饲料中粗纤维的测定方法（二）
------------SQL-6 纤维测定仪
1、原理：
用浓度准确的酸和碱，在特定条件下消煮样品，再用乙醇除去可溶物，经高温灼烧扣除矿物质的量，所余量为粗纤维。它不是一个确切的化学实体，只是在公认强制规定的条件下测出的概略成分，其中以纤维素为主，还有少量半木质素和木质素。
2、试剂溶液的配置：
（1）硫酸溶液（0.128±0.005mol/L）：取硫酸分析纯3.84ml置于1000ml容量瓶中，蒸馏水稀释定容至刻度混匀即可（标定）。
（2）氢氧化钠溶液（0.313±0.005mol/L）：取氢氧化钠饱和液17.6ml（或氢氧化钠12.52g）加蒸馏水1000ml溶解摇匀即可（标定）。
（3）正辛醇。
3、仪器设备：
（1）实验室用样品粉碎机；
（2）分析天平：分度值0.0001g；
（3）粗纤维测定仪SQL-6及用具；
（4）高温炉：有温度计可控制温度在500～600℃；
（5）电热恒温箱（烘箱）：可控制温度在130℃；
（6）干燥器：用氯化钙（干燥试剂）或变色硅胶作为干燥剂。
4、检测步骤：
（1）在已编号的坩埚内准确的称取净干的平均试样或烘干无水的脱脂样品约1g；
（2）接通电源、水源，开启主机电源开关（自来水尽量开足保证冷凝）；
（3）打开酸碱预热瓶上盖，分别加入已制备的酸、碱溶液以及蒸馏水，加热至预热瓶的90%，盖上冷凝球；
（4）开启酸预热电源开关，预热酸至微沸；
（5）将装有试样的坩埚移入仪器温室中，将下阀全部关闭，逐个拉出加热器手柄；
（6）开启酸阀，逐个开启上阀，在消煮管内加入少量的硫酸（将试样淹没为准），再开吸开关，逐个开下阀，抽尽溶液，关吸开关和全部下阀。然后将已预热好的硫酸加至刻度中间线（约150ml）后，再在每个消煮管内加入3-4滴正辛醇，开启定时器，同时按需要分别开加热器电源开关，调节选位旋钮可观察单个加热器电压。先将电压调至最高220V。待消煮液微沸，将电压逐个向下调至消煮管内液体微沸（以样品无沉淀为标准，电压中间调至100V，再调25-50V）。开始定时，旋钮旋至30min，（如消煮液微沸时发现试样粘壁可补加消煮液），同时开启蒸馏水预热开关（预热至蒸馏水微沸）。到时加温自动停止。
纤维素含量的测定
1. 引言
纤维素是植物细胞壁的主要组成部分，对于植物的生长和发育具有重要作用。同时，纤维素也是人类食物中的重要成分之一，对于人体健康起着重要的作用。因此，准确测定纤维素含量对于农业生产和食品工业具有重要意义。
本文将介绍纤维素含量的测定方法，包括传统的化学方法和现代的生物技术方法。同时，还将讨论不同物质中纤维素的含量测定方法的优缺点，并对纤维素含量的测定结果进行分析和解读。
2. 传统的化学方法
2.1. 酸碱法
酸碱法是最常用的纤维素含量测定方法之一。该方法基于纤维素对酸和碱的反应性，通过酸碱处理纤维素样品，进而测定纤维素含量。
具体操作步骤如下：
1. 取一定质量的纤维素样品；
2. 用酸处理样品，将纤维素溶解，得到纤维素溶液；
3. 用碱处理纤维素溶液，得到沉淀；
4. 将沉淀洗净、干燥，得到纤维素的质量。
2.2. 全纤维素测定法
全纤维素测定法是一种综合测定方法，可以同时测定纤维素的各个组分的含量，包括纤维素、半纤维素和木质素。
具体操作步骤如下：
1. 取一定质量的样品；
2. 用酸处理样品，将纤维素溶解，得到纤维素溶液；
3. 用酶处理纤维素溶液，将半纤维素水解为单糖；
4. 用酸处理水解液，将木质素溶解，得到木质素溶液；
5. 将纤维素溶液、半纤维素水解液和木质素溶液分别干燥，得到各自的质量。 3. 现代的生物技术方法
3.1. 高效液相色谱法
高效液相色谱法是一种常用的纤维素含量测定方法，具有准确、快速、灵敏度高等优点。该方法利用高效液相色谱仪对纤维素样品中的纤维素进行分离和测定。
具体操作步骤如下：
1. 取一定质量的纤维素样品；
2. 将样品加入适量的溶剂中，使纤维素溶解；
3. 使用高效液相色谱仪对纤维素溶液进行分离和测定；
4. 根据峰面积和标准曲线计算纤维素的含量。
3.2. 免疫测定法
