环境生物技术思考题

普通生物学复习思考题一、选择题1、生物区别于非生物的最基本特征是（）。

A、环境适应性B、运动性C、新陈代谢D、生长2、下列属于生物应激性的现象有（）。

A、草履虫从盐水中游向清水B、根生长的向地性C、利用黑光灯来诱杀害虫D、上述各项3、下列（）是病毒不具备的生命特征。

A、细胞结构B、生长和繁殖C、对环境的适应性D、新陈代谢4、下列那项是对理论正确的说明：（）A、理论是指已经被反复证明过的不会错的真理B、理论仅仅是一个需要进一步实验和观察的假说C、理论是不能用实验和观测来支持的假说D、科学中理论一词是指那些已经证明具有最大解释力的假说5、在现代生物学的研究中，生物学家认为生命的本质是（）。

A、机械的B、物化的C、精神的D、上述各项6、根据研究层次来划分，生物学的分科主要有（）。

A、细胞生物学B、分子生物学C、生态学D、解剖学7、18世纪瑞典博物学家（）创立了科学的自然分类系统。

A、施莱登B、林奈C、达尔文D、孟德尔8、1838-1839年（）提出细胞学说。

A.施莱登B、林奈C、达尔文D、孟德尔9、1859年英国生物学家（）提出了科学的生物进化理论。

A.施莱登B、林奈C、达尔文D、孟德尔10.（）是经典遗传学理论的奠基人。

A、施莱登B、摩尔根C、达尔文D、孟德尔11.（）于1953年提出DNA分子双螺旋模型，标志着分子生物学的诞生。

A、施莱登和施旺B、沃森和克里克C、富兰克林和威尔金斯D、孟德尔和摩尔根12、在分子生物学基础上发展起来的生物技术，包括（）等，已成为现代新技术重要组成部分。

A、基因工程B、细胞工程C、发酵工程D、酶工程二、判断题1、非生物具有远远超越任何生物的高度有序性（）。

2、生物能对环境的物理化学变化的刺激作出反应（）。

3、自主运动常被当作动物和人类生命存在的标志特征（）。

4、人类是唯一不适应特定环境，而又能在各种环境中生存的生物（）。

5、多细胞生物只以有性生殖方式产生后代（）。

6、生物进化是生物多样性和统一性共存的根本原因（）。

复习思考题第一章1. 现代生物技术是一项高技术，它具有高技术的“六高”特征是指哪“六高”？答：高效益、高智力、高投入、高竞争、高风险、高势能。

2. 什么是生物技术，它包括哪些基本的内容？它对人类社会将产生怎么样的影响？答：生物技术，也称生物工程，是指人们以现代生命科学为基础，结合其他基础学科的科学原理，采用先进的工程技术手段，按照预先的设计改造生物体或加工生物原料，为人类生产出所需产品或达到某种目的。

生物工程主要包括基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程和蛋白质工程。

每一次重大的科学发现和科技创新，都使人们对客观世界的认识产生一次飞跃；每一次技术革命浪潮的兴起，都使人们改造自然的能力和推动社会发展的力量提高到一个新的水平。

生物技术的发展也不例外，它的发展越来越深刻地影响着世界经济、军事和社会发展的进程。

3. 为什么说生物技术是一门综合性的学科，它与其他学科有什么关系？答：因为生物技术涉及到很多个方面，有医学、林农业、食品、环境、能源、化学品等等，不仅仅是局限于生物这一方面，例如研究使用到高科技电子设备，两者必须结合才能进行研究。

生物分子学也被运用到计算机的研发中去。

4. 简要说明生物技术的发展史以及现代生物技术与传统生物技术的关系。

答：传统生物技术诞生较早。

在石器时代后期，我国人民就会利用谷物造酒，这是最早的发酵技术。

在公元前221年周代后期，我国人民就能制作豆腐、酱和醋，并一直沿用至今。

公元10世纪，我国就有了预防灭花的活疫苗。

到了明代，就已经广泛地种植痘苗以预防天花。

16世纪，我国的医生已经知道被疯狗咬伤可传播狂犬病。

在西方，苏美尔人和巴比伦人在公元前6000年就已开始啤酒发酵。

埃及人则在公元前4000年就开始制作面包。

而现代生物技术是以20世纪70年代DNA重组技术的建立为标志的。

1944年Avery等阐明DNA是遗传信息的携带者。

1953年Watson和Crick提出了DNA的双螺旋结构模型阐明了DNA的半保留复制模式，从而开辟了分子生物学研究的新纪元。

普通生物学复习思考题第一章绪论一、选择题1、根据研究层次来划分，生物学的分科主要有（ 1、2、3 ）。

（1）细胞生物学（2）分子生物学（3）生态学（4）解剖学2、生物多样性通常分为（ 2、3、4 ）三个层次。

（1）生态环境多样性（2）生态系统多样性（3）物种多样性（4）遗传多样性3、18世纪瑞典博物学家（ 2 ）创立了科学的自然分类系统。

（1）施莱登（2）林奈（3）达尔文（4）孟德尔4、1838-1839年（ 1 ）提出细胞学说。

（1）施莱登（2）林奈（3）达尔文（4）孟德尔5、1859年英国生物学家（ 3 ）提出了科学的生物进化理论。

（1）施莱登（2）林奈（3）达尔文（4）孟德尔6、（ 4 ）是经典遗传学理论的奠基人。

（1）施莱登（2）摩尔根（3）达尔文（4）孟德尔7、（ 2）于1953年提出DNA分子双螺旋模型，标志着分子生物学的诞生。

（1）施莱登和施旺（2）沃森和克里克（3）富兰克林和威尔金斯（4）孟德尔和摩尔根8、在分子生物学基础上发展起来的生物技术，包括（ 1、2、3、4 ）等，已成为现代新技术革命的重要组成部分。

