组织纤溶酶原激活物—纤溶酶原激活物抑制剂—1复合物测定试剂盒(化学发光免疫分析法)产品技术要求

阿司匹林联合低分子肝素对血栓前状态复发性流产患者治疗的效果分析发布时间：2021-01-15T07:43:54.415Z 来源：《医药前沿》2020年27期作者：徐明峡1 高敏2（通讯作者）[导读] 相较于阿司匹林单用，阿司匹林联合低分子肝素治疗血栓前状态复发性流产的效果更佳，值得应用。

（1重庆市万州区妇幼保健院重庆 404100）（2重庆市万州区妇幼保健院周家坝分院重庆 404100）【摘要】目的：分析阿司匹林联合低分子肝素对血栓前状态复发性流产患者的治疗效果。

方法：选取2017年9月—2019年6月我院接收的血栓前状态复发性流产患者76例，随机分为单独使用阿司匹林治疗的对照组及阿司匹林联合低分子肝素治疗的实验组，各38例。

对比两组治疗的临床效果。

结果：治疗后，两组激素水平均升高，实验组雌二醇（450.8±54.7）ng/L、孕酮（30.5±2.6）μg/L、血清绒毛膜促性腺激素（6799.8±460.1）ng/L均高于对照组的雌二醇（382.7±45.6）ng/L、孕酮（21.3±2.1）μg/L、血清绒毛膜促性腺激素（5689.3±409.9）ng/L，组间差异显著（P＜0.05）；实验组D-二聚体（114.2±20.7）ng/mL、纤溶酶原激活物抑制物指标（13.1±8.8）均低于对照组的D-二聚体（153.6±23.0）ng/mL、纤溶酶原激活物抑制物指标（18.6±8.9），组间有显著差异（P＜0.05）；实验组组织型纤溶酶原激活物（0.90±0.12）、凝血酶时间（18.70±1.32）s均高于对照组组织型纤溶酶原激活物（0.61±0.09）、凝血酶时间（15.97±1.12）s，组间有显著差异（P＜0.05）；实验组活产率81.58%高于对照组55.26%，组间有显著差异（P＜0.05）。

doi：10.3969/j.issn.1000-484X.2023.11.015·论著/肿瘤免疫学·SERPINE1在胃癌中的免疫浸润和ceRNA网络的综合分析①时谨代德柱宋旭东郭霞梅封紫玉陶国全（南京医科大学附属淮安第一医院胃肠外科，淮安 223300）中图分类号R735.2 文献标志码 A 文章编号1000-484X（2023）11-2326-09［摘要］目的：探讨纤溶酶原激活物抑制剂1型（SERPINE1）在胃癌中的生物学作用，进一步阐明胃癌发病机制，为今后实施个体化预防及早期诊治提供参考。

方法：通过多个数据库分析SERPINE1在泛癌和胃癌中的表达并进行临床病理学分析。

使用R和STRING对SERPINE1共表达基因进行GO/KEGG功能富集和PPI分析。

通过TIMER数据库和CIBERSORT分析胃癌组织SERPINE1表达与免疫浸润的联系。

多个在线网站构建符合ceRNA假说的调控网络。

结果：SERPINE1在包括胃癌在内的多种肿瘤中高表达，与临床病理特征密切相关。

GO/KEGG功能富集分析提示SERPINE1与胰腺分泌、表皮生长、表皮细胞分化及角质形成细胞分化通路密切相关。

STRING数据库分析表明SERPINE1及相关蛋白（PLAT）在胃癌中存在差异表达；PLAT低表达的胃癌患者总生存期较高。

PPI显示SERPINE1与PLAT密切相关，在胃癌发展中可能发挥重要作用。

TIMER数据库及CIBERSORT分析显示SERPINE1表达与多种免疫细胞浸润相关。

通过网站相关分析构建了胃癌中9个可能的ceRNA网络。

结论：SERPINE1可作为胃癌患者诊断及预后的生物标志物，可能与肿瘤免疫浸润和ceRNA网络有关。

［关键词］SERPINE1；胃癌；生物信息学；免疫浸润；ceRNAComprehensive analysis of immune infiltration and ceRNA network of SERPINE1 in gastric cancerSHI Jin，DAI Dezhu，SONG Xudong，GUO Xiamei，FENG Ziyu，TAO Guoquan. Department of Gastrointestinal Surgery，the Affiliated Huai'an No.1 People's Hospital of Nanjing Medical University， Huai'an 223300， China ［Abstract］Objective：To investigate biological role of SERPINE1 （plasminogen activator inhibitor type 1） in gastric cancer，in order to further clarify pathogenesis of gastric cancer and provide important reference for individualized prevention and early diagno‐sis and treatment in future. Methods：SERPINE1 expression in generalized and gastric cancer was analyzed from multiple databases and clinicopathological analysis. GO/KEGG function enrichment and PPI analysis of SERPINE1 co-expressed genes were performed using R and STRING. Association between SERPINE1 expression and immune infiltration in gastric cancer tissues was analyzed by TIMER database and CIBERSORT. Several online websites constructed regulatory networks conforming to ceRNA hypothesis. Results：SERPINE1 was highly expressed in a variety of tumors， including gastric cancer， and closely associated with clinicopathological fea‐tures. GO/KEGG functional enrichment analysis suggested that SERPINE1 was closely related to pancreatic secretion，epidermal growth，epidermal cell differentiation and keratinocyte differentiation pathways. STRING database analysis showed that SERPINE1 and related protein （PLAT） were differentially expressed in gastric cancer. Gastric cancer patients with low PLAT expression had higher overall survival. PPI showed that SERPINE1 was closely associated with PLAT， which might play an important role in development of gastric cancer. TIMER database and CIBERSORT analysis showed that SERPINE1 expression was associated with infiltration of various immune cells. Nine possible ceRNA networks in gastric cancer were constructed through website correlation analysis. Conclusion：SERPINE1 can be used as a biomarker for diagnosis and treatment of gastric cancer patients， which may associate with tumor immune infiltration and ceRNA network.［Key words］SERPINE1；Gastric cancer；Bioinformatics；Immune infiltration；ceRNA①本文为国家自然科学基金项目（81773538）。

