实验动物微生物控制课件

AKR/J
一、实验动物的遗传分类
（一）近交系 近交系动物的特征
6、长期遗传稳定性
已建立的近交系动物在遗传上具有高度稳定性，个体遗传 变异仅发生在少量残留杂合基因和基因突变上，而这种机率非 常低。如果品系在被确认为近交系后坚持近交，同时辅以遗传 监测，及时地发现和清除遗传变异的动物，该品系的遗传特性 可世代相传。
一、实验动物的遗传分类
（一）近交系 近交系动物的特征
3、 特征表型的一致性
由于遗传上的同源性，近交品系内个体在表型上极为相同 ，如毛色、血型、组织型、形态上的特征、行为的类型等，尤 其是那些高度由遗传决定的生物学特征。近交系表型上的一致 性使得使用较少量的动物，即可以达到统计学的精确程度。
一、实验动物的遗传分类
（一）近交系 近交系动物的应用
3、某些近交系具有一定的自发或诱发肿瘤发病率，成为肿瘤 病因学、肿瘤药理学研究的重要模型；
4、多个近交系同时使用可使研究者分析不同遗传组成对某项 实验的影响，或者观察结果是否具有普遍意义。
一、实验动物的遗传分类
（一）近交系 近交系动物的分类
普通近交系 亚系 重组近交系 同源突变近交系 转基因动物
实验动物学的遗传质量控 制和微生物质量控制
实验动物为什么要求遗产背景明确或来源清楚？
实验动物的定义
指经人工饲育或人工改造，对其携带的微生物和遗传、营养、 环境实行控制，遗传背景明确或来源清楚的，用于科学研究、 教学、生产、检定以及其它科学实验的动物。
实验动物的遗传背景与反应特性是影响实验结果的重要因素， 不同遗传背景与反应性的实验动物，对同一刺激有时可引出 不同质和量的反应。
BALB/c、C57BR/cd
一、实验动物的遗传分类
（一）近交系 近交系动物的分类

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最初报道的无菌动物
动物 小鼠 大鼠
豚鼠 兔 猫 犬
培育者及育成时间 Pleasants, 1958 Reyniers等，1946 Gustafsson, 1948 Pleasants, 1959 Miyakawa等，1958 Tanami,1959 Wostmann和Pleasants,1959 Bleby, 1969 Glims, 1946
7.寿命 GF动物比CV动物要长得多
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三、无菌动物和悉生动物的应用
（一）在微生物学研究中的应用 1.病原体的致病作用 2.正常菌群相互间的依存性和拮抗性关系 3.生态预防和生态治疗 （二）在免疫学研究中的应用 （三）在放射医学研究中的应用 （四）在营养代谢研究中的应用 （五）在老年病学研究中的应用 （六）在毒理学研究中的应用 （七）在肿瘤研究中的应用
饲养条件：普通开放环境 应用：豚鼠、兔、犬、猴等大动物的实验研究。
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三、无特定病原体级动物（Specific pathogen free animal，简称SPF动物)
定义：指除清洁动物应排除的病原体外，不携带主 要潜在感染或条件致病和对科学实验干扰大的病 原体的实验动物。
来源：将无菌动物/悉生动物转移到屏障系统中 饲养繁殖 饲养条件：屏障系统内大 规模生产/隔离器内保种 应用：SPF大小鼠为国际 通行的科研用动物
心脏相对变小、白血球少、且数量波动范围小，这一特点与无 病原体入侵有关。 3.免疫系统
由于无菌动物几乎没有受过抗原刺激，其免疫机能基本上是处于原 始状态。胸腺、淋巴结发育不良；脾脏小，无二级滤泡。 4.泌尿系统 肾脏较小。
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（二）生理功能改变 1.免疫系统 ⑴免疫球蛋白及其合成率明显降低，血清中IgM、IgG水平低，无IgA。当

