观察细胞有丝分裂实验注意事项及常见试剂作用

观察
先用低倍镜观察
使染色体着色，便于显 微镜下观察
使细胞分散开
在低倍镜下找到分升区细胞； 正方形、排列紧密
再用高倍镜观察
依次观察分裂中期、前期、 后期、末期、的细胞间期紫
醋酸洋红
被染成分 DNA RNA 线粒体
染色体
呈现颜色 绿色
红色
蓝绿色 紫色 红色
1、先在低倍镜下观察，找到分生区细胞： 正方形，排列紧密。
2、再换成高倍镜仔细观察。 先找到中期细胞，然后找出分裂中期、前期、后期、末
期、间期的细胞，观察各时期内染色体形态和分布的特点。 3、填写记录表。P116
成 看一看植物细胞的
熟 区
分裂（根尖）
伸 长 区
分 生 区 根 冠 根尖纵剖结构示意图
的分布。 （2）人的 口腔上皮细胞可用于观察 线粒体及
DNA和RNA在细胞内的分布情况，而观察 细胞减 数分裂 时则选用动物的精巢细胞作为实验材料。
（3）观察叶绿体时常选用藓类的叶，因为 藓类 植物的叶片薄而小，常是一层细胞，叶绿体清楚，易
于观察和操作。
C.持续观察，视野中的K细 胞将分裂成两个子细胞
D.视野中，N细胞的染色体 数目是M细胞的一半
7、实验材料的选择 （1）洋葱的根尖可用于观察植物细胞有丝分的裂实验， 这是因为其根尖分生区细胞进行有丝分裂；而 洋葱鳞片叶的外表皮 细胞可用于观察植物细胞的质壁 分离和复原的实验，这是因为其具有 紫色大液泡 ，同时 还可以利用洋葱鳞片叶内表皮观察 DNA和RNA 在细胞中
B. 形态不规则
C. 细胞已经开始分化
D. 无间期细胞
3.（09·江苏）有1位同学做根尖有丝分裂实验，在显微镜
中观察到的图像如图所示。造成这种情况的原因可能是

六、实验步骤
（一）材料准备
通过休眠的洋葱鳞茎，经日晒后，置于盛有清水的小烧杯上，根部与水接触，20~25℃光照条件下培养2~3天，待根长1~2cm时，于上午9:00~11:00剪下根尖备用。
（二）预处理
为了获得较多中期分裂相的细胞，同时使染色体缩短和分散，可对根尖进行预处理，将根尖浸在蒸馏水中于在1~4℃低温下处理24小时。
徐州工程学院教案
2008年至2009年第一学期第3周
实验名称：光学显微镜的结构、植物细胞有丝分裂的制片和观察
一、目的与要求
1、掌握光学显微镜的构造及使用方法。
2、掌握植物根尖细胞有丝分裂制片技术。
3、掌握有丝分裂过程中染色体的形态特征和动态变化。
二、实验原理
有丝分裂是植物细胞分裂的主要方式，细胞分裂过程中，核内染色体准确地复制，并有规律地、均匀地分配到两个子细胞中去，使子细胞和母细胞的遗传组成一样，保证了植物细胞的遗传性状的一致。各种生长旺盛的植物组织中，如根尖组织、茎尖组织、居间分生组织、愈伤组织等，常进行着剧烈的细胞有丝分裂。在细胞分裂的适当（分裂旺盛期）时候取材，进行预处理，固定、解离、染色和涂抹压片等方法，使细胞、染色体分散，便于在显微镜下观察染色体的形态特征和变化特点及进行染色体计数。
8.使用显微镜时一定严格按规程操作，遇到问题，如机件不灵，千万不可用力转动，切忌任意拆修，应立即报告指导教师。
9．使用完毕要将显微镜擦试干净，恢复原状，转动物镜转换器，将4×物镜转到光路上，使镜台调至接近物镜。
10．关闭光圈、电源，适当下降聚光镜，将塑料罩罩好，及时收回镜箱。
八、作业
1.制作细胞有丝分裂各时期图象片子1~2张。
B液：铁钾矾0.5克溶于100ml 50％丙酸。
染色液：A液和B液等量混合，每5ml的A液和B液的混合液中加入2克水合三氯乙醛，充分溶解摇匀，存放一天后使用。贮存液可较长久保存，染色液只能保存一个月，在两周内使用效果最好。