线粒体呼吸链复合物I活性比色法定量检测试剂盒产品说明书（中文版）主要用途线粒体呼吸链复合物I（NADH－辅酶Q还原酶）活性比色法定量检测试剂是一种旨在使用合成辅酶Q同功类似物和特异性抑制剂，通过反应系统测定样品中还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）氧化后峰值的降低，即采用比色法测定样品中酶活性的权威而经典的技术方法。

该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。

其适合于各种纯化线粒体样品（动物、人体、酵母）以及细胞或组织裂解悬液样品的还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）－辅酶Q还原酶的特异性活性检测。

其用于衰老、能量代谢、蛋白组学、病理生理学、神经病变等研究。

产品不含污染性蛋白酶，严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，反应优化，检测敏感。

技术背景线粒体呼吸链复合物I，通常称为还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸辅酶Q还原酶（reduced nicotinamide adenine dinucleotide coenzyme Q reductase；NADH-CoQ reductase），又称为还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶（reduced nicotinamide adenine dinucleotide dehydrogenase；NADH dehydrogenase），是线粒体电子传递链中最大的结构成分：含有30至40多个多肽结构。

其特征性的酶活性是鱼藤酮敏感的NADH－辅酶Q还原酶（NADH:Q Reductase）。

复合物I催化线粒体内电子由供体NADH传递到内膜上辅酶Q受体（泛醌；ubiquinone）的能量转移反应，为整个呼吸链反应系统的第一步。

基于辅酶Q底物，在鱼藤酮存在与否的情况下，通过NADH－辅酶Q还原酶的催化，转化成还原型泛醌（CoQH2），同时还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（reduced nicotinamide adenine dinucleotide；NADH）转化为氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamide adenine dinucleotide；NAD），在分光光度仪下产生吸收峰值的变化（340nm 波长），由此定量测定NADH －辅酶Q还原酶的特异活性。

