病毒学检验实验课教学大纲
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实验项目一减毒活病毒鸡胚培养法及病毒滴度和抗体效价测定
【目的要求】
1.掌握病毒鸡胚培养的原理及技术。
2.掌握病毒滴度的测定方法及结果判定。
3.掌握抗体效价测定技术
【实验性质】综合性实验
【实验条件】
1.基本仪器设备:孵化器、恒温培养箱、低速离心机、超净工作台等
2.基本试剂药品:鸡胚、减毒活病毒液等
3.特殊环境要求:
【教学方法】以学生的实际操作为主、讲授为辅。
【教学内容】
1.教师讲授(示教):
2.5学时
(1)病毒鸡胚接种方法
(2)血凝试验。
(3)血凝抑制试验。
2.学生操作:7.5学时
(1)鸡胚接种
(2)血凝试验对尿囊液病毒滴度测定
(3)血凝抑制试验对免疫血清效价测定
3.实验报告:学生根据结果按要求填写实验报告。
(1)病毒鸡胚接种
(2)血凝试验及血凝抑制试验的原理及结果判定
实验项目二细胞培养法对病毒疫苗TCID50测定
【目的要求】
1.掌握细胞培养基本技术要领。
2.掌握病毒细胞接种技术
3.熟悉观察细胞病变判定病毒感染力TCID50
【实验性质】验证性实验
【实验条件】
1.基本仪器设备:CO2培养箱,倒置显微镜,高速离心机,低温冰箱等
2.基本试剂药品:待检病毒,细胞株等
3.特殊环境要求:
【教学方法】以学生的实际操作为主、讲授为辅。
【教学内容】
1.教师讲授(示教):3学时
(1)细胞培养技术。
(2)病毒细胞接种技术。
(3)病毒感染细胞病变。
2.学生操作:9学时
(1)原代细胞制备或传代细胞单层培养
(2)接种病毒疫苗
(3)观察细胞病变判定TCID50
3.实验报告:学生根据结果按要求填写实验报告。
(1)细胞培养病毒接种技术
(2)细胞病变
实验项目三临床标本中流感病毒的诊断
【目的要求】
1.熟练掌握鸡胚培养技术。
2.熟练掌握细胞培养技术
3. 熟悉RT-PCR、ELISA等常用实验室检测技术
【实验性质】综合性实验
【实验条件】
1.基本仪器设备:生物安全柜、孵化器、恒温培养箱、PCR仪等
2.基本试剂药品:细胞株、检测试剂盒等
3.特殊环境要求:生物安全柜
【教学方法】以学生的实际操作为主、讲授为辅。
【教学内容】
1.教师讲授(示教):4学时
(1)病毒常用培养技术。
(2)常用实验室检测技术(RT-PCR、ELISA等)。
(3)临床标本中流感病毒检测流程。
2.学生操作:10学时
检测待测标本流感病毒
3.实验报告:学生根据检测结果按要求填写实验报告。
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