实验一 邻二氮菲分光光度法测定铁

实验邻二氮菲分光光度法测定铁一、实验目的1、通过分光光度法测定铁的条件实验，学会如何选择分光光度分析的条件及分光光度测定铁的方法。

2、了解分光光度计的性能、结构及其使用方法3、学会使用TU-1810紫外可见分光光度计二、实验原理邻二氮菲(phen)和Fe2+在pH3～9的溶液中，生成一种稳定的橙红色络合物Fe(phen) 32+，其lgK=21.3，κ508=1.1 ×104L·mol-1·cm-1，铁含量在0.1～6μg·mL-1范围内遵守比尔定律。

其吸收曲线如图1-1所示。

显色前需用盐酸羟胺或抗坏血酸将Fe3+全部还原为Fe2+，然后再加入邻二氮菲，并调节溶液酸度至适宜的显色酸度范围。

有关反应如下：2Fe3++2NH2OH·HC1＝2Fe2++N2↑+2H2O+4H++2C1－图1-1 邻二氮菲一铁(Ⅱ)的吸收曲线用分光光度法测定物质的含量，一般采用标准曲线法，即配制一系列浓度的标准溶液，在实验条件下依次测量各标准溶液的吸光度(A)，以溶液的浓度为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

在同样实验条件下，测定待测溶液的吸光度，根据测得吸光度值从标准曲线上查出相应的浓度值，即可计算试样中被测物质的质量浓度。

三、仪器和试剂1．仪器TU-1810紫外可见分光光度计，pH酸度计等2．试剂(1)100ug·mL-1铁标准储备液准确称取0.702 0 g NH4Fe(S04)2·6H20置于烧杯中，加少量水和20 mL 1:1H2S04溶液，溶解后，定量转移到1L容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。

(2)10 ug·mL-铁标准溶液用吸量管移取25mL 100ug·mL-1铁标液于250mL容量瓶中，加入4mL6mol·L-1HCl溶液，用水稀释至刻度，摇匀。

（学生自配）(3)100 g·L-1盐酸羟胺水溶液用时现配。

实验一邻二氮菲分光光度法测定铁一、实验目的1、掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的原理和方法；2、熟悉吸收曲线绘制及最大吸收波长选择；3、学会标准曲线绘制及应用。

4、了解721型分光光度计的主要构造，并掌握其使用方法。

二、实验原理邻二氮菲(phen)和Fe2+在pH3～9的溶液中，生成一种稳定的橙红色络合物Fe(phen) 32+，其lgK=21.3，κ508=1.1 × 104L·mol-1·cm-1，铁含量在0.1～6μg·mL-1范围内遵守比尔定律。

其吸收曲线如下图所示。

显色前需用盐酸羟胺或抗坏血酸将Fe3+全部还原为Fe2+，然后再加入邻二氮菲，并调节溶液酸度至适宜的显色酸度范围。

有关反应如下：2Fe3+ + 2NH2OH·HC1＝2Fe2+ + N2↑+ 2H2O + 4H+ + 2C1－图1-1 邻二氮菲一铁(Ⅱ)的吸收曲线用分光光度法测定物质的含量，一般采用标准曲线法，即配制一系列浓度的标准溶液，在实验条件下依次测量各标准溶液的吸光度(A)，以溶液的浓度为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

在同样实验条件下，测定待测溶液的吸光度，根据测得吸光度值从标准曲线上查出相应的浓度值，即可计算试样中被测物质的质量浓度。

三、仪器和试剂1、仪器：721型分光光度计，50mL容量瓶，10mL吸量管，滴定管，洗瓶。

2、试剂：(1) 100ug·mL-1铁标准溶液；(2) 1.0×10-3mol·L-1铁标准溶液；(3) 100g·L-盐酸羟胺水溶液（新配）；(4) 1.5g·L-1邻二氮菲水溶液；(5) 1.0mol·L-1乙酸钠溶液；(6) 0.1mol·L-1氢氧化钠溶液。

四、实验步骤1、显色标准溶液的配制取6只 50 mL 容量瓶，并且对其编号(1-6号)。

用吸量管依次加入0,0.20,0.40,0.60,0.80,1.0 mL 100ug·mL-1铁标准溶液，分别加入1 mL 100g· L-盐酸羟胺溶液，摇匀后放置2 min，再各加入5 mL 1.0mol·L-1乙酸钠溶液和2mL1.5g·L-1邻二氮菲水溶液，以水稀释至刻度，摇匀。