（1）基因工程（2）细胞工程（3）发酵工程（4）酶工程二、判断题1、非生物具有远远超越任何生物的高度有序性（ × ）。

2、生物能对环境的物理化学变化的刺激作出反应（∨）。

3、自主运动常被当作动物和人类生命存在的标志特征（∨）。

4、人类是唯一不适应特定环境，而又能在各种环境中生存的生物（∨）。

5、多细胞生物只以有性生殖方式产生后代（∨）。

6、生物进化是生物多样性和统一性共存的根本原因（∨）。

7、发生于大约一万年前的工业革命，使人类实现了从流动的渔业（渔猎）社会向定居的农业社会的变迁（ × ）。

8、自然规律在时间上和空间上的一致性是自然科学的一项基本原则。

（∨）9、认识客观事物的科学方法常分为观察、实验、假说和理论四个步骤（× ）。

10、假说和理论没有明确的分界（∨）。

第一章：绪论思考题1.什么是生物技术？生物技术所包含的内容及定义。

答：1）生物技术又称生物工程，指人们以现代生命科学为基础，结合先进的工程技术手段和其他基础学科的科学原理，按照预先的设计改造生物体或加工生物原料，为人类生产出所需产品或达到某种目的的技术。

2）包括基因工程、细胞工程、发酵工程、酶工程、蛋白质工程、抗体工程、糖链工程、海洋生物技术及生物转化等。

（具体定义见P1）。

2.生物技术药物的概念及分类。

答：1）指采用DNA重组技术或其他生物技术生产的用于预防、治疗和诊断疾病的药物，主要是重组蛋白或核酸类药物。

2）a.按照用途：预防、诊断、治疗；b.按作用类型：细胞因子类、激素类、酶类、疫苗、单克隆抗体类、反义核酸、RNA干扰类、基因治疗药物；c.按照生化特性：多肽类、蛋白质类、核酸类、聚乙二醇化多肽或蛋白质。

3.生物技术药物在理化性质、药理学与作用、生产制备和质量控制方面的特性。

答：1）理化性质（从药物多是蛋白质或核酸出发）：a.相对分子质量大；b.结构复杂；c.稳定性差；2）药理学作用：a.活性与作用机制明确；b.作用针对性强；c.毒性低；d.体内半衰期短；e.有种属特异性；f.可产生免疫原性；3）生产制备特性：a.药物分子在原料中含量低；b.原料中常存在降解目标产物的杂质；c.制备工艺条件温和；d.分离纯化困难；e.产品易受有害物质污染；4）质量控制特性：a.质量标准内容的特殊性；b.制造项下的特殊规定；c.检定项下的特殊规定。

4.生物技术制药的概念和主要研究内容与任务。

答：1）指利用基因工程、细胞工程等生物技术的原理和方法，来研究、开发和生产预防、治疗和诊断疾病的药物的一门科学。

2）主要研究内容与任务：a.生物制药技术的研究、开发与应用；b.利用生物技术研究、开发和生产药物。

第二章：基因工程制药思考题1.简述基因工程制药的基本原理和基本流程。

答：1）利用重组DNA技术将外源基因导入到宿主菌或宿主细胞进行大规模培养和诱导表达以获取蛋白质药物的过程称为基因工程制药。

专业课原理概述部分一、选择题（每题1分，共5分）1. 下列哪种生物技术可以用于植物繁殖？（）A. 组织培养B. 基因编辑C. 克隆D. 转基因2. 在生态系统中的物质循环过程中，下列哪个环节是不可缺少的？（）A. 消费者B. 分解者C. 生产者D. 非生物的物质和能量3. 下列哪种细胞器在动物细胞中不存在？（）A. 叶绿体B. 线粒体C. 内质网D. 高尔基体4. 下列哪个是原核生物？（）A. 真菌B. 蓝藻C. 草履虫D. 酵母菌5. 下列哪种生物具有细胞壁？（）A. 动物细胞B. 植物细胞C. 病毒D. 细菌二、判断题（每题1分，共5分）1. 生物体的基因型决定了其表现型。

