国家食品药品监督管理总局关于发布《水产品中孔雀石绿的快速检测

水产品中孔雀石绿药物残留检测技术研究进展孔雀石绿是一种广泛应用于水产品中的药物残留检测技术。

它是一种有机物，常被用于治疗和控制水中的细菌和寄生虫。

然而，孔雀石绿的使用可能会对人体造成危害，因为它可以影响人体对细菌和寄生虫的免疫系统。

因此，许多国家对水产品中孔雀石绿的使用提出了限制。

然而，由于水产品野生和养殖的差异以及孔雀石绿对不同物种的不同响应，使得孔雀石绿药物残留检测变得相当困难。

本文将介绍当前孔雀石绿药物残留检测技术的研究进展。

常用的孔雀石绿药物残留检测技术包括高效液相色谱法、荧光光谱法、气相色谱法和液相串联质谱法等。

这些技术具有高灵敏度和高选择性，但也存在一些缺点。

例如，这些技术需要昂贵的仪器设备、高技术人员操作，并且需要花费大量时间进行样品制备。

此外，它们还需要处理大量的样品，这使得这些技术的成本和时间都非常高。

随着科技的发展，出现了一些新型的孔雀石绿药物残留检测技术。

这些技术以其快速、精确和经济的特点受到研究人员的青睐。

1、表面增强拉曼光谱法表面增强拉曼光谱法是一种新型的孔雀石绿药物残留检测技术。

它利用纳米颗粒表面的等离子共振增强拉曼散射，可以增强样品中分子振动的强度，从而提高信号强度和灵敏度。

与传统的检测技术不同，这种技术无需对样品进行复杂的前处理步骤，样品可以直接进行检测。

此外，这种技术还具有快速、稳定和经济的特点。

三、结论随着科技的发展，越来越多的新型孔雀石绿药物残留检测技术已经被开发出来。

这些新技术不仅具有高灵敏度，而且速度和经济性也得到了显著的提高。

这些新型技术的出现为水产品中孔雀石绿药物残留的检测提供了更加快速、准确和可靠的手段。

我们相信，在不久的将来，这些新技术将成为孔雀石绿药物残留检测的主要方式，帮助确保水产品的质量和安全。

孔雀石绿检测标准介绍孔雀石绿是一种有机物，常用于染色、防腐、除草等领域。

然而，孔雀石绿的过量使用可能对人体健康产生负面影响。

为保护公众的健康，许多国家都制定了孔雀石绿的检测标准。

本文将深入探讨孔雀石绿的检测标准，包括其原理、方法和应用。

原理孔雀石绿的检测是基于其化学性质的特点进行的。

常见的检测方法有高效液相色谱法、气相色谱法等。

这些方法利用孔雀石绿分子的结构特征，通过色谱技术对孔雀石绿进行分离和测定。

高效液相色谱法高效液相色谱法（HPLC）是一种常用的分离和定量分析方法，它利用样品中不同成分在色谱柱中的差异分离出目标物质。

在孔雀石绿的检测中，也可以使用HPLC方法。

检测步骤1.样品制备：将待测样品进行处理，例如提取、稀释等。

2.色谱柱选择：选择适合的色谱柱，根据需要可使用反相柱、离子交换柱等。

3.流动相选择：根据孔雀石绿的特性选择合适的流动相，如甲醇、乙腈等。

4.柱温控制：控制色谱柱的温度，以优化分离效果。

5.检测器选择：选择合适的检测器，如紫外/可见光检测器、荧光检测器等。

6.方法验证：确定分析方法的准确性和重复性。

7.样品分析：将样品按照一定流速通过色谱柱，采集检测结果。

气相色谱法气相色谱法（GC）是另一种常用的孔雀石绿检测方法。

它利用样品中不同成分在固定相和流动相之间的差异分离出目标物质。

检测步骤1.样品制备：将待测样品进行提取和净化处理，通常使用溶剂提取法或固相萃取法。

2.气相色谱仪选择：选择适当的气相色谱仪，包括色谱柱、进样器和检测器等。

3.良好的进样技术：确保样品能够均匀地进入色谱柱。

4.标准曲线的建立：使用标准样品建立孔雀石绿的浓度与响应信号的关系曲线。

5.批内和批间精密度实验：评估方法的精密度和准确性。

6.样品分析：按照一定流速将样品进入气相色谱仪，记录检测结果。

应用孔雀石绿的检测标准广泛用于食品、环境和农产品等领域。

