增殖细胞核抗原和Ki-67抗原在黏液表皮样癌中的表达

・８４・　口腔颌面外科杂志２００８年４月第１８卷第２期　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆｏｒａＪ　ａｎｄ　ＭａｘｉＵｏｆａｃｉａｌ　Ｓｕｒｇｅｒｙ　Ｖｏ１．１８　Ｎｏ．２　Ａｐｒｉｌ．２００８　

增殖细胞核抗原和Ｋｉ一６７抗原在黏液表皮样癌中的表达　

雷爱萍　，华培生　，易先平　，周　明　，苏　建　

（１．武汉市中心医院口腔科，２．病理科，湖北武汉４３００１４）　

【摘要１目的：检测细胞增殖核抗原（ＰＣＮＡ）和Ｋｉ．６７抗原在黏液表皮样癌中的表达，探讨其表达量与粘液表皮样癌分　级的相关性及意义。方法：对ｌ７例黏液表皮样癌的临床病理特点进行回顾性分析．采用ＳＡＢＣ和ＬＳＡＢ免疫组化法　

分别检测ＰＣＮＡ和Ｋｉ．６７在ｌ７例黏液表皮样癌的表达和分布。结果：１７例黏液表皮样癌中，高分化型ｌｌ例（其中１　

例转移），低分化型６例（其中４例转移）。ＰＣＮＡ及Ｋｉ．６７的增殖指数（ＰＩ值）在黏液表皮样癌中，低分化型明显高于　

高分化型（Ｐ＜Ｏ．Ｏ１）。在发生转移的黏液表皮样癌组中，ＰＣＮＡ及Ｋｉ．６７的表达水平均明显高于无转移组。结论：黏液　

表皮样癌中ＰＣＮＡ和Ｋｉ．６７的表达水平与细胞分化有关，其ＰＩ值可作为组织学分级的重要参数。ＰＣＮＡ和Ｋｉ．６７的　

高表达预示着黏液表皮样癌预后的不良。　

【关键词】　增殖细胞核抗原；Ｋｉ．６７抗原；黏液表皮样癌；　

【中图分类号】Ｒ７３９．８　【文献标识码】Ａ　【文章编号】１００５．４９７９（２００８）０２．Ｏ８４．０３　

Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｎｇ　Ｃｅｌｌ　Ｎｕｃｌｅｒ　Ａｎｔｉｇｅｎ　Ａｎｄ　Ｋｉ－６７　Ａｎｔｉｇｅｎ　

ｉｎ　Ｍｕｃｏｅｐｉｄｅｒｍｏｉｄ　Ｃａｒｃｉｎｏｍａ　

ＬＥＩ　Ａｉ－ｐｉｎｆ，ＨＵＡ　Ｐｅｉ—ｓｈｅｎｇ，ＹＩ　Ｘｉａｎ－ｐｉｎｆ，ＺＨＯＵ　Ｍｉｎｇ，ＳＵ　Ｊｉａｎｌ　

．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｓｔｏｍａｔｏｌｏｇｙ，Ｗｕｈａｎ　Ｃｅｎｔｒａｌ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｗｕｈａｎ　４３００１４；２．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ，　

Ｗｕｈａｎ　Ｃｅｎｔｒａｌ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｗｕｈａｎ　４３００１４，Ｈｕｂｅｉ　Ｐｒｏｖｉｎｃｅ，Ｃｈｉｎａ　

【Ａｂｓｔｒａｃｔ］Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ　ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＰＣＮＡ，Ｋｉ－６７　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｇｒａｄｅ　ｏｆ　ｍａｌｉｇｎａｎｃｙ　ｏｆ　

ｍｕｃｏｅｐｉｄｅｒｍｏｉｄ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ（ＭＥＣ）．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ａ　ｒｅｔｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　１７　ｃａｓｅｓ．Ａｌｌ　ｓｅｃｔｉｏｎｓ　ｗｅｒｅ　ｅｘａｍｉｎｅｄ　ｗｉｔｈ　ａｎｔｉ－　ＰＣＮＡ　ａｎｄ　ａｎｔｉ－Ｋｉ－６７　ｐｒｏｔｅｉｎ　ＭｃＡｂｓ　ｂｙ　ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ　ｍｅｔｈｏｄｓ．　Ｒｅｓｕｌｔｓ：　Ｉｎ　１　７　ｃａｓｅｓ　ｏｆ　ｍｕｃｏｅｐｉｄｅｒｍｏｉｄ　