免疫测定法是一种基于抗体与纤维素结合的原理进行纤维素含量测定的方法。该方法具有高度特异性和敏感性的优点。
饲料中粗纤维的测定方法（一）
参考GB/T 6434-1994
1、原理：
用浓度准确的酸和碱，在特定条件下消煮样品，再用乙醇除去可溶物，经高温灼烧扣除矿物质的量，所余量为粗纤维。它不是一个确切的化学实体，只是在公认强制规定的条件下测出的概略成分，其中以纤维素为主，还有少量半木质素和木质素。
2、试剂溶液的配置：
（1）硫酸溶液（0.128±0.005mol/L）：取硫酸分析纯3.84ml置于1000ml容量瓶中，蒸馏水稀释定容至刻度混匀即可（标定）。
（2）氢氧化钠溶液（0.313±0.005mol/L）：取氢氧化钠饱和液17.6ml（或氢氧化钠12.52g）加蒸馏水1000ml溶解摇匀即可（标定）。
（3）酸洗石棉、95%乙醇、正辛醇。
3、仪器设备：
（1）实验室用样品粉碎机；
（2）分析天平：分度值0.0001g；
（3）电热加热器（电炉），可调节温度；
（4）高温炉：有温度计可控制温度在500～600℃；
（5）电热恒温箱（烘箱）：可控制温度在130℃；
（6）消煮器：有冷凝球的600ml高型烧杯或有冷凝管的锥形瓶。
（7）抽滤装备：抽真空装置（真空泵）、吸滤瓶；
（8）古氏坩埚：30ml，预先加入酸洗石棉悬浮液30ml（内含酸洗石棉0.2～0.3g）再抽干，以石棉厚度均匀，不透光为宜。上下铺两层玻璃纤维有助于过滤。
（9）干燥器：用氯化钙（干燥试剂）或变色硅胶作为干燥剂。
4、检测步骤：
取试样品1g左右→用乙醚脱脂（含脂肪大于10%必须脱脂）置于煮沸器中→加已沸的0.128mol/L硫酸溶液200ml、正辛醇1滴→立即加热（2分钟内沸起）→再继续微沸30分钟（保持溶液浓度不变）→用过滤网过滤后用沸水冲洗至中性（抽干）→用200ml已沸的浓度为0.313mol/L氢氧化钠溶液将滤后残渣充移至原消煮器中→接着微沸30分钟→用真空装置抽滤（试样液抽完）→25ml硫酸溶液冲洗→蒸馏水洗至中性→95%乙醇15ml洗涤→抽干→将古氏坩埚连锅内的残渣置于130℃烘箱2小时→取出、冷却、称重→置于550℃高温炉中30分钟→取出、冷却、称重。
1.2.2 膳食纤维物性测定方法
1.2.2.1 膳食纤维溶胀性测定[7] 称取1.00g 样品, 置于
温条件下静置24h, 读取液体中样品的体积。按下式
计算溶胀性:
溶胀性=[溶胀后纤维体积(mL)- 干品体积(mL)]/
样品干重(mL)
20mL 试管中, 吸15mL 蒸馏水加入其中, 振荡后在室
1.2.2.2 膳食纤维持水力测定[7] 称取1.00g 样品放入
20mL 试管中, 加入蒸馏水15mL 室温下浸泡24h 后,
然后用胶头滴管吸取上层澄清液, 插入滤纸条, 使其
最底部刚刚接触渣液平面, 12h 后沥干样品水分。之
后将取下滤纸条的试管放在电子天平上准确称重。
按下式计算持水力:
持水力=[样品湿重(g)- 样品干重(g)]/样品干重(g)
1.3.5.1 膳食纤维膨胀力测定[8]
称取0.10g 样品，置于50ml 量筒中，吸5ml 蒸馏
水加入其中，振荡后在25℃条件下密封放置24h，读取
液体中样品的体积。按下式计算膨胀力：
膨胀力=[溶胀后纤维体积(ml)－干品体积(ml)]/样品
干重(ml)
1.3.5.2 膳食纤维持水力测定[8]
称取2.00 g 样品放入100ml 烧杯中，加入20℃蒸馏
水40ml 常温下浸泡1h 后，在定量滤纸上沥干样品水分，
并将其迅速转入表面皿中称重。按下式计算持水力：
持水力=[样品湿重(g)－样品干重(g)]/样品干重(g)
1.3.5.3 膳食纤维结合水力测定
称取1.00g 样品，置于平皿中，加入20℃蒸馏水
20ml，室温下保持1h 后移置定量滤纸上沥干水分，将
湿样移入10ml 刻度离心管中，在4000r/min 条件下离心
5min 后弃去水分，所获得湿样所含水分即为结合水，其
与干样的重量之比即为结合水力。按下式计算结合水
力：
结合水力=[离心后样品湿重(g)－样品干重(g)]/ 样品
干重(g)
1.3.6 高品质膳食纤维的评定方法
