高效液相色谱质谱联用仪的使用方法

LCMS-8040 简单操作流程版本：Version-LCMS001 1. 启动液质联用装置接通电源：确保质谱主机、液相色谱各单元和电脑已经接通电源（请务必确定电源的稳定和不会出现突然断电的情况！！），依次打开质谱主机、液相色谱各单元和电脑的电源开关（质谱主机电源键位于仪器背后的红色按钮，液相色谱各单元的电源开关位于各单元正面的左下方），此时，可观察到各单元的绿色指示灯依次亮起。

【注：若有某个单元的红色指示灯亮起，请及时联系岛津工程师进行处理】质谱主机的开启：1.1启动真空系统：1.1.1 电脑开机完毕后，请确认电脑右下方的相关图标为绿色。

【注：如果该图标为黄色，说明系统正在启动，请稍等片刻。

如果该图标为红色，表示有错误产生，请重启电脑。

】1.1.2. 双击电脑桌面上的图标，等待，直到出现下面的界面：1.1.3. 点击“OK”，启动分析程序。

在新出现的窗口中点击左侧的“Instrument”，再双击右侧的对应的仪器型号图标。

1.1.4. 然后点击新窗口的左侧按钮“Data Acquisition”，再点击“main”按钮，然后再点击窗口左侧最下方的按钮，此时，会出现“System Control”窗口：点击“Auto Startup”按钮，抽真空约10 分钟后可以开始进行分析实验。

此时，质谱主机上的“STATUS”指示灯亮起，为绿色。

如果需要得稳定测试结果，至少需要抽真空半天以上（最好抽真空过夜，16h以上）再进行测试。

1.1.5. 点击“Advanced”按钮，将CID GAS 右侧的“Open”按钮按下，以便打开碰撞气。

1.2日常开机：【该操作是针对日常使用中，已经启动了真空系统的状态下启动仪器进行分析实验的操作】1.2.1. 先接通液相色谱各单元的电源，开启液氮罐上的阀门和氩气钢瓶的总阀。

检查液氮罐和氩气钢瓶的气体输出压力【氮气减压阀表头压力读数在690-800kPa，氩气减压阀表头压力读数在500kPa，即如钢瓶的表头黑色记号笔标记所示】，确认无误后。

TSQ Quantum Ultra EMR液相色谱质谱联用仪操作规程一、开机1.打开质谱电源开关至ON状态，打开真空开关电源至ON状态；2.用放电针堵上离子传输毛细管；3.真空开关开启约一小时后，打开电子开关电源；4.打开数据处理系统，即打开计算机；5.计算机与仪器通讯正常后，双击桌面TSQ Tune图标，打开调谐界面，点击心形图标，选择Vacuum项，检查仪器真空状态，当真空度低于5×10-6Mpa时，进行参数的优化；6.质谱仪信号稳定以后，打开液相色谱泵、自动进样器开关；7.待各模块指示灯显示正常后，双击桌面Chomeleon图标,打开液相色谱软件。

二、化合物ESI/MS质谱条件优化1.在TSQ Tune软件中，打开优化界面；并开启扫描模式；2.连接管路，选择合适浓度待测化合物经注射泵注入质谱；3.设置扫描参数；4.调整离子源参数，使目标化合物达e6以上（负离子模式e5以上）；5.分别在MS Only、MS+MS/MS下进行优化；6.优化结束后, 选择Accept;并选择Save tune as 进行保存。

三、建立仪器方法打开TraceFinder软件，新建仪器方法，分别点击Chomeleon、TSQ Quantum按钮对液相色谱、质谱条件按标准进行设置。

四、样品序列建立及样品分析在TraceFinder系统主界面，选择Acquisition，进入界面后选择Setup,设置样品分析批顺序，点击运行。

五、定量数据处理1.在TraceFinder系统主界面，选择Method Development,新建Master Method 数据处理方法；2. 在TraceFinder系统主界面，选择Analysis,新建New Batch批添加数据文件；3.双击File name下的Unknown1，添加要处理的数据文件，设置样品类型、级别后，点击提交按钮。

六、报告生成点击Method View-Reports,选择报告类型，点击Report View查看报告七、关机1.在TSQ Tune界面，将质谱设置为待机Standby状态，关闭质谱软件；2.在Chomeleon界面，关闭液相流速，关闭液相色谱软件；3.先关闭质谱电子开关、再关闭真空开关；4.大约3分钟后关闭质谱主电源开关，5.关闭液相软件各部分模块电源。

