肿瘤干细胞分离方法的研究进展_文献综述_陈颖

肿瘤干细胞的分离培养及其在肿瘤治疗中的应用随着医学技术的不断前进，对肿瘤治疗的研究也越来越深入。

其中，肿瘤干细胞的研究备受关注。

肿瘤干细胞是指在肿瘤中所存在的一小部分细胞，能够不断分裂增殖，并给予肿瘤再生的可能性。

因此，肿瘤干细胞的分离与培养以及在肿瘤治疗中的应用，成为了当今医学研究的热点话题。

一、肿瘤干细胞的分离方法目前，分离肿瘤干细胞的方法主要包括紫杉醇浸润法、细胞表面标记法、限制稀释法等。

其中，限制稀释法是较为常用的一种。

限制稀释法是将单个肿瘤细胞样本通过连续的稀释、培养与观察，逐渐筛选出肿瘤干细胞。

它通过观察单个细胞的生长、分裂、增殖情况，来得出大量肿瘤细胞当中的干细胞。

虽然这种方法过程复杂、费时费力，但是它能够筛选出更加纯度高的肿瘤干细胞。

二、肿瘤干细胞的培养方法早期肿瘤干细胞的培养，主要采用血清补充的液体培养基进行细胞的培养。

但是在这种培养条件下，肿瘤干细胞很容易分化。

因此，近年来，越来越多的实验室采用无血清培养条件进行肿瘤干细胞的培养，以维持肿瘤干细胞的稳定状态。

无血清培养条件下，需要选择不同种类的培养基，添加多种生长因子与细胞基质，来模拟肿瘤干细胞自身的生长环境。

同时，还需注意对细胞的密度、温度、pH 值、CO2浓度等生理性因素的控制。

三、肿瘤干细胞在肿瘤治疗中的治疗应用肿瘤干细胞的研究在肿瘤治疗中，具有重要的应用价值。

首先，肿瘤干细胞作为肿瘤治疗的靶点，开启了新的临床治疗途径。

其次，肿瘤干细胞可以用于评估肿瘤药物的治疗效果，这一评价标准能够更为准确反映药物的实际效果。

此外，肿瘤干细胞还可以用于评估肿瘤的预后情况，帮助医生选择更加有效的治疗方式。

总之，肿瘤干细胞的研究在肿瘤治疗研究领域，具有非常重要的价值。

分离肿瘤干细胞、培养肿瘤干细胞以及开展针对肿瘤干细胞的治疗策略，将有助于提高肿瘤治疗的效果，为患者带来更好的治疗效果。

肿瘤干细胞在肿瘤发生和进展中的作用研究近年来，肿瘤干细胞日益成为肿瘤研究的重要热点之一，其在肿瘤发生和进展中的作用备受科研人员的关注。

肿瘤干细胞是一小部分能够自我更新和再生的细胞，而这些细胞正是导致肿瘤重建的罪魁祸首。

肿瘤干细胞的发现肿瘤干细胞最初是由美国的Rosen和Bostein在1997年提出的。

他们发现，体外培养的人类胶质瘤组织中只有少数几个细胞能够自我更新，而这些细胞具有成为更多干细胞的能力，从而导致了肿瘤的持续生长和扩散。

随着技术的不断发展，越来越多的科学家开始发现肿瘤干细胞在肿瘤发生和进展中的作用。

研究表明，这些干细胞能够避免正常的治疗方法，如放疗和化疗，导致肿瘤复发和进展。

同时，干细胞的特性也是使得肿瘤治愈如此困难的原因之一。

肿瘤干细胞的特性肿瘤干细胞自我更新和再生的能力是其最重要的特性之一。

这使得它们不仅能够维持肿瘤组织的生长和扩散，而且还能够再次发生肿瘤。

干细胞还具有多能性，即可以分化成不同类型的细胞，从而导致肿瘤的异质性。

肿瘤干细胞的功能肿瘤干细胞在肿瘤发生和进展中发挥着重要的作用。

首先，它们是肿瘤组织的主要来源，能够支持肿瘤的生长和扩散。

其次，它们能够避免正常的治疗方法，如放疗和化疗的影响，导致肿瘤复发和进展。

因此，如果不对肿瘤干细胞进行有效的治疗，就无法真正治愈肿瘤。

肿瘤干细胞与肿瘤治疗由于肿瘤干细胞的存在，普通的肿瘤治疗方法可能不足以根除肿瘤。

因此，科学家们将注意力转向了肿瘤干细胞的研究和治疗。

治疗肿瘤干细胞的方法包括通过靶向肿瘤干细胞的分子来消灭它们，以及利用生物学的方法，如干细胞疫苗和植入可以生成正常细胞的人工干细胞等。

虽然肿瘤干细胞的研究和治疗仍在进行中，但这项工作已经为未来的肿瘤治疗提供了新的思路和方法。