ｃａｒｃｉｎｏｍａ，１　１　ｃａｓｅｓ　ｗｅｒｅ　ｏｆ　ｌｏｗ　ｇｒａｄｅ，６　ｃａｓｅｓ　ｗｅｒｅ　ｏｆ　ｈｉ【ｇｈ　ｇｒａｄｅ　ｉｎ　ｍａｌｉｇｎａｎｃｙ．Ｔｈｅ　ＰＣＮＡ　ａｎｄ　Ｋｉ－６７　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｎｇ　ｉｎｄｅｘ　

（ＰＩ）　ｏｆ　ｈｉｇｈ　ｇｒａｄｅ　ｍｕｃｏｅｐｉｄｅｒｍｏｉｄ　ｃａｒｃｉｎｍａ　ｗｅｒｅ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｈｉｇｈｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈａｔ　ｏｆ　ｈｉｇｈ　ｇｒａｄｅ　ｍｕｃｏｅｐｉｄｅｒｍｏｉｄ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ　

（尸＜Ｏ．ｏｏ１）．Ｉｎ　ｔｈｅ　ｃａｓｅｓ　ｗｉｔｈ　ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ，ＰＣＮＡ　ａｎｄ　Ｋｉ－６７　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｉｎｔｅｎｓｉｔｉｅｓ　ｗｅｒｅ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｓｔｒｏｎｇｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈｏｓｅ　

ｗｉｔｈｏｕｔ　ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ．Ｃｏｎｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｎｇ　ｉｎｄｅｘ　ｏｆ　Ｋｉ－６７　ａｎｄ　ＰＣＮＡ　ｍａｙ　ｂｅ　ｕｓｅｄ　ａｓ　ａｎ　ｉｍｐｏｒｔａｎｔ　ｐａｒａｍｅｔｅｒ　ｆｏｒ　ｇｒａｄｉｎｇ　ｍｕｃｏｅｐｉｄｅｒｍｏｉｄ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ．Ｔｈｅ　ｈｉｇｈｅｒ　ｌｅｖｅｌｓ　ｏｆ　ＰＣＮＡ　ａｎｄ　Ｋｉ－６７　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓ　ｍａｙ　ｉｎｄｉｃａｔｅ　ａ　ｐｏｏｒ　ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ．　

【Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ］ＰＣＮＡ　ａｎｔｉｇｅｎ；Ｋｉ－６７　ａｎｔｉｇｅｎ；ｍｕｃｏｅｐｉｄｅｒｍｏｉｄ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ　

黏液表皮样癌（ｍｕｃｏｅｐｉｄｅｒｍｏｉｄ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ，ＭＥＣ）　

是涎腺最常见的恶性肿瘤之一，占涎腺肿瘤５％～　

１２％。好发于腮腺。已经证实，涎腺的黏一液表皮样癌　

的组织学分级能够预测其预后。对手术后的放疗方　

案的决定至关重要。然而，临床上发现，有的高分化　

型的黏一液表皮样癌并没有表现出同组织病理学一　

致的临床过程。因此，黏液表皮样癌的许多分级方法　

被学者提出。以期能够提高黏液表皮样癌的可预见　

性　

收稿日期：２００７—０５—３ｌ　作者简介：雷爱萍（１９６５一），女，陕西人，副主任医师，硕士研究生　通讯作者：雷爱萍．Ｅ－ｍａｉｌ：ｌａｐｌｓｎｉｎｇ＠ｓｉｎａ．ｃ０ｍ　随着肿瘤增殖动力学研究的不断深入，通过细　

胞增殖活性检测来评价肿瘤的恶性度、预测预后的　

可能性成为一种趋势。本实验采用增殖细胞核抗原　

（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｎｇ　ｃｅｌｌ　ｎｕｃｌｅｒ　ａｎｔｉｇｅｎ，ＰＣＮＡ）及Ｋｉ一６７的　