食品安全是社会关注的热点之一，特别是对于水产品、禽畜肉和加工食品等易污染食品，孔雀石绿的检测显得尤为重要。

水产品中孔雀石绿快速检测产品技术评价研究
张凡;王一名;霍思宇;王海玲;余丽波;周超;祁萌娜;余洋
【期刊名称】《现代食品》
【年(卷),期】2022(28)3
【摘要】本研究建立了一种孔雀石绿快速检测产品的技术评价方法。

以鱼肉和虾肉为基质,采用孔雀石绿质控样品和均匀性满足要求的干扰物质基质加标样品作为评价用样品,每个快检产品随意抽取3个不同批次,每批次产品均检测80个阴性样品、200个阳性样品和40个干扰物质基质加标样品。

对市面流通中认知度较高的4个厂家孔雀石绿快速检测产品的检出限、灵敏度、特异性、假阳性率和假阴性率等参数进行评价。

评价结果表明,4个厂家孔雀石绿快速检测产品的灵敏度均
≥97.6%,特异性均≥88.3%,假阴性率均≤2.4%,假阳性率均≤11.7%,不同厂家产品的检测效果存在差异。

该评价方法可对快速检测产品进行全面技术评价,进而筛选出稳定可靠的孔雀石绿快速检测产品,可为监管部门在水产品监管方面提供技术支持,并为开展孔雀石绿快速检测产品认证工作奠定基础。

【总页数】5页(P208-212)
【作者】张凡;王一名;霍思宇;王海玲;余丽波;周超;祁萌娜;余洋
【作者单位】中国检验检疫科学研究院;中检科(北京)测试认证有限公司
【正文语种】中文
【中图分类】TS254.7
【相关文献】
1.水产品中孔雀石绿及其代谢物快速检测方法研究
2.孔雀石绿快速检测试剂盒的比较研究以及在水产品监控中的应用
3.孔雀石绿快速检测试剂盒的比较研究以及在水产品监控中的应用
4.一种快速检测水产品中孔雀石绿及其代谢物的方法研究
5.水产品中孔雀石绿残留快速检测技术的现状与突破
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水产品中孔雀石绿快速检测方法
组织检测步骤：
鱼虾等去皮、脂肪，用均质器均质样本，称取2±0.05g均质物于15ml离心管；加入1瓶去脂试剂，振荡2min，室温4000rpm，离心3min。

倒掉上清液，把肉样弄松散（若要做添加实验，请在此刻加入添加物）；加入1瓶提取剂A，立即摇匀，然后加入1瓶提取剂B，充分振荡混合5min，室温4000rpm，离心5min；取上层有机层4ml到15ml离心管中，加入20ul衍生化试剂，涡旋1min，加入4ml净化剂，颠倒混匀1min，静置1min；取下层（溶液显紫红色）2ml，55℃下使用便携式空气吹干仪吹干；然后加入0.5ml缓冲液剧烈涡旋2min，待检。

检测:从包装中取出微孔，用移液器吸取待检液体80ul至微孔中充分吸打均匀，然后全部滴加至检测卡加样孔（检测卡平放），静置8-15分钟，根据示意图判读结果（见彩图）水样检测步骤：
①用移液器吸取80µl样本液至样品孔中。

②静置5-8分钟，根据示意图判读结果。

结果判定及示意图：
在试纸卡的中央判读区喷有2条线，上面一条为对照线(C线)，下面一条为测试线(T线)。

若样品液中孔雀石绿的浓度小于检测限时，则T线显色比C线强，或显色与C线相近；若样品液中孔雀石绿的浓度大于检测限时，则T线显色比C线浅很多或T线显绿色。

实验设备：
1、孔雀石绿快速检测卡；
2、PRO-12L空气吹干仪;
3、HH-1水浴锅；
4、80-2离心机；
5、均质器；
6、掌上电子天平。

水产品中孔雀石绿的快速检测胶体金免疫层析法（KJ201701）1范围本方法规定了水产品及其养殖用水中孔雀石绿和隐色孔雀石绿总量的胶体金免疫层析快速检测方法。

本方法适用于鱼肉及养殖用水中孔雀石绿和隐色孔雀石绿总量的快速测定。

2原理样品中孔雀石绿、隐色孔雀石绿经有机试剂提取，吸附剂净化，正己烷除脂后，加入氧化剂将隐色孔雀石绿氧化成为孔雀石绿，经浓缩复溶后，孔雀石绿与胶体金标记的特异性抗体结合，抑制抗体和检测卡中检测线（T线）上抗原的结合，从而导致检测线颜色深浅的变化。