科学家们相信，只要持续不断地深入研究肿瘤干细胞，就有可能找到一种有效的治疗方法，最终实现肿瘤的治愈。

结直肠癌肿瘤干细胞的研究进展摘要】自肿瘤干细胞（CSC）学说的提出以来，越来越多的研究支持肿瘤中存在肿瘤干细胞，肿瘤干细胞是肿瘤增殖、转移、复发及耐药性产生的主要原因。

结直肠癌中肿瘤干细胞的发现为今后治愈结直肠癌提供了新的途径和新方法。

近年来国外关于结直肠癌肿瘤干细胞的来源、分选鉴定以及表面标记物方面的研究已经取得了一些进展。

【关键词】结直肠癌；肿瘤干细胞；研究进展；表面标记物【中图分类号】R735.3 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2014）26-0271-02The Progress of the Research of Colorectal Cancer stem CellsYANG Ming，DENG Mingming1、DePartment of Gastroenterology,the PeoPle’s hosPital of Mianyang2、DePartment of Gastroenterology,the Affiliated HosPital,Luzhou Medical College【Abstract】More and more studys suPPort the cancer stem cells(CSCs) really exist in neoPlasm since the theory has been ProPosed,and it is the main reason of tumour initiaton,metastasis,recurrence and resistance to drugs. The finding of Colorectal cancer stem cell brings us new ways and methods to cure Colorectal cancer in the future.In recent years the studys about the origin, identification and surface maker of Colorectal cancer stem cells have got some Progress.【Key words】Colorectal cancer Cancer stem cells research Progress surface marker结直肠癌(Colorectal cancer)是最常见的消化系统恶性肿瘤之一，临床上发现实施了外科手术的结直肠癌患者远期预后不佳的主要原因是术后的癌细胞的转移和肿瘤复发所导致。

肿瘤干细胞的研究新进展【关键词】肿瘤干细胞；干细胞；肿瘤近年来随着肿瘤干细胞(Cancer stem cells,CSC；或Tumour stem cells,TSC)在肿瘤组织中分离成功，并提出了肿瘤干细胞学说，为肿瘤研究提供了新的思路。

肿瘤干细胞是存在于肿瘤组织中的一小部分具有干细胞性质的细胞群体，均具有自我更新能力和不定向分化潜能，并可导致肿瘤发生。

现认为肿瘤干细胞是肿瘤形成及其不断生长的根源。

1 肿瘤干细胞的分离及鉴定1997年Bonnet等[1]首次确认了人类急性髓性白血病中肿瘤干细胞的存在，并成功分离出来。

研究发现只有0．2%~1%的细胞亚群有持续的克隆形成能力,与造血干细胞有相似的表型，即CD34+CD38-Thy-细胞,这种细胞移植到NOD/SCID小鼠后能形成类似AML的肿瘤细胞。

Al-Hajj[2]和Clarke[3]等首次从人类乳腺肿瘤中分离出了肿瘤干细胞，即CD44+CD24-/lowLin-细胞，只需100个即能100%形成肿瘤，CD44+CD24+细胞不能形成肿瘤。