邻二氮菲分光光度法测定铁一、实验原理铁是人体内必需的微量元素之一，它参与多种生理过程，包括氧的运输、细胞呼吸等。

然而，铁中毒和缺铁症是世界上最常见的两种微量元素相关疾病之一。

因此，准确地测定铁的含量对于诊断疾病、评估营养状况和监测食品安全至关重要。

邻二氮菲是一种有机染料，可以与铁形成复合物。

在一定的温度和pH条件下，邻二氮菲与铁形成深紫色络合物，其最大吸收峰位于520 nm和560 nm，吸收强度与铁的浓度成正比。

因此，邻二氮菲可以用于分光光度法定量测定铁的含量。

在邻二氮菲分光光度法中，首先需要将样品中的铁离子与邻二氮菲反应形成络合物。

然后，通过分光光度计测量此络合物在特定波长下的吸收强度，并利用标准曲线将其与铁的浓度相关联。

二、实验步骤1.准备样品：将约0.5 g的待测样品粉碎并称取10 mL的溶液，加入3 mL的浓硫酸和3 mL的双氧水，将其在热板上加热至溶解为止。

注意，加入双氧水时应小心，因为双氧水和硫酸接触时会产生剧烈反应。

2.制备邻二氮菲-铁络合物：将约0.1 g的邻二氮菲溶解于100 mL的95%乙醇中，制备10 mM的邻二氮菲溶液。

然后分别取1 mL的邻二氮菲溶液和1 mL的样品溶液，加入9 mL的软化水，混匀后放置15分钟左右，直到出现深紫色。

3.测量吸收光谱：将配制好的邻二氮菲-铁络合物的吸收光谱在520 nm和560 nm处用分光光度计进行测量，记录吸光度值。

4.构建标准曲线：按照相同步骤制备不同浓度的铁标准溶液（可以从200 ppm逐渐稀释至1 ppm）。

将每个标准溶液管的吸光度读数记录，并将它们与浓度相关联，构建标准曲线。

5.测量样品中的铁含量：按照相同步骤制备样品的邻二氮菲-铁络合物，并在520 nm处测量吸光度。

然后利用标准曲线将吸光度值转化为铁的浓度。

三、注意事项1.操作要小心，防止吸入、飞溅和皮肤接触有害化学物质。

2.铁标准溶液应避免暴露在空气中，以免氧化。

3.在分析之前，应将铁标准溶液和样品基底浓度相同，以保证准确性和可重复性。

实验一邻二氮菲分光光度法测定铁[实验目的]1、了解分光光度法测定物质含量的一般条件及其选定方法。

2、掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的方法。

3、了解721型（或722型）分光光度计的构造和使用方法。

[实验原理]Fe2+与邻二氮菲反应生成红色配合物，在波长510nm（最大吸收波长）处，其吸光度的高低与浓度的关系符合朗伯—比尔定律。

Fe2+与邻二氮菲在PH为2—9范围都能形成稳定的红色配合物，但在5—6时最佳。

铁必须是以Fe2+形式反应，因此显色前要加入还原剂，通常用盐酸羟胺作为还原剂，反应式如下：4Fe3+＋2NH2OH = 4Fe2+＋N2O↑＋4H+＋H2OFe2+与邻二氮菲的反应式如下：[试剂和仪器]1、试剂：0.1mg/mL标准铁溶液：准确称取0.8634g分析纯铁铵矾［NH4Fe（SO4）2·12H2O］置于烧杯中加入20mL6mol·L -1的HCl溶液，溶解后转入1000mL容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。

(或0.702 0 g NH4Fe(S04)2·6H20)1.5 g·L-1邻二氮菲水溶液避光保存，溶液颜色变暗时即不能使用。

100 g·L-1盐酸羟胺水溶液用时现配。

1mol·L-1NaAc溶液0.1mol·L-1NaOH溶液2、仪器 721（或722）型分光光度计一台（包括比色皿一套）、50mL容量瓶10只、5mL吸量管2支其它辅助器皿[实验步骤]（一）、工作条件试验1、吸收曲线的绘制用吸量管吸取1mL标准铁溶液，注入50mL容量瓶中，依次加入1mL盐酸羟铵溶液（摇匀）、2mL邻二氮菲溶液、5mL1mol/LNaAc溶液，定容至刻度，摇匀。

在721（或722）型分光光度计上，用1cm比色皿，一试剂空白为参比溶液在波长为440～560nm间，间隔10nm测定一次吸光度（在最大吸收波长附近，每隔2nm测定一次）。