索氏抽提法实验报告
一、实验目的
1.了解索氏抽提法测定粗脂肪含量的原理；
2.掌握索氏抽提法测定粗脂肪含量操作方法；
3.测定脂肪的含量，可以作为鉴别样品品质优劣的一个指标。
二、实验原理
脂肪含量的测定有很多方法，如抽提法、酸水解法、比重法、折射法、电测和核磁共振法等。
目前国内外普遍采用抽提法，其中索氏抽提法（Soxhlet extractormethod）是公认的经典方法，也是我国粮油分折首选的标准方法。
本实验采用索氏抽提法中的残余法，即用低沸点有机溶剂（乙醚或石油醚）回流抽提，除去样品中的粗脂肪，以样品与残渣重量之差，计算粗脂肪含量。由于有机溶剂的抽提物中除脂肪外，还或多或少含有游离脂肪酸、甾醇、磷脂、蜡及色素等类脂物质，因而抽提法测定的结果只能是粗脂肪。
三、实验试剂和器材
1.实验材料
油料作物种子(花生)、中速滤纸.
2.仪器
① SZF-06A脂肪仪
②干燥器(直径15～18cm，盛变色硅胶)
③不锈钢镊子（长20cm）
④培养皿
⑤分析天平
⑥称量瓶
⑦恒温水浴
⑧烘箱
⑨样品筛（60目）
3.试剂
无水乙醚或低沸点石油醚（A.R.）
四、操作步骤
1.准备
①将滤纸切成4cm×4cm，叠成一边不封口的纸包，用硬铅笔编写顺序号，按顺序排列在培养皿中。将盛有滤纸包的培养皿移入105±2℃烘箱中干燥2h，取出放入干燥器中，冷却至室温；
②按顺序将各滤纸包称重（记作a）、(称量时室内相对湿度必须低于70％)。
2.包装和干燥
①将花生研碎,放入105±2℃的烘箱中干燥3h，移至干燥器中
冷却至室温；
② 称取约0.5g 左右研碎的样品放入上述已称重的滤纸包中装入，封好包口，按顺序号依次放入称量瓶中称重（记作b ）。
3.抽提
① 将装有样品的滤纸包用长镊子放入抽提筒中，向其中注入一次虹吸量的1.67倍的无水乙醚，使样品包完全浸没在乙醚中；
② 连接好抽提器各部分，接通冷凝水水流，在恒温水浴中进行抽提，调节水温为60℃，使冷凝下滴的乙醚成连珠状（10min-15min 虹吸一次），抽提至抽取筒内的乙醚用滤纸点滴检查无油迹为止（约需6～12h,本次实验1h ）；
③ 抽提完毕后，用长镊子取出滤纸包，在通风处使乙醚挥发（抽提室温以12～25℃为宜）。提取瓶中的乙醚另行回收。
4.称重
① 待乙醚挥发之后，将滤纸包置于65℃烘箱中干燥15min ，放入干燥器冷却至恒重为止（记作c ）。
五、实验结果
100a -b c -b ⨯=粗脂肪含量（％）
式中：a ：称量瓶加滤纸包重（g ）
b ：称量瓶加滤纸包和烘干样重（g ）
c ：称量瓶加滤纸包和抽提后烘干残渣重（g ）
由实验得数据：
％粗脂肪含量（％）02.591000.23
-0.840.48-0.84100a
-b c -b =⨯=⨯=
即本次试验得粗脂肪含量为：59.02％
六、注意事项
1.测定用样品、抽提器、抽提用有机溶剂都需要进行脱水处理。这是因为：第一，抽提体系中有水，会使样品中的水溶性物质溶出，导致测定结果偏高；第二，抽提体系中有水，则抽提溶剂易被水饱和（尤其是乙醚，可饱和约2％的水），从而影响抽提效率；第三，样品中有水，抽提溶剂不易渗入细胞组织内部，结果不易将脂肪抽提干净；
2.试样粗细度要适宜。试样粉末过粗，脂肪不易抽提干净；试样粉末过细，则有可能透过滤纸孔隙随回流溶剂流失，影响测定结果；
3.索氏抽提法测定脂肪最大的不足是耗时过长，如能将样品先回流1～2次，然后浸泡在溶剂中过夜，次日再继续抽提，则可明显缩
短抽提时间；
4.YG-Ⅱ型油分测定器容量大，适合于样品较多的选种鉴定工作使用，温度控制在70℃左右，8h可提取完毕；
5.必须十分注意乙醚的安全使用。抽提室内严禁有明火存在或用明火加热。乙醚中不得含有过氧化物，保持抽提室内良好通风，以防燃爆；
6.乙醚中过氧化物的检查方法是：取适量乙醚，加入碘化钾溶液，用力摇动，放置1min，若出现黄色则表明存在过氧化物，应进行处理后方可使用。处理的方法是：将乙醚放入分液漏斗，先以1/5乙醚量的稀KOH溶液洗涤2～3次，以除去乙醇；然后用盐酸酸化，加入1/5 乙醚量的FeSO4 或Na2SO3溶液，振摇，静置，分层后弃去下层水溶液，以除去过氧化物；最后用水洗至中性，用无水CaCl2或无水Na2SO4脱水，并进行重蒸馏。
七、思考与讨论
1.如何利用残余法测定油料作物种子中的粗脂肪含量？
答：残余法测定油料作物种子中的粗脂肪含量，是用低沸点有机溶剂（乙醚或石油醚）回流抽提，除去样品中的粗脂肪，以样品与残渣重量之差，来计算粗脂肪含量。
2.测定过程中为什么需要对样品、抽提器、抽提用有机溶剂都要进行脱水处理？
答：进行脱水处理的原因有三：第一，抽提体系中有水，会使样
品中的水溶性物质溶出，导致测定结果偏高；第二，抽提体系中有水，则抽提溶剂易被水饱和（尤其是乙醚，可饱和约2％的水），从而影响抽提效率；第三，样品中有水，抽提溶剂不易渗入细胞组织内部，结果不易将脂肪抽提干净。
3.在实验过程中安全使用乙醚应注意哪些问题？
答：抽提室内严禁有明火存在或用明火加热。乙醚中不得含有过氧化物，保持抽提室内良好通风，以防燃爆。
4.测定样品粒子粗细有什么要求？
答：试样粗细度要适宜。试样粉末过粗，脂肪不易抽提干净；试样粉末过细，则有可能透过滤纸孔隙随回流溶剂流失，影响测定结果。
八、讨论
经过本次利用索氏提取法进行花生中脂肪的粗测定实验，使我较为熟练的掌握了SZF-06A脂肪仪的使用，并且了解了其工作原理，这对于以后的学习是有很大帮助的。经查阅资料得，花生中脂肪的含量大概在50％左右，本次实验的结果为59.02％，总体来讲，本次试验较为成功，较为粗略地测量出了花生中脂肪的含量。经过分析后，得出几点影响实验结果的因素，如下：
1.虹吸现象不发生。不发生虹吸现象的原因可能是因为：①仪器虹吸管道顶部有破损，因此水不会出来，空气会进去，压强增大，虹吸现象会中断；②虹吸管道在以前实验中操作不当，有杂质残留在管道中堵塞了管道，影响虹吸现象的发生；③仪器内压强过大，导致无
