实验原始记录示范

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实验记录规范

1、实验记录本是研发人员专门用于记录和实验相关事宜的本子,不能用于其它用途。

2、实验记录的基本要求是字迹书写清晰,数据记录明了,如需修改,不能用修正液或笔涂改,而应该用笔划一条删除线,标明需要删除的错误内容,然后在其旁边写出正确的结果。

3、一份完整的实验记录,就是一份实验报告。实验中的每一个操作,在实验记录本中都可以找到原始记录。

4、实验记录本的封面应该包含至少以下基本信息:使用人的姓名,该记录本使用的起始-终止日期,该记录本的发放编号,实验记录本的每一页都应该有编号,在使用完毕上交存档时,实验记录本不得缺页。

示范:

实验记录本

第1页

续XXXX(标明该本实验记录本是承接哪一本实验记录本的,如果是第一本,则无需写此项)

2009年01月01日 000001

(记录时间,按照ISO要求必须写成X年X月X日格式) (页码)

9:00 XX 产品RF090101批发酵

实验批号:RF090101 方案制定人:ABC

实验目的:技术小试验收

实验方案:

1)实验配方:

物料名称 配比 需要称量量 实际称量量 备注

110 ×% 1.00 1.00

111 ×% 0.2000 0.2001

112 ×%

113 ×%

当需要记录大量的原始数据时,需要事先在实验记录本上设计好数据记录表格。

2)发酵罐状态纪录

电机状态

电极校验纪录

温度:罐显/标准温度计测定;pH:罐显/电位;溶氧:罐显/电位

3)消毒纪录——消毒纪录单

投料体积、灭菌前pH、蒸汽压力、升温时间、保温时间、降温时间、消后pH、消后体积

4)过程控制——过程纪录单

接种量、发酵温度、pH、通风、罐压、搅拌、补料

5)分析方法:

pH:取样后10分钟内用pH计测定

OD600:将样品摇匀后用微量移液器取200ul,加入5ml水,震荡摇匀,测定600nm吸光值

残糖:250ml锥形瓶加入A液、B液各10ml,然后加入Sml发酵液,加蒸馏水30ml,加热煮沸2min,冷却后加入KI溶液、14%H2SO4溶液各10ml,加入2ml淀粉指示剂,立即用标准硫代硫酸钠溶液滴定至淡粉红色。(同时作空白,终点颜色为黄色,一般滴定数量为26.5~26.6ml。)

计算方法:D=(空白滴定量-样品滴定量)*因素值F

糖量表按D值查得糖量G,最终葡萄糖含量为G/(S*10)

氨氮:250ml三角瓶加60ml2%硼酸后加10滴甲基红-溴甲酚绿;取1.0ml发酵液及10ml蒸馏水于定氮管内;放置于定氮仪,定氮管内泵入70ml40%NaOH,开启仪器。当250ml三角瓶内体积从60ml增至150ml后取下用0.1008mol/L的HCl溶液滴定,终点变化绿色到灰紫。同时做空白。

XX含量:取发酵液稀释液10ml离心(2500rpm,10min),吸取1ml清夜,加入1ml茚三酮溶液,混匀,铝箔封口100C沸水加热10min,冷却至室温后加蒸馏水8ml,测定OD475。

计算:(28.41*OD475+7.869)*稀释倍数/(1000*V发酵液)

每本实验纪录本必须有完整的分析方法,当后面再次引用可以写:见P×

分析试剂:

标准硫代硫酸钠溶液,浓度0.1001mol/L,因素值0.9978,配制日期2009-1-10,配制人XXX,标定人XXX,XXX记录本2009-08,P000078;

标准盐酸溶液:浓度0.1000mol/L,配制日期2009-1-18,配制人XXX,标定人XXX,XXX记录本2002-07,P000048

过程分析

YF L031010-10Q 发酵时间:18小时

罐温:30.0℃ 溶氧:30.5% 搅拌:600rpm 通气量:3.5L/min 罐压:0.10MPa

取样量 10mL pH 6.02/6.00(罐显)

OD600 1.313

残糖 0.125 /10倍 /1.05% 氨氮 1.04 / 0.58%

XX:参照 0.567,样品100倍 0.890/0.901,含量2.01% 镜检:杆菌,细长,无杂菌

YF LY 031010-11Q 发酵时间:18小时

罐温:30.1℃ 溶氧:26.5% 搅拌:600rpm 通气量:3.5L/min 罐压:0.10MPa

取样量 9mL pH 6.09/6.00(罐显) OD600

1.298

残糖 0.147 /10倍 /1.18% 氨氮 1.18/ 0.62%

XX:参照 0.567,样品100倍 0.789/0.804,含量1.89% 镜检:杆菌,细长,无杂菌

讨论

1. 此次菌种的镜检结果正常,然而种子的质量不好(OD和pH较低),估计原因:

i. 原料的质量可能有问题;

ii. 方瓶配方缓冲体系可能不对;

iii. 接种有问题,造成菌种在方瓶中生长过程代谢异常。

个人估计第三个原因是主要原因。

发酵过程产生的泡沫影响最终的放罐体积、最终罐产量;同时,罐上溶氧显示易失真。今后发酵过程通风、搅拌参数的调整亦受此影响。

下一步计划:

增加底料中的泡敌配比,由0.05%提高到0.1%