丁醇异构体混合物的GC分离——归一化法定量一、目的要求1. 学会使用归一化法定量测定；2. 进一步熟练TCD的使用。
二、方法原理DNP柱对醇类有很好的选择性，特别是对四种丁醇异构体化合物的分析，在一定的色谱操作条件下，四种丁醇异构体化合物可以得到完全的分离，而且分析时间短。
三、仪器与试剂1.仪器：气相色谱仪、气体发生器、实验三制备的色谱柱、TCD、微量注射器2.试剂：异丁醇、仲丁醇、叔丁醇、正丁醇（以上均为分析纯）。
丙酮洗针液四、实验步骤1．配制混合物试样用一干燥洁净的称量瓶分别称取0.5g异丁醇、0.6g仲丁醇、0.5g 叔丁醇、0.5g正丁醇（称准至0.001g），混合均匀，备用。
2. 色谱仪的开机和调试（1）打开气体发生器，流速为30ml/min，十分钟后排水。
（2）将载气通入主机气路，检漏，调节载气流速为30ml/min，通载气半个小时将气路中的空气等赶走。
（3）打开色谱主机电源，在控制面板上对气化室、柱箱、检测器进行控温，将温度分别调节为160℃，75℃，80℃；（4）打开桥流（100mA）（5）打开色谱数据处理机，输入测量参数。
2.标准和未知试样的分析测定（1）观察仪器谱图基线是否平直，待仪器电路和气路系统达到平衡，基线平直后，用1微升清洗过的微量注射器吸取混合试样0.6微升进样，记录分析结果。
（2）按上述方法再进样分析测定两次，记录分析结果。
（3）结束工作实验完成后，清洗进样器。
（4）关桥流。
降低柱温，待柱温降至50℃再停止通载气。
五、结果处理1. 记录实验条件。
3．归一化法计算各组分的质量分数。
六、注意事项1.用氮气做载气，桥流一般100mA。
2. 柱温的升温速率切忌过快，以保持色谱柱的稳定性。
关机时一定要等柱温降下来再关载气。
七、思考题1. 归一化法对进样量的准确性有无严格要求？2. 实验中分离的几种丁醇出峰顺序如何？。
气相色谱定H 分析1. 常用的气相定H 分析方法归一化法是常用的一种简便、准确的定量方法。
使用这种方法的条件是样品中所有组分 都出峰，将所有出峰组分的含量之和按100%十，当测量参数为面积时，计算式如下:式中 f]——组分i 的峰高校正因子；hi ——组分i 的峰高。
如果样品中组分是同分异构体或同系物，若已知校正因子近似相等，就可以不用校正 因子，将面积直接归一化，即可按下式计算：归一化定量的优点是方法准确， 进样量的多少与结果武官， 仪器与操作条件对结果影响小。
缺点是某些组分在所用检测器上可能不出峰，如 H 2O 在氢焰离子化检测器上等；样品中含有沸点高，出峰很慢的组分(如果用其它定量方法，可用反吹法除去) ，不需定量的个别组分可能分离不好，重叠在一起， 影响面积的测量，使其应用受到一定程度的限制。
在使用选择性检测器时，一般不用该法定量。
2. 标法□(10)式中 国——试样中组分i 的百分含量;国一一组分i 的校正因子；[A]——组分i 的峰面积。
如果测量参数为峰高，计算式如下：X iX ih i X —i100h i(12)(13)当分析样品不能全部出峰，不能用归一化法定量时，可考虑用标法定量。
方法：准确称取样品，选择适宜的组分作为欲测组分的参比物，在此称为标物。
加入一 定量的标物，根据被测物和标物的质量及在色谱图上相应的峰面积比按下式求组分的含量。
式中园一一试样中组分i 的含量；gs | 加入标物的质量；|Ai|——标物的峰面积；|m|——试样的质量；园一一组分i 的峰面积；对标物的要：不能与样品或固定相发生反应；能与样品完全互溶；与样品组分很好的 分离，又比较接近；加入标的量要接近被测组分的含量；要准确称量。
如果用峰高作为测量参数，上式也可将面积改为峰高，将面积校正因子改为峰高校正 因子进行定量。
标法定量也比较准确，而且不象归一化法有使用上的限制。
主要缺点是：每次需要用 分析夭平准确称量标和样品， 日常分析使用很不方便， 样品中多了一个标物， 显然对分离的要求更高些。
气相色谱实验-01GC 法分离丁醇异构体及其含量测定一、实验目的1．掌握气相色谱仪的基本构成及基本操作2．掌握色谱柱分离化学物质的原理，以及影响分离度的因素3．掌握分离度的计算方法4．掌握气相色谱中保留值定性与内标法定量的分析方法。
