白腐真菌固定化技术的研究进展以及在环境保护中的应用---

  • 格式:doc
  • 大小:56.50 KB
  • 文档页数:5

白腐真菌固定化技术的研究进展以及在环境保护中的应用

摘要:本文阐述了白腐真菌的生物学特性和降解机理,提出了白腐真菌生物技术在实际应用中所需解决的问题,讨论了微生物固定化技术及其影响因素,对白腐真菌固定化技术的优势进行了分析,综合评述了白腐真菌固定化技术中载体材料特性、固定化时间及固定方法研究的新进展。

关键词:白腐真菌;生物降解;固定化技术;环境保护

一. 白腐真菌生物学特性及降解机理

白腐真菌是一类能引起木质白色腐烂的丝状真菌的统称,分属于担子菌,少数为子囊菌。白腐真菌菌丝体为多核,少有隔膜,其种类很多,《中国真菌志》便记载了46属137种。白腐真菌属于中温菌,属好氧菌,适宜温度9~39 ℃。

白腐真菌对污染物的降解机理非常复杂,细胞学定位表明,这种降解发生在细胞外,而细胞外降解系统为结构复杂乃至有毒的污染物提供了更易被处置的调节环境,当白腐真菌被引入废水中后,由于微生物的应激作用,细胞内的葡萄糖酶和细胞外的乙二醛氧化酶在分子氧的参与下氧化并形成H2O2,激活过氧化酶并启动酶的催化循环;细胞外的木质素过氧化物酶LiP和锰过氧化物酶MnP以HO为初始底物进行自由基的链催化氧化,该反应是高度非特异性和无立体选择性的,故对污染物的降解产生广谱特征。

白腐真菌在处理难降解有机废水具有降解底物的非专一性和

对其它微生物的拮抗作用;能够降解环境中某些低浓度污染物,

因白腐真菌降解酶的诱导与降解底物多少无关;白腐真菌是由酶

触发启动的自由基链反应,实现对异生物质的氧化降解,很容易

达到较高的反应速率;白腐真菌降解有毒污染物在胞外,从而避

免了有毒物对菌体细胞自身的毒害;白腐真菌对不同酸、碱污

染体系具有较好适应性。

二. 微生物固定化技术

虽然白腐真菌降解技术具有高效、适用性强等特点,但对某

些废水的去除效果不佳,反应器中细菌易被污染,运行参数要

求较高等问题, 引入固定化技术则能很好的克服上述问题。

微生物固定化技术是利用物理或化学手段将游离的微生物,

定位于限定的空间区域内,在保持微生物活性基本不变的情况下,

且能反复使用的基本技术。该项技术起源于上世纪60年代,目

前,废水处理中的固定化技术应用成为国内外研究的热点。

2.1微生物固定化方法

微生物的固定化方法有多种,以吸附法和包埋法最为常用。

表面吸附(结合)固定化对细胞活性的影响小,但所固定的微生物

数量受限;包埋固定化是使微生物细胞包埋在半透明的聚合物或

膜内,或使微生物细胞扩散进入多孔性载体内或包埋在凝胶或微

胶蘖内,底物及反应代谢物可自由出入这些载体的孔道或凝胶膜,

而微生物细胞却不能移动。此外,利用两个或两个以上的功能基

团,使微生物菌体相连接成网状结构的交联固定化;通过半透膜、

中空纤维膜和超滤膜等进行部分截留的膜截流固定化;利用处理

装置结构的合理设计及微生物自身作用进行微生物自身固定化技

术也有应用。

2.2 微生物固定化载体材料

微生物固定化载体可分为无机载体、多糖与蛋白质类、天然

和有机合成高分子凝胶载体四大类。微生物固定化过程中载体材

料性能和种类的选择成为固定化中的重要影响因素,开发具有良

好性能的载体也是固定化微生物细胞技术研究中一个最为重要的

课题之一。

2.3 微生物固定化反应器

微生物固定化反应器有纯种与混合种群固定化反应器之分。

纯种固定化微生物反应器以单一种群微生物细胞为生物活性物

质,利用特种载体及适当的固定方法,实现对废水中污染物降解;