LCMS简易操作手册前 言感谢您选择岛津公司的液质联用仪LCMS, 此本简易手册包括七节内容，供您学习参考。

学习LCMS之前，要求对高效液相色谱有一定的了解和熟悉。

更详细的软件功能及参数请参考软件说明书。

目录第一节 LCMS简易操作流程第二节 完全开关机和日常开关机第三节 系统配置第四节 方法设置和进样分析第五节 LCMSsolution定量分析第六节 LCMS调谐操作第七节 报告制作第一节：LCMS简易操作流程一 抽真空1．打开质谱右侧电源开关。

2．打开计算机。

3．打开LC-MS工作站，点击instrument 1,进入LCMS Real Time Analysis 界面。

4．点击左侧System Control按钮，进入抽真空界面，点击Auto startup,开始抽真空，直到Ready指示灯由黄变绿。

真正样品分析一般需要抽真空8小时以后才能进行。

以上步骤一般情况下不做，只有在卸真空后，重新开机时，才必须完成的步骤。

二 调谐MS1．配备调谐液及调谐液流动相。

2．连接好流路，ESI源调谐时，前端可以连阻尼管。

APCI源调谐时，可以直接PEEK管连接。

3. 进入LCMS Real Time Analysis 界面，点击Tuning，进入调谐界面。

4. 先保存调谐报告（File-Save Report as），而后点击Fill up,气泡排干净。

之后点击AutoTuning 开始进行调谐。

4. 调谐完成，虚拟打印调谐报告成PDF格式，保存。

以上步骤一般情况下不做，只有长时间未用、重新开机或仪器经过大的调整时，才必须完成的步骤。

三 联机1．开机前打开氮气发生器。

2．开泵、脱气机、系统控制器、柱温箱及PDA电源，点击instrument 1,进入LCMS Real Time Analysis 界面。

3．联机成功，显示Ready；操作失败，显示Not Connection。

四 建立分析方法1．在LCMS Real Time Analysis 界面，所有参数设置均在界面下半部分，如：MS、Interface，Data Acquisition LC Time Prog. Pump Column Oven.分别设置各操作参数， 保存方法文件。

高效液相-四级杆飞行时间质谱联用技术高效液相-四级杆飞行时间质谱联用技术是一种常用的分析方法，其基本原理是在高效液相层析仪（HPLC）和四级杆飞行时间质谱（HPLC-QTOF MS）之间进行联用，以获得更准确和可靠的化合物分析结果。

该技术被广泛应用于药物分析、天然产物分析、蛋白质分析和环境分析等领域。

该技术的工作流程如下：首先将待测样品通过高效液相层析仪进行分离，然后将分离后的化合物通过四级杆飞行时间质谱进行检测并识别。

在此过程中，四级杆飞行时间质谱可以根据化合物的质量-荷比（M/Z）比值进行分离和鉴定。

高效液相-四级杆飞行时间质谱联用技术具有以下优点：1.高效：高效液相和四级杆飞行时间质谱联用的技术可以提高分析效率和检测灵敏度，这是因为HPLC可以对复杂的样品进行分离，而四级杆飞行时间质谱可以提供高分辨率和高灵敏度的检测功能。

2.准确：该技术可以提供更准确的化合物分析结果，因为他们是基于两个独立的技术，可以提供更多的信息，如分子量、分子结构和碎片分析等。

3.可靠：该技术可以提供更可靠的分析结果，因为它可以避免化合物的假阳性、假阴性结果。

4.多样性：高效液相-四级杆飞行时间质谱联用技术适用于多种样品类型和化合物类别，例如药物、天然产物和环境污染等。

5.通用性：高效液相-四极杆飞行时间质谱联用技术易于操作，因为它是所有质谱技术中最常用的技术之一。

此外，该技术可以与其他分析技术如毛细管电泳等联用，以提高其分析效率和性能。

总之，高效液相-四级杆飞行时间质谱联用技术是一种重要的分析方法，具有高效、准确、可靠、多样性和通用性等优点，其在药物、天然产物、蛋白质和环境分析等领域中有着广泛的应用前景。