犬、猴和鸡的微生物学以及寄生虫学等级标准。目前有关实验动物的 标准有28个。颁布年代主要在2001年，最近对标准又进行了部分修订。
GB14925
实验动物环境与设施
GB14923
实验动物哺乳类实验动物的遗传质量控制
GB14922.1
实验动物寄生虫学等级及检测
GB14922.2
实验动物微生物学等级及检测
法、解剖镜下通体检查法等，主要适用于检查蚤、虱、螨等节肢动物。
（2）体内寄生虫：主要检查蠕虫和原虫，可用直接涂片法(粪便、血液、脏器、肠内容物
)、饱和盐水漂浮法或沉淀法、透明胶纸肛门周围粘取法、
组织或器官剖面压印法、病变组织切片或压片法、尿液的离心法
(如检查鼠膀胱线虫)等。
我省近5年实验动物微生物、寄生虫感染状况
实验动物质量保障体系
第二节 实验动物的微生物学、寄生虫学质量监测
(一)实验动物的微生物、寄生虫感染的危害
1、影响实验结果。如仙台病毒感染引起小鼠肺鳞状化病变；小鼠肝炎病毒感染引起血清谷丙转氨酶、谷
草转氨酶升高。
2、影响动物生产。如鼠痘、兔出血热病毒、犬细小病毒性肠炎的感染导致动物的大批死亡。 3、威胁人类健康。如汉坦病毒、钩端螺旋体感染人致病或致死。
4、污染实验材料。如用于疫苗生产的原材料SPF鸡胚污染病毒，接种疫苗导致病原的扩散。
5、寄生虫对实验动物的影响。 1）掠夺宿主的营养；
2）体外寄生虫对动物的骚扰；
3）对宿主机体产生机械性损伤;
4）对宿主产生毒性作用；
5) 对宿主生理、生化和免疫系统产生影响。
（二）监测意义
1、保证实验研究的顺利进行和工作人员的身体健康。
北美 0.02 0.00 0.00 0.01 0.02 0.04 1.57

对实验人员 的安全 有保障。 实验结 果可靠。
为什么要进行实验动物的微生物学控制？
威胁人的健康和生命 对动物生产有影响 使实验被迫中断 实验的准确性、重复性有质疑
第三章 实验动物的微生物和寄生虫质量控制
第一节 实验动物分级 第二节 普通动物 第三节 清洁级动物与无特定病原体动物 第四节 无菌动物 第五节 悉生动物 第六节 实验动物的微生物和寄生虫监测
慢性表现为： 脚、尾和鼻部出现皮疹和溃疡， 严重者可见脚、尾坏死脱落。
隐性感染无临床症状，实验激活鼠痘病毒而 使鼠痘流行。
2、兔出血症（rabbit epidermic hemorrhagic fever）
（1)是家兔的一种急性烈性传染病。 (2)具有传播快、病程短，发病率和死亡率高的特点 (3)主要感染青壮年兔，多呈急性经过。 (4)接种疫苗后，3-4天后即可产生较强的免疫力，
2、流行性出血热(EHFV)汉坦病毒（HV)
在国际上统称为肾综合性出血热。 在实验动物中，主要感染大鼠造成危害。大鼠感 染后不表现症状，也不发生死亡。 人感染后,主要临床特征为发热、出血、肾脏损害， 若不及时治疗死亡率较高。 在国内外实验动物单位出现过多起人感染后死亡的 现象。
特别要记住的是：
一种自然疫源性疾病，主要在野鼠中流行，隐性感染为主。
引起的大小鼠呼吸道疾病，经空气传播。
（三）、啮齿类动物细小病毒
小鼠细小病毒(Minute virus of mice MVM)和 大鼠细小病毒(Rat parvovirus)。
是迄今所知的唯一抗癌谱广、具有高度抗癌特异 性的微生物，对肝癌、胃癌、肉瘤等多种肿瘤均有明 显杀伤作用，故其感染将会给肿瘤的研究造成严重的 干扰。
二、普通动物的管理与用途

