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水杨酸浸种对低温下白三叶种子萌发及幼苗生长的影响作者：武季玲陈桂平来源：《草原与草坪》2013年第05期摘要：以白三叶种子为材料，研究外源水杨酸（SA）不同浓度，不同浸种时间处理对低温下种子萌发和幼苗生长的影响。
结果表明，随水杨酸浓度的增加，种子发芽率、发芽势、发芽指数和活力指数均呈现先上升后降低的变化趋势；幼苗株高、根长，鲜重、干重和叶绿素含量的变化相同，也是先上升后降低，其中，以SA浓度为0.02 mmol/L，浸种12 h处理效果最好，较高浓度SA>0.1 mmol/L对白三叶种子萌发及幼苗生长均产生抑制作用。
关键词：白三叶；水杨酸；低温胁迫；种子萌发；幼苗中图分类号：S 330.2 文献标识码：A 文章编号：1009-5500（2013）03-0053-04收稿日期：2013-06-10；修回日期：2013-08-31作者简介：武季玲（1972-），女，河南西平人，副教授，博士，主要从事植物生理学及组织培养方面的教学及研究工作。
E-mail：wujl@白三叶（Trifolium repens），又名白车轴草，属豆科白三叶草属多年生草本植物，在我国西南、新疆都有野生分布，在温带及亚热带高海拔地区也有生长[1]。
白三叶寿命长，适应性广，生长快，草丛浓厚，具根瘤，有改土肥田作用。
在坡地、堤坝及公路种植，对防止水土流失，减少尘埃均具有良好的作用。
另外，由于白三叶低矮，抗逆性强，叶色花色美丽，也是近年来广泛应用的绿化美化物种之一[2]。
种子是植物生活史中新生命开始的幼小植物体，种子萌发和幼苗的建成是植物生长的关键时期[3]。
植物种子萌发期和出苗期是其生活史各环节中抗逆性最薄弱的一环，对温度变化较为敏感[4]，低温是影响种子萌发和幼苗成长的主要因素之一[5-8]。
水杨酸（SA），即邻羟基苯甲酸，是一种小分子酚类物质，广泛存在于高等植物体内。
水杨酸被认为是一种具有促进种子发芽、调节植物生长发育、诱导植物抗病、抗逆境胁迫等多种生理作用的物质，近年来有关水杨酸提高植物抗逆性的试验很多[9-12]。
王晓琳，邬 稢，黄洁雪，等．四霉素与丙硫菌唑复配对草莓炭疽病菌的增效作用［Ｊ］．江苏农业科学，２０２１，４９（１０）：９１－９５．ｄｏｉ：１０．１５８８９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２－１３０２．２０２１．１０．０１７四霉素与丙硫菌唑复配对草莓炭疽病菌的增效作用王晓琳１，邬 稢２，黄洁雪１，吉沐祥１（１．江苏丘陵地区镇江农业科学研究所，江苏句容２１２４００；２．镇江万山红遍农业园，江苏句容２１２４００） 摘要：在实验室条件下，以草莓炭疽病菌（Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍｇｌｏｅｏｓｐｏｒｉｏｉｄｅｓ）为供试菌，采用菌丝生长速率法，测定了吡唑醚菌酯、四霉素、丙硫菌唑、氟吡菌酰胺和吡噻菌胺对草莓炭疽病菌的毒力。
结果表明，丙硫菌唑对草莓炭疽病菌抑制中浓度最低，ＥＣ５０仅为０．０３６６μｇ／ｍＬ，其次是四霉素，ＥＣ５０为０．２９７５μｇ／ｍＬ，吡噻菌胺抑制中浓度最高，其ＥＣ５０为１．８１８８μｇ／ｍＬ。
在离体条件下开展四霉素与丙硫菌唑配比筛选试验，结果表明，当四霉素与丙硫菌唑的质量比为１∶１５时，ＥＣ５０仅为０．０２２４μｇ／ｍＬ，增效系数（ＳＲ）值为１．７３，确定四霉素与丙硫菌唑防治草莓炭疽病菌的最佳比例为１∶１５。
关键词：四霉素；丙硫菌唑；草莓炭疽病菌；复配；增效作用 中图分类号：Ｓ４３６．６８＋４ 文献标志码：Ａ 文章编号：１００２－１３０２（２０２１）１０－００９１－０５收稿日期：２０２０－１１－１１基金项目：江苏省镇江市重点研发计划（编号：ＮＹ２０１９００２）；江苏省句容市农业科技支撑计划（编号：ＮＹ２０１９４４１０３２）。