（）2. 所有生物都需要氧气进行呼吸。

（）3. DNA是生物体内主要的遗传物质。

（）4. 被子植物和裸子植物都属于种子植物。

（）5. 细胞分化过程中，细胞核内的遗传物质会发生变化。

（）三、填空题（每题1分，共5分）1. 生物体的基本单位是______。

2. 在有氧呼吸过程中，最终物是______和______。

3. 生物进化的重要证据之一是______。

4. 生态系统中，能量流动的特点是______。

5. 遗传信息的传递过程可概括为：DNA→______→蛋白质。

四、简答题（每题2分，共10分）1. 简述生物多样性的三个层次。

2. 什么是光合作用？它包括哪两个阶段？3. 简述减数分裂的过程。

4. 什么是种群？它有哪些基本特征？5. 简述生态系统中能量流动的特点。

五、应用题（每题2分，共10分）1. 设计一个实验，验证植物细胞的质壁分离和复原。

2. 分析一个生态系统中食物链和食物网的关系。

3. 举例说明生物技术在农业生产中的应用。

4. 如何利用现代生物技术进行疾病诊断？5. 讨论生物进化与生物多样性的关系。

六、分析题（每题5分，共10分）1. 分析孟德尔遗传实验中，分离现象和自由组合现象的原因。

2. 结合实例，分析生物体内环境稳态的调节机制。

化工环境保护与安全技术概论第三版思考题答案1 ．在化工废气处理技术中，过滤式除尘器的特点描述错误的是（）A．高效除尘器B．回收干料C．适宜处理含水、油、粘性的粉尘D．使用温度较低参考答案：C答案解析：暂无2 ．在化工废气处理技术中，清除废气中的粉尘时，粉尘密度描述正确的是（）A．真密度大于视密度时，差值越大越易飞扬B．真密度大于视密度时，差值越小越易飞扬C．真密度小于视密度时，差值越大越易飞扬D．真密度小于视密度时，差值越小越易飞扬参考答案：A答案解析：暂无3 ．在废水中氮的消除中，使用化学沉淀法的特点，描述错误的是（）。

A．除磷率高B．处理结果稳定C．废渣多D．废渣少参考答案：D答案解析：暂无4 ．在过滤法中，格栅过滤除粗悬浮物中栅条净间距是（）A．0-5mmB．5-10mmC．10-25mmD．25-50mm参考答案：C答案解析：暂无5 ．由国家环保部统一制定环境影响报告表的编制主要内容为（）项，环境影响登记表主要内容为（）项A．4，6B．6，4C．8，3D．10，5参考答案：B答案解析：暂无6 ．在污水处理中，浮选法（气浮法）利用高度分散的（）粘附水中污秽物，浮到水面，再进行分离。

A．小气泡B．大气泡C．小颗粒D．大颗粒参考答案：A答案解析：暂无7 ．混凝沉淀法中助凝剂不包括以下哪个方面（）。

A．pH调节剂B．还原剂C．氧化剂D．活化剂参考答案：B答案解析：暂无8 ．发改委的行业《清洁生产评价指标体系》中科测评注企业的清洁生产水平的分值，一般是（）分以上为合格。

A．50B．60C．65D．70参考答案：B答案解析：暂无9 ．建设项目环评具体分类由（）部制定并公布名录。

A．卫生部B．监督部C．建设部D．环保部参考答案：D答案解析：暂无10 ．化工污染按性质分类，以下不属于的是（）A．高分子B．无机物C．有机物D．混合物参考答案：A答案解析：暂无11 ．在二氧化硫废气处理技术，关于钠碱法脱除二氧化硫技术描述错误的是（）A．吸收率高B．吸收率低C．无结垢堵塞D．耗碱成本较高参考答案：B答案解析：暂无12 ．化工污染按污物形态分类，以下不属于的是（）A．废水B．废烟C．废气D．废渣参考答案：B答案解析：暂无13 ．在卫生填埋技术中，防治二次污染的措施中，下列正确的是（）A．掩埋好B．选址好C．渗透好D．引出好参考答案：D答案解析：暂无14 ．在气态污染物处理技术中，关于吸附法特点描述错误的是（）A．工艺简单B．净化度高C．吸附容量大D．不适于高浓度大气量参考答案：C答案解析：暂无15 ．在二氧化硫废气处理技术，关于氨法脱除二氧化硫技术描述错误的是（）A．A氨法流程简单B．工艺成熟C．副产物都无用D．广泛应用于硫酸生产尾气处理参考答案：C答案解析：暂无16 ．以下不属于乙炔加成氯化法生产氯乙烯工艺优点。

第一章．绪论1、生命体细胞作为基本单位的组构，有哪些重要的特点？2、为什么说生物体是一个开放的系统？3、在五界系统中，为什么没有病毒？4、在二界或三界系统中，细菌、真菌均隶属于植物界，在五界系统中，它们都从植物界中划出来，或独立或为原核生物界和真菌，这样做的理由是什么？5、三叶草—蝴蝶—蜻蜓—蛙—蛇—鹰是一种常见的食物链，但其中没有分解者，试将分解者以适当方式加到这个食物链中。

6、分子生物学的发展如何深化和发展了人们关于生物界统一性的认识？7、怎样理解科学是一项具有自我修正机制的社会活动？8、为什么说地球上的生态系统是目前人类生存的地球表层环境得以维持的支持系统？第二章．生命的化学基础1、动物是由于氧气（O2）氧化糖（C6H12O6）产生CO2和H20获得能量。

假设你想知道所产生的CO2中的氧是来自于糖还是氧气，试设计一个用180作为示踪原子的实验来回答你的问题。

2、有人说：“不必担心工农业所产生的化学废料会污染环境，因为组成这些废料的原子本来就存在于我们周围的环境中。

”你如何驳斥此种论调？3、兔子吃的草中有叶黄素，但叶黄素仅在兔子的脂肪中积累而不在肌肉中积累。

发生这种选择性积累的原因在于这种色素的什么特性？4、牛能消化草，但人不能，这是因为牛胃中有一种特殊的微生物而人胃中没有。

你认为这种微生物进行的是什么生化反应？如果用一种抗生素将牛胃中所有的微生物都消灭掉，牛会怎样？5、有一种由9种氨基酸组成的多肽，用3种不同的酶将此多肽消化后，得到下列5个片段（N代表多肽的氨基酸）：丙一亮一天冬一酪一撷一亮酪一撷一亮N一甘一脯一亮天冬一酪一撷一亮N一甘一脯一亮一丙一亮试推测此多肽的一级结构。