TM㊁TAT㊁PIC㊁t-PAIC对冠心病的诊断价值及支持向量机鉴别诊断模型的建立高敏,李宏宾,刘启龙,马宁,訾盼盼,石慧娟,杜玉明摘要目的:分析凝血酶-抗凝血酶复合物(TAT)㊁纤溶酶-α2纤溶酶抑制物复合物(PIC)㊁组织型纤溶酶原激活物/抑制剂-1复合物(t-PAIC)㊁血栓调节蛋白(TM)对冠心病(CHD)的诊断价值,并建立支持向量机(SVM)模型㊂方法:选取2018年5月 2020年12月于郑州大学第一附属医院接受诊治的218例冠心病病人作为研究组,同期健康体检的志愿者46名作为对照组,比较两组病人的临床资料以及不同冠状动脉狭窄程度病人的临床资料,分析TAT㊁PIC㊁t-PAIC㊁TM与Gensini评分的相关性以及对冠心病的诊断效能,建立二元Logistic回归模型和SVM模型并评价预测效果㊂结果:与对照组相比,研究组吸烟指数㊁三酰甘油(TG)㊁总胆固醇(TC)㊁低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)㊁TAT㊁PIC㊁t-PAIC㊁TM均升高,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)降低,差异均有统计学意义(P< 0.05)㊂中度狭窄组㊁重度狭窄组TC㊁TAT㊁PIC㊁t-PAIC㊁TM及Gensini评分高于轻度狭窄组(P<0.05),HDL-C低于轻度狭窄组(P< 0.05),重度狭窄组TC㊁TAT㊁PIC㊁t-PAIC㊁TM及Gensini评分高于中度狭窄组(P<0.05),HDL-C低于中度狭窄组(P<0.05)㊂冠心病病人TAT㊁PIC㊁t-PAIC㊁TM与Gensini评分均呈正相关(P<0.01)㊂TAT㊁PIC㊁t-PAIC㊁TM诊断冠心病的曲线下面积(AUC)分别为0.781,0.765,0.769,0.778,最佳截断值分别为3.00ng/mL㊁0.99μg/mL㊁9.35ng/mL㊁8.83U/mL㊂Logistic回归模型和SVM模型AUC分别为0.891,0.902,准确度分别为90.15%㊁92.05%,差异均无统计学意义(P>0.05)㊂结论:TAT㊁PIC㊁t-PAIC㊁TM对冠心病具有一定的诊断价值,基于4种指标建立的Logistic回归模型和SVM模型对冠心病的预测效果更好㊂关键词冠心病;支持向量机;凝血酶-抗凝血酶复合物;纤溶酶-α2纤溶酶抑制物复合物;组织型纤溶酶原激活物/抑制剂-1复合物;血栓调节蛋白;诊断d o i:10.12102/j.i s s n.1672-1349.2023.01.026冠状动脉由于发生粥样硬化病变而引起血管腔狭窄甚至阻塞,进而导致心肌缺血㊁缺氧以及器质性病变,即为冠状动脉粥样硬化性心脏病,简称冠心病(coronary heart disease,CHD)㊂近年来,冠心病在我国发病率逐年升高,患病群体呈年轻化趋势,对病人的生活质量和生命安全造成严重影响[1]㊂有研究表明,高凝血状态及血栓形成是冠心病的重要危险因素[2]㊂凝血酶-抗凝血酶复合物(thrombin-antithrombin complex,TAT)㊁纤溶酶-α2纤溶酶抑制物复合物(plasmin-α2plasmin inhibitor complex,PIC)㊁组织型纤溶酶原激活物/抑制剂-1复合物(tissue plasminogen activator/inhibitor-1complex,t-PAIC)㊁血栓调节蛋白(thrombomodulin,TM)能综合反映凝血-纤溶系统情况以及血管内皮损伤程度[3]㊂目前,已有研究报道,TAT㊁PIC㊁t-PAIC及TM这4种血栓前标志物对弥散性血管内凝血㊁恶性肿瘤血栓以及急性心肌梗死有一定的预测价值[4-6]㊂然而对冠心病的诊断作者单位郑州大学第一附属医院(郑州450000)通讯作者杜玉明,E-mail:*****************引用信息高敏,李宏宾,刘启龙,等.TM㊁TAT㊁PIC㊁t-PAIC对冠心病的诊断价值及支持向量机鉴别诊断模型的建立[J].中西医结合心脑血管病杂志,2023,21(1):133-138.报道较少,因此,本研究通过检测冠心病病人TAT㊁PIC㊁t-PAIC及TM,并建立支持向量机(support vector machine,SVM)模型,旨在为冠心病的诊断提供新的参考依据㊂1资料与方法1.1研究对象选取2018年5月 2020年12月于我院接受诊治的218例冠心病病人作为研究组㊂纳入标准:符合‘稳定性冠心病诊断与治疗指南“[7]中的诊断标准,经冠状动脉造影确诊为冠心病;首次发病,且发病24h内入院;年龄>18岁;临床病历资料完整;病人及家属知情同意并自愿签署知情同意书㊂排除标准:合并心肌病㊁心脏瓣膜病以及先天性心脏病等其他心脏疾病;合并恶性肿瘤㊁感染性疾病㊁内分泌疾病以及其他重要脏器或系统疾病;合并其他血栓性疾病;近期有创伤史或手术史;精神疾病㊁认知功能障碍者;妊娠期或哺乳期妇女㊂另外,选取同期于我院进行健康体检的志愿者46名作为对照组㊂本研究已获得我院医学伦理委员会审核批准㊂1.2方法1.2.1基础资料收集记录病人的基础资料,包括性别㊁年龄㊁体质指数(body mass index,BMI)㊁吸烟指数[吸烟支数ˑ吸烟时间(年)]㊁家族史㊁高血压史㊁糖尿病史㊂1.2.2冠状动脉造影所有病人首先选择桡动脉穿刺入路,其次为股动脉,采用标准Judikins法常规进行冠状动脉造影,由2名不参与本研究但经验丰富的心内科医师判读结果㊂取病变最严重处的血管内径与距该病变最近的近端未病变血管节段内径的比例表示狭窄程度,至少1支冠状动脉主要分支血管内径的狭窄程度ȡ50%,即可诊断为冠心病㊂1.2.3冠状动脉狭窄程度评估冠状动脉狭窄程度采用Gensini评分评价,将不同狭窄部位与不同的权重系数相乘,狭窄部位:第2对角支ˑ0.5,第1对角支㊁后降支㊁回旋支远段㊁左前降支远段㊁左室后降支㊁后侧支㊁右冠状动脉全段均ˑ1,左前降支中段ˑ1.5,回旋支近段㊁左前降支近段ˑ2.5,左主干ˑ5;狭窄程度:完全闭塞计32分,狭窄91%~99%计16分,狭窄76%~ 90%计8分,狭窄51%~75%计4分,狭窄25%~ 50%计2分,狭窄程度<25%计1分;所有分支狭窄部位和狭窄程度所得分数之和即为Gensini评分㊂1.2.4实验室指标检测采集研究组和对照组空腹静脉血2.7mL置于0.109mol/L枸橼酸钠抗凝管中,充分混匀,1500ˑg离心10min,分离血浆,采用HISCL-5000全自动化学发光仪及原装配套试剂(日本Sysmex公司),严格按照说明书,以化学发光酶免疫法检测TAT㊁PIC㊁t-PAIC及TM㊂采用7600-120全自动生化分析仪(日本日立)及配套试剂,采用甘油磷酸氧化酶法测定三酰甘油(triglyceride,TG),采用胆固醇氧化酶法测定总胆固醇(total cholesterol,TC),采用直接法测定低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)㊂1.3统计学处理采用SPSS16.0进行实验数据的统计分析㊂定性资料采用χ2检验;符合正态分布的定量资料以均数ʃ标准差(xʃs)表示,两组间比较采用独立样本t检验,多组间比较首先采用单因素方差分析,若差异有统计学意义,则采用独立样本t检验进行两组间比较;相关性分析采用Pearson相关性分析法㊂将264例研究对象(研究组218例和对照组46例)随机抽取70%(共185例,其中研究组153例㊁对照组32例)作为训练集,其余30%(共79例,其中研究组65例㊁对照组14例)作为测试集㊂采用Logistic回归模型筛选冠心病发生的危险因素㊂原始数据均采用极差法进行转换,以使参数取值为0~1㊂SVM数学模型于Python3.7平台运行,采用scikit-learn0.22软件分析,惩罚系数C和核函数参数σ是主要参数,SVM模型根据两者的组合不断更新核函数,当验证结果准确率最大时,模型即停止训练,此时模型分类误差最小,参数组合为最优化㊂采用测试集数据评估模型的泛化能力,防止过度训练现象㊂以受试者工作特征(receiver operating characteristic curve,ROC)的曲线下面积(area under curve,AUC)㊁准确度㊁敏感度㊁特异性㊁阳性预测值㊁阴性预测值评价模型的诊断效能㊂2结果2.1研究组与对照组临床资料比较研究组与对照组病人性别㊁年龄㊁BMI㊁家族史㊁高血压史㊁糖尿病史比较差异均无统计学意义(P>0.05)㊂与对照组相比,研究组吸烟指数㊁TG㊁TC㊁LDL-C㊁TAT㊁PIC㊁t-PAIC㊁TM均升高,HDL-C降低,差异均有统计学意义(P<0.05)㊂详见表1㊂表1研究组与对照组临床资料比较项目对照组(n=46)研究组(n=218)统计值P 