作者简介：王晓琳（１９８６—），女，辽宁营口人，硕士，助理研究员，主要从事草莓病害防治研究。
Ｅ－ｍａｉｌ：ｍｏｒｅｔｈａｎ３６５＠１２６．ｃｏｍ。
通信作者：吉沐祥，研究员，主要从事应时鲜果病虫害防治研究。
Ｅ－ｍａｉｌ：ｊｉｌｖｄｕｎ２８００＠１６３．ｃｏｍ。
草莓是江苏省大面积栽培的特色经济作物之一，全省种植面积达２万ｈｍ２，主要分布在苏南的句容市、溧水县、宜兴市，以及苏北地区的东海市、铜山区、贾旺区、如皋市、海门市、沭阳县等地区，其中设施草莓面积超过９０％，年产量超过４．０万ｔ。
草莓叶绿素降解基因是指参与草莓叶绿素分解代谢的基因。
叶绿素是植物中的关键色素，参与光合作用过程中的光能吸收和传递。
然而，在草莓成熟过程中，叶绿素的降解是一个重要的生理过程，它使得草莓呈现出从绿色到红色的颜色变化。
以下是一些已知的参与草莓叶绿素降解的基因：1. SGR（Stay Green）基因家族：SGR基因家族编码的蛋白质参与调控叶绿素降解过程，促进叶绿素分解和叶绿素降解产物的转运和回收。
2. NYC1（Non-yellow Coloring 1）基因：NYC1基因编码的酶参与草莓中的羧化酶活性，被认为是草莓成熟过程中叶绿素降解的关键基因之一。
3. PaO（Pheophorbide a Oxygenase）基因：PaO基因编码的酶在叶绿素降解的过程中将叶绿素转化为氧化叶绿素，进一步促进叶绿素降解。
这些基因的表达和调控受到多种因素的影响，如植物内部因子和外部环境条件。
研究这些基因可以帮助我们更好地理解草莓成熟过程中叶绿素降解的分子机制，以及如何控制和调节草莓颜色的变化。
除了上述提到的SGR、NYC1和PaO基因外，还有其他一些已知参与草莓叶绿素降解的基因，包括但不限于：1. RCCR（Red Chlorophyll Catabolite Reductase）基因：RCCR基因编码的酶参与将氧化叶绿素还原为叶绿素衍生物，进一步促进叶绿素降解过程。
2. PAO（Phytoene desaturase-like）基因：PAO基因编码的酶参与叶绿素的脱氧步骤，将氧化叶绿素转化为非发光的产品，进一步推动叶绿素代谢。
3. NYC3（Non-yellow Coloring 3）基因：NYC3基因编码的蛋白质具有类似于NYC1基因的功能，参与调控叶绿素降解过程。
4. CLH（Chlorophyllase）基因：CLH基因编码的酶参与叶绿素降解的起始步骤，在叶绿素分子中断键，引发降解过程。
这些基因的功能和调控机制复杂多样，通过相互作用和调控网络来调节叶绿素的降解过程。
草莓细菌叶斑病病原鉴定植物保护学现代农业科技2011年第23期草莓细菌叶斑病病原鉴定米楠(山西省阳泉市园林管理局,山两阳泉045000)摘要采用形态观察,生理生化特性测试等传统的细茵鉴定方法和16SrDNA碱基序列测定等现代的细茵鉴定方法鉴定草莓细茵叶斑病茵株.结果表明:该菌株可利用的碳源有葡萄糖,乳糖,麦芽糖,蔗糖,D一海藻糖,淀粉,甘露醇,肌醇,L一缬氨酸,L一精氨酸.硝酸盐还原试验为阳性,淀粉水解阴性,明胶水解阴性,油脂水解阴性,精氨酸双水解酶阳性,接触酶阳性;鉴定该茵株为草莓黄单孢茵(Xanthomonasfragariae).关键词草莓细菌叶斑病;病原;鉴定;分离;纯化;黄单孢茵中图分类号s436.639;$668.4文献标识码A文章编号1007—5739(20l1)23～0220—02BacterialPathogenIdentificationofLeafSpotonStrawberryMINan(~angquanLandscapeBureauofShanxiProvince,Y angquanShanxi045000) AbstractTraditionalbacterialidentificationmeasuresbyappearanceobservationandphysio