三种大鼠动脉粥样硬化模型复制方法的比较

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【中图分类号】Ｒ３６３
【文献标识码】Ａ
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第７天行大鼠主动脉内膜球囊损伤术…。动物饲养
在带不锈钢盖底的塑料笼内，每笼２只，自由饮水，
室温１９～２３℃，自然采光。
１．３大鼠主动脉内膜球囊损伤术
动物用戊巴比妥钠（３０吲ｋｇ体重）腹腔麻醉，
背位固定，无菌条件下作颈正中切口，分离左颈总动
脉，结扎远心端，向心脏方向插入１．５Ｆ球囊，进入８
ｃｍ后，注入０ ２ｍＬ生理盐水充盈球囊，手感到一定
小文通信忤打，Ｉ哄系电活：０２１．６３６１０１０９．７３加ｌ，杨军柯，男．１９７０年出
小，汉欹，河市省洛Ｈ１『仃人，博Ｌ．主要从事冠心病研究。
脂质浸润、钙超载、内皮损伤等致病因素，为此，本文 设计了三种大鼠动脉粥样硬化模型建立的方法并进 行了比较，为研究Ａｓ的病因、发病机制和防治措施 提供合适的动物模型。
各组动物胸主动脉经ＨＥ染色在显微镜观察发 现，正常对照组管腔圆形，内膜、中膜和外膜分界清 楚，管腔面由单层内皮细胞覆盖，细胞完整，中膜主 要见梭形平滑肌细胞；外膜较薄，为疏松结缔组织。 高脂组管壁层次尚清晰，内膜内皮细胞完整，中膜无 明显萎缩、增厚，外膜为疏松结缔组织。高脂维生素 组管壁明显增厚，平滑肌增生明显，细胞排列紊乱， 纤维组织增生伴片状或点状钙化，弹性纤维层结构 不清，形成纤维增生性动脉粥样硬化斑块。内皮损 伤组管壁内皮细胞脱落，内膜增厚，斑块表面纤维帽 薄，突出的斑块内含有坏死物质，平滑肌细胞减少， 纤维组织增生伴片状或点状钙化，中膜明显萎缩，，ａ 较典型的成熟动脉粥样硬化斑块（图１．Ｈｇｕ－ｃ｜）、
化，大鼠模型； 高脂； 维生素Ｄ； 内皮损伤
【摘要］ 为研究动脉粥样硬化的发病机制，比较了三种大鼠动脉粥样硬化斑块模型建立的方法。分别予单纯高
脂、高脂＋维生素Ｄ、高脂＋维生素Ｄ＋内皮损伤三种不同方法处理大鼠，９０天后比较血脂、血钙、胸主动脉的形态
学改变、巨噬细胞和＊平滑肌肌动蛋白含量。结果发现，三组实验组与正常对照组相比，总胆固醇、甘油三酯和低
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（：Ｎ ４３—１２６２／Ｒ中国动脉硬化杂志２００３年第ｌｌ卷第５期 【文章编号】 １００７—３９４９（２００３）１１一∞．０４６５ ０５
４６５
·方法学研究·
三种大鼠动脉粥样硬化模型复制方法的比较
郭延松，昊宗贵。杨军柯，黄高忠 （第二军医大学长征医院心血管内科，上海２００００３）
［关键词］病理学与病理生理学； 大鼠动脉粥样硬化模型的复制； 高脂＋维生素Ｄ＋内皮损伤； 动脉粥样硬
统计学意义（表ｌ，ｍｌｅ １）。
表 删ｌｅ各１．组实 ｍ曲验ａ大哩鼠芦体０重ｆ俐变化ｊｇ（ｈｇｔ，ｊｚⅡ±“ｓ）ｐｅ而删眺
２．２血脂和血钙浓度的变化 血脂和血钙变化见表２（Ｔ抽ｌｅ ２）。经方差分
析。与正常对照组相比，其它三组动物血清ＴＣ、１ｃ 和ＬＤＭ均明显升高（尸＜ｏ．０１），ＨＤ比各组间差异 无统计学意义。与正常对照组和高脂组相比，高脂 维生素组和内皮损伤组动物血清ｃａ２＋均明显升高 （｜Ｄ（Ｏ．０１）。 ２．３胸主动脉形态学变化
学检测
采用微波Ｅｎｖｉｓｉｏｎ法拉’，应用小鼠抗大
鼠ｃ１Ｍ８单克隆抗体和ａ平滑肌肌动蛋白单克隆抗
体匀一抗鉴定巨噬细胞和平滑肌细胞，ＥｎＶｉｓｉｏｎ复
合物为二抗，常规ＤＡＨ斗１２０２显色，苏木素复染。
ｌ ７统计分析
数据用ｘ±ｓ表示，利用ｓＰｓｓｌ０ ０统计软件行
方差分析，各组间两两比较用ｓＮＫ法。
２结果 ２．１一般状况
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密度脂蛋白胆目醇均明显升高（尸＜ｏ ｏＩ）；高脂＋堆生素Ｄ组、高脂＋维生素Ｄ＋内皮损伤组与正常对照纽和高脂
组相比，血钙均明显升高（Ｐ＜ｏ叭）；高脂＋维生素Ｄ组、高脂＋维生素Ｄ＋内皮损伤与正常对照组相比，内膜增
厚、中膜萎缩（Ｐ＜０ ０５或Ｐ＜０ ０１）；单纯高脂粗、高脂＋维生素Ｄ组ｃＤ６８为弱阳性．高脂＋雏生素Ｄ＋内皮损伤
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阻力向回拉约４～５ ｃｍ，放水后再进入８ ｃｍ，注水充
盈、回拉、放水，反复３次，拔出球囊，结扎近心端。
１．４血液和动脉标本的采集
实验第９０天，各组动物禁食过夜，在戊巴比妥
钠腹腔麻醉下，分离腹主动脉，在肾动脉分叉处下
方，剪开腹主动脉，插入穿刺针，以注射器采集动脉
血，用３ ０００ ｒ，ｍｉｎ立即离心１５耐ｎ，分离血浆，取１
Ｉ，１Ｌ用检测血脂和血钙；剪下主动脉，取胸主动脉下
段约１ ｃｍ立即用１０％甲醛固定，用于常规形态学和
免疫组织化学检查。
１．５血脂和血钙的检测
用Ａｂｂｏｔｔ Ａｅｍｓｅｔ ＴＭ生物化学分析仪（美国亚
培公司）检测血浆总胆固醇（ｔｏｔａｌ ｃｈｏｌｅｓｔｅｍＩ，Ｔ℃）、甘
油三酯（ｍ只ｌｙｃ鲥ｄｅ，１Ｂ）、高密度脂蛋白胆固醇（ｈｉ出
ｄｅｎｓｉ竹ｌｉｐｏｐｍｃｅｉｎ ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ，ＨＤＬＣ）、ＬＤＬ￡和Ｃｒ＋。 １ ６病理学观察
ｌ ６ １形态学研究
将用１０％甲醛固定的胸主
动脉石蜡包埋，连续切片，切片固定于载玻片上，ＨＥ
染色，光镜现察，利用ＨｎＡｓ一１０００型图象分析系统
检测内膜、中层厚度。
１．６．２ 巨噬细胞和ａ平滑肌肌动蛋白免疫组织化
万方数据
（：Ｎ ４３一１２６２／Ｒ中国动脉硬化杂志２００３年第ｌｌ卷第５期 表２各组大鼠血清脂质和血钙水平（ｒⅢｎｏ儿．ｎ＝６，ｚ±ｓ】
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