第三章.细胞结构与细胞通讯1、为什么低等动物不能单纯靠细胞体积的膨大而进化为高等动物？2、原核细胞和真核细胞的差别关键何在？3、植物一般不能运动，其细胞的结构如何适应于这种特性？4、动物能够运动，其细胞结构如何适应于这种特性？5、细胞器的出现和分工与生物由简单进化到复杂有什么关系？6、动、植物细胞的质膜在成分和功能上基本相同，其生物学意义何在？7、最近发现了食欲肽（orexin )，一种似乎能调节任何动物食欲的信号分子。

生物化学实验思考题生物化学实验考试试题细胞破碎1 常用的细胞破碎的方法有哪些？机械法：研磨，高速捣碎机；物理法：反复冻溶，超声波破碎，压榨法；化学与生物化学法：自溶，溶胀法，酶解法，有机溶剂处理。

2 有机溶剂法破碎细胞原理，常用的有机溶剂有哪些？有机溶剂溶解细胞壁并使之失稳。

比如笨、甲苯、氯仿、二甲苯及高级醇等3 酶法破碎细胞原理：酶分解作用4反复冻融法破碎细胞原理：通过反复将细胞放在低温下突然冷却和室温下融化达到破壁作用层析技术1.什么叫层析技术？层析技术是利用混合物中各组分理化性质的差别（分子亲和力、吸附力、分子的形状和大小、分配系数等），使各组分以不同程度分布在两个相，其中一个是固定相，另一个是流动相，从而使各组分以不同速度移动而使其分离的方法。

2、按层析过程的机理，层析法分哪几类？按操作形式不同又分哪三类？根据分离的原理不同分类，层析主要可以分为吸附层析、分配层析、凝胶过滤层析、离子交换层析、亲和层析等。

按操作形式不同又分层析可以分为纸层析、薄层层析和柱层析。

3.指出常用层析技术的应用范围。

凝胶层析法：⑴脱盐；⑵用于分离提纯；⑶测定高分子物质的分子量；⑷高分子溶液的浓缩离子交换层析法：主要用于分离氨基酸、多肽及蛋白质，也可用于分离核酸、核苷酸及其它带电荷的生物分子高效液相层析法：⑴液-固吸附层析；⑵液-液分配层析；⑶离子交换层析4.SephadexG-100凝胶柱层析分离蛋白质原理是什么？大小不同的分子经过的路线长短不同而达到分离作用。

5.用Sephadex G25脱盐时蛋白质和盐哪个先出峰？蛋白质6.相对分子量为8万和10万的蛋白质能否在SephadexG-75柱中分开？为什么？不能,分子量差距太小。

7.将分子量分别为a（90 000）、b（45 000）、c（110 000）的三种蛋白质混合溶液进行凝胶过滤层析，正常情况下，将它们按被洗脱下来的先后排序。

c、a、b8.离子交换层析与凝胶过滤哪种分辨率高？离子交换层析较高。

环境监测思考题第一节1.国家爱环保部对监测方法分类答：我国对各类水体中不同污染物质的监测分析方法分为三分层次：A层次方法为国家或行业标准方法，其成熟性好和准确度好是评价其他监测方法的基准方法；B层次方法为统一分析方法；C层次方法为等效方法（试用方法）。

2.工业废水在检测时应如何设采样点？答：（1）。

在车间或车间处理设施的废水排放口布设采样点，检测第一类污染物；在工厂废水总排放口布设采样点，监测第二类污染物。

（2）已有废水处理设施的工厂，在处理设施的总排放口布设采样点。

3.具体说明地表水检测中河流监测断面，采样垂线及采样点布设的内容。

答：河流监测断面的布设：为评价完整江河水系的水质，需设置背景断面、对照断面、控制断面和削减断面；对于某一河段，只需设置对照、控制和削减三种断面。

（1）背景断面：设在未受人类活动影响的河段，用于评价一个完整的水系污染程度。

（2）对照断面：设在进入城市或工业区以前的地方，避开各种废水流入处和回流处。

一个河段一般只设一个对照断面，有主要支流时酌情添加。

（3）控制断面：设在排污口下游500—1000米出。

削减断面：通常设在城市或工业区最后一个排污口下游1500m以外的河段上，污染浓度显著降低的断面。

采样垂线：根据水面宽度确定断面上的监测垂线。

对于江河水系，当水面宽小于等于50m时，只设一条中泓垂线；水面宽50——100m时，再近左右岸有明显水流处各设一条垂线；水面宽大于100m时，设左中右三条垂线，如证明断面水质均匀时，可仅设中泓垂线。

采样点的布设：根据监测垂线处水深确定采样点的数目和位置。

在一条垂线上，当水深不足0.5m时在二分之一水深处设采样点；水深0.5—5m时，只在水面下0.5m处设一个采样点；水深5—10m时，在水面下0.5m处和河底以上0.5m处各设一个采样点；水深大于10m时，设三个采样点，即水面下0.5m处、河底以上0.5m及二分之一水深处各设一个采样点。

