病毒感染的检查方法与防治原则
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新型冠状病毒感染防控方案(第十版)为指导各地做好对新型冠状病毒感染(COVID-19)实施“乙类乙管”后的疫情防控工作,依据《中华人民共和国传染病防治法》,制定本方案。
一、指导原则以习近平新时代中国特色社会主义思想为指导,坚持“预防为主、防治结合、依法科学、分级分类”的原则,坚持常态化防控和疫情流行期间应急处置相结合,压实“四方责任”,提高监测预警灵敏性,强化重点人群保护,实现“保健康、防重症”的工作目标,最大程度保护人民生命安全和身体健康,最大限度减少疫情对经济社会发展的影响。
二、病原学和流行病学特征新型冠状病毒(SARS-CoV-2,以下简称新冠病毒)属于β属冠状病毒,对紫外线和热敏感,乙醚、75%乙醇、含氯消毒剂、过氧乙酸和氯仿等脂溶剂均可有效灭活病毒。
人群普遍易感。
传染源主要是新型冠状病毒感染者;主要传播途径为经呼吸道飞沫和密切接触传播,在相对封闭的环境中经气溶胶传播,接触被病毒污染的物品后也可能造成感染。
目前,奥密克戎变异株已成为国内外流行优势毒株,其潜伏期缩短,多为2-4天,传播能力更强,传播速度更快,致病力减弱,具有更强的免疫逃逸能力,现有疫苗对预防该变异株所致的重症和死亡仍有效。
三、疫苗接种(一)坚持知情、同意、自愿原则,鼓励3岁以上适龄无接种禁忌人群应接尽接。
倡导公众特别是老年人积极主动全程接种疫苗和加强免疫接种。
(二)对于符合条件的18岁以上目标人群进行1剂次同源或序贯加强免疫接种,不可同时接受同源加强免疫和序贯加强免疫接种。
(三)对于感染高风险人群、60岁以上老年人群、具有较严重基础疾病人群和免疫力低下人群,在完成第一剂次加强免疫接种满6个月后,可进行第二剂次加强免疫接种。
提高60岁及以上老年人群等重症高风险人群的全程接种率和加强免疫接种率。
(四)根据疫苗研发进展和临床试验结果,进一步完善疫苗接种策略。
四、个人防护与宣传教育(一)强调“每个人都是自己健康的第一责任人”,倡导公众遵守防疫基本行为准则,坚持勤洗手、戴口罩、常通风、公筷制、保持社交距离、咳嗽礼仪、清洁消毒等良好卫生习惯和合理膳食、适量运动等健康生活方式,自觉提高健康素养和自我防护能力;疫情严重期间减少聚集,患有基础疾病的老年人及孕妇、3岁以下婴幼儿等尽量减少前往人员密集场所。
第25章病毒感染的检查方法与防治原则第一节病毒的诊断随着对病毒感染从生物学及分子生物学水平的研究进展,病毒的诊断技术已由传统方法扩展至新的快速诊断技术。
病毒感染的快速诊断有利于对病毒感染者的治疗;例如对有些病毒(如疱疹病毒、人类免疫缺陷病毒)感染已有较特异的抗病毒药物治疗。
早期诊断及早期治疗对控制病毒感染十分重要。
此外,从群体感染角度分析,确诊病毒感染的病原在监测病毒的流行病学(如新型流感病毒、肺出血型汉坦病毒的发现等)方面也有重要的现实意义。
标本的采集与送检用于分离病毒或检测病毒及其核酸的标本应采集病人急性期标本。
根据不同病毒感染采取不同部位的标本(如鼻咽分泌物、脑脊液、粪便或血液)。
由于病毒在室温中很易被灭活,应在采集和运送标本中注意冷藏。
如欲检测抗体,早期单份血清可用于检测IgM抗体,而欲检测早期与恢复期的抗体效价的变化,则需采集早期与恢复期双份血清。
血清抗体检测标本应保存于-20℃。
病毒的分离、培养与鉴定目前最常用的方法是细胞培养。
