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巴氏染液配制

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巴氏染液配制 1、苏木精：

Harris苏木精：苏木精5g溶于无水乙醇50ml ，硫酸铝钾100g溶于蒸馏水

1000ml ，混合后煮沸，待稍冷加入氧化汞2.5g，再煮沸2min，用前加冰醋酸

20ml

改良Gill氏半氧化苏木精：

苏木精2g, 无水乙醇250ml, 硫酸铝17.6g,（可减半量） 碘酸钠0.2g, 柠檬酸2g，甘油50ml, 蒸馏水750ml。

配制方法：将苏木精溶于无水乙醇，硫酸铝溶于蒸馏水，完全溶解后两液混合，

依次加入碘酸钠，柠檬酸，甘油。

此配方特点： 配制时勿须加温。配后即可应用。性能稳定，基本消除了过度氧

化的苏木精结晶污染涂片的麻烦。唯染色时间较长，须5～10min。 2、桔黄G6(orangeG6)： 桔黄G 0.5g，溶于95%酒精100ml, 加磷钨

15mg。

3、 EA染液：

EA36：由三种贮备液按比例混合而成：

0.5%亮绿(light green)酒精溶液45ml，

0.5%裨士麦褐(bismark brown)酒精溶液10ml，

0.5%伊红Y(eosin yellowish)酒精溶液45ml，

混合后，再加磷钨酸0.2g，饱和碳酸锂水溶液1滴。 EA50：3%亮绿水溶液10ml，纯甲醇250ml， 20%伊红Y 水溶液20ml，冰醋

酸20ml，磷钨酸2g (水溶后加入)，95%酒精700ml 。

染色方法 1、经固定的涂片入水、苏木精染核、盐酸酒精分化、返兰同HE染色 。

2、70%、80%、95%酒精逐级脱水各1min。

3桔黄G6 3～5 min 。

4、95%酒精二缸漂洗各1 min 。

5、EA36或EA50 5 min 。

6、95%酒精二缸漂洗各1 min 。

7、无水酒精二缸漂洗各1 min 。

8、二甲苯二缸透明各1 min 。

9、中性树胶封片。

染色结果

核深蓝色, 鳞状上皮底层、中层及表层角化前细胞浆染绿色，表层不全角化细胞

胞浆染粉红色, 完全角化细胞胞浆呈桔黄色, 红细胞染鲜红色，粘液染淡蓝色或

粉红色。

巴氏染色特点

细胞透明度好, 结构清晰, 涂片色彩丰富而鲜艳, 因能显示鳞状上皮不同角化程

度, 常用于阴道涂片测定雌激素水平。宫颈涂片和痰涂片内分化差的小角化细胞

癌显示桔黄色胞浆, 在红色坏死背景中特别突出, 不易漏诊。因此本室宫颈涂片、

痰涂片常规用巴氏染色。但巴氏染液多数用95%酒精配制，成本高, 染液配制

麻烦, 染色步骤多, 而且染液易陈旧, 染色效果不稳定, 因此基层医疗单位推广

有困难。EA50染液配方稍复杂, 但不易沉淀，染色效果较EA36稳定。

巴氏染色液

产品编码 产品名称 规格 单位 效期 备注

BA4135 巴氏染色液（EA-36）套组 3×250ml 盒 1年半 在液基TCT系统妇科检查

中，巴氏染色细胞学检查是

宫颈癌及癌前病变的常用筛

查方法，对早期发现和诊断

一些病变和肿瘤具有重要的

意义。该染色方法的特点是

对细胞具有多色性染色效

果，能清晰的显示细胞的结

构，特别是细胞核染色质非

常清楚，从而较容易发现异

常细胞。 BA4135A 巴氏染色液（EA-50）套组 3×250ml 盒 1年半

BA4041 苏木素染液（Harris） 1000ml 盒 1年半

BA4097 苏木素染液（Harris） 500ml 盒 1年半

BA4033 巴氏染色液-EA36染液 500ml 盒 1年半

BA4036 巴氏染色液-EA36染液 1000ml 盒 1年半

BA4033A 巴氏染色液-EA50染液 500ml 盒 1年半

BA4036A 巴氏染色液-EA50染液 1000ml 盒 1年半

BA4035 巴氏染色液-橘黄G染液 1000ml 盒 1年半

BA4035A 巴氏染色液-橘黄G染液 500ml 盒 1年半

BA4133 巴氏染色液（OG-EA混合染液） 500ml 盒 1年半

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染色液的配制

染色液的配制

授课：XXX 染色液的配制

一、吕氏(Loeffler)碱性美蓝染液

A液：美蓝(methylene blue) 0．6g

95%酒精 30ml

B液：KOH 0．01g

蒸馏水 100ml

分别配制A液和B液，配好后混合即可。