最早的纯种固定化反应器应是法国生物学家巴斯德设计的称之为

醋化器的纯种固定化细胞反应器。反应器类型有流化床生物、固

定填充床及膜生物反应器等。对于成分复杂的废水,需要发挥不

同种类微生物的协同代谢优势,实现多种物质的同时降解,由此

开发了混合种徘微生物固定化反应器工艺,该反应器多通过合理

控制反应器的水力流态及营养结构和投加必要的核心物质而达到

微生物的固定化。

三.固定化技术优势

应用固定化技术既可以保持酶原有催化活性,又可以同一般催化剂一样回收和反复使用,并可实现连续化和自动化,菌体固定化后更稳定、更容易分离、更不易受环境影响。固定化白腐真菌技术的优势

(1)可促进菌体生长和产酶量,提前产酶期:Shim等发现,

白腐真菌进行固定化培养比悬浮培养更利于产 LiP, 且其酶活性

较高;Chung等用聚胺酯泡沫固定培养白腐真菌时,不仅菌体

数增加几倍,产酶高峰期也提前;这说明载体有利于营养物的传

递及菌体的充分伸展,促进菌体生长,进而促进菌体的次生代谢,

提高产酶量。

(2)反应启动快,降解效果好:固定化技术能有效增加系统中

菌体细胞或酶的浓度和纯度,进而快速启动酶促反应,使系统的

降解速度和降解效率得以提高。处理废水时发现,固定化体系的 COD 去除率和脱色率远高于悬浮培养体系。Saglam等发现固定化的白腐真菌对Hg2+的吸附率比游离态高出近20 %。

(3)具有抑制杂菌功能:反应体系一旦染菌,白腐真菌的产酶

和降解能力均急剧下降,从而使其无法在非灭菌条件下正常运行

。固定化后的白腐真菌具有保护细胞外产生的过氧化酶免受细

菌攻击的能力,使系统长时间保持较高酶活性;载体在空间上也

有利于抵御杂菌的进攻,使降解系统免受感染'4'。

(4)抗逆性、耐毒性、耐高负荷能力强,系统稳定程度高:固

定化微生物处理废水时内外表面同时进行,有毒成份很难直接对

内表面微生物构成威协,从而减轻了有毒物质对微生物的毒害作

用。Raghukumar等首次报道固定化白腐真菌在同一系统中同

时具备脱色和解毒的双重功能。李蓉等的研究表明,各种多

孔材料可有效固定菌体,克服由于机械剪切作用对降解酶系统的

破坏,使系统维持稳定、高效的降解能力。

四. 白腐真菌固定化的应用研究新进展

( 1 )载体的物理性质和结构特征:目前对载体的研究主要集中

在两方面,一是研究载体的物理性质和结构特性对白腐真菌的影

响;一是促进白腐真菌产酶和降解污染物的最佳载体及调控参数

的筛选。

研究表明,白腐真菌的固定化载体可以是一些天然或合成的

多孔性的材料,, 天然材料包括稻草、玉米秆等纤维类物质,

但材质不同,固定化技术不同略有差异。合成材料种类繁多,包

括一些聚合物、烧结物等;载体形状和载体材料会影响真菌生物

量和产酶叶;固定化培养白腐真菌ii MnP酶活性明显提高;

