包埋标本制作
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包埋操作方法有哪些
包埋操作是组织学技术中的一种,它是将组织切片包裹在蜡中制成固定块,以便进行显微镜下的染色和观察。
包埋的操作方法如下:
1. 取得需要包埋的组织标本,并进行切片。
2. 将组织切片放入去水化油中脱水,通过逐渐替换水分来去除样本中的水分。
3. 将去水化切片下沉于熔蜡中,直到切片完全浸泡在蜡中。
这个步骤通常需要耐心,因为切片必须完全浸泡在蜡中。
4. 利用旋转式包埋机或手动装置,将浸泡在熔蜡中的样本切片转移到有预备好的包埋盒中,保证切片的纵向对位。
5. 将包埋盒中的切片冷却,直到蜡完全凝固。
这个过程需要放在冰箱中进行,通常需要约3至4小时。
6. 将已硬化的包埋块切割成薄切片,并进行染色和显微观察,以便研究细胞和组织结构。
以上就是包埋操作的主要步骤,需要进行细心和耐心的操作。
包埋的技术流程
包埋是组织学研究中常用的技术手段,其主要目的是将组织标本固定在特定位置,方便切片和染色,以便于观察细胞结构、形态和组织结构等。
下面是包埋的技术流程。
1. 预处理组织标本。
将新鲜组织标本收集后,首先要用理化方法杀死组织中的细胞,并使细胞内部的结构保持在最佳状态。
目前常用的方法包括福尔马林固定、石蜡包埋等。
2. 嵌入组织标本。
将固定好的组织标本用其他化学和物理方法处理后,将其放置在一段预先制备好的塑料模具内,注入熔化的石蜡等物质,待其凝固后,即可形成包埋块。
3. 切制包埋切片。
使用组织切片机将包埋块切成薄片,通常厚度在4-6微米之间。
切片要求均匀,不得有气泡、碎屑等影响观察的因素。
4. 上色染色处理。
将切制好的薄片放置在染色盒内,加入相应的染色剂,待其染色后,可用显微镜观察其表观结构和组织形态等。
5. 封片和存储处理。
在包埋切片上涂上特定胶粘剂,放置于载玻片上,并覆盖一层玻璃片,待固化后,即可封存和存储。
以上是包埋技术的主要流程及注意事项,实践中还需要根据具体情况进行相应的调整和优化。
标本包埋切片后的流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。
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切片的厚度可以根据需要进行调整,一般为 4-6 微米。
植物亚克力包埋标本制作过程植物亚克力包埋标本的制作过程包括以下步骤:
1.选择合适的植物材料,确保其健康、完整,并符合制作要求。
2.对植物材料进行清洗,去除表面的污垢和杂质。
3.将清洗干净的植物材料进行固定,可以使用细铁丝或胶水将其固定在硬纸板或
泡沫板上。
4.根据需要,可以使用亚克力板制作合适的模具,将植物材料放入模具中,并用
透明亚克力板密封。
5.在密封好的模具中注入适量的固化剂,确保植物材料完全被固化剂覆盖。
6.将注入固化剂的模具放入干燥箱中,保持一定的温度和时间,使固化剂充分反
应并硬化。
7.待固化剂硬化后,将模具取出,小心地拆开亚克力板,取出植物材料。
8.对制作好的植物亚克力包埋标本进行修饰和加工,如打磨、抛光等,使其表面
光滑、整洁。
9.最后进行质量检查,确保制作出的植物亚克力包埋标本符合要求。
需要注意的是,制作过程中要保持清洁卫生,避免污染和杂质的混入。