二、实验原理：不同化合物之所以能够色谱分离是因为在色谱柱中停留时间的不同，停留时间取决于化合物与固定相的亲和能力。
当样品通过进样口汽化进入色谱柱，化合物分子会溶解在固定相，随后在温度、气流作用下再次汽化到流动相，这个过程不断反复，微弱的性质差别被不断放大，直至流出色谱柱。
与固定相亲和力强的化合物，汽化到流动相比较难，流出色谱柱的时间（保留时间Retention time ，Rt ）也就比较长，根据相似相溶的原理，不同极性的色谱柱适合分离相应极性的化合物；保留时间还取决于蒸汽压和汽化焓，即与沸点密切相关；保留时间受环境温度、流动相速度的影响也很明显。
色谱柱的分离能力是决定色谱分析成败的关键，现代气相色谱广泛采用高效率的毛细管色谱柱。
毛细管色谱柱种类众多，按固定相的不同可分为非极性柱、弱极性柱、中等极性柱、极性柱等。
本实验采用的色谱柱Rtx-1是一种非极性柱，固定相是高分子量聚二甲基硅氧烷，最高使用温度340℃。
在气液色谱中，有两种力同时影响组分的分离。
即（1）建立在拉乌尔定律基础上的蒸汽压平衡力和（2）组分分子与固定相分子间的作用力。
组分最终从柱后流出的次序就是这两种力相互“竞争”的结果。
柱温严重影响分配系数，进而影响组分的分离度。
一般地说，柱温降低，分配系数增大，分离改进。
图1是典型的气相色谱图，Y 轴表示检测器电压，X 轴是从样品进样到某个组分流出的时间，即该组分的保留时间。
如果色谱峰分离不理想，如图2的第二、第三峰，虽然可以简单地在峰谷画一条垂直线将两峰分离，但是在第三峰起始处仍然有第二峰分子的存在，无法准确标定峰面积与分子数之间的关系，因此有必要调整色谱条件，使各色谱峰得到良好分离（基线分离）。
归一化法测定烷烃混合物的含量【目的要求】1．掌握归一化法的定量分析方法。
2．掌握气相色谱仪的基本结构和使用方法。
【实验原理】在色谱分析中各组分的量与色谱峰面积成正比，归一化法是根据各组分在试样中所占的百分比利用色谱峰面积来进行定量分析的方法。
由于检测器对各组分的响应不同，需用校正因子进行校正，故各组分的含量可由下式计算：100%A f A f 100%m m m m (%) C n 1i ii i i n 21i i ×=×+⋅⋅⋅++=∑= 式中f i 和A i 分别为组分的校正因子和色谱峰面积。
归一化法具有简便、准确，不需要对照品，进样量和操作条件的变动对实验结果影响不大，但要求所有组分必须全部能被洗脱和检测出相应的色谱峰，不适合微量组分的分析。
【仪器与药品】1. 仪器岛津GC-14A 型气相色谱仪（或其他型号），微量注射器（5 μl ）。
2. 药品正己烷、正庚烷、正辛烷（均为AR ）。
【实验内容】1. 试样溶液配制分别精密移取一定体积的正己烷、正庚烷、正辛烷于5 ml 样品瓶中，混匀。
2. 实验条件检测器：热导检测器（TCD ）；色谱柱：(φ 3mm ×2mm ×2m) 15 % DNP （邻苯二甲酸二壬酯）不锈钢柱，102白色担体；载气：N 2；流量：18~35 ml/min ；气化室温度：110℃；检测器温度：110℃；柱温：100℃；进样量：2 μl 。
3. 气相色谱仪操作根据上述实验条件，按照如下流程操作：开气→开机→设置温度（柱温、检测器、气化室）→打开检测器→桥流设置（35mV ）→打开色谱工作站建立文件→查看基线。
4. 样品测定在上述实验条件下，用注射器进样2 μl，记录色谱图并保存数据，重复测定3次。
5. 数据处理打开保存的数据文件进行离线数据分析，获取色谱保留时间、峰面积、峰宽、半峰宽、含量等数据，编辑实验报告，打印结果。
【注意事项】1. 当TCD检测器开着时，一定要保持有载气通过；2. 先开气，后开仪器电源；关机时，先设置温度，待柱温、进样器温度、检测器温度均降至50℃后再关电源，最后关闭载气；3. 检测器温度应在柱温以上，以防样品溶液或流失的固定液冷凝在检测器里；4. 如果色谱峰太小或太大，可适当调整进样量。