logybio-chemicaltestsandthemogdernbacterialidentificationmeasuresby16SrDNAtechniquewereusedtoidentifythebacterialpathogeno fleafspotonstrawberry.Theresultsshowedthatthestraincoulduseglucose,lactose,maltose,sucrose,D-Trehalose,starch,mannitol,inositol,L-V alin eandL-Proline.Thestrainwaspositivefornitratereduction, argininecihydrolaseandoxidasereaction,butnegativeforfathydrolysis,starchhydrolysisa ndgelatinhydrolysis.Atlast,thestrainwasidentifiedasXanthomonasfiagariae.Keywordsbacterialleafspotofstrawberry;pathogen;identification;isolating;purifying;Xa nthomonasfrag~iae草莓在植物分类学上属于蔷薇科草莓属,为多年生草本植物,是世界各国普遍栽培的一种浆果类果树Il_.草莓有"果中皇后"之称,营养物质较为丰富囝.在中国,草莓的种植面积很广泛,但每年各种病害的发生对草莓产量与质量造成很大影响,挫伤了草莓种植户的积极性.在草莓发生的各种病害中,最常见的一种综合性叶部病害是草莓叶斑病,也可侵染果梗,叶柄,匍匐茎和浆果,使草莓丧失商品价值13].草莓叶斑病是草莓叶部病害的总称,主要有草莓叶枯病,"V"型褐斑病(褐色轮斑病),草莓蛇眼病等.在众多草莓叶斑病中,快速有效地鉴定出病原菌,是研究草莓叶斑病的重要工作.研究鉴定草莓细菌叶斑病病原具有重要的意义.细菌分类鉴定有传统的经典方法和现代的DNA方法[41.该试验结合了鉴定的传统方法和现代方法,使试验结果更准确.传统的经典方法主要包括形态特征(个体特征和菌落特征),生理生化特征和生长特征等.常用的形态学特征包括细胞形态及其染色特性,特殊的细胞结构,运动性,菌落形态,大小,颜色等.其均可作为微生物分类和鉴定的重要依据.现代的方法往往是单一的鉴定方法,该种方法对供试细菌的某一特性有特别的鉴别作用,因此该种方法更为准确和快速,主要有血清学试验,氨基酸序列和蛋白质分析,核酸分子杂交,聚合酶链式反应(polymerase chainreactionPCR)技术,细菌快速鉴定和自动化分析技术等【.1材料与方法1.1试验材料1.1.1供试菌种.Xan一4菌株,来自笔者所在实验室种植的草莓植株,在叶片和花萼上有斑点病,用组织分离法分离和作者简介米楠(1975一),男,山西阳泉人,工程师,从事园林绿化施工与管理工作.收稿日期2011-10—21纯化病原菌,得到了Xan一4菌株.1.1.2供试培养基.PDA培养基,LB培养基,基础培养基,硝酸盐还原培养基,淀粉培养基,油脂培养基,明胶液化培养基,精氨酸双水解酶培养基.1.1.3试验试剂.3端引物和5引物,4种dNTP贮存液,TaqDNA聚合酶和缓冲液;结晶紫染液;格里斯亚硝酸试剂甲液,乙液,卢哥氏碘液,0.6%中性红水溶液,5%过氧化氢水溶液,0.1%酚红水溶液,1.1.4其他用品.PCR仪,无菌1.5IxLEppendoff离心管,微量取样器,电泳仪,水平电泳槽;冷冻台式离心机,摇床,1000加样枪,超净工作台,灭菌锅,三角瓶,培养皿,试管,量简,天平,镊子,接种环,酒精灯,恒温培养箱,显微镜,载玻片,盖玻片,琼脂糖凝胶电泳系统,香柏油,二甲苯,擦镜纸,生理盐水,蒸馏水.1.2试验方法1.2.116SrDNA技术.16SrDNA技术主要是基于DNA序列特征的鉴定方法.菌落PCR:①制作PCR反应体系;②用PCR仪进行目标DNA体外扩增;③产物鉴定;④测序.