性别[例(%)]男30(65.22)129(59.17)χ2=0.5790.447女16(34.78)89(40.83)年龄(岁)62.58ʃ7.9663.04ʃ8.12t=-0.3500.726 BMI(kg/m2)26.39ʃ3.1426.75ʃ3.20t=-0.6960.487吸烟指数(支㊃年)175.42ʃ86.58347.82ʃ256.79t=-4.494<0.001家族史[例(%)]0(0.00)3(1.38)χ2=0.6400.424高血压史[例(%)]25(54.35)128(58.72)χ2=0.2970.586糖尿病史[例(%)]6(13.04)41(18.81)χ2=0.8620.353 TG(mmol/L) 1.39ʃ0.41 1.82ʃ0.57t=-4.855<0.001 TC(mmol/L) 4.68ʃ1.07 5.19ʃ1.65t=-2.0080.046 HDL-C(mmol/L) 1.15ʃ0.260.97ʃ0.38t=3.0630.002 LDL-C(mmol/L) 2.74ʃ0.53 3.06ʃ0.79t=-2.6230.009 TAT(ng/mL) 2.30ʃ0.43 4.78ʃ1.21t=-13.702<0.001 PIC(μg/mL)0.71ʃ0.14 1.43ʃ0.33t=-14.507<0.001 t-PAIC(ng/mL) 6.77ʃ1.4713.14ʃ2.94t=-14.307<0.001 TM(U/mL)7.68ʃ1.2611.30ʃ2.21t=-10.737<0.0012.2不同冠状动脉狭窄程度病人临床资料比较218例病人Gensini评分在4.5~67.0分,按照3分位法将ɤ24分作为轻度狭窄组,24.1~46.0分作为中度狭窄组,ȡ46.1分作为重度狭窄组㊂3组病人性别㊁年龄㊁BMI㊁吸烟指数㊁家族史㊁高血压史㊁糖尿病史㊁TG以及LDL-C 比较差异均无统计学意义(P>0.05)㊂中度狭窄组㊁重度狭窄组TC㊁TAT㊁PIC㊁t-PAIC㊁TM及Gensini评分高于轻度狭窄组,HDL-C低于轻度狭窄组,重度狭窄组TC㊁TAT㊁PIC㊁t-PAIC㊁TM及Gensini评分高于中度狭窄组,HDL-C低于中度狭窄组,差异均有统计学意义(P<0.05)㊂详见表2㊂表2不同冠状动脉狭窄程度病人临床资料比较项目轻度狭窄组(n=73)中度狭窄组(n=73)重度狭窄组(n=72)统计值P 性别[例(%)]男52(71.23)55(75.34)57(79.17)χ2=1.2250.542女21(28.77)18(24.66)15(20.83)年龄(岁)61.95ʃ8.0262.88ʃ8.0963.79ʃ8.16F=1.2640.137 BMI(kg/m2)26.27ʃ3.1626.91ʃ3.2327.08ʃ3.27F=1.5070.126吸烟指数(支㊃年)335.89ʃ245.71344.72ʃ258.39359.51ʃ269.65F=0.6520.543家族史[例(%)]0(0.00)1(1.37)2(2.78)χ2=2.0610.357高血压史[例(%)]38(52.05)42(57.53)48(66.67)χ2=3.2560.196糖尿病史[例(%)]10(13.70)14(19.18)17(23.61)χ2=2.2210.329 TG(mmol/L) 1.75ʃ0.52 1.83ʃ0.56 1.89ʃ0.61F=1.4080.115 TC(mmol/L) 4.49ʃ1.08 5.25ʃ1.49① 5.82ʃ1.83①②F=5.237<0.001 HDL-C(mmol/L) 1.38ʃ0.490.97ʃ0.37①0.56ʃ0.28①②F=12.649<0.001 LDL-C(mmol/L) 3.02ʃ0.73 3.05ʃ0.78 3.11ʃ0.82F=0.5830.469 TAT(ng/mL) 3.63ʃ0.72 4.64ʃ0.79① 6.10ʃ0.43①②F=29.175<0.001 PIC(μg/mL) 1.19ʃ0.23 1.45ʃ0.32① 1.66ʃ0.25①②F=12.181<0.001 t-PAIC(ng/mL)10.09ʃ1.1012.97ʃ1.71①16.40ʃ1.34①②F=31.069<0.001 TM(U/mL)8.94ʃ0.6911.56ʃ1.66①13.42ʃ1.14①②F=28.572<0.001 Gensini评分(分)13.48ʃ5.8933.67ʃ5.92①55.74ʃ6.25①②F=40.923<0.001与轻度狭窄组相比,①P<0.05;与中度狭窄组相比,②P<0.05㊂2.3TAT㊁PIC㊁t-PAIC㊁TM与Gensini评分的相关性冠心病病人TAT㊁PIC㊁t-PAIC㊁TM与Gensini评分均呈正相关(r值分别为0.777,0.537,0.833,0.789,P均<0.01)㊂详见图1~图4㊂图1TAT与Gensini 评分的相关性图2PIC与Gensini评分的相关性图3t-PAIC与Gensini 评分的相关性图4TM与Gensini评分的相关性2.4TAT㊁PIC㊁t-PAIC㊁TM对冠心病的诊断效能TAT诊断冠心病的AUC为0.781[95%CI(0.697, 0.864)],取最佳截断值3.00ng/mL时,敏感度为84.86%,特异性为65.22%㊂PIC诊断冠心病的AUC为0.765[95%CI(0.675,0.855)],取最佳截断值0.99μg/mL 时,敏感度为82.57%,特异性为71.74%㊂t-PAIC诊断冠心病的AUC为0.769[95%CI(0.677,0.861)],取最佳截断值为9.35ng/mL时,敏感度为84.40%,特异性为71.74%㊂TM诊断冠心病的AUC为0.778[95%CI (0.692,0.864)],取最佳截断值8.83U/mL时,敏感度为79.82%,特异性为67.39%㊂详见图5㊂图5TAT㊁PIC㊁t-PAIC㊁TM对冠心病的诊断效能2.5二元Logistic回归模型分析冠心病的危险因素将研究对象是否发生冠心病(是=1,否=0)作为因变量㊂将研究组和对照组差异有统计学意义的因素作为自变量,吸烟指数㊁TG㊁TC㊁HDL-C㊁LDL-C㊁TAT㊁PIC㊁t-PAIC㊁TM均为连续数值型变量,取其实测值,纳入二元Logistic回归模型,结果显示,吸烟指数㊁LDL-C㊁TC㊁TAT㊁PIC㊁t-PAIC㊁TM是冠心病发病的危险因素(P<0.05)㊂详见表3㊂表3二元Logistic回归模型分析冠心病的危险因素因素回归系数标准误Waldχ2值P OR值95%CI下限上限吸烟指数0.4070.6510.3900.012 1.502 1.476 1.692 TG 1.5120.531 6.6420.079 4.5360.325 4.648 TC 1.3540.6507.2930.006 3.872 1.467 5.701 HDL-C-0.5260.432 1.4820.0150.5910.0530.935 LDL-C0.0330.711 2.1540.011 1.034 1.017 1.921 TAT 1.4310.31912.7640.007 4.183 2.065 6.348 PIC 2.0320.96720.5230.0047.629 3.49212.575 t-PAIC 1.6920.73512.687<0.001 5.433 1.8378.954 TM 1.3420.8819.3540.005 3.827 2.5167.232常数-25.6947.28526.138<0.0012.6SVM模型建立及预测效果评价惩罚系数C= 