在注明欲检测的病毒后,病毒分离培养的实验室将选择适当的原代培养细胞(敏感性高)及传代细胞系(便于在实验室保存)作病毒分离培养。
接种标本后,细胞可出现病变或也可并不出现病变而需用血细胞吸附等方法检测是否有病毒增殖,并进一步还需用特殊的抗体鉴定病毒的种类,例如用特异荧光抗体染色或抗体中和试验等。
当无病毒增殖时,可能标本中病毒含量较低,未被检出,则需要盲目传代3次后方可明确标本中是否存在病毒。
这一分离与鉴定病毒的全过程有时可长达2~3个月,而且仅在有设备、实验条件及合格工作人员的实验室方可进行。
虽然这种方法所需时间长、步骤多,但在确定病原上是“黄金标准”,即其准确性高而无误。
如我国台湾省确定由肠道病毒71型引起多数患儿发生脑膜炎并致死的研究报道,就是由分离培养及鉴定病毒所确诊。
如欲提高病毒感染细胞培养的敏感性,可将病毒接种于内有盖玻片的细胞培养瓶,经低温离心后,以增加病毒与细胞接触的机率。
《医学微生物学》第二十五章和第二十六章复习题及答案第二十五章病毒感染的检查方法与防治原则一、单项选择题1.进行病毒病原学检查的标本递送要求是:A.孵箱保存B.室温保存C.加入防腐剂D.冷藏速送E.加入含抗生素和蛋白质的运输培养基中冷藏速送2.细胞病变效应不包括:A.细胞圆缩.脱落B.细胞融合C.形成包涵体D.干扰现象E.胞裂解3.可用于制备病毒灭活疫苗的的理化因素是:A.紫外线B.甲醇C.甲醛D.乙醇E.乙醛4.IFN-γ的产生细胞主要是:A.活化的T细胞B.活化的B细胞C.白细胞D.成纤维细胞E.巨噬细胞5.防病毒感染最有效的方法是A.使用抗生素B.使用抗病毒化学疗剂C.使用中草药D.使用疫苗E.使用抗菌药物6.下列关于减毒活疫苗缺点的叙述,错误的是:A.偶尔可能恢复为毒力株而致病B.进入人体偶尔引起并发症C.对人体免疫系统刺激过强而引起免疫麻痹D.可能活化其他的潜伏病毒E.偶尔可能引起持续感染7.病毒的致病因素是:A.内毒素B.外毒素C.侵袭力D.表面结构E.以上均不对8.下述药物对治疗病毒感染无效的是:A.干扰素B.抗生素C.聚肌苷酸D.黄连.黄苓E.三氮唑核苷9.灭活疫苗的缺点不包括:A.需多次注射B.免疫维持时间短C.疫苗成本高D.诱导细胞免疫反应差E.可发生干扰现象降低免疫效果10.人工被动免疫最常用的制剂是:A.转移因子B.干扰素C.免疫核糖核酸D.免疫球蛋白E.白蛋白11.机体在抗病毒感染中起主要作用的是:A.干扰素B.中性粒细胞C.致敏T细胞D.中和抗体E.抗毒素二、多项选择题1.病毒在细胞内增殖的指标有:A.CPEB.干扰现象C.红细胞吸附D.细胞培养液浑浊E.免疫荧光法可检测到病毒抗原2.细胞病变包括:A.变圆B.坏死C.溶解D.脱落E.融合3.送检标本分离病毒应做到:A.冷藏.速送B.加入石碳酸防治污染C.60℃加热灭菌D.置50%甘油盐水保存运送E.加入青霉素.链霉素抗菌4.能抑制病毒核酸合成的药物是:A.金刚烷胺B.阿糖腺苷C.阿糖胞苷D.无环鸟苷E.三氮唑核苷5.临床上常取粪便标本作为检测材料的病毒是:A.甲型肝炎病毒B.狂犬病病毒C.脊髓灰质炎病毒D.乙型肝炎病毒E.EB病毒6.干扰素抗病毒作用的特点包括:A.有种属特异性B.间接作用C.发挥效应早D.广谱抗病毒作用E.低毒性三、名词解释1.CPE2.减毒活疫苗3.亚单位疫苗4.IFN四、简答题1.比较减毒活疫苗和灭活疫苗的异同?2.目前可用疫苗预防的病毒性疾病有哪些?3.其抗原性不同,人类IFN分为几种?各自有何特点?答案一、单项选择题1.E2.D3.C4.A5.D6.C7.E8.B9.E 10.D 11.C二、多项选择题1.ABCE2.ABCDE3.ABD4.BCDE5.AC6.ABCDE三、名词解释1. CPE(细胞病变效应):在体外实验中,通过细胞培养和接种杀细胞性病毒经过一定时间后,可用显微镜观察到细胞变圆.坏死,从瓶壁脱落等现象,称细胞病变效应。