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仙台病毒感染
仙台病毒是大、小鼠群中常见的病毒之一，由副流感 病毒I 型引起的一种呼吸道传染病。急性感染多见于断乳 小鼠，成年鼠多数情况下呈隐性感染，在饲养条件恶化， 气温骤变或并发呼吸道细菌感染时，传播快，流行广，造 成呼吸道疾病的流行。仙台病毒隐性感染会给实验研究带 来严重干扰。 1、 严重影响机体体液与细胞免疫应答 2、 影响干扰实验性致瘤作用 3、 影响胚胎的发育，对鼠类生殖繁育造成影响
大鼠 兔
携带微生物 3年前 秒门菌、皮肤病原真菌、鼠痘病毒
近3年
了
沙门菌、皮肤病原真菌
皮肤病原真菌、体外等生虫
体外寄生虫
猴疱疹病毒、沙门菌、志贺菌 仙台病毒、小鼠肝炎病毒
猴疱疹病毒、皮肤病原真 菌
小鼠肝炎病毒
了
嗜肺巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌、 绿脓杆菌、鞭毛中
了
绿脓杆菌、肺炎克雷伯杆 菌
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1 、病毒感染危害性及其对实验研究 的干扰作用
猴痘病毒 猴狂犬病毒 黄热病毒
中非和扎伊尔的一些物 种
许多种类
非洲和新大陆种
大部分无临床症状，有 时出现发热和丘疹
狂犬病
接触分泌物 伤口接触唾液
在南美猴种从症状不明 蚊子 显到死亡变化
痘病变 狂犬病 黄热
来自非洲猴的检测
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猴疱疹病毒1型感染 (B 病毒)
由猴B病毒又称疱疹病毒引起的人和猴共患的一种传染病。 猴是B病毒的自然宿主，感染率可达10-60%。多数情况下 呈良性经过，仅在口腔粘膜出现疱疹和溃疡，之后病毒可 长期潜伏在呼吸道或泌尿生殖器官附近的神经节，也可长 期潜伏在组织器官中，产生抗体。人类接触性感染，主要 表现脑脊髓炎症状，多数病人发生死亡。
实验动物微生物学和 寄生虫学质量控制

疫苗研发
利用实验动物评估疫苗的 有效性和安全性，加速疫 苗的研发进程。
药物研发
药效学研究
通过实验动物评估药物的疗效和作用机制，为新 药研发提供科学依据。
药代动力学研究
研究药物在实验动物体内的吸收、分布、代谢和 排泄过程，为新药研发提供重要参数。
毒理学研究
评估药物对实验动物的毒副作用和安全范围，确 保药物在临床试验中的安全性和有效性。
03
CATALOGUE
实验动物微生物学检测技术
显微镜检查技术
直接显微镜检查
通过显微镜直接观察样本中的微生物 形态，如细菌、真菌等。
染色技术
利用染色剂将微生物染色，使其更容 易观察，如革兰氏染色、抗酸染色等 。
培养分离技术
固体培养
将微生物接种在固体培养基上，通过培 养使其生长繁殖，便于分离和鉴定。
对实验动物微生物的控制和管理，有助于减少微生物对实验动物模 型的影响，提高实验结果的可靠性和可重复性。
推动相关领域的研究
实验动物微生物学的深入研究，有助于推动生物学、医学、兽医学 等相关领域的发展。
实验动物微生物学的发展历程
01
初期阶段
实验动物微生物学起源于20世纪初，当时的研究主要集中在病原菌对实
《实验动物微生物学》 ppt课件
CATALOGUE
目 录
• 实验动物微生物学概述 • 实验动物常见微生物种类 • 实验动物微生物学检测技术 • 实验动物微生物学应用领域 • 实验动物微生物学面临的挑战与展
望
01
CATALOGUE
实验动物微生物学概述
定义与特点
定义
实验动物微生物学是研究实验动物与微生物之间相互关系的科学，主要探讨微 生物对实验动物的影响以及实验动物在微生物学研究中的应用。