高效液相-四级杆飞行时间质谱联用技术在药物分析领域的应用已经得到了广泛的认可。

该技术可以用于研究药物及其代谢产物在体内的分布、代谢和排泄等方面，为药物的研发和生产提供可靠的分析手段。

比如，对于新药的开发，HPLC-QTOF MS联用技术可以用于药物代谢产物的鉴定及其代谢途径的研究，同时也可以用于药物合成中间体的鉴定等。

Thermo Fisher LCQ Fleet 型液相色谱-质谱联用仪操作规程一、开机与关机1.开机前，先检查氮气和氦气的压力是否满足分析要求。

翻开氦气钢瓶〔纯度>99.995%〕压力表总阀，调整分压表到0.15MPa。

翻开氮气钢瓶〔纯度>99.9%〕压力表总阀，调整分压表到0.4~0.6MPa。

2.翻开FCQ Fleet 总电源开关，机械泵开头工作。

此时勿翻开电子开关。

在此状态下抽真空，抽真空的时间依据下表：项目停机时间抽真空时间1 4d 以上24h2 1-3d 8h3 0.5d 1h3.抽完真空后，翻开电子开关。

取下离子源，取下用于密封的APCI 电晕针并保存好，再装上离子源。

4.关机：关机挨次与开机挨次相反，无特别状况或长假，质谱仪不关机。

二、日常开机〔机械泵未关闭时〕1.开机前的预备工作1.1检查设备电源、流路、信号连接是否完好。

1.2流淌相：必需使用色谱纯的溶剂，假设是选用进口的色谱纯试剂可以不经过微孔滤膜过滤，以免引入增塑剂等杂质。

水或缓冲盐溶液要用颖制备的超纯水，经0.45um 微孔滤膜抽真空过滤。

夏天温度较高时，纯水或缓冲盐尽量每天更换，以免长菌。

1.3流淌相添加剂：不要使用无机酸、碱金属碱，它们会导致仪器腐蚀，推举使用易挥发的有机酸和有机碱，如醋酸、甲酸、氨水等。

外表活性剂易产生离子抑制作用，因而清洗用于液质的样品瓶等不要用洗涤精等外表活性剂。

2.开机2.1先翻开氮气总阀，渐渐调整分压表到0.5MPa。

离子源 流速范围 最正确流速 说 明ESI1 µ L/min - 1mL/min一般来说, 高流速需要高的毛 200 µ L/min细管温度和气体流速。

一般来说，高流速需要更高的APCI200 L/min - 2mL/min 500 µ L/min 鞘气和关心气流量，但不需要提高毛细管温度。

液体流速 Rate(µl/min)金属毛细管 〔℃〕鞘气压力 〔arb 〕关心气压力 〔arb 〕喷雾电压 I Spray voltage(kv)2.2 依次翻开 FCQ Fleet 主机上的电子开关、高效液相色谱仪、自动进样器和计算机。

液相色谱质谱联用仪的工作原理及重要应用途径液相色谱质谱联用仪（LC—MS）是一种结合了液相色谱（LC）和质谱（MS）两种分析技术的仪器。

它可以实现对多而杂样品的高效分别和精准检测，广泛应用于药物研发、环境监测、食品安全等领域。

液相色谱质谱联用仪的工作原理基于两个重要步骤：样品的分别和质谱分析。

1.液相色谱分别：样品在液相色谱柱中进行分别，依据各组分在固定相上的亲疏水性、极性差异等性质，通过掌控流动相的构成、流速等参数，使各组分依次在柱上分别出来。

2.质谱分析：溶出的化合物进入质谱部分，通过电离源产生带电离子，然后通过质谱仪的离子光学系统进行质量分析。

常见的离子化方式包含电喷雾离子源（ESI）和大气压化学电离源（APCI），质谱分析可以供给化合物的分子质量、结构信息和相对丰度等数据。

LC—MS联用仪在科学讨论和工业应用中有着广泛的应用。

1.药物研发：LC—MS联用仪可以用于药物的新药研发、代谢产物分析、药代动力学讨论等。

通过对多而杂的药物样品进行高效分别和精准检测，可以确定药物的构成、结构和代谢途径，为药物的设计和优化供给紧要信息。

2.环境监测：LC—MS联用仪在环境监测领域起侧紧要作用。

例如，可以用于水质、土壤和空气中有机污染物的检测和分析，如农药残留、有机物污染等。

通过对环境样品进行分别和质谱分析，可以快速、精准地确定污染物的种类和浓度，为环境保护和整治供给依据。

3.食品安全：LC—MS联用仪在食品安全领域也具有紧要应用价值。

它可以用于检测食品中的农药残留、毒素、添加剂等有害物质。

通过分别和质谱分析，可以精准判定食品中的化合物是否合规，并确定其含量。

这对于确保食品安全、追溯食品来源具有紧要意义。

4.分子生物学讨论：LC—MS联用仪在生物医学和分子生物学讨论中也有广泛应用。

例如，可以用于蛋白质组学讨论，通过对多而杂蛋白样品的分别和质谱分析，确定蛋白质的氨基酸序列、修饰情况等；还可以用于代谢组学讨论，探究生物体内代谢产物的种类和变更。