病毒感染的检查方法和防治原则(总分:21.50,做题时间:90分钟)一、A1型题(总题数:18,分数:18.00)1.有关病毒标本的采集和运送,不正确的是∙A.发病早期或急性期采集标本∙B.发病晚期采集标本∙C.标本运送应放在带有冰块的保温瓶中∙D.标本采集后应立即送实验室检查∙E.运输培养基中应含有抗生素(分数:1.00)A.B. √C.D.E.解析:2.病毒在细胞中增殖的指标不包括∙A.CPE∙B.细胞融合∙C.培养液pH值改变∙D.培养基混浊∙E.红细胞吸附(分数:1.00)A.B.C.D. √E.解析:3.用直接电镜法可作出早期快速诊断的病毒是∙A.疱疹病毒∙B.轮状病毒∙C.流感病毒∙D.巨细胞病毒∙E.腺病毒(分数:1.00)A.B. √C.D.E.解析:4.最有效的干扰素诱生剂是∙A.聚肌胞∙B.泰洛龙∙C.脂多糖∙D.新霉素∙E.金刚烷胺(分数:1.00)A. √B.C.D.E.解析:5.不适用于培养病毒的方法是∙A.适龄鸡胚接种∙B.传代细胞培养∙C.组织器官培养∙D.易感动物接种∙E.人工合成培基(分数:1.00)A.B.C.D.E. √解析:6.常用减毒活疫苗预防的疾病是∙A.狂犬病-麻疹∙B.破伤风-百日咳∙C.白喉-乙型肝炎∙D.脊髓灰质炎-结核病∙E.流行性乙型脑炎-腮腺炎(分数:1.00)A.B.C.D. √E.解析:7.对病毒性感染进行血清学诊断时,双份血清抗体效价至少增高几倍时,才有诊断意义∙A.2倍∙B.4倍∙C.8倍∙D.16倍∙E.32倍(分数:1.00)A.B. √C.D.E.解析:8.下列分子生物学实验中,检测病毒蛋白的方法是∙A.原位杂交∙B.点杂交∙C.Southernblot∙D.Westernblot∙E.Northernblot(分数:1.00)A.B.C.D. √E.解析:9.病毒中和试验是病毒血清学特异试验,以下描述不正确的是∙A.是中和抗体与病毒结合使病毒失去感染性的-种试验∙B.需用活细胞或鸡胚或动物来判断结果∙C.是一种特异性较高的实验∙D.中和抗体在体内维持时间较短∙E.是用已知病毒抗原检测中和抗体(分数:1.00)A.B.C.D. √E.解析:10.下述实验中,不能检测病毒蛋白的方法是∙A.蛋白电泳∙B.免疫荧光技术∙C.酶免疫技术∙D.放射免疫法∙E.PCR(分数:1.00)A.B.C.D.E. √解析:11.用活疫苗进行预防接种,可有效控制的病毒性疾病是∙A.狂犬病∙B.小儿麻痹∙C.艾滋病∙D.乙型肝炎∙E.黄热病(分数:1.00)A.B. √C.D.E.解析:12.在组织或尿沉淀细胞核内观察到猫眼状包涵体,有助于诊断的疾病是∙A.狂犬病∙B.巨细胞感染∙C.疱疹病毒感染∙D.脊髓灰质炎病毒感染∙E.甲肝病毒(分数:1.00)A.B. √C.D.E.解析:13.下列检测病毒的方法中,不是检查病毒抗原的一项为∙A.直接免疫荧光∙B.RIA∙C.反向间接血凝(RPHA)∙D.EIA∙E.血凝抑制试验(分数:1.00)A.B.C.D.E. √解析:14.抑制病毒核酸合成的药物不包括∙A.金刚烷胺∙B.阿糖腺苷∙C.阿糖胞苷∙D.无环鸟苷∙E.三氮唑核苷(分数:1.00)A. √B.C.D.E.解析:15.