同时,要选择合适的固化剂和亚克力板,确保制作出的植物亚克力包埋标本具有良好的透明度、硬度和耐久性。
此外,在制作过程中要小心操作,避免损坏植物材料或影响其形态和特征。
病理组织包埋流程病理组织包埋是指将组织标本进行固定、处理和包埋以便进行镜下观察的过程。
它是病理学中非常重要的一个步骤,对于疾病的诊断和治疗提供了重要的依据。
下面将介绍病理组织包埋的流程。
一、固定固定是将组织标本中的细胞和结缔组织的蛋白质交联,以保持其形态和结构不变。
常用的固定剂有福尔马林、乙醛、酒精等。
固定的时间要根据组织标本的大小和性质进行调整,一般为24至48小时。
二、脱水脱水是指将固定后的组织标本中的水分逐渐去除,使其能够与蜡相容。
脱水的步骤一般为将组织标本依次浸泡在不同浓度的酒精溶液中,如70%酒精、80%酒精、95%酒精和绝对醇。
每个浓度的酒精溶液中的时间一般为1至2小时。
三、透明化透明化是指将脱水后的组织标本中的酒精逐渐替换为透明剂,以使组织在切片过程中更加清晰可见。
常用的透明剂有苯麻油和二甲苯等。
透明化的时间一般为1至2小时。
四、浸渍浸渍是将透明化的组织标本浸入熔化的石蜡中,使其充分浸透。
在浸渍过程中要保持标本的定位和方向,以确保后续切片的准确性。
浸渍的时间一般为1至2小时。
五、包埋包埋是将浸渍后的组织标本放入预先制备好的包埋模具中,将石蜡包裹住组织,使其固定在切片时不会移动。
在包埋过程中要注意避免气泡的产生,以免影响后续的切片质量。
包埋的时间一般为2至3小时。
六、切片切片是将包埋好的组织标本切割成薄片,一般为4至6微米。
切片的工具有手动切片机和自动切片机等。
切片后的组织标本要进行染色,以便观察细胞和组织的结构。
七、染色染色是为了使组织标本中的细胞和结构更加清晰可见。
常用的染色方法有苏木精-伊红染色、血液学染色、免疫组织化学染色等。
染色的时间一般为1至2小时。
八、封片封片是将切片后的组织标本放置在玻璃片上,并用透明胶带或胶水密封,以便保存和观察。
封片后的组织标本可以通过显微镜进行观察和分析。
总结:病理组织包埋流程包括固定、脱水、透明化、浸渍、包埋、切片、染色和封片等步骤。
这个流程严格按照一定的顺序进行,每个步骤都非常重要,任何一步出现问题都可能影响到最终的结果。
小标本的固定、脱水、包埋技巧
固定技巧
在进行标本制作之前,固定是非常重要的一步。
以下是一些固定技巧:
•使用合适的固定液进行固定,如福尔马林、乙醛等。
•根据标本类型和需要,选择适当的固定时间。
•确保标本完全浸泡在固定液中,以确保固定效果。
•对于较大的标本,可以使用注射器或针筒将固定液注入其内部。
脱水技巧
在固定完成后,需要进行脱水处理。
以下是一些脱水技巧:
1.使用逐渐浓度递增的酒精溶液进行脱水,如70%、80%、90%、95%和
100%。
2.每个脱水浓度的时间可以根据标本的大小和类型进行调整。
3.确保标本充分浸泡在脱水溶液中,并且脱水过程中避免震动和剧烈搅拌。
4.注意安全,使用酒精时要远离明火。
包埋技巧
经过固定和脱水处理后,标本需要进行包埋以便进行切片观察。
以下是一些包埋技巧:
•选择合适的包埋剂,如石腊、聚乙二醇等。
•根据需要,将标本放置在合适的包埋模具中。
•倒入适量的包埋剂材料,确保标本完全覆盖。
•根据包埋剂的要求,进行固化处理。
•使用切片机或显微镜切片仪对包埋后的标本进行切片。