virus infection)
Lyphocytic choriomenin gitis
virus
狂犬病 (Rabies)
Rhabdo virus
小鼠、仓鼠
类 似 流 行 性 感 冒 的 症 状 ，接 触 感 染 ( 接 触 小 鼠 头痛、肌痛、发热、恶 粪便和尿液)；吸入； 心 、 呕 吐 、 喉 痛 、 畏 光 。咬伤，或由节肢动物
如蚊子、蟑螂传播
所有哺乳类
头痛、肌痛、发热、恐 咬伤、皮肤伤口或黏
水、狂妄、抽搐、昏厥、 膜感染含狂犬病毒的
死亡
唾液
细菌性疾病
疾病
病原
媒介动物
人类临床症状
传染途径
全身性感染 (Systemic infections)
布氏杆菌病 (Brucellosis)
犬 Brucdla Canis 、 猪 Brucella suis
正常菌群
a. 正常菌群受内外环境变化发生菌群失调，将产生数量和位置的改变， 由非致病菌变为致病菌。
3. 真菌感染对动物和实验的干扰
病原真菌大多为人兽共患病原，病原性弱，为慢性过程，以慢性增生性炎
症为主。
真菌孢子飞扬，污染环境，威胁动物和实验、饲养人员。
4. 寄生虫感染对动物和实验的干扰
掠夺宿主的营养
(Rabies) 酶联免疫吸附试验（ELISA）。
Germfree animal GF
三、微生物、寄生虫潜在感染对实验研究的干扰
1. 实验动物病毒对动物和实验的干扰
鼠痘病毒
a. 实验性结核、X射线、化学毒素、组织移植、肿瘤、运输可使隐性感染病毒激
活。
b. 大量内毒素或切除脾脏可改变吞噬细胞功能，而增加小鼠对病毒的易 感性。

有主要传染病病原体、没有对实验结果可能产生干 扰的微生物。 SPF动物不存在隐性感染（清洁级就有）。 隐性感染不会影响动物健康的外表，容易被忽视， 但却能给实验带来严重的干扰。
第六页，共38页。
表3-3几种(jǐ zhǒnɡ)实验动物应用价值的比较
类别
无菌动明确
应用动物数
普通级动物的饲养管理： 饲料、垫料不需要高压消毒； 饮用水要符合城市饮水卫生标准； 青饲料应经洗净后再喂； 外来动物必须严格隔离检疫； 饲养室内要有防野鼠、防昆虫的设备； 要坚持(jiānchí)经常性的环境卫生及笼器
具的清洗消毒，严格处理淘汰及死亡动 物； 限制无关人员进人动物室。
Yersinia(Pas teurella) pestis
Chlamydia psittaci
Streptobacill us monilifonnis spirillum minus
各种脊椎动物 的哺乳类、两 栖类、爬行类
鼠类、猫、 犬、兔、山羊
多种鸟类(鹦 鹉科、火鸡、 鸽、鸭等) 大鼠等啮齿类
与带病原的渗出物、分 泌物、排泄物接触传染 ，或经呼吸道感染
被带菌的大鼠、小鼠、 犬、猫咬伤，由空气、 灰尘或饮用污染的牛乳 感染
第二十一页，共38页。
续表
疾病
病原
媒介动物
人类临床症状
传染途径
呼吸道感染 ( Respiratory lnfections)
结核病
Mycobacteri 犬、猫、猴
(Tuberculosis um
类似天花症状，如发热、 皮疹、头痛、咽喉痛、虚脱 、偶有腹痛，严重致死
唾液(咬伤)、抓 伤
接触、空气传染 ；人类之间可经 由血液、分泌物 或精液传染 接触传染或呼吸 道感染