把扩增产物送到专门机构测序.并做出鉴定.1.2.2形态观察.①菌落特征的观察.观察菌落特征,包括菌落大小,颜色,形状,高度,有无水溶性色素,是否湿润或干燥,光泽,透明度,边缘状况等.②个体特征的观察.细菌个体微小,且较透明,必须借助染色法使细菌着色,以显示出细菌的一般形态结构及特殊结构,在显微镜下用油镜进行观察.基本过程为:涂片,干燥,固定,染色,冲洗,吸干,观察.1.2.3生理生化测试.试验主要做Xan一4菌株对含碳化合物的利用情况,对生物大分子的水解试验(淀粉水解试验, 油脂水解试验,明胶水解试验)[61,微生物呼吸作用试验(接触酶试验,硝酸盐还原试验),还有精氨酸双水解酶试验91.米楠:草莓细菌叶斑病病原鉴定2结果与分析2.116SrDNA测试由图1可知,测序结果显示,该菌是是黄单孢杆菌(0- nthomonasfiagariae).电泳检测结果显示PCR产物为1.4kb, 与预期的产物大小相一致.ooobp750bp50obp750bp50Obp250bp图1Xan--416SrDNAPCR产物在凝胶成像仪上的检测情况注:M为marker;Xan为Xan--416srDANPCR产物.2.2形态观察对菌落进行形态观察,结果表明,菌落直径3toni,浅黄色,圆形,边缘整齐,低凸,表面干燥,有光泽,无水溶性色素.个体形态观察表明,油镜下可见个体形态为长杆状(图2),为革兰氏阴性菌.精氨酸双水解酶试验,氧化酶试验,接触酶试验,明胶液化试验,油脂水解试验,硝酸盐试验和20 种碳源的利用情况等生理生化测试结果见表1.根据表1中的生理生化试验结果,结合16SrDNA序列比对分析.该草莓细菌叶斑病病原鉴定为XantholllDn418fragariae.3结论与讨论生理生化鉴定结果表明,该菌株可利用的碳源有葡萄糖,乳糖,麦芽糖,蔗糖,D一海藻糖,淀粉,甘露醇,肌醇,L一缬氨酸,L-精氨酸.硝酸盐还原试验为阳性,淀粉水解阴性,明胶水解阴性,油脂水解阴性,精氨酸水解阳性,接触酶阳性.经过形态观察和生理生化鉴定以及16SrDNA鉴定.初步确定该菌株为草莓黄单孢菌(Xanthomonasfiagar/ae).这为以图2Xan--4菌株菌落个体形态表1Xan--4菌株生理生化特性特性结果特性结果精氨酸双水解酶+油脂水解一接触酶+淀粉水解一明胶液化一硝酸盐还原+葡萄糖+D一海藻糖+乳糖+可溶性淀粉+蔗糖+甘露醇+麦芽糖+肌醇+L_缬氨酸+I,-精氨酸+后草莓病害工作者对该病原物生物学研究和致病机理的研究奠定基础.4参考文献【1】朱飞,黄红英.粤北地区引种丰香草莓常见病虫害及防治对策【J].韶关学院:自然科学版,2002,23(12):96.【2】任小杰,梁艳,陆金萍,等.上海地区草莓炭疽病病原鉴定【J】.植物病理,2008,38(3):325—328.【3】李莉,杨雷,孙立神,等.不同草莓品种(系)对叶斑病田间抗性鉴定『J1.河北农业科学,2007,儿(1):32—33.【4】肖明.王雨净.微生物学实验【M】.北京:科学出版社,2008:82—83. 【5】魏海雷.GaeS/GacA双因子调控系统和群体感应系统在生防荧光假单孢杆菌2P24中的作用【D】.北京:中国农业大学,2004.【6]赵斌,何绍江.微生物学实验【M】.北京:科学出版社,2002:151-153. 【7]钱存柔,黄仪秀.微生物学实验教程【M].北京:北京大学出版社, 2008:23.【8】东秀珠,蔡妙英.常见细菌系统鉴定手册【M】.北京:科学出版社.2oo1:381.【9】9袁英泽,尚丽,刘丽,等.非发酵菌群细菌精氨酸双水解实验蜡封与不蜡封结果分析咖.河北医药,2009,31(18):2492.(上接第219页)点,处理B3,处理B4的成秧率较高,均达到100.0%,同时2个处理对根数的影响也较好.2.3安全性调查在荷花村试验点调查,处理区秧苗有矮化,叶色微黄等现象.而双龙村试验点调查未见此现象发生.3结论与讨论试验结果表明,移栽灵混剂对预防水稻苗期立枯病确实有较好的防治效果,其最佳的防效与枯必清相同.