全身包埋断层标本讲解断层是地壳的一部分,是地球表面断裂的地质现象,是地震活动的主要形式之一。
全身包埋断层标本是用来研究地球内部结构和地壳运动的重要工具。
下面我们来讲解一下全身包埋断层标本。
首先,全身包埋断层标本是通过地质勘探和采样取得的地球内部岩石和构造的代表样本。
它们通常是从地表到地下数百米甚至更深的岩石和地层中获取的。
这些标本经过保存、鉴定和制备,可以用来研究地球的结构、构造、地质历史等方面的问题。
全身包埋断层标本的制备过程需要经过一系列的步骤。
首先,地质学家会选择一个有代表性的地质剖面,然后进行地质勘探和取样工作。
在取样过程中,他们会使用钻探、采样或挖掘等方式,将地下的岩石和地层取出来。
为了保持样本的完整性和真实性,标本通常会进行全身包埋,即将整个标本保留在一个透明的材料中,比如树脂或玻璃。
然后,取样的标本经过清洁和鉴定。
地质学家会仔细观察和分析每个标本的特征,确定其类型和年代。
同时,他们还会进行必要的清洁工作,以去除标本表面的杂质和污垢,以便更好地观察和研究。
接下来,标本需要进行制备工作。
这包括将标本固定在一个支架上,使其保持稳定和平衡,以便进行观察和研究。
此外,标本上的重要特征和结构可能会被突出显示,并进行各种观察和测量。
这些制备工作需要地质学家的专业知识和经验,以确保标本的质量和准确性。
最后,全身包埋断层标本可以用来开展各种地质研究和教学活动。
地质学家可以观察标本中的岩石类型、构造特征和地层关系等,从而了解地球演化的过程和模式。
同时,在教学中,标本的真实性和可视性可以帮助学生更好地理解地质学的基本概念和原理。
总之,全身包埋断层标本在地质学研究和教学中起着重要的作用。
它们通过保存和展示地球内部结构和地质历史的代表样本,帮助我们更好地了解地球演化的过程和模式。
同时,它们也为学生提供了一个直观、生动的学习工具,帮助他们更好地理解和掌握地质学知识。
不仅如此,全身包埋断层标本还促进了科学研究和学术交流,为我们更深入地认识地球提供了宝贵的资源。
包埋式标本是一种使用安全无毒(达到食品安全级别)、高透明有机高分子树脂材料,将动植物生物体等标本物通过包埋的方式,加工制作成的一种新型标本产品。
它主要由透明高分子树脂材料,以及经过特殊处理的标本物两部分构成。
标本整体为实心的固体,内部无明显的液体或气体空间。
这是一种综合了多项工艺技术的创新型产品,它涵盖了全球顶尖的高分子树脂材料聚合技术、生物防腐技术、标本防冻技术、动植物保色技术等。
这些技术和工艺,是制作高分子树脂包埋教学标本的核心关键,它决定了产品的品质和应用范围。
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树脂包埋标本的制备方法摘要:一、树脂包埋标本制备的意义和应用二、树脂包埋标本的制备材料和工具三、树脂包埋标本制备的步骤和方法四、注意事项及优化技巧正文:树脂包埋标本制备方法在生物学、地质学等领域具有广泛的应用,它能够将珍贵的样本保存下来,便于长期观察和研究。
本文将详细介绍树脂包埋标本的制备方法,包括材料选择、操作步骤和优化技巧。
一、树脂包埋标本制备的意义和应用树脂包埋标本制备技术是一种将实物样本嵌入固态树脂中,使其具有较高观赏性和保存价值的方法。
这种方法不仅可以保护标本,防止其腐烂、变形,还可以使标本更加美观,便于展示和观察。