0.859,核函数参数σ=16时,SVM模型对冠心病的辨识率最高㊂Logistic回归模型AUC为0.891,SVM模型AUC为0.902,差异无统计学意义(P>0.05)㊂Logistic回归模型准确度90.15%,SVM模型准确度92.05%,差异无统计学意义(P>0.05)㊂详见表4㊁图6㊂表4Logistic回归模型和SVM模型的预测效果模型AUC(95%CI)准确度(%)敏感度(%)特异性(%)阳性预测值(%)阴性预测值(%) Logistic0.891[0.824,0.958]90.1590.3789.1392.0666.13SVM0.902[0.838,0.966]92.0591.7493.4898.5270.49图6Logistic回归模型和SVM模型诊断冠心病的ROC曲线3讨论冠心病的发生机制与血栓形成关系密切,而血栓形成过程极为复杂,凝血和纤溶系统失衡以及血管内皮损伤均发挥重要作用[8]㊂目前,涵盖凝血㊁纤溶系统的凝血酶原时间㊁凝血酶时间㊁活化部分凝血活酶时间㊁凝血因子㊁抗凝血酶㊁D-二聚体㊁纤维蛋白原㊁纤维蛋白降解产物等是实验室常规的凝血检测项目,然而这些指标都是血栓形成后的晚期被动检测项目,对血栓前状态监测的敏感性不高,因此,血栓前标志物TAT㊁PIC㊁t-PAIC及TM逐渐被推广使用㊂解承娟等[9]研究发现,脑血栓病人TAT㊁PIC㊁t-PAIC㊁TM水平明显高于正常人群,且对脑血栓具有不同程度的诊断价值㊂周坤等[10]研究发现,恶性肿瘤病人中血栓组TAT㊁PIC㊁t-PAIC㊁TM明显高于无血栓组,这些指标与恶性肿瘤病人静脉血栓的形成有关,且具有一定的早期预测价值㊂本研究发现,冠心病病人中TAT㊁PIC㊁t-PAIC㊁TM水平升高,4种血栓前标志物对冠心病有一定的预测价值,与上述报道具有一致性㊂而刘艳红等[11]研究发现,冠心病组血浆TM㊁t-PAIC水平比健康对照组明显升高,两组TAT㊁PIC水平比较差异均无统计学意义,但4种指标预测冠心病的准确率却较高,这与本研究结果不完全一致,可能跟样本量㊁检测方法存在差异有关㊂体内凝血酶原被激活成凝血酶后,TAT与抗凝血酶迅速以共价键结合,生成无活性的不可逆复合物,进而使凝血酶失活,因此,TAT作为凝血途径潜在活化的敏感指标,能直接反映机体凝血酶的活化㊂α2纤溶酶抑制物由肝脏产生且是纤溶酶最重要的抑制因子,其与血液中的纤溶酶以等比例迅速结合形成PIC,进而对纤溶酶的纤溶作用进行抑制,因此PIC成为反映纤溶系统最终阶段的纤溶酶指标㊂组织型纤溶酶原激活剂由血管内皮细胞产生并释放到血液中,当其以等比例迅速与生理性抑制因子纤溶酶原激活物抑制剂-1结合后可形成t-PAIC,其水平异常升高会导致纤溶系统失调进而使血栓形成,t-PAIC既是纤溶系统也是血管内皮细胞损伤的分子标志物㊂作为一种跨膜糖蛋白,TM主要于血管内皮细胞表达,通过与凝血酶结合进而使凝血酶活化纤溶抑制剂㊁蛋白C被激活,进而对凝血和纤维蛋白溶解发挥抑制作用㊂研究表明,TM在正常状态下水平极低,而在内皮细胞损伤或病变时则会异常分泌并释放入血,因此常被用作血管内皮细胞损伤的标志物[12]㊂另外,本研究根据Gensini评分结果将病人分为不同冠状动脉狭窄组,结果证实,冠心病病人TAT㊁PIC㊁t-PAIC㊁TM水平随着冠状动脉狭窄程度加重而升高,且与Gensini评分呈正相关,该结果与刘文武等[13]报道相符㊂分析原因,各种因素导致冠心病病人血管内皮细胞受损,凝血和纤维蛋白溶解系统被异常激活,进而使这4种指标生成增加,而形成的复合物及纤维蛋白异常沉积可进一步促进冠状动脉病变的发生发展㊂尽管临床上将生物标志物单独或联合使用对疾病的诊断具有一定的价值,但建立联合多种生物标志物的筛查诊断模型能进一步提高诊断的准确性㊂Logistic回归模型是最常用的一种机器学习算法,但需满足变量符合正态分布㊁变量之间不存在交互作用㊁相互独立等诸多条件,因而其应用受到一定程度的限制㊂SVM数学模型是基于结构风险最小化原理和统计学习理论的VC维理论,保证结果找到的极值解是全局最优,实现对样本的泛化能力,在小样本㊁高维度数据以及非线性问题的处理中更具优势㊂Bao等[14]联合10项血清指标建立的SVM模型预测肺癌的准确率达90.3%,AUC达0.901,明显高于Fisher线性判别模型㊂李广涵等[15]通过基于弹性成像㊁彩色多普勒超声及常规超声参数建立多模态超声模型发现,SVM和Logistic模型对肾脏疾病的诊断效能相似㊂本研究建立的Logistic回归模型和SVM模型对冠心病的预测效果无明显差异,可能由于本研究仅涉及数据层面,而无文字描述㊁医疗图像等信息㊂综上所述,TAT㊁PIC㊁t-PAIC㊁TM对冠心病具有一定的诊断价值,基于4种指标建立的Logistic回归模型和SVM模型对冠心病的预测效果更好㊂本研究存在的局限性:纳入对象为确诊的冠心病病人和健康体检者,存在样本随机性不足和选择性偏倚;未将本研究涉及的所有项目纳入模型进行分析,可能造成研究结果的偏倚;模型的稳定性仍需在多中心㊁大样本中进行验证㊂今后将通过改善以上条件进而建立更加完善的冠心病筛查模型㊂参考文献:[1]SU M,NIU Y,DANG Q,et al.Circulating microRNA profiles basedon direct S-Poly(T)plus assay for detection of coronary heartdisease[J].J Cell Mol Med,2020,24(11):5984-5997.[2]SHABANA,SHAHID S U,SARWAR S.The abnormal lipid profile inobesity and coronary heart disease(CHD)in Pakistani subjects[J].Lipids Health Dis,2020,19(1):73.[3]CHEN Q,SHOU W,WU W,et al.Performance evaluation ofthrombomodulin,thrombin-antithrombin complex,plasmin-α2-antiplasmin complex,and t-PA:PAI-1complex[J].Journal ofClinical Laboratory Analysis,2019,33(6):e22913.[4]YAMADA S,ASAKURA H.Management of disseminatedintravascular coagulation associated with aortic aneurysm andvascular malformations[J].International Journal of Hematology,2021,113(1):15-23.[5]付阳,刘玉梅,金亚雄,等.凝血与纤溶标志物在肺癌血栓栓塞患者中的临床应用价值研究[J].中国肺癌杂志,2018,21(8):583-587.[6]吕永楠,任玮,陈晶晶,等.急性心肌梗死患者血栓标志物水平变化及意义[J].微循环学杂志,2017,27(3):43-46.[7]中华医学会心血管病学分会介入心脏病学组,中华医学会心血管病学分会动脉粥样硬化与冠心病学组,中国医师协会心血管内科医师分会血栓防治专业委员会,等.稳定性冠心病诊断与治疗指南[J].中华心血管病杂志,2018,46(9):680-694.[8]PAPANDREOU C,SALA-VILA A,GALIÉS,et al.Associationbetween fatty acids of blood cell membranes and incidence ofcoronary heart disease[J].Arteriosclerosis,Thrombosis,andVascular Biology,2019,39(4):819-825.[9]解承娟,李满桂,任啟霞,等.血栓前标志物TAT㊁PIC㊁TM㊁tPAIC在脑血栓中检测的价值[J].医学临床研究,2019,36(2):370-371. [10]周坤,周玉珍,郑遵荣,等.血栓四项在恶性肿瘤患者静脉血栓形成中的应用研究[J].中国医师进修杂志,2019,42(11):994-999. [11]刘艳红,李艳.冠心病患者血浆凝血㊁纤溶检测指标与低密度脂蛋白水平的相关性研究[J].武汉大学学报(医学版),2019,40(1):139-142.[12]RODRIGUES A T,RODRIGUES J T,RODRIGUES C T,et al.Association between thrombomodulin and high mobility groupbox1in sepsis patients[J].World J Crit Care Med,2020,9(4):63-73.[13]刘文武,罗显元,葛以山,等.血清HNP1-3㊁t-PAIC联合检测在冠心病诊断中的价值[J].山东医药,2019,59(28):69-72. [14]BAO X,SHI R,ZHAO T,et al.Immune landscape and a novelimmunotherapy-related gene signature associated with clinicaloutcome in early-stage lung adenocarcinoma[J].Journal ofMolecular Medicine(Berlin,Germany),2020,98(6):805-818. [15]李广涵,刘建,武敬平,等.基于支持向量机多模态超声模型诊断肾疾病[J].中国医学影像技术,2020,36(6):898-902.(收稿日期:2021-05-28)(本文编辑郭怀印)。