中性土壤用量以移栽灵混剂A,B剂各1.0mL/m为好,盐碱土壤用量以移栽灵混剂A,B剂各3.0mL/m2为好.移栽灵混剂在盐碱土壤上对水稻成秧率的提高效果显着,A,B剂各3.0mldm2的处理可使成秧率达100.O%,同时,干物重也达到了3.0g~5o株(全株).水稻育苗应用移栽灵混剂时,不用调酸即可促进水稻根系发育,培育壮秧,可有效地防治立枯病的发生.移栽灵混剂是一项育秧技术安全,操作简便,效果显着的新技术,有很大的推广应用前景,建议在生产中进行示范推广及应用嘲.4参考文献[1】杨春,吕宝航,徐福贵,等.移栽灵混剂防治水稻立枯病试验报告叨.垦殖与稻作.2006(3):53—54.[2】2付秀林,张强."移栽灵混剂"对水稻立枯病的防治效果研究[J].农业与技术,1997(6):1-3.【3]白莲香,贾仁会.水稻旱育苗应用移栽灵混剂的效应叨.山西农业大学:自然科学版.1997,17(3):266—269.[4】刘浩官,宋宝京.移栽灵混防治旱育秧立枯病和提高秧苗素质的研究叨.福建农业科技,1997(6):2—3.【5】刘喜珍,张令军.移栽灵混剂对水稻秧苗素质的影PNJ].北京农业科学,1997,15(1):25—26.[6]朱明路.移栽灵混剂在早稻旱床育秧上的使用效果初探忉.江西农业科技,1998(1):35—36.221。
安徽农学通报2023年12期经济作物作者简介赵栗（1992—），女，硕士，助教。
研究方向：灌溉排水与节水灌溉。
收稿日期2023-02-17水杨酸对棉花种子萌发期和幼苗期根系生长的影响赵栗1，2（1烟台科技学院智能工程学院，山东烟台265600；2塔里木大学，现代农业工程重点实验室，新疆阿拉尔843300）摘要为探究外源水杨酸（SA ）对棉花萌发期和幼苗期生长的影响，量化不同浓度SA 对棉花萌发期和幼苗期根系生长的调控作用，以“新陆早27号”棉种为试材，以不施SA 为对照（CK ），设置0.01、0.05、0.10mmol/L 3个SA 浓度处理，在萌发期和幼苗期分别采用萌发袋试验和土柱试验方法进行了试验。
结果表明，在萌发期施加SA 可促进棉花种子萌发，低浓度SA 可显著增加总根长、根系总表面积和根系体积；施加SA 可增加地下部生物量累积，从而增加根冠比。
在苗期施加SA 对棉花总根长、根系总表面积和根系体积均无明显影响，高浓度SA 存在抑制棉花幼根生长的风险。
关键词棉花；水杨酸；根系生长；生物量中图分类号S562文献标识号A文章编号1007-7731（2023）12-0055-05中国是全球第二大原棉生产国，棉花是仅次于粮食的大宗农产品。
随着纺织业的飞速发展，对高品质原棉的需求也随之增加[1-2]。
棉种萌发和幼苗生长是棉花生长的2个关键生长阶段。
在棉种萌发期，胚根是第一个与土壤接触的器官，对外界环境的刺激比较敏感，其生长发育状况决定着棉种的发芽状况。
在棉花幼苗期，真叶未完全伸展，光合作用微弱，幼苗主要依靠根系吸收并输送土壤中的水分和营养维持生长[3]。
因此，胚根及幼苗根系的发育状况不仅影响茎叶的生长，还决定着水分利用和养分供应效率[4]，进而影响中后期棉花植株的生长发育及棉花的产量和品质[5]。
当前，化学调控在农业生产中已得到了广泛应用。
通过外施植物生长调节剂，可改变植物的内源激素，从而调节植物的生长发育[6]。
喷施水杨酸对野生大豆草甘膦耐性的影响王宇;王艳丽;李晓明;褚佳豪;司增志;乔亚科;张锴【期刊名称】《核农学报》【年(卷),期】2024(38)7【摘要】为进一步提高前期筛选到的高耐草甘膦野生大豆材料的抗性,本研究以喷施清水为对照,先后对野生大豆材料进行外源喷施水杨酸(SA)和草甘膦处理,测定过氧化氢(H_(2)O_(2))、超氧阴离子(O_(2)^(-))、莽草酸含量、脂质过氧化水平(丙二醛含量)、叶绿素含量、抗氧化酶活性及5-稀醇式丙酮-莽草酸-3-磷酸合成酶(EPSPS)基因表达等指标。