树脂包埋标本广泛应用于博物馆、学校、科研机构等地。
二、树脂包埋标本的制备材料和工具1.树脂材料:选择适合包埋的树脂材料,如环氧树脂、聚氨酯树脂等。
要求树脂具有良好的流动性和固化性能。
2.硬化剂:根据树脂的种类选择合适的硬化剂,按照说明书比例与树脂混合。
3.容器:选用干净、无毛刺的容器,如玻璃瓶、塑料盒等。
4.工具:镊子、刀片、刷子、搅拌器等。
三、树脂包埋标本制备的步骤和方法1.准备工作:将所需标本清洗干净,修整形状,确保表面光滑。
如有需要,可进行染色处理。
2.填充模具:将标本放入容器中,加入适量树脂和硬化剂混合物,注意留出一定空间以防止树脂膨胀时溢出。
3.搅拌混合:用搅拌器充分搅拌树脂和硬化剂,确保混合均匀。
4.倒入模具:将搅拌好的树脂倒入容器,轻轻震动使其充满整个空间,同时排出气泡。
5.固化:将容器放入固化设备中,按照设定时间进行固化。
不同树脂的固化时间有所不同,需根据具体产品说明调整。
6.取出标本:固化完成后,从容器中取出树脂包埋标本,用刀片或刷子修整表面,去除多余树脂。
7.抛光:用砂纸或抛光机对标本表面进行抛光,使其光滑美观。
四、注意事项及优化技巧1.选择合适的树脂和硬化剂:根据标本材质和保存要求,选择适合的树脂和硬化剂。
2.防止气泡产生:在倒入树脂过程中,尽量排出气泡,以确保标本表面光滑。
病理样本处理包埋与切片方法探讨病理样本处理:包埋与切片方法探讨病理学作为医学的重要学科,主要研究疾病的发生、发展和变化规律。
在研究过程中,病理样本的处理是至关重要的一步。
本文将探讨病理样本处理中的包埋与切片方法,并对其优缺点进行深入剖析。
一、包埋方法包埋是将病理组织样本固定、脱水、清洁、浸泡、渗透、包裹于固化剂中并固化,以便制作切片进行组织学观察的过程。
1. 快速冷冻包埋法快速冷冻包埋法是将组织标本迅速冷冻至-20℃以下,固定在刀座上,使用冷冻切片机进行切片。
这种方法不需要组织固化,能够保存原始的染色形态,适用于一些需要即时诊断的情况。
优点:操作简单快捷,适用于临床紧急情况。
缺点:组织固化不充分,易导致形态变形;冷冻切片质量相对较差,不适合一些特殊染色。
2. 石蜡包埋法石蜡包埋法是将含有标本的石蜡块融化,并将标本浸入石蜡中,冷却后形成固态块,以此完成组织样本的包裹。
这种方法是目前常用的包埋方法。
优点:组织固化充分,形态变形较少;石蜡块稳定、易于保存。
缺点:操作时间相对较长,需要进行多个步骤,费时费力;石蜡中的热融液对组织有一定的破坏作用。
二、切片方法切片是指将包埋好的组织标本切割成适当厚度的薄片,用于显微镜下观察和分析。
1. 微距切片法微距切片法是利用显微镜下切割组织标本。
具体操作是将病理组织样本固定在切片机上,通过微调控制刀片的运动,并使用显微镜进行观察和调整刀片的位置。
优点:控制切片的厚度更准确,适用于研究细胞亚结构。
缺点:操作要求高,需要熟练的技术经验;切片速度较慢。
2. 刨切切片法刨切切片法是通过旋转式刨切机切割组织标本,作用类似于削切。
这种方法适用于大块的组织标本。
优点:切片速度快,适用于体块较大的标本。
缺点:刨除过程中易产生热,对组织造成一定伤害,不适用于一些需要保持原始形态的标本。
三、病理样本处理方法比较1. 包埋方法比较快速冷冻包埋法适用于紧急诊断,但对组织形态保护较差;石蜡包埋法操作步骤繁多,但能够更好地保护组织形态。