判断流感病毒接种鸡胚尿囊腔是否生长,应选择∙A.红细胞吸附试验∙B.血凝试验∙C.血凝抑制试验∙D.间接血凝试验∙E.补体结合试验(分数:1.00)A.B. √C.D.E.解析:16.哪项不是病毒在细胞内增殖的检测指标∙A.检测细胞病变∙B.观察血球吸附∙C.进行蚀斑测定∙D.检查病毒抗原∙E.观察干扰现象(分数:1.00)A.B.C. √D.E.解析:17.病毒的分离方法不包括∙A.接种营养培养基∙B.动物接种∙C.细胞培养∙D.组织器官培养∙E.鸡胚培养(分数:1.00)A. √B.C.D.E.解析:18.长期保存病毒的方法是∙A.冷冻真空干燥∙B.置50%中性甘油盐水中保存∙C.4℃冰箱保存∙D.-20℃冰箱保存∙E.细胞培养反复传代(分数:1.00)A. √B.C.D.E.解析:二、B1型题(总题数:0,分数:0.00)三、A.咽漱液B.粪便C.血液D.脑组织E.尿(总题数:3,分数:1.50)19.分离狂犬病毒应取(分数:0.50)A.B.C.D. √E.解析:20.分离脊髓灰质炎病毒最好取(分数:0.50)A.B. √C.D.E.解析:21.自病人体内分离汉坦病毒最好取(分数:0.50)A.B.C.D.E. √解析:四、A.减毒活疫苗B.灭活疫苗C.亚单位疫苗D.多价疫苗E.基因工程疫苗(总题数:4,分数:2.00)22.我国研制并已应用的甲型肝炎疫苗属于(分数:0.50)A. √B.C.D.E.解析:23.狂犬病毒疫苗属于(分数:0.50)A.B. √C.D.E.解析:24.脊髓灰质炎糖丸属于(分数:0.50)A. √B.C.D.E.解析:25.我国目前应用的乙型肝炎疫苗属于(分数:0.50)A.B.C.D.E. √解析:。
第12章 病毒感染得检查方法与防治原则 学习要点 一、病毒感染得检查方法 1、检材得采集与送检 病毒分离标本得采集原则就是:①早期取材;②注意无菌操作;③正确处理含菌标本;④低温保存与尽快送检。 2、病毒得分离培养与鉴定 (1)动物接种 (2)鸡胚接种 (3)组织培养:原代细胞;二倍体细胞;传代细胞系 (4)病毒增殖得指标:①细胞得变化;②红细胞吸附;③干扰现象;④培养基pH改变。 3、病毒感染得血清学诊断 (1) 中与试验; (2) 补体结合试验; (3) 血凝抑制试验 4、病毒感染得快速诊断 (1) 形态学检查法:光学显微镜检查法;电镜与免疫电镜检查 (2) 免疫学检查法:检查病毒抗原;检查病毒特异性IgM (3) 检测病毒核酸:核酸杂交技术;PCR技术 二、病毒感染得防治原则 1、病毒感染得预防 (1) 人工自动免疫 用于人工自动免疫得生物制品有:①灭活疫苗;②减毒活疫苗;③基因工程疫苗;还有亚单位疫苗、多肽疫苗、核酸疫苗等。 (2) 人工被动免疫 人工被动免疫常用得制剂有:动物免疫血清、人血清丙种球蛋白、转移因子等。 2、 抗病毒治疗 (1) 抑制病毒穿入与脱壳 金刚烷胺 (2) 抑制病毒生物合成 核苷类化合物(疱疹净、阿昔洛韦、阿糖腺苷、病毒唑、叠氮脱氧胸苷、拉米呋啶等);病毒蛋白酶得抑制物(沙喹纳伟、英迪纳伟等);IFN及其诱生剂等。 (3) 免疫制剂 特异性免疫球蛋白、治疗性疫苗等。 (4) 抗病毒中草药 复习题
一、名词解释 1、二倍体细胞 2、细胞病变效应 3、红细胞吸附试验 4、血凝抑制试验 5、减毒活疫苗 6、灭活疫苗 二、选择题 A1型题 1、从患者体内分离病毒,采集标本时得错误..做法就是:
A、在发病早期采集 B、选取正确部位取材 C、标本冷藏 D、标本尽快送实验室 E、疾病恢复期取材 2、细胞病变效应不.包括:
A、细胞圆缩、脱落 B、细胞融合 C、形成包涵体 D、干扰现象 E、细胞裂解 3、病毒凝集红细胞(血凝试验)得机制就是: A、红细胞表面抗原与血凝素抗体结合 B、红细胞表面受体与病毒表面血凝素结合 C、红细胞表面病毒抗原与相应抗体结合 D、病毒与结合在红细胞表面得抗体结合 E、红细胞上得血凝素与病毒结合 4、预防病毒病最有效得方法就是使用: A、抗毒素 B、抗病毒化学疗剂 C、中草药 D、疫苗 E、抗菌药物 5、以下描述正确得就是 A、人工被动免疫接种得物质为抗原 B、人工被动免疫不能用于治疗 C、人工主动免疫接种得物质为丙种球蛋白 D、人工主动免疫主要用于治疗 E、人工被动免疫主要用于紧急预防 6、无环鸟苷(ACV)有效控制单纯疱疹病毒得作用机理就是 A、ACV作用于敏感细胞表面受体 B、ACV抑制病毒DNA多聚酶与DNA合成 C、ACV抑制病毒RNA聚合酶 D、ACV抑制敏感细胞DNA复制 E、ACV抑制病毒蛋白合成 7、下列不.适于培养动物病毒得方法就是
A、鸡胚培养 B、人工合成培养基培养 C、器官培养 D、二倍体细胞培养 E、动物培养 8、不.能作为病毒在细胞内生长繁殖指标得一项就是
A、致细胞病变作用 B、红细胞凝集 C、干扰现象 D、细胞培养液变混浊 E、细胞培养液PH改变 9、有关病毒标本得采集与运送,不.正确得方法就是
A、发病早期或急性期采集标本 B、发病晚期采集标本 C、标本运送应放在带有冰块得保温桶中 D、标本采集后应立即送实验室检查 E、运输培养基中应含有抗生素 10、病毒得中与试验就是病毒血清学特异试验,以下描述中不.正确得就是
A、中与试验就是指中与抗体与病毒结合,使病毒失去感染性得一种试验 B、中与试验需用活细胞或鸡胚或动物来判断结果 C、中与试验就是一种特异性较高得试验 D、中与抗体在体内维持时间较短 E、中与试验就是用已知病毒抗原检测中与抗体 12、抗病毒药物不.包括
A、金刚烷胺 B、无环鸟苷 C、叠氮脱氧胸苷 D、干扰素 E、头孢三嗪 13、对治疗病毒感染无效得药物就是 A、干扰素 B、抗生素 C、聚肌胞 D、黄连、黄芩 E、三氮唑核苷 B1型题 (供1~3题备选答案) A、鼻咽漱液 B、粪便 C、血液 D、脑组织 E、尿 1、分离狂犬病毒应取: 2、分离脊髓灰质炎病毒最好取: 3、分离流感病毒应采集: (供4~6题备选答案) A、中与试验 B、血凝抑制试验 C、补体结合试验 D、血凝试验 E、多聚酶链反应(PCR) 4、鉴定流感病毒型别或亚型得试验: 5、测定病毒感染力得试验: 6、可体外扩增病毒核酸得试验就是:
三、填空题 1、分离病毒最好采集发病 天内得标本,采集标本必须严格遵守 操作。 2、含病毒标本采集后必须 送检,否则应置 液中保存送检。 3、分离培养病毒得方法有 、 与 。 4、常用于培养病毒得细胞类型有 、 与 。 5、 病毒血清学试验通常取双份血清检查, 期抗体效价比 期增高 倍或以上时,有诊断意义。 6、用化学方法裂解病毒,提取病毒 或 上与免疫有关得亚单位成分,除去核酸后制成得疫苗,称为 。
四、问答题 1、简述目前最常用得培养病毒得方法。 2、病毒检测与细菌检测有何区别? 3、比较减毒活疫苗与灭活疫苗得异同。 4、使用减毒活疫苗应注意哪些事项? 参考答案
