南昌大学2001生物化学考研试题
- 格式：doc
- 大小：33.00 KB
- 文档页数：4
南昌大学2001年生物化学考研试题
名词解释20
1.核酸的变性与复性：变性作用是指核酸双螺旋结构被破坏，双链解开，但共价键并未断裂的现象; 核酸变性后分开的互补链，重新形成碱基对而恢复双链结构的过程。
2.氧化磷酸化作用: 氧化磷酸化作用是指有机物包括糖、脂、氨基酸等在分解过程中的氧化步骤所释放的能量，驱动ATP合成的过程。
在真核细胞中，氧化磷酸化作用在线粒体中发生，参与氧化及磷酸化的体系以复合体的形式分布在线粒体的内膜上，构成呼吸链，也称电子传递链。
其功能是进行电子传递、H^＋传递及氧的利用，产生H2O 和ATP
3.诱导锲合学说: 为说明底物与酶结合的特性，在锁钥学说的基础上提出的一种学说。
底物与酶活性部位结合，会引起酶发生构象变化，使两者相互契合，从而发挥催化功能
4.操纵子:转录的功能单位。
很多功能上相关的基因前后相连成串，由一个共同的控制区进行转录的控制，包括结构基因以及调节基因的整个DNA序列。
主要见于原核生物的转录调控，如乳糖操纵子、阿拉伯糖操纵子、组氨酸操纵子、色氨酸操纵子等。
5.密度梯度离心: 用一定的介质在离心管内形成一连续或不连续的密度梯度，将细胞混悬液或匀浆置于介质的顶部，通过重力或离心力场的作用使细胞分层、分离的方法。
密度梯度离心常用的介质为氯化铯、蔗糖和多聚蔗糖。
二、生物膜是由哪些物质组成,它们分别有何重要功能?10(P19)
三、简述三种测定蛋白质分子量的方法,并说明其原理
答：1．根据化学组成测定最低相对分子质量
用化学分析方法测出蛋白质中某一微量元素的含量，并假设分子中只有一个这种元素的原子，就可以计算出蛋白质的最低分子量。
肌红蛋白、血红蛋白均含铁0.335%，分别求它们的最低分子量：
肌红蛋白为55.8（Fe原子量）÷0.335×100=16700，与其他方法测分子量相符凝胶过滤法
2．凝胶过滤法
凝胶过滤法分离蛋白质的原理是根据蛋白质分子量的大小。
由于不同排阻范围的葡聚糖凝胶有一特定的蛋白质分子量范围，在此范围内，分子量的对数和洗脱体积之间成线性关系。
因此，用几种已知分子量的蛋白质为标准，进行凝胶层析，以每种蛋白质的洗脱体积对它们的分子量的对数作图，绘制出标准洗脱曲线。
未知蛋白质在同样的条件下进行凝胶层析，根据其所用的洗脱体积，从标准洗脱曲线上可求出此未知蛋白质对应的分子量
3．SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法
蛋白质在普通聚丙烯酰胺凝胶中的电泳速度取决于蛋白质分子的大小、分子形状和所带电荷的多少。
SDS（十二烷基磺酸钠）是一种去污剂，可使蛋白质变性并解离成亚基。
当蛋白质样品中加入SDS后，SDS与蛋白质分子结合，使蛋白质分子带上大量的强负电荷，并且使蛋白质分子的形状都变成短棒状，从而消除了蛋白质分子之间原有的带电荷量和分子形状的差异。
这样电泳的速度只取决于蛋白质分子量的大小，蛋白质分子在电泳中的相对迁移率和分子质量的对数成直线关系。
以标准蛋白质分子质量的对数和其相对迁移率作图，得到标准曲线，根据所测样品的相对迁移率，从标准曲线上便可查出其分子质量
4．沉降法（超速离心法）
沉降系数（S）是指单位离心场强度溶质的沉降速度。
S也常用于近似地描述生物大分子的大小。
蛋白质溶液经高速离心分离时，由于比重关系，蛋白质分子趋于下沉，沉降速度与蛋白质颗粒大小成正比，应用光学方法观察离心过程中蛋白质颗粒的沉降行为，可判断出蛋白质的沉降速度。
根据沉降速度可求出沉降系数，将S带入公式，即可计算出蛋白质的分子质量
？？四、当生物体内的硫胺素及生物素缺乏时,为什么会影响脂肪酸的合成,分别解释其原因10？
五、试讨论DNA的半保留复制并且用实验方法给予说明10
他们先将大肠杆菌细胞培养在用15NH4Cl作为唯一氮源的培养液里养很长时间（14代），使得细胞内所有的氮原子都以15N的形式存在（包括DNA分子里的氮原子）。
这时再加入大大过量的14NH4Cl和各种14N的核苷酸分子，细菌从此开始摄入14N，因此所有既存的“老”DNA分子部分都应该是15N标记的，而新生的DNA则应该是未标记的。
接下来他们让细胞们继续高高兴兴地生长，而自己则在在不同时间提取出DNA分子,利用CsCl密度梯度离心分离，而当细胞分裂了一次的时候只有一个DNA带，这就否定了所谓的全保留机理，因为根据全保留机理，DNA复制应该通过完全复制一个“老”DNA双链分子而生成一个全新的DNA双链分子，那么当一次复制结束，应该一半DNA分子是全新（双链都完全只含14N），
另一半是“全老”（双链都完全只含15N）。
这样一来应该在出现在离心管的不同位置，显示出两条黑带。
通过与全14N和全15N的DNA标样在离心管中沉积的位置对比，一次复制（分裂）时的这根DNA带的密度应当介于两者之间，也就是相当于一根链是14N，另一根链是15N。
而经历过大约两次复制后的DNA样品（generation＝1.9）在离心管中显示出强度相同的两条黑带，一条的密度和generation＝1时候的一样，另一条则等同于完全是14N的DNA。
这样的结果跟半保留机理推测的结果完美吻合
就这样，关于DNA复制机理的争论终于被Meselson和Stahl完美解决，而基因学和基因组学也得以在此后的五十年取得一系列重大突破。
六、简述一分子葡萄糖完全氧化生成CO2和H2O过程中形成ATP的步骤,并计算所产生的ATP 分子数15
??七、简单解释”插入失活”和菌落杂交的含义及其在基因工程中的应用.10
答：(1)若把外源DNA片段插入到载体的选择标记基因中而使此基因失活，丧失其原有的表性特征，此方法叫插入失活。
标记基因多为抗生素抗性基因。
菌落杂交:使用原位杂交来确定携带一个特定同源序列的插入DNA片段载体的技术。
八、如欲从无单宁和生物碱的植物材料中提取一种酶,在已建立测定酶活力的方法基础上,请你列出一般提取分离纯化及鉴定酶纯度和保存酶的方法和注意事项15。