急性心肌梗死患者血栓标志物水平变化及意义吕永楠;任玮;陈晶晶;李晓艳【摘要】目的:观察急性心肌梗死(AMI)患者血栓调节蛋白(TM)、凝血酶-抗凝血酶原复合物(TAT)、组织型纤溶酶原激活物/纤溶酶原激活物抑制剂-1复合物(t-PAIC)、纤溶酶-α2纤溶酶抑制物复合物(PIC)水平变化并探讨其临床价值.方法:2017-01-2017-05武汉大学人民医院心内科住院AMI患者80例(AMI组),选择同期体检健康人群80例作为对照组.采用Sysmex HISCL-5000型化学发光仪检测血浆TM、TAT、PIC和t-PAIC水平,应用受试者工作特征(ROC)曲线评价各血栓标志物对AMI的诊断效能.结果:AMI组TM、TAT、t-PAIC和PIC水平均高于对照组[分别为TM(11.41±0.42 vs 7.18±0.24)IU/ml,TAT(8.76±2.97 vs 1.95±0.11)ng/ml,t-PAIC(12.95±0.69 vs 3.49±0.19)ng/ml,PIC(1.18±0.17 vs 0.37±0.02)μg/ml],差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01).ROC曲线分析结果显示TM、TAT、t-PAIC和PIC对AMI均有一定的诊断价值,以t-PAIC和PIC诊断价值最高.结论:AMI患者TM、TAT、t-PAIC和PIC水平均升高,特别是t-PAIC和PIC水平,对早期AMI患者诊断均有较高价值.%Objective: To observe level change and clinical significance in pations of blood coagulation biomarkers(TM,TAT,t-PAIC,PIC).Method: We enrolled 80 AMI patients admitted to the department of cardiology at renmin hospital of Wuhan University between January 2017 and May 2017 into the experimental group,at the same time,this study enrolled 80 healthy people into the control group.by to detect the level of TM,TAT,t-PAIC,PIC coeredetected.The difference between groups of these biomarkers was compared,and the receiver operation cure(ROC) was drew to determin the diagnostic cut-off pointand diagnostic AMI perfomance.Results:The biomarkers level was higher in the experimental group than in the control group.TM(11.41±0.42 vs7.18±0.24)IU/ml,TAT(8.76±2.97 vs 1.95±0.11)ng/ml,t-PAIC(12.95±0.69 vs 3.49±0.19)ng/ml,PIC(1.18±0.17 vs 0.37±0.02)μg/ml.The ROC analysis results showed that TM,TAT,t-PAIC,PIC had a certain diagnostic value for AMI,especially t-PAIC and PIC.Conclusion: The blood coagulation biomarkers(TM,TAT,t-PAIC,PIC) were significantly higher in patients with AMI,especially t-PAIC and PIC.Thus,they may become the useful indicators for the early assessment of the AMI.【期刊名称】《微循环学杂志》【年(卷),期】2017(027)003【总页数】4页(P43-46)【关键词】急性心肌梗死;血栓调节蛋白;凝血酶-抗凝血酶原复合物;组织型纤溶酶原激活物/纤溶酶原激活物抑制剂-1复合物;纤溶酶-α2纤溶酶抑制物复合物【作者】吕永楠;任玮;陈晶晶;李晓艳【作者单位】武汉大学人民医院心内科,武汉 430060;武汉大学人民医院检验科,武汉 430060;武汉大学人民医院心内科,武汉 430060;武汉大学人民医院心内科,武汉430060【正文语种】中文【中图分类】R543.3急性心肌梗死(Acute Myocardial Infarction，AMI)是严重的心血管疾病，可并发恶性心律失常、急性心力衰竭和心脏破裂等，常可危及生命，是冠心病分类中的危急重症[1]。