组织包埋的方法及注意事项
组织包埋是一种重要的组织学技术,在组织学研究和病理学诊断中得到广泛应用。
下面介绍组织包埋的方法及注意事项。
一、组织包埋的方法
1. 组织固定:将组织标本放入含有固定液的容器中,固定液的
选择应根据待检组织的性质和所需染色方法来确定。
2. 脱水:将固定的组织标本放入逐渐浓度递增的乙醇溶液中,
使其逐渐脱水。
3. 渗透剂处理:将脱水的组织标本放入逐渐浓度递增的渗透剂(例如,二甲苯或氯仿)中,使其逐渐渗透。
4. 包埋剂浸润:将组织标本放入液态包埋剂中,使其完全浸润。
5. 包埋:将浸润后的组织标本放入蜡盒中,倒入液态包埋剂,
使组织标本被完全包埋在包埋剂中。
6. 冷却:将包埋后的组织标本置于冰箱中,使包埋剂凝固。
7. 切片:用切片机将凝固的组织标本切成薄片。
8. 烘干:将切好的组织切片放入烤箱中,使其完全干燥。
9. 染色:将干燥的组织切片放入染色盒中,进行染色。
二、注意事项
1. 组织标本的处理过程应尽量缩短时间,以避免组织变性和脱落。
2. 包埋剂的选择应根据待检组织的性质和所需染色方法来确定。
3. 包埋剂的浸润时间应充分,以保证组织标本被完全浸润。
4. 包埋剂中不能有气泡,否则会影响组织的包埋质量。
5. 切片时应掌握合适的切片角度和切片速度,以避免切片过厚或过薄。
6. 切片后的组织切片应避免受到异物的污染和损坏。
7. 染色时应掌握合适的染色时间和染色方法,以获得理想的染色效果。
总之,组织包埋技术是一项复杂而精细的操作,需要仔细掌握每一个步骤,以获得高质量的组织切片。
药⽤植物学实验环氧树脂植物标本制作--实验四实验四制作药⽤植物环氧树脂包埋标本⼀、实验⽬的1. 学习树脂标本的制作⽅法。
2. 通过本实验,学习如何保留植物形状、⾊彩、花、果、叶、根的原⽣⽣态,更直观观察植物的⽣态特征。
3. 学习野外植物调查记录表填写。
⼆、实验仪器及材料1. 实验仪器:电⼦天平,恒温⿎风⼲燥箱2. 实验试剂:环氧树脂A/B胶,75%酒精,变⾊硅胶3. 实验材料:校园及附近植物,硅胶模具,烧杯,玻璃棒,镊⼦,药勺,枝剪,⽩棉绳,标签,⽑刷,针线,胶⽔三、实验内容1. 标本的整形先将采集到的植物分类后,进⾏整形,⽤⼲净⽑刷去除根、茎、叶上的泥⼟,从数株同⼀植物中选择⽣态特征最完整的⽤于标本制作。
为避免枝⼲重叠厚重,对枝叶进⾏修剪,⼀般留3-5朵花、果,注意保留植物原有的⽣态特征,修剪后的植株既能保持⾃然状态,还具有艺术美感。
2. 标本的⼲燥滴胶固化时放热,若待包埋的标本含⽔,则会导致标本产⽣⼤量⽓泡或者⽩⾊⽔汽或使标本变⾊,因此在包埋前应进⾏⼲燥除去⽔分。
树脂包埋标本可保持标本的⽴体空间形态,为保证⽴体植物形态不变,多采⽤⼲燥剂包埋法⼲燥,将整形完毕的植物标本埋⼊⼲燥的变⾊硅胶或者氧化铝戏份中,保证整株植物完全包埋,再放⼊50℃烘箱中⼲燥,约2-5h植物完全⼲燥。
3. 环氧树脂AB胶的配制⽤天平称取A胶适量,加⼊玻璃烧杯中,置于60℃烘箱中加热⼤约10min,⾄⽓泡消失后取出。
在天平上称取B胶,AB胶质量⽐3:1混合,⽤玻璃棒搅拌约15min,静置,待⽓泡完全消失。
4. 标本的包埋取出已⼲燥好的标本,⽑笔扫去硅胶或氧化铝粉末,喷洒75%酒精消毒,杀死⾍卵,晾⼲待⽤。
将配制好的环氧树脂AB胶缓慢倒⼊洁净⼲燥的模具中,然后将标本⼩⼼放⼊模具,再继续浇筑⾄所需⾼度。