石蜡切片免疫组化法检测１７例黏液表皮样癌．分析　

其不同分化程度间表达的差异。　

１材料与方法　

１．１　材料　

选用武汉市中心医院１９７８—０１—２００５—１２保存完　

整的临床病理存档资料，经病理复查确诊的黏液表　维普资讯 http://www.cqvip.com 雷爱萍，等．增殖细胞核抗原和Ｋｉ．６７抗原在黏液表皮样癌中的表达　ＬＥＩ　Ａｉ—ｐｉｎｇ，ｅｔ　ａ１．Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｎｇ　Ｃｅｌｌ　Ｎｕｃｌｅｒ　Ａｎｔｉｇｅｎ　Ａｎｄ　Ｋｉ．６７　Ａｎｔｉｇｅｎ　ｉｎ　Ｍｕｃｏｅｐｉｄｅｒｍｏｉｄ　Ｃａｒｃｉｎｏｍａ　・８５・　

皮样癌１７例，所有标本均经１０％甲醛固定，石蜡包　

埋，４　ｍ连续切片行ＨＥ染色和免疫组化染色。１７　

例ＭＥＣ中，年龄最大７５岁，最小１４岁。其中男性９　

例，女性８例，男女比为１：０．８９。腮腺ｌ１例，腭部３例，　

口底２例，颌下腺１例。按ＷＨＯ的ＭＥＣ分级标准　

【ｌ】，高分化ｌ１例，低分化６例。　

１．２方法　

抗ＰＣＮＡ单抗系ＣＡＬＢＩＯＣＨＥＭ公司产品．工　

作浓度１：５０，所有标本均采用ＳＡＢＣ法进行染色。抗　

Ｋｉ一６７单抗系美国Ｓｉｇｍａ公司产品．工作浓度１：８００，　

采用ＬＳＡＢ和Ｈｉｇｈ—ＳＡＢＣ法进行染色。以ＰＢＳ代替　

一抗设阴性对照。以口腔黏膜鳞状细胞癌作阳性对　

照。　

１．３结果判定和统计学处理　

ＰＣＮＡ和Ｋｉ一６７免疫组化染色以明确的核着色　

定为阳性．选用测试网格．４００倍视野下观察１　０００　

个肿瘤细胞，计算阳性百分比．称为增殖指数　

（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｎｇ　ｉｎｄｅｘ，ＰＩ），求其平均值，并应用方差分　

析及ｔ检验进行统计学分析。　

２结果　

２．１　ＰＣＮＡ免疫组化观察结果　

ＰＣＮＡ阳性着色主要限于细胞核内．呈现颗粒　

型或弥散型棕褐色着色。胞浆一般不着色。低分化粘　

液表皮样癌中ＰＣＮＡ阳性表达较高分化型明显增　

加．遍布整个癌细胞团块、条索中，主要表现为表皮　

样细胞和中间细胞（图１），黏液表皮样癌的低分化　

型与高分化型之间其ＰＩ值差异有显著性（Ｐ＜０．００１）　

（表１）。　

图１　低分化型黏液表皮样癌ＰＣＮＡ（ＳＡＢＣ法。３．３ｘ４０）　Ｆｉ￣ｎ＇ｅｌ　Ｐｏｏｒｌｙｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｅｄｍｕｃｏｅｐｉｄｅｒｍｏｉｄ　ｃａｒｃｉｎｏｍａＰＣＮＡ　（ＳＡＢＣ，３￣ｘ４０）　

２．２　Ｋｉ一６７免疫组化观察结果　

Ｋｉ一６７阳性着色主要限于细胞核内，呈现颗粒　状，沿核膜聚集（图２）。胞浆一般不着色。不同分型的　

黏液表皮样癌组织中Ｋｊ．６７的表达水平和分布形态　

基本和ＰＣＮＡ的表达相似，只是Ｋｉ一６７阳性细胞计　

数上差异。Ｋｉ一６７的ＰＩ值见表１，方差分析及两两比　

较结果基本同ＰＣＮＡ的ＰＩ值分析结果。　

图２高分化型黏液表皮样癌Ｋｉ・６７（Ｌ－ＳＡＢ法，３．３ｘ４０）　Ｆｉｇｕｒｅ　２　ｍｅ，ｍｙ　ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｅｄ　ｍｕｃｏｅｐｉｄｅｒｍｏｉｄ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ　Ｋｊ・６７　（Ｌ・ＳＡＩｌ，３￣ｘ４０）　