4.简述地面水监测方案的制定包括哪些内容？答：（1)基础资料的收集与实地考察（2）监测断面和采样点的布设（3）采样时间和采样频率的确定（4）采样及检测技术的选择（5）结果表达、质量保证及实施计划第三节1.瞬时水样、混合水样、综合水样？2.举例说明水样的保存措施有哪些？3.水样预处理的内容？4.硝酸消解法常用于消解测定哪一类化合物的水样？5.萃取率与分配比之间的关系换算？6.如何采集测定溶解氧的水样/7.水温计法和颠倒温度计法各适合测定什么样的水温？8.水的颜色可分为几种？如何定义的？9.水的固体物分为哪几种？各是什么？第六节1.冷原子吸收光谱法测定金属汞的原理；画出冷原子吸收测汞仪的工作原理并举例说明?2.原子吸收分光光度计的四个主要构成部分并说明其作用?3.二苯碳酰二肼分光光度法测定总铬的原理？4.标准加入法的操作方法？第七节1.什么是酸度，什么是碱度，有哪些测定方法？2.PH值有哪些测定方法？3.写出碘量法测定溶解氧的原理及化学反应方程式，如果水样中含有氧化性物质和还原性物质对测定结果有哪些影响？4.修正的碘量法主要有哪些，各为消除什么物质干扰？5.氰化物测定时常用蒸馏方法有哪些？6.什么是氨氮，纳氏试剂分光光度法测定水中氨氮时，如果水样中含有钙、镁、铁等金属离子时，应如何消除干扰？第八节，1.COD2.重铬酸钾法测定COD原理、实验步骤、计算公式3.计算1g葡萄糖，1g苯二甲酸氢钾理论COD为多少4.测定高锰酸钾指数时，酸性高锰酸钾法和碱性高锰酸钾法各适用于什么情况，为什么？5.BOD6.什么是五大培养法？7.稀释水和接种稀释水如何配制？8.测定BOD时引入稀释水和接种稀释时的目的？9.BOD结果上报数据时有何要求？10.BOD的计算11.燃烧氧化—非色散红外吸收法测定总有机碳（TOC）原理。