一、名词解释 1、二倍体细胞:就是目前常用培养病毒得细胞类型。其特点就是在体外可连续传40至50代仍保持23对染色体,因此广泛用于病毒得分离与疫苗得生产。 2、细胞病变效应:指病毒在体外细胞培养时引起得细胞损害。根据病毒种类与细胞种类得不同,细胞病变效应可有不同表现,均可在显微镜下观察到,作为病毒在细胞内增殖得指标。 3、红细胞吸附试验:某些带有血凝素得病毒在细胞内生长不引起明显得细胞病变效应,但病毒在出芽释放时可将其血凝素表达在宿主细胞膜上,使细胞可以吸附人与某些动物得红细胞。 4、血凝抑制试验:就是一种特异性得抗体中与反应,其基本原理就是病毒得血凝素可凝集红细胞,但若先用特异性抗体与病毒作用,再加入红细胞,则不出现红细胞凝集,称为血凝抑制。该试验常用于鉴定带有血凝素得病毒得型别,或就是检测此类病毒感染者体内特异性抗体。 5、减毒活疫苗:用人工诱导病毒发生毒力变异而获得得毒力降低而抗原性不变得病毒株制备得疫苗,如脊髓灰质炎疫苗。 6、灭活疫苗:用甲醛灭活病毒核酸但抗原性不变而制备得疫苗,如乙型脑炎疫苗与狂犬疫苗等。 二、选择题 A1型题 1、E 2、D 3、B 4、D 5、E 6、B 7、B 8、D 9、B 10、D 11、E 12、B B1型题 1、D 2、B 3、A 4、B 5、D 6、E 三、填空题 1、4;无菌;2、立即;50%甘油缓冲;3、组织培养;动物接种;鸡胚培养; 4、原代细胞;二倍体细胞株;传代细胞系;5、恢复;急性;4; 6、衣壳;包膜;亚单位疫苗
四、问答题 1、目前最常用得培养病毒得方法就是细胞培养。根据细胞来源与性状得不同可分为三类:(1)原代细胞:新鲜组织经胰酶消化后形成单细胞,加入培养液后37 培养,数日可贴壁长成单层细胞,即为原代细胞培养; (2)二倍体细胞:就是目前最常用得细胞,该细胞可以在体外连续传40至50代仍保持23对染色体得特点,故广泛用于病毒得分离与疫苗得制备;(3)传代细胞:就是体外可以无限传代得细胞,来源于肿瘤细胞或细胞株传代过程中发生得变异株。 2、病毒检测与细菌检测得区别主要在于,病毒就是非细胞型微生物,必须在活细胞内才能增殖,因此与细菌检测主要在分离培养与形态观察上有较大区别: (1)病毒得观察需电子显微镜。光学显微镜只能观察病毒在细胞内形成得包涵体;细菌则可以用光学显微镜观察。 (2)病毒得分离培养需用动物接种、鸡胚培养与组织细胞培养,而细菌大多可用人工培养基培养。 (3)培养物得签定:病毒多通过观察动物发病或细胞病变效应等方法;细菌则主要通过生化反应。 3、相同点:两种疫苗都用于人工主动免疫。 不同点:(1)免疫效果:活疫苗免疫效果好,既可产生体液免疫,也可产生细胞免疫,免疫维持时间长。而灭活疫苗免疫效果较差,仅产生体液免疫而无细胞免疫,免疫维持时间短;(2)给药途径与次数:活疫苗可模拟自然感染方式或注射,免疫一次即可;灭活疫苗只能通过注射且需多次免疫;(3)保存:活疫苗需冷藏,不易保存;灭活疫苗不需冷藏,易保存;(4)缺点:活疫苗极偶然可能发生并发症、持续感染、毒力回复突变等,免疫缺陷者与孕妇不能应用;灭活疫苗得最大缺点就是免疫力不强。 4、使用减毒活疫苗应注意: (1)冷藏:活疫苗对温度很敏感,使用之前应一直保持冷藏以保证疫苗活性。 (2)注意给药时间、浓度与途径:接种疫苗应选择适当时间,如不同得疫苗选择不同年龄分别进行计划免疫;两种活疫苗应避免同时接种而发生干扰。口服肠道病毒疫苗以冬季服用为好,可避免其她肠道病毒得干扰。疫苗得剂量一定要足。口服疫苗应注意不要用热水与母乳送服。 (3)注意禁忌证:被免疫者应无急性发热性疾病、腹泻、免疫缺陷或其她慢性疾病,避免发生病毒之间得干扰或疫苗增殖引起不良反应。接种疫苗时应避免用免疫球蛋白。