雷米普利对糖尿病大鼠肾脏保护作用的影响及其机制研究汪晶华;杨新军;刘宇;陈云爽;林静;杨洁;刘颖【摘要】Objective To observe the changes of renal pathology and the protein expression of Megsin, PAI-1 and IGF-1 with the ramipril intervention, in order to study the protective mechanisms of ramipril. Methods 48 healthy male SD rats were randomly divided into three groups:normal control group (Group A, n=12);diabetic rat models were established&nbsp;with peritoneal injection of streptozotocin ( blood glucose≥16. 7 mmol/L) and the successful 24 models we re divided into dia-betic group (Group B, n=12) and ramipril intervention group [1mg/(kg·d), Group C, n=12]. 12 weeks later, the blood, urine and kidney samples were collected for further analysis; the weight, 24 h urine, blood glucose and kidney/body weight ratio, the amount of 24 h urinary protein and serum creatinine clearance rate were compared. The histopathological changes of renal tissues were also observed. And the protein expression of Megsin, PAI-1 and IGF-1 were respectively meas-ured by immunohistochemistry and western blot. Results Compared with that of Group A, the body weight loss was greater, the 24 h urine, blood glucose and kidney/body weight ratio and serum creatinine clearance rate increased more in Group B and C with statistical significance (P<0. 05). The 24 h urine and serum creatinine clearance rate were obviously decreased in Group C (P<0. 05). There was no significant renal pathological change in Group A, while there was in Group B. Mean-while, in Group B, themesangial area became wider, PAS stain positive materials and the expression of Megsin, PAI-1 and IGF-1 increased more significantly than that in Group A (P<0. 05). Conclusion Ramipril can alleviate pathological changes of diabetic rats, and lower the expression of Megsin, PAI-1, IGF-1in renal tissues, and with a protective effect.%目的：观察雷米普利对糖尿病大鼠肾脏病理学变化及肾组织中Megsin、血浆纤溶酶原激活物抑制剂-1(plasminogen activator inhibitor-1, PAI-1)和胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1, IGF-1)表达的影响,探讨其肾保护机制。