实验6 观察根尖分生组织细胞的有丝分裂➢核心知识回顾1、实验原理(1)高等植物的组织细胞有丝分裂较旺盛。

(2)细胞核内的染色体(质)易被性染料( 溶液或液)染成深色。

(3)由于各个细胞的分裂是独立进行的，在同一分生组织中可以通过高倍显微镜观察细胞内的存在状态，判断处于不同分裂时期的细胞。

2、实验步骤(1)洋葱根尖的培养：实验前3d～4d，待根长到约5cm。

(2)装片的制作：①取材：取根尖23mm；②解离：解离液为质量分数为和体积分数为混合液(1∶1)，目的是，解离时间为3 min～5 min。

③漂洗：漂洗液为，目的是防止，便于染色，时间约10 min。

④染色：染液为质量浓度为0.01 g/mL或0.02 g/mL的溶液(或溶液)，目的是使，时间：3 min～5 min。

⑤制片：用镊子尖将根尖弄碎，盖上，复加一块载玻片，用拇指轻压呈絮状。

(3)观察：先观察：根据根尖特点找到细胞。

后观察：先找中期，后找前、后、末期细胞。

(4)洋葱根尖分生区细胞的特点是。

答案：1、(1)分生(2)碱甲紫醋酸洋红(3)染色体2、(2)②15%的盐酸95%的酒精使组织中的细胞相互分离③清水解离过度④甲紫醋酸洋红染色体着色⑤盖玻片(3)低倍镜分生区高倍镜(4)细胞呈正方形，排列紧密➢核心知识辨析1、根尖解离后立即用龙胆紫溶液染色，以防解离过度(2022·广东卷)辨析：根尖解离后需要先漂洗，洗去解离液后再进行染色。

2、观察根尖分生组织细胞有丝分裂实验中，可以用纺锤丝牵引染色体的运动为观察指标(2021辽宁卷)( × )辨析：观察根尖分生组织细胞有丝分裂，细胞在解离的时候已经死亡，看不到纺锤丝牵引染色体的运动。

3、用龙胆紫染液染色的洋葱根尖装片，可以观察到染色体在细胞中移动并平均分配到两极(2020江苏卷)( × )辨析：观察洋葱根尖装片时，制片后细胞已死亡，不能观察到染色体的动态变化。

4、观察细胞的有丝分裂，分生区细胞呈正方形，多数细胞中呈紫色的染色体形态清晰(×)辨析：洋葱根尖分生区细胞大多处于分裂间期，而呈紫色的染色体形态清晰阶段处于分裂中期。

漂洗是为洗去细胞内部的盐酸，因此要保证足够的时间
四、实验过程
可用固定的针轻轻 地将根尖细胞分开
染色
染色液：0.01 g/mL或0.02 g/mL的 甲紫溶液(或醋酸洋红液) 时间：3～5 min 目的：使染色体着色
观察 制片
四、实验过程
观察 ①低倍镜下找到分生区（呈正方形，排列紧 密），再换用高倍镜观察。 ②统计多个视野中处于细胞周期不同阶段的细 胞数。
观察洋葱根尖分生组织细胞的有丝分裂
一、实验原理
在高等植物体内,有丝分裂常 见于根尖、芽尖等分生区细胞。 由于各个细胞的分裂是独立进 行的，因此在同一分生组织中 可以看到处于不同分裂时期的 细胞。通过在高倍显微镜下观 察各个时期细胞内染色体的存 在状态，就可以判断这些细胞 分别处于有丝分裂的哪个时期。 染色体容易被碱性染料（如甲 紫溶液、醋酸洋红染液)着色。
下图为研究人员利用TdR双阻断法 使人宫颈癌细胞群同步化的过程 示意图。回答下列问题：
(1)细胞增殖包括_物__质__准__备__和细胞分 裂两个相连续的过程。对于真核细胞 来说，有丝分裂是其细胞分裂的主要 方式，有丝分裂的重要意义是:
将亲代细胞的染色体经过复制，精确地平 均分配到两个子细胞中，在细胞的亲代和子 代之间保持了遗传的稳定性。
例.细胞增殖是细胞重要的生命活动，具有周期性。细胞周期包含四个阶段： G1期(DNA复制前期)、S期(DNA复制期)、G2期(DNA复制后期)和M期(分裂期)。 细胞周期同步化是指借助特定方法使分裂细胞都停留在细胞周期的同一阶段 的现象。高浓度的胸腺嘧啶核苷(TdR)双阻断法是常用的同步方法。TdR能可 逆地抑制S期DNA合成，而不作用于其他细胞阶段的运转，最终导致细胞群被 同步化。
丙 根尖5～7 mm处 ＋ ＋ ＋ ＋