２．３黏液表皮样癌的转移与ＰＣＮＡ及Ｋｉ一６７表达　

结果　

本组１７例中，５例出现转移，转移率为２９．４１％，　

其中３例转移至区域淋巴结，２例远处转移部位分　

别为腰椎及肺。出现转移的５例中，其中１例为高分　

化型黏液表皮样癌，４例为低分化的黏液表皮样癌。　

出现转移距手术后时间最短１个月．最长４８个月。　

发生淋巴结及远处转移的病例．其ＰＣＮＡ与Ｋｉ一　

６７的ＰＩ值明显高于非转移性病例，且有显著性差　

异（Ｐ＜０．００１）（表１）。　

表１不同类型及生物学行为ＭＥＣ的ＰＣＮＡ、Ｋｉ－６７表达（ＰＩ值。　）　Ｔａｂｌｅ１　ＴｈｅＰＣＮＡ　ａｎｄＫｉ－６７ＰＩｉｎ　ｄｉｆｅｒｅｎｔｔｙｐｅｓ　ａｎｄ　ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　ｂｅｈａｖｉｏｒ　ｏｆ　ｍｕｃｏｅｐＭｅｒｍｏＭ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ（ＰＬ　±　１　

３讨论　

细胞增殖的评估是肿瘤的组织学分类所依据的　

重要指标，与肿瘤的治疗和复发有着潜在的相关性。　

ＰＣＮＡ在细胞增殖周期中反复出现，故称周期素，分　

子量为３６ｋＤａ，作为ＤＮＡ多聚酶的一种辅助蛋白，　

直接参与ＤＮＡ的合成，其表达和合成与细胞的增殖　

周期有关。因此它能有效地反映细胞的增殖功能。　

Ｋｉ一６７是一种反映细胞增殖有关的核蛋白，

几乎表达　维普资讯 http://www.cqvip.com ・８６・　口腔颌面外科杂志２００８年４月第１８卷第２期　Ｊｏｕｒｎ￣ｏｆｏｒａｌ　ａｎｄ　Ｍａｘｉｌｌｏｆａｃｉａｌ　Ｓｕｒｇｅｒｙ　Ｖｏ１．１８　Ｎｏ．２　Ａｐｒｉｌ．２００８　

于所有增殖细胞中，在细胞周期Ｇ，晚期、Ｓ期、Ｍ期　

及Ｇ：期均有表达，但在Ｇｎ期则缺乏此抗原。Ｋｉ一６７　

的表达能较准确地反映细胞的增殖程度　

不同分化程度的黏液表皮样癌有着明显不同的　

临床表现和预后。目前一般根据其分化程度判断恶　

性程度。ＷＨＯ对黏液表皮样癌分化程度的病理诊断　

标准为，高分化黏液表皮样癌，黏液细胞数量５０％，　

表皮样细胞分化好；低分化黏液表皮样癌，肿瘤主要　

由未分化的中间细胞或分化差的表皮样细胞构成，　

黏液细胞数量不足１０％【ｕ。有些病例，组织病理学上　

精确地判定其细胞组成比较困难，其组织病理学的　

分级不够客观，使得组织病理学诊断有时和临床的　

生物学行为表现不一致。近年来，有些研究报告［２１用　

生物学标记物试图区分其恶性程度以获得更客观的　

评估。Ｚｈｕ等【　１认为ＰＣＮＡ和Ｋｉ一６７的表达指数是区　

分涎腺肿瘤良恶性可靠的标记物。ＣａｒｄＯＳＯ等［４１认为　

ＰＣＮＡ的表达可作为黏液表皮样癌分级辅助方法。