只用于生命科学研究，不能用于诊断程序仅用于体外实验DIG High Prime DNA Labeling and Detection Starter KitⅡ采用地高辛-dUTP进行随机引物DNA标记，碱性标记，利用CSPD化学发光检测，随时即用。

货号：11 585 614 910此试剂盒储存条件：-15℃到-25℃。

此试剂盒可对10ng-3μgDNA进行12次标记反应，可检测10×10cm2面积的杂交膜24张。

指导手册2005.12 版1 前言1.1 内容表1 前言1.1 内容表1.2 试剂盒成分2.介绍2.1 产品简介3. 操作步骤和所需材料3.1 在你开始前3.2 流程图3.3 地高辛标记DNA3.4 标记效率的确定3.5 DNA的转移和固定3.6 杂交3.7 免疫检测3.8 DNA印记的洗脱和再杂交4. 附录4.1 故障排除4.2 参考文献4.3 订购信息1.2 试剂盒的成分附加仪器与所需试剂除了上表中列出的试剂外，你必须准备一些溶液。

在下表中，你可以找到不同操作程序需要准备的设备概要。

在每个操作程序的前面提供了详细的信息。

*标记的产品可以从Roche Applied Science 获得。

2.介绍2.1 产品概况实验原则此试剂盒采用DIG(地高辛)，一种甾类半抗原，steroid hapten 去标记DNA探针用于杂交和后续的免疫检测[1,2,3]。

图1 DIG-dUTP ，碱性标记图2 CSPD反应应用地高辛标记DNA探针可以用于：所有类型的滤膜杂交总基因组DNA中单拷贝基因的检测，甚至对于高度复杂的生物体也可以进行检测，如人，大麦和小麦。

样品材料至少100bp的DNA片段线性的质粒，cos质粒或者DNA超螺旋的DNA实验时间此表格列出了每一步实验所需的反应时间。

检测数量一个试剂盒足够用于:12个标准的标记反应，每个反应的膜板DNA不超过3μg；并可以检测24张10×10cm2的杂交膜。