若植物体积较⼤或者质量较轻,课分层包埋,先在模具中倒⼊少量滴胶,⽤棉线将标本固定,然后轻轻放⼊滴胶中,在第⼀层树脂未完全固化时,浇筑第⼆层,在第⼀层树脂固化后,去除固定装置,继续浇筑直⾄没过整株标本。
作者: 卢康
作者机构: 江苏省睢宁县高作中学 221231
出版物刊名: 实验教学与仪器
页码: 38-38页
主题词: 简易制作;有机玻璃;玻璃碎屑;玻璃碎片;透明基质;有机溶剂;生活史;同源器官;尿醛树脂;氯仿
摘要: 把动物中的昆虫、植物中的微小器官包埋在透明基质中,这就成为包埋标本。
它具有原料易得,成本低廉,不怕发霉、虫蛀,不怕摔碰,便于观察研究,便于永久保存等优点。
特别适宜于制作昆早生活史标本、动物的同源器官比较标本等。
平常,用于制作包埋标本的主要原料为尿醛树脂,制作过程比较繁琐,技术水平要求也比较高。
如果利用废弃的有机玻璃碎片(聚甲基丙烯酸甲酯)易溶于氯仿(三氯甲烷)等有机溶剂,待氯仿挥发后,溶解后的有机玻璃又能重新凝结成固体状态这一原理,来制作包埋标本,就具有简便易行、美观大方等特点。
制成的有机玻璃透明体,不但可作为标本长期保存,而且还可以作为精美的工艺品,供人们观赏。
硬组织切片制作流程
一、标本固定:
取下标本后放于10%中性福尔马林液玻璃瓶中固定,但要注意对于大块标本最好采用取材后先固定48小时,然后将大标本分切成小块再次固定,固定时间为1-2周,以使组织得到充分固定。
固定完成后,将标本流水冲洗24小时去除组织中福尔马林液。
二、脱水:
脱水溶液脱水时间
70%酒精24小时
80%酒精24小时
90%酒精24小时
95%酒精(1) 30小时
95%酒精(2) 30小时
100%酒精(1) 24小时
100%酒精(2) 24小时
100%酒精+100%乙醚() 24小时
氯仿溶液(1) 24小时
氯仿溶液(2) 24小时
氯仿溶液(3) 24小时
三、浸润:
组织经脱水透明后分别浸入浸液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中,于4℃冰箱中每液浸润7天,每天抽真空2小时,以使浸润液更好地渗入到组织深部。
三种浸液配制方法:
浸润液I(原液):甲基丙烯酸甲酯95与邻苯二甲酸二丁酯5混合,磁力搅拌器搅拌2小时。
浸润液:每100原液加入过氧化苯甲酰1.5g,磁力搅拌器搅拌4小时。
浸润液:每100原液加入过氧化苯甲酰4g,磁力搅拌器搅拌4小时。
四、包埋:
三浸完成后,取新配制的浸润液倒入玻璃小瓶(注意包埋方向,瓶子大小直径在1~3.5)中,放入标本,加盖后室温过夜,次日放入32℃水浴箱中聚合,水浴温度从32℃→38℃→42℃→50℃分阶段提升温度,直至样品完全硬化。
从水浴箱中取出小瓶,放入4℃冰箱中冷却10分钟,取出后砸碎瓶子,将组织块取出。
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河北中学花序类型包埋标本制作方法
一、准备材料
1、科学家集成模型:河北中学的植物花序类型。
2、胶带:细口胶带、粗口胶带。
3、涂料:白色底漆、涂料抹刀、颜料、抹布、墨水、铅笔、油漆桶、油漆刷。
4、木料:高密度的木板、木梁、木栓、木筒。
5、工具:钢钳、钻头、锤子、木凿、文具刀、尖头钳子。
6、药品:50万单位凝胶甲硫氧嘧啶、苯甲酸甲酯助剂。
