠，体重200-250g，由广东医学院动物实验中心提供。

2. 药品与试剂：四氯化碳（CCl4）、联苯双酯（DDB）、生理盐水、丙氨酸转氨酶（ALT）、天门冬氨酸转氨酶（AST）试剂盒等。

3. 仪器：高速离心机、显微镜、病理切片机等。

三、实验方法1. 分组：将24只大鼠随机分为3组，每组8只：正常对照组、肝损伤模型组（简称模型组）、DDB治疗组（简称DDB组）。

2. 模型制备：模型组和DDB组大鼠采用腹腔注射CCl4（0.3ml/100g体重）制备急性肝损伤模型，正常对照组大鼠注射等体积的生理盐水。

3. 干预：DDB组大鼠在注射CCl4后，每天给予联苯双酯滴丸（5mg/kg体重）灌胃，连续14天；模型组和正常对照组大鼠给予等体积的生理盐水灌胃。

4. 样本采集：实验结束后，各组大鼠空腹12小时，采集血液，检测血清ALT、AST水平；取肝脏组织，进行病理切片观察。

5. 数据处理：采用SPSS 20.0软件进行统计分析，数据以均值±标准差表示，组间比较采用单因素方差分析。

四、实验结果1. 血清ALT、AST水平：DDB组血清ALT、AST水平较模型组明显降低（P<0.001），与正常对照组相比，DDB组血清ALT、AST水平无显著差异。

2. 肝脏病理学观察：DDB组大鼠肝组织切片中肝细胞脂肪变性、炎细胞浸润均较模型组明显减轻，且肝组织中无明显纤维增生。

五、讨论本研究采用CCl4诱导的大鼠急性肝损伤模型，成功复制了急性肝损伤病理过程。

联苯双酯作为一种肝保护药物，能够显著降低血清ALT、AST水平，减轻肝脏病理损伤。

1. CCl4诱导的大鼠急性肝损伤模型：CCl4作为一种亲肝的细胞毒性物质，能迅速被肝和脑吸收，通过自由基形成及引发的链式过氧化反应，损伤细胞膜、内质网膜等，导致肝细胞死亡。

小鼠急性酒精性肝损伤模型的制备及观察林晓晖;黄玲;王一铮;刘如玉【摘要】Objective:To establish an alcohol-induced acute liver injury model in mice and to dynamically monitor the changes of biochemical indexes in serum and liver. Methods :Eighty ICR mice were randomly divided into eight groups, four control groups and four model groups. The model groups were given 52%(V/V)alcohol with 12ml·kg-1d-1 by gastric perfusion while the control groups were given distilled water. At 2, 4, 6, 8 days after administration, a model group and a control group were respectively sacrificed to take serum samples for measurements of ALT and TG levels, and liver samples for measurements of liver index, TG, SOD and MDA levels. Results:After treating for 6 days, serum ALT and TG levels were significantly increased(P<0.01), and liver index, TG and MDA level in liver tissue were increased significantly(P<0.01), whereas SOD level in liver tissue decreased significantly(P<0.01). Conclusion :A mice model of alcohol-induced acute liver injury has been successfully established, which is stable and can be used for studying the mechanism of drug protectionin alcoholic liver disease.%目的：建立小鼠酒精性肝损伤模型，并动态研究小鼠血清和肝脏的生化指标的变化。