这是首次在实体瘤中发现肿瘤干细胞的存在。

Ignatova[4]等在人类脑部肿瘤中发现了CD133+肿瘤干细胞，为肿瘤干细胞的存在再次提供了强有力证据。

Singh等[5]从人脑瘤中分离出CD133+和CD133-脑瘤细胞，只有CD133+的肿瘤细胞才能在体外培养中形成肿瘤球，具有较强的自我更新能力及增殖致瘤能力，仅需100个细胞就可以使NOD/SCID小鼠形成新的肿瘤，并能连续传代致瘤。

而CD133-的肿瘤细胞数量虽占多数，却不能使小鼠形成肿瘤。

Houghton等[6]研究发现在慢性螺旋杆菌感染时，骨髓来源的干细胞会聚到胃黏膜处，并不断增殖，久之发生化生、不典型增生及癌肿。

Baumann等[7]发现肝癌干细胞不仅可分化为肝细胞癌,还可能为胆管细胞癌,或者两者皆有的混合型肿瘤。

原发性肝癌在早期阶段受阻则表现为低分化肝癌，其表型介于肝细胞癌与胆管细胞癌之间；而在后期阶段受阻则表现为肝细胞癌或胆管细胞癌。

生命科学Chinese Bulletin of Life Sciences第21卷 第5期2009年10月Vol. 21, No. 5Oct., 2009文章编号 ：1004-0374(2009)05-0715-05肿瘤干细胞研究进展潘秋辉1，宋尔卫2*（1中山大学附属第二医院医学研究中心，广州510120；2中山大学附属第二医院乳腺外科，广州510120）摘　要：在过去的十年中，肿瘤干细胞(cancer stem cell/tumor-initiating cell, CSC/TIC)虽然受到广泛重视，但也是争论的焦点。

如何正确认识C S C s 假说，以及C S C s 的生物学特点和C S C s 的治疗应用这些问题都存在巨大的争议。

该文对C S C s 的起源、分离鉴定的方法，以及信号通路、微环境等对C S C s 的调控关系，肿瘤的最佳治疗途径等问题进行综述。

关键词：干细胞；肿瘤干细胞；肿瘤治疗；分选鉴定中图分类号：R730.231 文献标识码：A Research progress of cancer stem cellsPAN Qiu-hui 1, SONG Er-wei 2*(1 Medical Research Center, second Affiliated Hospital, Sun Yat-sen University, Guangzhou 510120, China;2 Department of Breast Surgery, Second Affiliated Hospital, Sun Yat-sen University, Guangzhou 510120, China)Abstract: The investigation and study of cancer stem cells (CSCs) have received enormous attention over the past decade but remain topics of considerable controversy. Opinions about the validity of the CSC hypothesis,the biological properties of CSCs, and the relevance of CSCs to cancer therapy differ widely. In the following text, we discuss the origin, the identification, regulatory pathway, microenviroment and the new potential therapeutic targets elucidated by considering cancer as a problem in stem cell biology.Key words: stem cell; cancer stem cell; cancer therapy; identification of sorfing收稿日期：2009-08-21基金项目：国家自然科学基金重点项目(30830110)；国家自然科学基金面上项目(30600328)*通讯作者：E-mail: songerwei02@1　肿瘤干细胞的概念肿瘤细胞群具有功能异质性，即不同的细胞亚群增殖、分化能力并不相同。

肿瘤干细胞的研究进展作者：严杰来源：《中国保健营养·临床医学学刊》2008年第04期中图分类号：R73-3 文献标示码：B 文章编号：1005-0019（2008）4-0172-02肿瘤研究的难点和基本问题之一是那些肿瘤细胞能够无限地生长。

传统的观点认为肿瘤的生长是所有肿瘤细胞一起增殖的结果，通过对造血系肿瘤的研究发现，肿瘤细胞的生长繁殖和干细胞之间有许多相似之处，因此提出了肿瘤干细胞学说[1]。

认为肿瘤的生长是肿瘤组织中极少量的肿瘤干细胞无限增殖的结果，而其周围的肿瘤细胞的增殖能力是十分有限的。

近年来的研究表明，在白血病以及部分实体瘤中(如乳腺癌、脑瘤等)，只有一小部分肿瘤细胞具有无限增殖能力，并可形成新的肿瘤灶，这种细胞称之为肿瘤干细胞(tumorstemcell，TSC)。