结果表明,与仅喷施草甘膦阳性对照相比,喷施0.5 mmol·L^(-1) SA的2个野生大豆材料H_(2)O_(2)、O_(2)^(-)、莽草酸和丙二醛含量在草甘膦处理后整体显著降低,叶绿素含量、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)活性整体显著升高,EPSPS基因表达整体显著上调。
上述结果表明,外源喷施SA可提高野生大豆植株过氧化物清除酶活性,进一步提高植株对草甘膦的耐性水平。
本研究为提高栽培大豆草甘膦耐性,降低草甘膦对大豆植株损伤提供了参考。
【总页数】8页(P1408-1415)【作者】王宇;王艳丽;李晓明;褚佳豪;司增志;乔亚科;张锴【作者单位】河北科技师范学院园艺科技学院;河北科技师范学院农学与生物科技学院【正文语种】中文【中图分类】S51【相关文献】1.喷施草甘膦对抗草甘膦油菜糖氮积累的影响2.喷施草甘膦对抗草甘膦油菜物质生产的影响3.不同时期喷施草甘膦对抗草甘膦转基因大豆生长和产量构成的影响4.第二复叶期喷施草甘膦对抗草甘膦大豆生理指标及产量构成的影响5.冀东野生大豆对草甘膦的耐性鉴定及耐性机制初步研究因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
本科毕业论文（设计）文献综述水杨酸和茉莉酸在植物两种防御反应中的作用摘要SAR与ISR是植物响应病原物侵染的主要途径，在植物抵抗生物胁迫上发挥了重要作用。
本文就现有研究成果介绍了SAR与ISR作用中关键的生物因子，以及生物因子间互相的作用，从而阐述了SA介导SAR作用与JA介导ISR作用的机理，并提出了相关研究的发展方向。
关键词: 系统获得抗性、诱导系统抗性、水杨酸、茉莉酸The Fountion of Salicylic Acid and Jasmonic Acid in Two PlantResistance ResponseAbstractSAR and ISR is the main way that plants respond to pathogen infection and play an important role in plant resistance to biotic stress. This paper describes the key biological factors in SAR and ISR and the action of biological factors between each other using the results of existing studies, which describes the mechanism ofSA-mediated SAR and JA-mediated ISR. This paper also proposed the development of related research direction.Key words Systemic acqui redresistance, Induced systemic resistance, Salicylic acid, Jasmonic acid植物与病虫害之间的关系是植物信号传递及相互关系研究领域中的一个热点。
园 艺 学 报 2014，41（1）：53–62 http: // www. ahs. ac. cn Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao@126.com
收稿日期：2013–07–16；修回日期：2013–12–11 基金项目：上海市科技兴农重点技攻关项目[（2012）第1–3号]；上海市科委现代农业领域重点科技攻关项目（12391901400）；农业部公益性行业（农业）科研专项（201003064-5） * 通信作者 Author for correspondence（E-mail：xnwangfei521@126.com，qhgao20338@sina.com）