通过检测线与控制线（C线）颜色深浅比较，对样品中孔雀石绿和隐色孔雀石绿总量进行定性判定。

3试剂和材料除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的二级水。

3.1 试剂3.1.1正己烷。

3.1.2乙腈。

3.1.3冰乙酸。

3.1.4盐酸。

3.1.5吐温-20。

3.1.6氯化钠。

3.1.7对-甲苯磺酸。

3.1.8无水乙酸钠。

3.1.9盐酸羟胺。

3.1.10无水硫酸钠。

3.1.11中性氧化铝：层析用，100目~200目。

3.1.12二氯二氰基苯醌。

3.1.13氯化钾。

3.1.14磷酸二氢钾。

3.1.15十二水合磷酸氢二钠。

3.1.16饱和氯化钠溶液：称取氯化钠（3.1.6）200g，加水500mL，超声使其充分溶解。

3.1.17盐酸羟胺溶液（0.25g/mL）：称取2.5g盐酸羟胺（3.1.9），用水溶解并稀释至10mL，混匀。

3.1.18乙酸盐缓冲液：称取4.95g无水乙酸钠（3.1.8）及0.95g对-甲苯磺酸（3.1.7）溶解于950mL 水中，用冰乙酸（3.1.3）调节溶液pH为4.5，用水稀释至1L，混匀。

3.1.19二氯二氰基苯醌溶液（0.001mol/L）：称取0.0227g二氯二氰基苯醌（3.1.12）置于100mL 棕色容量瓶中，用乙腈（3.1.2）溶解并稀释至刻度，混匀。

4℃避光保存。

3.1.20复溶液：称取8.00g氯化钠（3.1.6），0.20g氯化钾（3.1.13），0.27g磷酸二氢钾（3.1.14）及2.87g十二水合磷酸氢二钠（3.1.15）溶解于900mL水中，加入0.5mL吐温-20（3.1.5），混匀，用盐酸（3.1.4）调节pH为7.4，用水稀释至1L，混匀。

专利名称：水体及水产品中孔雀石绿和无色孔雀石绿残留的快速检测方法和该方法所用的检测盒
专利类型：发明专利
发明人：张根华,詹月华,张海芸,尹凡,丁建英
申请号：CN200810025045.9
申请日：20080425
公开号：CN101566574A
公开日：
20091028
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：一种水体及水产品中孔雀石绿和无色孔雀石绿残留的快速检测方法，属于水体及水产品中的残留物检测技术领域。

其是将待测样品和提取剂I振荡混合均匀后，加入提取剂II振荡混合后静置，取上清液加入到富集柱中，观察富集柱中最下层的显色剂颜色变化，若形成绿色环带，则判断待测样品中含有孔雀石绿或无色孔雀石绿；提取剂I为乙腈、二氯甲烷、正己烷和对甲苯磺酸的混合液；提取剂II为二氧化铅和酸性氧化铝的混合物；待测样品为待检测水体样品或待检测水产品样品。

优点：具有操作简单并且步骤少，不需要使用昂贵的仪器设备，能体现对现场检测的方便、灵活性。

申请人：常熟理工学院
地址：215500 江苏省常熟市元和路98号
国籍：CN
代理机构：常熟市常新专利商标事务所
代理人：朱伟军
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142实验研究引言我国有着非常丰富的水产资源，在世界上属于水产养殖大国。