微生物思考题及参考答案The document was prepared on January 2, 2021微生物思考题及参考答案1.用油镜观察时应注意哪些问题在载玻片和镜头之间加滴什么油起什么作用答：应该先用擦镜纸将镜头擦干净,以防上次实验的污染.操作时,先低倍再高倍.用完要擦掉油.加香柏油,作用是增加折光率,也就是增加了显微镜的分辨率.油的折光率和分辨率成反比有公式,同时与波长成正比.2.什么是物镜的同焦现象它在显微镜观察中有什么意义答：在一般情况下,当物像在一种物镜中已清晰聚焦后,转动物镜转换器将其他物镜转到工作位置进行观察时,物像将保持基本准焦的状态,这种现象称为物镜的同焦.利用这种同焦现象,可以保证在使用高倍镜或油镜等放大倍数高、工作距离短的物镜时仅用细调节器即可对物像清晰聚焦,从而避免由于使用粗调节器时可能的误操作而损坏镜头或载玻片.3.影响显微镜分辨率的因素有哪些答：物镜的NA值物镜的数值孔径与照明光源的波长.4.美蓝染色液作用时间的不同,对酵母菌死细胞数量有何影响,试分析原因答：会造成更多的死细胞,在显微镜下观察,活的是透明无色,衰老的是淡蓝色,死亡的是蓝色,如果美蓝染色液作用时间过长,会造成细胞脱水死亡并渗透染液,影响实验结果.5.镜检时如何区分放线菌基内菌丝,气生菌丝以及孢子丝一般气生菌丝颜色较深,直生或分枝丝状,比基内菌丝粗；而基内菌丝色浅、发亮,可看到横隔膜,继而断裂成球状或杆状小体.6.在进行细菌涂片时应注意哪些环节1、载玻片应该冷却后再涂片.2、如果是涂布液体,可以用毛细管或接种环滴一小滴,然后轻轻抹开,一圈足够. 3、如果是涂布菌落或菌苔,应该在载玻片上先滴一滴水,再将菌落或菌苔涂布上去,接种环的尖蘸一点点即可. 4、为了节省时间,可以将干燥和热固定合并成一步.但是应该避免高温,因为温度一高,细菌会变形. 5、染色时间视染色液种类而定.如结晶紫只需几十秒,亚甲基蓝则需一到两分钟. 6、冲洗时,水流不能太大,而且尽量避免水流直接冲在涂片上. 7、冲洗后干燥,可以用酒精灯加热以节省时间,同样的,应该避免高温,因为温度一高,细菌会变形.7.进行细菌制片时为什么要进行加热固定在加热固定时应注意什么固定的目的有三个：1杀死微生物,固定细胞结构.2保证菌体能更牢的粘附在载玻片上,防止标本被水冲洗掉.3改变染料对细胞的通透性,因为死的原生质比活的原生质易于染色.固定时应注意：手持玻片,菌膜朝上,在微火过3次手指触摸玻片反面,不烫手为宜,固定时应尽可能维持细胞原有形态,防止细胞膨胀或收缩.8.为什么要求制片完全干燥后才能用油镜观察1.因为用油镜观察时,镜头离玻片会很近.如果未完全干燥,载玻片上的液体会污染油镜镜头.镜头非常精密,被污染后不利于下次观察.2、若未完全干燥,水滴会影响油与玻璃之间折光率,造成视野不够清晰.9.哪些环节会影响革兰色染色结果的正确性其中最关键的环节是什么答：涂片环节、加热固定环节、脱色环节；其中最关键的环节是脱色环节.10.进行革兰氏染色时,为什么特别强调菌龄不能太老,用老龄细菌染色会出现什么问题答：菌龄太老,细胞壁通透性改变.着色不均,染色效果不好.阴性阳性不明显分不太清楚,问题是：不便于显微镜下观察是阳性菌还是阴性菌.11.革兰氏染色中那一步是关键为什么你是如何操作的革兰氏染色的关键步骤是：乙醇脱色是脱色时间.如果脱色过度,革兰氏阳性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阴性菌；如脱色时间过短,革兰氏阴性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阳性菌.脱色时间的长短还受涂片的厚薄,脱色是玻片晃动的快慢及乙醇用量的多少等因素的影响,难以严格规定脱色是应当控制速度,脱色时间一般为20—30s.12.革兰氏染色中,哪个步骤可以省略在什么情况下采用媒染目的是在所有的内形成了不溶于水的与碘的复合物. 脱色后使变为无色. 复染使革兰氏阴性菌染成红色. 所以鉴别细菌的革兰氏阴阳性只须媒染,复染的目的是为了看清革兰氏阴性菌.13.你主要根据哪些形态特征来区分四种不同的霉菌曲霉:具有分隔；气生菌丝的一部分形成长而粗糙的分生孢子梗,顶端膨大成球状顶囊,表面辐射出一层或两层小梗,小梗上着生成串的球形分生孢子.分生孢子梗生于足细胞上,并通过足细胞与营养菌丝相连.根霉:菌丝无隔、多核、分枝状,有匍匐菌丝和假根.在假根的上方直立地生长出一至数根孢囊梗,其顶端膨大成球形孢子囊.囊的基部有囊托,中间有球形或半球形囊轴.毛霉:菌丝无隔、多核、分枝状,无假根或匍匐菌丝.菌丝体上直接生出单生、总状分枝或假轴状分枝的孢囊梗.各分枝顶端着生球形孢子囊,无囊托.青霉:菌丝有横隔,分生孢子梗亦有横隔,光滑或粗糙.基部无足细胞,顶端不形成膨大的顶囊,其分生孢子梗经过多次分枝,产生几轮对称或不对称的小梗,形如扫帚,称为帚状体.孢子颜色：黑曲霉是黑色,青霉是青色,根霉是白菌丝黑孢子,毛霉则是淡黄色.以上为实验室观察1菌丝特征：青菌与曲霉菌丝与膈；毛霉与根霉则无；2菌丝的特化结构：曲霉有足细胞,其它霉菌无；根霉有假根与匍匐枝,其它霉菌无；3孢子头特征：青霉的孢子头为扫帚状；根霉与毛霉的孢子头为囊状；曲霉为菊花状孢子头.14.为什么更换不同放大倍数的目镜或物镜时,必须用镜台测微尺重新对目镜测微尺进行校正目镜测微尺中每小格代表的实际长度是不固定的,它是随所使用目镜和物镜的放大率的不同而改变的,故在测量前必须先用镜台测微尺重新对目镜测微尺进行校正,以得出在显微镜的特定放大倍率下,目镜测微尺每小格所代表的相对长度.15.