二、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液

A液：碱性复红(basic fuchsin) 0．3g

95%酒精 10ml

B液：石炭酸 5．0g

蒸馏水 95ml

将碱性复红在研钵中研磨后，逐渐加入95%酒精，继续研磨使其溶解，配成A液。

将石炭酸溶解于水中，配成B液。

混合A液及B液即成。通常可将此混合液稀释5—10倍使用，稀释液易变质失效，一次不宜多配。

三、革兰氏(Gram)染色液

1．草酸铵结晶紫染液

A液：结晶紫(crystal violet) 2g

95%酒精 20ml

B液：草酸铵(ammonium oxalate) 0．8g

蒸馏水 80ml

混合A、B二液，静置48小时后使用。

2．卢戈氏(Lugol)碘液

授课：XXX 碘片 1．0g

碘化钾 2．0g

蒸馏水 300ml

先将碘化钾溶解在少量水中，再将碘片溶解在碘化钾溶液中，待碘全溶后，加足水分即成。

3．95%的酒精溶液。

4．番红复染液

番红(safranine O) 2．5g

95%酒精 100ml

取上述配好的番红酒精溶液10ml与80ml蒸馏水混匀即成。

四、芽孢染色液

1．孔雀绿染液

孔雀绿(malachite green) 5g

蒸馏水 100ml

2．番红水溶液

番红 0．5g

蒸馏水 100ml

3．苯酚品红溶液

碱性品红 11g

无水酒精 100ml

制法取上述溶液10ml与100ml5%的苯酚溶液混合，过滤备用。

4．黑色素(nigrosin)溶液

EA50染液pH值变化对宫颈脱落细胞染色的影响

EA50染液pH值变化对宫颈脱落细胞染色的影响

EA50染液pH值变化对宫颈脱落细胞染色的影响

曹加兴;赵玺龙;字灿忠;郑艳梅;王力

【摘 要】Objective To discuss the effects of Ph value changes in EA50

staining solution on the staining of exfoliated cervical cells, and to seek

ways to improve the quality of Pap staining. Methods EA50 staining

solution was treated with 1 mol/L Na2 CO3 solution and 1 mol/L HAC

solution respectively, and the Ph values of the two kinds of staining

solutions were determined. Observation was made in the staining results

of exfoliated cervical cells in these EA50 staining solutions of different Ph

values. Results In the solution of low Ph value, the staining of the cervical

cells was not bright - colored, and the pigmentation of cytoplasm was

abnormal with serious dyeing of red and hazy contrasting in coloring of

red, yellow and green; In the solution of high Ph value, the staining was

染色液配制方法

染色液配制方法

常用染色液的配制

1．骆氏美蓝染色液

甲液：美蓝0.3g 95％酒精溶液 30ml

乙液：0.01％氢氧化钠溶液 100ml

甲液与乙液相混合即成。

2．1％美蓝酒精溶液 美蓝1g 95%酒精溶液 100ml，充分混合溶解即可。

3．革兰氏染色液

（1）草酸铵结晶紫染液

甲液：结晶紫2.0g 95％酒精20ml

乙液：草酸铵0.8g 蒸馏水80ml

用时先以蒸馏水将甲液稀释5倍，然后加20ml于80ml乙液中，混合即成。

（2）革兰氏碘溶液 碘片 1g 碘化钾 2g

蒸馏水 300ml

先将碘化钾置于干净的乳钵中，加入蒸馏水少许（约5ml），待碘化钾完全溶解后，再加入碘片，略作研磨，使碘片完全溶解，然后徐徐加水，充分混合，直至足量。切忌将碘片与碘化钾一起直接加入瓶中，一次加水配制。否则，碘片往往不能完全溶解而影响碘的浓度。