水产品作为我国城乡居民摄入动物蛋白的主要来源之一，在居民的生产生活中占据着极其重要的地位。

随着我国科学技术的进步，经济的快速发展，人民生活水平不断提高，对水产品的需求量也不断增长。

在养殖过程中，为降低生产成本，使用含有激素或者发生霉变的饲料，滥用抗生素、激素等渔用药物防治水产动物疾病，导致水产品药物残留超标，严重危害人类健康。

加强水产品中的渔药检测就显得尤为重要，本文阐述及归纳了水产品中孔雀石绿检测的常用方法，为水产品药物残留检测提供重要依据，对保障人类食品安全具有一定的意义。

1.孔雀石绿的常规检测方法1.1前处理方法1.1.1液液萃取液液萃取也称溶剂萃取或抽提，是指利用在溶液系统中两种或多种物质组分溶解度或分配系数不同的原理，使溶质物质从其中一种溶剂中转移到另一溶剂中提取方法。

通过静置过程，将出现分层现象的两种互不相容的物质进行分离的操作，叫做分液。

提取孔雀石绿的过程中常用的萃取溶液是二氯甲烷和无水乙醇。

它的优点是可以在常温条件下进行，操作较为方便，不需要特殊的实验装置和操作技术；缺点是有机溶剂的消耗量较大，挥发性较强的溶剂应尽量在通风橱内操作并做好个人防护工作。

1.1.2固相萃取固相萃取是于20世纪80年代发展起来的一种样品前处理技术，通常与液相色谱技术相结合，主要用于样品前处理的分离、提纯和浓缩过程。

它的原理是通过固相萃取小柱中的固体吸附剂吸附液体中的目标化合物，将样品的基质与干扰物有效的分离，再用洗脱液进行洗脱或者通过加热过程使目标化合物解吸附，最后经过氮吹或者旋蒸，达到浓缩与富集目标化合物的目的。

固相萃取的优点是操作简单，分离时间短，试剂消耗量少，可有效提高被测样品的回收率，对于痕量分析物有较为出色的检测能力；缺点是成本较高，属于一次性使用的实验耗材，同时需要专业人员进行方法开发。

1.1.3分散固相萃取净化技术分散固相萃取净化技术也称为QuEChERS技术，是2003年由美国农业部Anastassiades等人开发，提出之后又经过多次验证和方法改进正式确立。

商品名称：水溶性非食用色素（含孔雀石绿）的快速检测规格：50批次/盒检测项目：水溶性的非食用色素：罗丹明B、孔雀石绿产品简介：本产品利用水溶性食用色素被试棉吸附后，可以漂洗干净；而非食用色素被试棉吸附后，不容易去除的原理，快速筛查是食用色素还是非食用色素使用方法产品前处理：1液体食品直接备用。

汽水、色酒等加热除去二氧化碳或酒精后备用。

2辣椒粉、茶叶等粉叶状食物，取约10克置于烧杯中，加30ml水，振摇使色素溶于水中备用。

3表面有颜色的豆腐皮、豆腐干、黄花鱼等，取10克以上的样品，加入适量能够淹没样品的100℃的纯净水，放置2分钟，观察样品表面的颜色是否溶入水中，有溶出时，基本上可以判断加入了色素，即使是食用色素也是法规所不允许的。

4辣椒油或带有颜色的油状食物，采用“油溶性非食用色素速测盒”进行检测。

5取处理后的样品液10ml于试管中，滴入A试剂调PH到8～9之间，加入B试棉少许，将试管放入90℃以上的水浴中1分钟，搅拌试棉后将其取出，用清水漂洗试棉，试棉上的颜色不退为非食用色素。

为便于判断，可取B试棉少许，用水浸湿后对比观察。

孔雀石绿的检测：取10ml蓝色或绿色可疑液体放入试管中，滴入A试剂调PH 到10～11之间，将试管放入90℃以上的水浴中5分钟后，如果蓝色或绿色退去变为无色，再滴入C试剂调PH到2～3之间，放至室温，5分钟后又变回原有颜色，可初步判断样品中含有孔雀石绿。

此时，可用A试剂回调PH到7～8之间（不要高于9），加入B试棉少许，将试管放入90℃以上的水浴中1分钟，搅拌试棉后将其取出，用清水漂洗试棉，试棉上的颜色不退可进一步判断样品中含有孔雀石绿，有条件时将样品送实验室进一步确证。

注意事项：1.A试剂为饱和碱液,温度低时可能会有结晶出现,如果不易滴出时,可用滴管从中吸取液体使用。

2.罗丹明B检出浓度1.0µg/ mL，孔雀石绿检出浓度10µg/mL。

3.试剂闭光常温保存，有效期为2年。