在不改变目镜和目镜测微尺,而改用不同放大倍数的物镜来测定同一细菌的大小时,其测定结果是否相同为什么答:相同;目镜测微尺是一块圆形玻片,其中央刻有精确等分的刻度,有把毫米刻成为50 等分或把10 毫米长度刻成100 等分.测量时,将其放在接目镜中的隔板上来测量经显微镜放大后的细胞物象.由于在不改变目镜和目镜测微尺,而改用不同放大倍数的物镜来测定同一细菌的大小时,物象的放大倍数与每小格目镜测微尺所代表的长度在变化比例上是同步的,故而测定结果相同.16.哪些因素会造成血细胞计数板的计数误差,应如何避免操作时没有先盖盖玻片再滴加悬液,导致体积不准确.避免：先盖盖玻片再滴加悬液.细胞密度太高.避免：稀释溶液.溶液不均匀.避免：滴加溶液前混匀悬液.1、仪器误差：所用器材均应清洁干净,并且计数板计数区不应该有擦痕.2、计数室内可能有气泡.因为酵母细胞并没有染色,看起来是透明的,有气泡很容易被计入,使数值偏高；并且,气泡会影响菌悬液的随机分布.改进：若产生气泡,则用吸水纸吸出.3、菌体在计数板上分布不均,当用选取5格计数时,会造成很大误差.改进：应使菌液自然流入并混匀,进行观察时尽可能多数几个格子.4、配制稀释液时吸取的浓度过高或过低,导致稀释液浓度和原液不成正确比例,计算时产生误差.应将原液摇晃均匀后取中部的液体进行稀释.5、由于数菌体数目时视觉疲劳而导致的视觉误差.应多人观察,取记录平均数.6、计数时可能将格四周的菌都计算在内了,使数值偏高.改进：谨遵一个规则,计上不计下,计左不计右,不可以重复计数.7、可能出现有出芽的酵母菌,将出芽的酵母菌按两个计数了,使数值偏高.改进：计数时,只有当芽体于母细胞一样大的时候,才能计为两个.17.培养基配好后,为什么必须立即灭菌如何检查灭菌后的培养基是否无菌为什么要倒置培养答：由于配制培养基的各类营养物质和容器等含有各种微生物,因此,已配制好的培养基必须立即灭菌,如果来不及灭菌,应暂存冰箱内,以防止其中的微生物生长系列而消耗养分和改变培养基的酸碱度所带来的不利影响.将灭菌的培养基放入37℃温箱中培养24～48h,无菌生长即可证明灭菌后的培养基无菌.倒置培养的主要目的：1由于重力的作用使培养基表面及次层能富集微生物生长所需的营养物质,利于微生物生长；2防止空气中微生物的污染培养基及培养物：倒置时平板内的空气是不流动的,杂菌不会沉降到培养基表面,如果不倒置,很快平板周边会长起杂菌.3倒置培养使琼脂里水分不易蒸发出去,而充分的保持琼脂的弹性与细菌容易繁殖和生存的环境.如果不倒置,大概3天左右培养基就会出现龟裂等水分散失的情况.而一些落菌等试验,需验证培养基无菌,就要先倒置培养48小时才可作为模板做落菌,水分散失是很重要的.19.在配制培养基的操作过程中应注意些什么问题为什么答：一般而言,培养基的配置要注意如下几点原则：1营养成分的配比：碳源和氮源的比例C/N要适当；2适宜的酸碱度pH值：配制培养基时pH的调节；3渗透压：营养物质要有适合的浓度；4培养基不能反复高温灭菌.5 称不溶性固形物时,应单独称,若量少的可以与无机盐一起称,但一定要混匀再分装；6一般情况下培养基用自来水配制.操作细节上则要注意：1称药品用的牛角匙不要混用,称完药品应及时盖紧瓶盖2调pH值不要调过头,以免回调而影响培养基内各离子的浓度3分装时注意不要污染棉塞、试管口,以免染菌.4及时灭菌,以免培养基及容器里的微生物生长繁殖消耗养分、改变酸碱度.1、当然是注意浓度配比不要搞错2、很多培养基的加料顺序有讲究,否则会有沉淀产生3、有些培养基会有不溶物质,分装前应摇匀4、不要忘了调节pH值一般细菌都需要,酵母可能自然pH就行,不过不一定5、加热溶解时尽量不要煮沸,会损失营养物质20.高压蒸气灭菌开始之前,为什么要将锅内冷空气排尽灭菌完毕后,为什么待压力降低“0”时才能打开排气阀,开盖取物.答：1在使用高压蒸汽灭菌时,灭菌锅内冷空气的排除是否完全极为重要,因为空气的膨胀压大于水蒸汽的膨胀压,所以,当水蒸气中含有空气时,在同一压力下,含空气蒸汽的温度低于饱和蒸汽的温度.2压力未降至“0”便开盖取物的可能后果：压力锅内压力骤然降低,引起容器中的溶液喷出容器口导致污染或导致人员的烫伤.21.干热灭菌操作过程中应注意哪些问题为什么1、物品不要摆放太挤,以免妨碍空气流通2、灭菌物品不要接触干燥箱内壁的铁板,以防包装纸烤焦起火3、灭菌时人不能离开4、灭菌结束后不能忘记关掉电源5、待温度降到70度以下再打开,否则冷热空气交替,玻璃器皿容易炸裂或发生烫伤事故22.为什么干热灭菌比湿热灭菌所需温度高时间长在湿热条件下,有水蒸汽的作用：a高温水蒸汽导热比干空气要快；b高温水蒸汽冷凝变水时有放热过程；c高温水蒸汽能穿透细菌的细胞膜,直接进入细胞内破坏细胞；d高温水蒸汽能水解一部分细胞结构,加速导热.湿热中细菌菌体吸收水分,蛋白质较易凝固,因蛋白质含水量增加,所需凝固温度降低；湿热的穿透力比干热大；湿热的蒸汽有潜热存在,每1克水在100℃时,由气态变为液态时可放出2．26kJ千焦的热量.这种潜热,能迅速提高被灭菌物体的温度,从而增加灭菌效力.23.设计实验方案,比较干热灭菌和湿热灭菌的效果.以下试验方案有关操作均遵循无菌操作条件和等量原则.一实验材料试管镊子酒精灯嗜热脂肪芽孢杆菌ATCC7053菌片纸片与菌片同大小同材料溴甲酚紫蛋白冻水培养基已灭菌等实验材料材料有余.二对照组取9支洁净试管,分为A1B1C1三组每3支一组,将A1组中放入菌片,B1组中放入纸片,C1组中什么也不加；不经灭菌,直接加入溴甲酚紫蛋白冻水培养基等量.三恒为培养将上述所有试管按分组在56℃恒温条件下培养48小时.24.如何确定平板上某单个菌落是否为纯培养请写出实验的主要步骤纯培养的确定除观察其菌落特征外,还要结合显微镜检测个体形态特征后才能确定,有些微生物的纯培养要经过一系列分离与纯化过程和多种特征鉴定才能得到.25.