此外,固定化时体系的环境与其固定效果有影响,这主要与该状

态时的吸附能力有关。

(2)固定化时间与固定化方法:固定化细胞的过程中,必须保

证菌体与载体间接合稳定才会有更好的处理效果,载体不同、方

法不同,固定化时间亦不尽相同。固定化方法不同,菌体与载

体的结合方式和结合程度有所不同,而使系统的产酶量和降解效

果出现明显差异。

(3)工艺联合:采用固定化技术与其他处理工艺的联合运用是

当前难降解污染物处理的发展新趋势。姜怡勤就以固定化白腐

真菌技术与铁铜微电解预处理和SBR联合工艺,可以得到最佳的

处理效果。

五.白腐真菌在环境保护中研究应用进展

1白腐真菌在工业废水处理中的研究与应用

1.1染料及印染废水处理

应用Pc菌生物膜反应器进行酸性染料卡布龙红和弱酸大红的降解实验。结果表明,在限碳培养条件下挂膜培养5 d后,木素过氧化物酶活力达到最高,此时分别加入酸性染料卡布龙红和弱酸大红,质量浓度分别为25、5O、100 mg/L和l2.5、25、50 mg/L,48 h后培养液基本脱色,较高浓度下菌膜上有少量吸附的残余染料,5 d后染料质量降解率分别为100%、88%、92%和58%、65%、38%t3]。李慧等研究了Pc菌在6种染料的液体静培养条件下对不同浓度的染料的脱色降解作用。实验发现共培育30 d时,Pc菌对浓度在10~100 mg/L的6种染料均有小同程度的降解脱色作用,其中刚果红、直接冻黄G和活性翠蓝KN—G达到92%~99%的脱色率。l0、50、100 mg/L的活性翠蓝KN—G,50、l00 nlg/L的金莲橙0与天青蓝A,l00 mg/L的活性艳蓝KN—R的降解率达70%以上;l8个样品中达到60%的降解率超过50%I 。Livemoche等发现用海藻酸钠包埋的PC菌fcoriolus versicolor)处理造纸混合漂白废水,废水的色度在开始2 d内下降最快,3 d内废水色度下降80%。在3 d内原废水经稀释后再进行处理时的脱色率高达90%,而原废水直接处理时脱色率仅为65%。将裂褶菌F17定在聚酯纤维E构建白腐真菌生物接触氧化装置用来处理染料废水。研究发现该Pc菌挂膜迅速且与聚酯纤维结合牢固,染料废水进水浓度为15 mg/L,停留时问24 h,连续式运行条件下,混合染料废水脱色率达到79.5%,刚果红为91.6%,结晶紫为65-4%,次甲基蓝为6.9%。将粉碎成3~5 mm长的稻草末作为PC菌(ME一446)的挂膜载体,采用微电解一白腐菌降解一石灰絮凝沉淀的:对活性染料生产废水进行处理试验研究,结果表明COD 去除率达90%以上,废水色度 12 800 mg/L降到80 mg/L,但该工艺产生的固体残渣较多,增加二次污染处理量。应用从自然界的朽木中分离出的3种Pc菌(担子菌纲)构建煤渣生物膜反应器处理活性艳红染料废水。研究发现3种Pc菌煤渣生物膜反应器对实际的偶氮染料废水的脱色作用主要在初始阶段完成,72 h后COD。 得以有效去除。当该废水的初始COD , 为6 000 mg/L时,经144 h后,COD 去除率达98%。

1.2 农药废水处理

研究r Pc菌fBKM/F一1767)对水中微量氯代农药的生物降解情况。在含有0.02%的葡萄糖、0.03%的酒石酸铵和适量无机盐的培养液中,于35℃,经5~7 d的静置培养可获得良好的菌丝,对氯代农药的脱氯降解率可达90%以上。

1.3 重金属废水处理

对摇瓶培养获得的Pc菌菌丝球吸附水溶液中Pb +的能力进行了初步研究,结果表明,在pH=4.5、温度25 28℃、吸附16 h的最佳吸附条件下,菌丝球对pb2+的吸附量最大可达108.4

mg/g;同

时,碱处理可以提高Pc菌对pb2+的吸附能力⋯

2 白腐真菌在堆肥处理和垃圾渗滤液处理中的研究与应用

2.1 有害废弃物的堆肥处理