这些研究对肿瘤研究领域和肿瘤的治疗产生深远的影响，为临床肿瘤治疗提供了新的方向和视觉角度。

本文就TSC的生物学特性、分离纯化鉴定技术及其临床意义作一综述。

1 肿瘤干细胞理论的提出早在19世纪中期就有人在显微镜下发现肿瘤细胞与干细胞十分相似，但由于当时技术水平的限制，研究没有进一步的深入。

但随后又有学者发现，在多发骨髓瘤和白血病患者中，仅有很少量的肿瘤细胞集落能够在体外克隆增殖，在异种移植实验中，将白血病细胞接种NOD/SCID小鼠[2]，仅有1%到4%的细胞能够在脾内形成集落，表明并不是所有的肿瘤细胞都能无限的增殖，只有小部分肿瘤细胞具有致瘤源性。

早期对很多其他实体瘤，如对卵巢癌、肺癌、神经母细胞瘤的研究中，Hamburger等人[3]也发现仅有1/1000或1/5000的肿瘤细胞能在琼脂中形成克隆。

肿瘤的生成是一个长期的过程，一个正常细胞转变为肿瘤细胞至少要发生4-7次的突变，这需要几年甚或几十年的时间，在一些细胞更新快的组织如皮肤表皮、肠道黏膜和血液等，衰老细胞迅速死亡脱离机体，而这些组织恰是肿瘤的好发部位。

肿瘤干细胞研究的新进展与展望随着人类健康意识的提升，癌症成为了大家最为关注的健康问题之一。

虽然目前治疗癌症的方法已经有了很大的进步，但是癌症的治疗仍然面临很大的挑战。

癌症的发生和发展是一个非常复杂的过程，其中肿瘤干细胞是癌症发生和发展的关键因素之一。

因此，肿瘤干细胞研究一直是癌症研究的热点之一。

本文将介绍肿瘤干细胞研究的新进展和未来的发展方向，以期为癌症治疗提供新的思路和方法。

一、肿瘤干细胞的定义和特点肿瘤干细胞是指肿瘤组织中一种具有自我更新和增殖能力的细胞，它们具有分化为体细胞的潜能，并且能够延长肿瘤的生存期。

和普通的癌细胞不同，肿瘤干细胞能够形成肿瘤的种子细胞，并且在肿瘤治疗中具有一定的耐药性。

二、肿瘤干细胞研究的新进展最近的研究表明，肿瘤干细胞可以通过一些因素来激活它们的自我更新和增殖能力。

这些因素包括一些基因的突变、细胞微环境的改变和营养物质的供给等。

其中，细胞微环境对肿瘤干细胞的影响尤为重要。

肿瘤干细胞在特定的微环境下，会受到一些信号分子的作用，从而激活自身的分化和增殖，进而促进肿瘤的生长和扩散。

同时，最近的研究表明，肿瘤干细胞还可以通过分泌一些促进血管生成的因子来促进自身的生长和扩散。

这些因子包括VEGF、FGF等，它们能够刺激周围的血管生成，供给肿瘤干细胞所需的养分和氧气，从而优先满足肿瘤干细胞的生长和扩散需求。

三、肿瘤干细胞研究的未来展望虽然肿瘤干细胞研究已经取得了很大的进步，但是还有很多问题需要进一步解决。

一方面，肿瘤干细胞的分化和增殖机制、以及肿瘤干细胞和周围环境的相互作用等问题还需要进一步研究；另一方面，开发针对肿瘤干细胞的新型治疗方法也是研究的重点之一。

在未来的研究中，可以考虑以下几个方面：1、研究肿瘤干细胞和周围微环境的相互作用，深入了解细胞因子和信号通路的调控机制，在这个基础上，设计针对肿瘤干细胞的新型治疗方法。