配制牛肉膏蛋白胨培养基,有哪些操作步骤那几步易出错,如何防止称取药品—加热溶化—分装—加棉塞—包扎—灭菌—搁置斜面易出错的步骤有：a称取药品称取时钥匙专用,瓶盖不要错盖,易吸水的药品要快速称取；b加热溶化加入药品后要用玻璃棒不停搅拌,以免糊底在琼脂熔化过程中,应控制火力,以免培养基因沸腾而溢出容器,同时,需不断搅拌,以防琼脂糊底烧焦.；c分装分装时培养基不能粘在三角瓶或试管口,以免接种时染菌；d搁置斜面斜面长度约试管长度一半为宜.26.平板菌落计数法的原理是什么它适用于那些微生物的计数平板菌落计数法是将等测样品经适当稀释后,其中的微生物充分分散为单个细胞,取一定量的稀释液接种到平板上,经过培养,由每个单细胞生长繁殖而形成的肉眼可见的菌落,即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞.统计菌落数,根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌数.但是,由于待测样品往往不易完全分散成单个细胞,所以,长成的一个单菌落也可能来自样品中的2~3或更多个细胞.因此平板菌落计数的结果往往偏低.现在常使用菌落形成单位.平板计数法是根据微生物在固体培养基上所形成的一个菌落是由一个微生物繁殖而形成的现象进行的,也就是一个菌落可代表一种微生物并不绝对.通常用来测定样品中所含细菌、孢子、酵母菌等单细胞微生物的数量.8、微量移液器的最小量程太大,在加样时,容易加多,使盖玻片鼓起,血球计数板所技术的体积变大,最终结果偏大.改进：用量程的小的微量移液器并少加一些.27.如果一项科学研究内容需从自然界中筛选到能产生高温蛋白酶的菌株,你将如何完成写出实验方案产蛋白酶菌株在酪素平板上能形成降解酪素透明圈.以下试验方案有关操作均遵循无菌操作条件一材料准备 1 土壤有机质特别是蛋白质含量丰富的土壤2 灭菌生理盐水%NaCl3 灭菌移液管4 添加酪素的B—4牛肉膏蛋白胨完全培养基经灭菌5 B—4斜面经灭菌6 其他材料：接种环酒精灯等二操作方法1在盛有10ml灭菌生理盐水的烧杯中添加1g土壤,配成悬浮液；2 稍静止后,用灭菌移液管移取部分上清液,将其制成10^4—10^6倍的稀释液；3 用灭菌移液管吸取各稀释液用稀释倒平板法或涂布平板法将其接入添加酪素的B—4平板上；4 在55—65℃下培养1—2天；5 挑取形成降解酪素透明圈的菌落透明圈直径D与菌落直径d之比较大者,转接入B—4斜面上培养；若无特定菌落形成,则需另取土样从开始重复试验6 将B—4斜面上的菌落再用平板纯培养,依次重复2—3次后即可得到纯培养镜检；7 纯培养细菌中蛋白酶的提取及活性鉴定摇瓶培养若提取蛋白酶及其活性正常,则纯培养成功,否则,重取土样重复以上实验.28.为什么熔化后的培养基要冷却至45℃左右才能倒平板低于这个温度琼脂会凝固,温度过高,如果是做倾倒琼脂做菌落计数,会杀死一部分细菌,如果只是只是制备琼脂平板,那么温度太高就进行倾倒会导致琼脂凝固后偏软,水汽过多.29.要使平板菌落计数准确,需要掌握哪几个关键为什么1 无菌操作2 稀释良好,不会太浓或太稀.3 菌落生长时间控制好,不会长的太大不便区分,也不至于太小影响计数.30.当你的平板上长出的菌落不是均匀分散的而是集中在一起时,你认为问题出在哪里1.太浓2.没涂匀31.用倾注法和涂布法计数,其平板上长出的菌落有何不同为什么要培养较长时间48h后观察结果倾注法是在培养皿中接种好样品之后,倾注琼脂并培养；而涂布法则是在琼脂表面接种并使用L型棒涂布.因此,倾注法的菌落将出现在琼脂的各个部位,包括底层和中层,但涂布法培养后形成的菌落只出现在琼脂表面.32.你如何解释淀粉酶是胞外酶而非胞内酶答：①淀粉是大分子物质,进入细胞十分困难,甚至需要高耗能的胞吞作用.因而通过胞外酶的作用,将淀粉水解为葡萄糖后运入细胞,较方便高效.②试验中出现透明圈,说明培养基内淀粉被水解,可推测是细菌产生的胞外的淀粉酶起的作用.33.不利用碘液,你能否证明淀粉水解的存在答：由于淀粉水解生成葡萄糖,即多羟基醛,因此可利用醛的性质进行检验,如银镜试验,斐林试验等.呈阳性者,说明产生了葡萄糖,淀粉被水解；阴性者说明淀粉未被水解.34.假如某些微生物可以有氧代谢葡萄糖,发酵试验应该出现什么结果答微生物有氧代谢葡萄糖产气不产酸,因此发酵结果是小管中生气泡但是溶液不变黄.35.解释在细菌培养中吲哚检测的化学原理,为什么在这个试验中用吲哚的存在作为色氨酸酶活性的指示剂,而不用丙酮酸答：化学原理：有些细菌产生色氨酸酶,分解蛋白胨中的色氨酸,产生吲哚和丙酮酸.吲哚与对二甲基氨基甲醛结合,形成红色的玫瑰吲哚.但并非所有的微生物都具有分解色氨酸产生吲哚的能力,因此吲哚试验可以作为一个生物化学检测的指标.因为丙酮酸是生物体呼吸作用的产物,无论是有氧还是无氧,都会产生丙酮酸,因而无法作为色氨酸酶活性的指示剂进行区分.同时吲哚能通过有明显颜色变化的化学反应观测到,而丙酮酸不能,所以试验中用吲哚的存在作为色氨酸酶活性的指示剂,而不用丙酮酸.36.为什么大肠杆菌是甲基红反应阳性,而产气杆菌为阴性答：当细菌代谢糖产生酸时,培养基就会变酸,使加入培养基中的甲基红指示剂由橙黄色转变为红色,即甲基红反应.而大肠杆菌和产气肠杆菌在培养的早期均产生有机酸,但大肠杆菌在培养的后期仍能维持酸性PH4,而产气肠杆菌则转化有机酸为非酸性末端产物,如乙醇、丙酮酸等,使PH升至大约6.因此,大肠杆菌为阳性,产气肠杆菌为阴性.37.用紫外线进行诱变时,为什么要打开皿盖为什么要在红光灯下操作紫外线不容易穿透玻璃,所以打开盖,自然光下容易光复活,红光下不会所以在红光下操作。