（3）95％酒精

（4）复染色液 可用碱性复红或沙黄液及稀释的石炭酸复红液。

碱性复红液：碱性复红0.1g 蒸馏水100ml，混合即成。

沙黄液：3.41％沙黄酒精溶液10ml、蒸馏水90ml。

稀释石炭酸复红液：石炭酸复红液10ml、蒸馏水90ml，混合即成。

4．抗酸染色液

（1）石炭酸复红液 3％碱性复红酒精溶液10ml、5％石炭酸水溶液90ml，二液混合即成。

（2）盐酸酒精溶液 浓盐酸3ml、95％酒精溶液97ml，二液混合即成。 5．瑞氏染色液 瑞氏染料粉0.1g、纯甘油1.0ml、中性甲醇60ml。

置染料粉于乳钵中，加入甘油，充分研磨，再徐徐加入甲醇，边研磨边搅拌，促其溶解，然后盛于棕色瓶中，置暗处过夜，次日以滤纸滤过后，仍盛于棕色瓶中，保存于暗处备用。

磷酸盐缓冲液：

溶液一：Na2HPO4.12H2O（磷酸二氢钠）23.864g、蒸馏水1000ml。

溶液二：KH2PO4（磷酸二氢钾）9.078g、蒸馏水1000ml。

巴氏小体_实验报告

巴氏小体_实验报告

一、实验目的

1. 掌握巴氏小体的制备方法；

2. 观察并识别巴氏小体的形态特征及所在部位；

3. 了解巴氏小体的形成机制及生物学意义；

4. 通过实验学习显微镜操作技巧。

二、实验原理

巴氏小体（Barr body）是指在雌性哺乳动物细胞中，除了活跃的X染色体外，另一条X染色体在间期细胞核中发生异固缩而形成的深染小体。巴氏小体是X染色质的一种表现形式，其形成机制与性别决定和剂量补偿效应有关。

三、实验材料

1. 生理盐水；

2. 固定液（甲醇:冰醋酸=3:1）；

3. 巴比妥缓冲液（pH 7.4）；

4. 染色液（苯酚品红染液）；

5. 显微镜；

6. 载玻片；

7. 盖玻片；

8. 牙签；

9. 吸管；

10. 镜台；

11. 镜头；

12. 光源。

四、实验步骤 1. 取材：受检者清水漱口数次，用洁净牙签从女性口腔两侧刮取粘膜，原位刮2～3次，第一次舍去，第2、3次分别涂于干净载玻片上。拔取女性带有毛囊的头发（约2cm），置于载玻片上。

2. 固定：将置于离心管中的材料（口腔粘膜细胞），首先2000rpm离心20min，弃上清，加入新配置的固定液（甲醇:冰醋酸=3:1），37℃下静置30min。

3. 染色：加入苯酚品红染液，染色约20min。

4. 洗涤：用生理盐水冲洗载玻片，去除多余的染液。

5. 观察与计数：在显微镜下观察细胞核，寻找巴氏小体。对每个视野内的细胞核进行计数，记录巴氏小体的数量。

6. 数据处理：计算巴氏小体的出现频率，并与文献报道的正常女性口腔粘膜细胞中巴氏小体出现的概率（30%~50%）进行比较。

五、实验结果

1. 巴氏小体在女性口腔粘膜细胞中普遍存在，且数量较为稳定。

2. 巴氏小体的出现频率在30%~50%之间，与文献报道的正常女性口腔粘膜细胞中巴氏小体出现的概率相符。

六、实验分析

1. 巴氏小体的制备与观察方法简便易行，能够较好地反映女性细胞中X染色质的形态与数量。