2、发展肿瘤干细胞特异性标记和鉴别技术，以便更准确地检测肿瘤干细胞的数量和分布，指导针对肿瘤干细胞的治疗策略。

肿瘤干细胞的研究进展王敏【期刊名称】《医学综述》【年(卷),期】2012(18)1【摘要】Cancer stem cell( CSC )theory, thinks that a small group of cells in tumor tissue is similar with stem cells in biological characteristics,which is believed to be the source of tumor genesis,metastasis and recurrence. CSC membrane expressed ABC transporters and CSC growth microenvironment make them relatively insensitive to chemotherapy and radiation therapy, and CSC has several signal pathways to update itself. Therefore,ABCG2's drug resistance, the growth microenvironment of CSC and the signal pathways are the new targets of cancer treatment. Here is to make a review on the origin and the biologic characteristic of CSCs,and the relationship between CSCs and the tumor drug resistance,metastasis and treatment.%肿瘤干细胞(CSC)理论认为肿瘤组织内有一小群细胞具有与干细胞类似的生物学特性,这一小部分细胞被认为是肿瘤发生、扩散、复发过程中的根源.CSC细胞膜上表达的ABC转运蛋白以及CSC生长的微环境都使其对化疗和放疗相对不敏感,并且CSC具有多条自我更新的信号通路.因而,ABCG2的耐药性、CSC生长的微环境和肿瘤细胞的信号通路等都是肿瘤治疗的新靶点.现就CSC的来源、生物学特性以及它们与肿瘤的耐药性转移和治疗间的关系进行综述.【总页数】3页(P59-61)【作者】王敏【作者单位】安徽医科大学附属口腔医院(安徽省口腔临床医学重点学科,安徽省口腔疾病研究省级实验室,中央与地方共建口腔医学中心实验室)合肥,230032【正文语种】中文【中图分类】R730.21【相关文献】1.口腔颌面部恶性肿瘤干细胞标志物用于靶向治疗的研究进展 [J], 杨震;姚金光2.植物化合物靶向肿瘤干细胞的研究进展 [J], 杨力侠;王琳;王金佩;邢书娟;黄国友3.卵巢癌肿瘤干细胞及其标志物与卵巢癌靶向治疗的研究进展 [J], 关慧鑫;韩世愈4.肿瘤干细胞相关机制及靶向肿瘤干细胞治疗研究进展 [J], 马慧;任正刚5.肿瘤干细胞与肺腺癌EGFR-TKI获得性耐药机制的研究进展 [J], 陈雨;陈杰;李亚军因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

DOI: 10.3969/j.issn.1673-713X.2018.04.010·综述·肿瘤干细胞研究进展潘有礼，赵成建，赵玉伟肿瘤是目前严重威胁人类生命健康的重大疾病之一[1]。

近年来，随着生物科技的进步以及肿瘤生物学的发展，肿瘤的临床治疗取得了显著的进步，但是绝大多数恶性肿瘤仍然无法从根本上消除，其中转移和复发是当前肿瘤治疗的最主要挑战。

肿瘤干细胞是近年来肿瘤理论研究的热点之一，它被认为是肿瘤组织内真正驱动肿瘤发生和发展的“动力”，同时也是肿瘤复发和转移的根源。

肿瘤干细胞可以很好地解释肿瘤细胞的异质性，由于肿瘤组织中存在肿瘤干细胞群体，而其具有很强的自我更新和分化能力，因而在维持肿瘤的恶性增殖、侵袭、耐药、转移、复发等方面起着决定性的作用。

近年来肿瘤干细胞学说受到越来越多的关注[2-3]，并在白血病、乳腺癌、结直肠癌、脑肿瘤、前列腺癌、肺癌、肝癌、皮肤癌等多种恶性肿瘤中成功分离出了肿瘤干细胞。

除此之外，研究人员还通过基因遗传谱系追踪技术对肿瘤细胞谱系进行了追踪，发现并证实了肿瘤干细胞的存在[4-6]。

这些研究成果均为基于肿瘤干细胞的肿瘤治疗策略提供了理论基础。

1 肿瘤干细胞模型肿瘤干细胞模型认为肿瘤干细胞为一群具有干细胞特性的细胞，其可以持续维持肿瘤的生长，并且肿瘤干细胞与正常的组织干细胞具有很多相似的特性，包括自我更新（对称和不对称分裂）和自我分化能力。