7、其他材料:木工膨胀剂、锌钉、螺丝等。
二、制作方法
1.针对每个植物花序类型,把科学家集成模型拆分出来。
2.根据植物花序类型的大小,准备不同尺寸的木板、木梁、木栓等,拼装为花序类型的结构模型。
3.使用细口胶带将拼装好的模型固定住,用粗口胶带将多余的细部悬挂住。
4.将预先准备好的涂料,如白色底漆、颜料、抹布、墨水、铅笔、油漆桶、油漆刷等涂抹在植物花序类型模型上,以便进行装饰和装饰。
5.将工具、药品、木工膨胀剂、锌钉、螺丝等一一按照制作要求用于植物花序类型的装饰和装饰。
6.最后,用50万单位凝胶甲硫氧嘧啶和苯甲酸甲酯助剂将植物花序类型包裹起来,完成标本制作工作。
河北中学花序类型包埋标本制作方法
以河北中学花序类型包埋标本制作方法为题,本文将详细介绍制作花序类型包埋标本的步骤及注意事项。
一、材料准备
1.花序标本
2.包埋机
3.包埋蜡
4.切片机
5.玻片
6.显微镜
7.清洁剂
8.电子天平
9.手术刀
10.镊子
二、制作步骤
1.准备花序标本,将其清洗干净并去掉杂质。
2.将花序标本用手术刀切成合适的大小。
3.将花序标本放入包埋机中,加入包埋蜡,按照包埋机的说明进行包埋。
4.将包埋好的标本从包埋机中取出,用切片机切成薄片。
5.将切好的薄片放在预先准备好的玻片上。
6.将玻片放入烘箱中,加热至蜡膜融化,使薄片与玻片紧密结合。
7.将玻片上的薄片用手术刀切成合适的大小。
8.将切好的玻片放入显微镜中观察,根据花序的形态特征进行分类。
9.将分类好的标本装入标本盒中并标注名称、地点、时间等信息。
三、注意事项
1.操作过程中要注意安全,避免受伤。
2.包埋蜡的温度要掌握好,过高易导致标本变形。
3.切片时要注意刀片的角度和厚度,避免切断花序的重要结构。
4.加热玻片时要掌握好温度和时间,避免薄片与玻片分离。
5.在观察花序时要注意显微镜的调节和清洁,避免影响观察效果。
制作花序类型包埋标本需要仔细严谨的操作,只有掌握好每个步骤才能得到高质量的标本。
同时,制作标本也为我们研究植物的形态特征提供了重要的手段。
硬组织包埋
1. 动物麻醉,颈椎脱臼处死,解剖分离骨组织,置于4%多聚甲醛或者PLP中固定24小时,再由PBS浸泡,4℃存放。
2. 70%乙醇浸润2天,95%乙醇浸润2天,100%异丙醇1天×2次。
3. 二甲苯浸润2天×2次。
4. 标本依次在塑料聚合液1,2,3液中各浸泡3天。
1液:60ml甲基丙烯酸甲酯+35ml甲基丙烯酸丁酯+5ml苯甲酸甲酯+1.2ml聚乙二醇400。
2液:1液+0.4g过氧化苯甲酰。
3液:1液+0.8g过氧化苯甲酰。
以上程序均在4℃
5. 制作瓶底:600ulN,N二甲基-对-苯甲胺加入100ml的3液中,搅拌数分钟,迅速倒入包埋瓶中,放入标本,抽尽空气,4度低温聚合1天。
(有专用的小包埋框,只需加0.5ml左右即可,不需抽尽空气)
6. 400ulN,N二甲基-对-苯甲胺加入100ml的3液中,搅拌数分钟,迅速倒入包埋瓶中,放入标本,抽尽空气,-20度低温聚合3天。
(加满包埋框即可,不需抽尽空气)
7. 标本完全固化以后,在标本修整仪上进行修整至所需的横断切面。
横断面超薄切片,片厚1μm。
(建议:2液、3液中的过氧化苯甲酰和5、6中的N,N二甲基-对-苯甲胺用量为推荐量的1.2-1.5倍,因这两种液体起到催化剂的作用,多加点有利于聚合)。