水杨酸对草莓炭疽病响应基因FaNBS20表达的影响 张庆雨1,3，刘芳春3,4，段 可3，王 飞2,*，王延秀4，高清华3,* （1西北农林科技大学林学院，陕西杨凌 712100；2西北农林科技大学园艺学院，陕西杨凌 712100；3上海市农业科学院林木果树研究所，上海 201403；4甘肃农业大学农学院，兰州 730000）
摘 要：以栽培草莓（Fragaria × ananassa Duch.）‘久香’叶片为试材，采用同源克隆和RT-PCR方法，克隆FaNBS20全长cDNA序列，并利用实时荧光定量PCR技术检测外源SA处理协同草莓炭疽病病原菌侵染对FaNBS20表达的影响。结果表明，FaNBS20的开放阅读框为3 573 bp，编码1 190个氨基酸，预测的蛋白质分子量为134.5861 kD，含有1个TIR结构域、1个NB-ARC结构域和1个亮氨酸的富集区，与森林草莓（Fragaria vesca subsp. vesca）抗烟草花叶病毒蛋白（XP_004292718）同源性高达99%。接种草莓炭疽病菌对草莓抗炭疽病品种‘甜查理’FaNBS20的表达影响显著，易感病品种‘久香’FaNBS20的表达则一直处于较低水平，表明该基因可能与对炭疽病的抗性相关。两个草莓品种在SA处理后对草莓炭疽病的抗性均明显增强，且持续期可以达到10 d以上。在SA和草莓炭疽菌协同诱导下，FaNBS20基因的表达量在抗性品种‘甜查理’和易感品种‘久香’中分别达到接种前的38倍和7.2倍。以上结果表明，水杨酸能提高草莓对炭疽菌浸染的抗性，表达水平和炭疽病抗性水平相关的FaNBS20基因可能是水杨酸参与的对炭疽病抗性响应途径中一个重要的成员。 关键词：草莓；水杨酸；胶孢炭疽菌；克隆；表达分析 中图分类号：S 668.4 文献标志码：A 文章编号：0513-353X（2014）01-0053-10
Effects of Salicylic Acid on the Expression of FaNBS20 Gene Responsive to Colletotrichum gloeosporioides Infection in Fragaria × ananassa
ZHANG Qing-yu1,2,3，LIU Fang-chun3，DUAN Ke3，WANG Fei2,*，WANG Yan-xiu4，and GAO Qing-hua3,* （1College of Forestry，Northwest A & F University，Yangling，Shanxi 712100，China；2College of Horticulture，Northwest
A & F University，Yangling，Shaanxi 712100，China；3Forestry and Fruit Tree Research Institute，Shanghai Academy of
Agricultural Sciences，Shanghai 201403，China；4College of Agricultural Sciences，Gansu Agricultural University，Lanzhou
730000，China）
Abstract：A full-length cDNA of FaNBS20 was isolated by homologous cloning and RT-PCR from Fragaria × ananassa Duch.‘Jiuxiang’. Sequence analysis indicated that FaNBS20 holds a 3 573 bp open reading frame encoding 1 190 amino acids with an estimated molecular mass of 134.5861 kD.