肿瘤干细胞模型的一个重要应用在于它表明肿瘤细胞是分等级的，并且肿瘤干细胞位于等级的顶端。

肿瘤干细胞模型的最早证据来源于急性粒细胞白血病[7]，该文献表明不同的白血病细胞亚群移植免疫缺陷老鼠后形成肿瘤的能力也是有差异的。

其中大多数白血病细胞不能持续增殖，而少数表型为CD34+CD38–的白血病细胞亚群可在NOD-SCID 小鼠体内引发新的白血病，首次发现了白血病干细胞（LSC）的存在。

随后，2003 年，Al-Hajj 等[8]在乳腺癌中发现CD44+CD24–的细胞具有肿瘤起始能力。

２００６年第３期１３ＬｕｎｄｅｌｌＮ，ＭａｒｋｉｄｅｓＫ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉａ，１９９２，３４：３６９．１４ＢｕｓｈｅｙＭＭ，ＪｏｒｇｅｎｓｏｎＪＷ．ＡｎａｌＣｈｅｍ，１９９０，６２（２）：１６１．１５郑天，屠春燕．南京工业大学学报，２００４，２６（２）：９９￣１０５．１６ＪａｎｚｅｎＲ，ＵｎｇｅｒＫＫ，ＧｉｅｓｃｈｅＨ，ｅｔａｌ．ＪＣｈｒｏｍａｔｏｇｒ，１９８７，３９７：９１．１７蔡宇杰，丁彦蕊，张大兵，等．色谱，２００４，２２（２）：１１１￣１１５．１８李国龙，李继睿，邵涛．广州化工，２００４，３２（３）：５￣９．１９周先碗，胡晓倩．生物化学仪器分析与试验技术．北京：化学工业出版社，２００２，１３９．２０ＳｍｉｔｈｉｅｓＯ，ＰｏｕｌｉｋＭＤ．Ｎａｔｕｒｅ，１９５６，１７７（４５１８）：１０３３．２１Ｏ’ｆａｒｒｅｌＰＨ．ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ，１９７５，２５０（１０）：４００７￣４０２１．２２ＯｇｕｒｌＴ，ＴａｋａｈａｔａＩ，ＫａｔｓｕｔａＫ，ｅｔａｌ．Ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓ，２００２，２（６）：６６６．２３ＺｈｏｕＧ，ＬｉＨＭ，ＤｅＣａｍｐＤ，ｅｔａｌ．ＭｏｌＣｅｌｌＰｒｏｔｅｏｍｉｃｓ，２００２，１（２）：１１７．２４邓延倬，何金兰．高效毛细管电泳．北京：科学出版社，１９９６，２７２￣３１７．２５陆豪杰，阮宗琴，康经武，等．分析测试技术与仪器，１９９９，５（３）：１２９￣１３４．２６梁振，单亦初，赵瑞环，等．分析化学，２００３，３１（３）：３６０￣３６３．２７ＭａｎｚＡ，ＧｒａｂｅｒＮ，ＷｉｄｍｅｒＨＭ．ＳｅｎｓＡｃｔｕａｔｏｒｓＢ，１９９０，Ｂ１：２４４￣２４８．２８丛辉，王惠民，王跃国．现代检验医学杂志，２００５，２０（１）：８８￣８９．２９徐炎华，欧阳平凯，韦萍．江苏化工，１９９６，２４（３）：４￣７．李洁等：生物大分子分离技术：过去、现状和未来!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!肿瘤干细胞的研究进展中国医学科学院昆明医学生物研究所研究生瞿素在胡云章导师指导下，论述了肿瘤干细胞的研究进展。