Bioinformatics analysis revealed that FaNBS20 contains typical domains of TIR，NB-ARC，and LRR type. 54 园 艺 学 报 41卷 FaNBS20 shares a 99% sequence similarity with the TMV resistance protein（GenBank accession No. NC_020492）from Fragaria vesca subsp. vesca. Expression of FaNBS20 was obviously changed by the inoculation of Colletotrichum gloeosporioides，a causal agent of strawberry anthracnose. Opposite changes were observed in two cultivars with different susceptibility to anthracnose. In both the resistant variety ‘Sweet Charlie’and the susceptible‘Jiuxiang’，resistance to C. gloeosporioides infection was clearly improved by spraying salicylic acid and this enhancement lasted for more than 10 d. Following the combined treatment of SA and C. gloeosporioides，expression of FaNBS20 showed a 38-fold and 7.2-fold increase in‘Sweet Charlie’and‘Jiuxiang’，respectively. These results indicate that the expression of FaNBS20 may be positively correlated to strawberry resistance，and external SA can increase strawberry resistance to anthracnose，probably，through a signaling network with FaNBS20 as an important component. Key words：Fragaria × ananassa；salicylic acid；Colletotrichum gloeosporioides；cloning；expression analysis
由半知菌亚门炭疽菌属（Colletotrichum）3种炭疽菌引起的草莓炭疽病已成为草莓破坏性病害之一。充分挖掘抗病基因资源，利用分子标记辅助育种方法培育出抗病品种是防治炭疽病发生的最为经济且有效的途径。目前已从多种植物中克隆出许多抗病相关基因，其表达产物的氨基酸序列大多表现出高度保守性。NBS-LRR（Nucleotide binding site plus leucine-rich repeat）是成员最多、分布最广的抗病基因家族，大多数已鉴定的基因都包含1个核苷酸结合位点（NBS）和亮氨酸的富集区（LRRs）（Hulbert et al.，2001）。植物抗病基因的NBS区域被认为与传递信号有关（Tao et al.，2000）。NB-LRR蛋白功能涉及基础防御（Holt et al.，2005），在易感宿主上被致病病原体激活后，能限制病原体生长（Glazebrook，2005）。研究表明，NBS-LRR蛋白并不是仅仅由一些单独的功能单元构成，可能是由不同的共同进化的区域构成，如P-loop、亮氨酸重复，核苷酸结合基序及激酶结构域等；而且，信号感应和传导需要分子间的相互作用，进行病原菌的识别和信号转导。当植物细胞受到攻击时，植物激素也作为信号分子参与细胞的防卫反应（王友红 等，2005）。 水杨酸（Salicylic acid，SA）在植物体内具有多重生理作用，一方面可作为内源信号分子参与植物对病原菌及其它逆境胁迫作出的应答并进行信号传递；同时又可作为激发子（外源信号分子）来诱导植物的抗病反应。前人的研究表明水杨酸与病原体防御有关，在双子叶植物和单子叶植物中，外源SA和它的功能类似物可激活病程相关基因的表达，并对病毒、细菌和病原真菌的侵害产生抗性。在烟草和拟南芥中则相反，通过细菌水杨酸羟化酶的表达量阻碍SA的积累，使SA转化成邻苯二酚，HR（高度敏感细胞死亡反应）减退，SAR（系统获得性免疫）消失。同样，突变或者使用SA合成相关酶的抑制剂，植物对病原体的易感性增强，而抗病性可以通过外源SA恢复（An & Mou，2011）。 本文报道了草莓FaNBS20的cDNA全长序列以及草莓炭疽病病原菌侵染后其表达的变化，通过定量RT-PCR技术分析了SA和炭疽菌（C. gloeosporioides）协同诱导对FaNBS20基因表达的影响，以探寻FaNBS20基因在草莓对炭疽病防御反应中的作用。本研究结果有助于从分子水平上揭示草莓应答炭疽病病原菌侵染所启动的基因防御响应，对于解析草莓NBS-LRR基因的功能及其表现炭疽病抗性的分子调控机理具有一定参考意义。此外，对于信号转导中关键基因变化的研究有助于进一步了解病害所诱导的防御信号途径。
